目的:制备改良型富血小板纤维蛋白（A-PRF）/壳聚糖温敏水凝胶（以下简称复合水凝胶）并探讨复合水凝胶对糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法:该研究为实验研究。成功制备具有多孔网状结构及温敏特性的含质量浓度为10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶。取6~8周龄雄性SD大鼠，通过腹腔注射链脲佐菌素成功制造糖尿病大鼠模型，并在每只大鼠背部制造4个全层皮肤缺损创面（最终36只大鼠成功造模）。将每只大鼠3个创面分别作为空白组（不进行药物干预）、阳性对照组（滴加重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子凝胶）、壳聚糖水凝胶组（滴加壳聚糖水凝胶溶液）。取其中30只大鼠，将每只大鼠剩余的1个创面共30个创面分为10、15、20、50、100 g/L复合水凝胶组，每组6个创面，分别滴加含10、15、20、50、100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液；取剩余6只大鼠，于每只大鼠剩余的1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液。伤后14 d，取其中1个创面滴加含100 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠，行苏木精-伊红（HE）染色，观察大鼠心、肝、脾、肺和肾等炎症、出血或坏死情况；伤后10 d，取其中1个创面滴加含15 g/L A-PRF的复合水凝胶溶液的6只大鼠，采用激光血流成像系统观测4组创面血流灌注量（样本数为6）。伤后7、14 d，计算8组创面愈合率。伤后14 d，取8组创面组织，分别行HE、Masson染色，观察新生上皮形成和胶原生成情况；采用免疫组织化学法检测CD31、血管内皮生长因子A（VEGFA）的阳性表达情况并计算阳性面积百分比；采用蛋白质印迹法检测CD31、VEGFA的蛋白表达；采用实时荧光定量反转录PCR法检测CD31、VEGFA的mRNA表达（样本数均为4）。结果:伤后14 d，6只大鼠心、肝、脾、肺、肾中均未观察到明显的炎症、出血或坏死。伤后10 d，15 g/L复合水凝胶组创面血流灌注量明显多于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组（ P值均<0.05）。伤后7、14 d，空白组创面愈合率分别为（26.0±8.9）%、（75.0±1.8）%，均分别明显低于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组及10、15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组的（45.8±3.2）%、（49.8±3.7）%、（51.2±2.9）%、（68.5±2.4）%、（68.8±1.5）%、（72.7±2.1）%、（75.0±3.7）%及（79.1±1.9）%、（77.2±1.7）%、（82.3±1.3）%、（89.6±1.9）%、（89.8±1.3）%、（87.3±1.1）%、（87.9±1.3）%（ P<0.05）；阳性对照组、壳聚糖水凝组、10 g/L 复合水凝胶组创面愈合率均明显低于15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05）。伤后14 d，15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组创面上皮化程度较其他4组创面更高、新生微血管情况更好，胶原数量更多且排列更整齐。伤后14 d，阳性对照组创面CD31、VEGFA及壳聚糖水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组（ P<0.05），10 g/L 复合水凝胶组创面VEGFA阳性面积百分比明显高于空白组、壳聚糖水凝胶组、阳性对照组（ P值均<0.05），15、20、50、100 g/L 复合水凝胶组创面CD31、VEGFA阳性面积百分比均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05）。伤后14 d，壳聚糖水凝胶组、阳性对照组、10 g/L 复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组（ P<0.05），10 g/L复合水凝胶组创面组织中VEGFA蛋白表达明显高于阳性对照组（ P<0.05）和CD31、VEGFA mRNA表达均明显高于阳性对照组、壳聚糖水凝胶组（ P<0.05），15、20、50、100 g/L复合水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA蛋白和mRNA表达均明显高于空白组、阳性对照组、壳聚糖水凝胶组、10 g/L 复合水凝胶组（ P<0.05），壳聚糖水凝胶组创面组织中CD31、VEGFA的mRNA表达均明显低于阳性对照组（ P<0.05）。 结论:复合水凝胶生物安全性高，可改善创面血流灌注，有效促进创面组织中血管和胶原生成，从而促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合；15 g/L为复合水凝胶中A-PRF的较优使用质量浓度。

目的:观察脂肪组织来源的脱细胞基质水凝胶（DAT-gel）对大鼠坐骨神经缺损的修复效果。方法:2019年4月-2020年4月,收集在解放军总医院第一医学中心整形修复科行大腿或腹部吸脂术的健康成年女性的术后废弃无菌颗粒状脂肪组织,术前均获得患者知情同意。对脂肪组织行脱细胞和酶消化处理制备成DAT-gel。扫描电镜（SEM）观察水凝胶的超微结构,流变学测试水凝胶的凝胶动力学和粘弹性。建立大鼠坐骨神经缺损模型,并将其随机分为3组：单纯几丁质导管组（Chitin组）、DAT-gel加几丁质导管组（DAT-gel组）和自体神经反接组（Autograft组）,每组10只动物。术后12周分别对再生神经的大体观、功能学以及形态学等一系列指标进行观察,评估损伤神经的修复情况。采用单因素方差分析（one-way ANOVA）进行数据分析,如果组间差异有统计学意义,则进一步采用Turkey法进行两两比较, P<0.05为差异有统计学意义。 结果:SEM检查结果显示DAT-gel凝胶内部呈三维疏松多孔的纤维网络结构。流变学测试结果显示：水凝胶在4 ℃与37 ℃时复数粘度分别为148.91 mPa·s和801.29 mPa·s。DAT-gel随温度增高发生溶胶-凝胶相变结果显示DAT-gel具备良好温敏效应,其溶胶-凝胶相变临界点近似体内温度。动物实验结果显示,术后12周,DAT-gel组的再生神经形态及其功能均优于Chitin组（ P<0.05）。 结论:DAT-gel可能对大鼠坐骨神经缺损的修复具有明显的促进作用。

目的:探讨载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响。方法:采用实验研究方法。通过油包水乳化法制备聚乙烯醇/海藻酸钠微球（单纯微球）、P311微球及异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白（FITC-BSA）微球，于光学显微镜/倒置荧光显微镜下观察形貌。制备壳聚糖溶液，将壳聚糖溶液和β-磷酸甘油二钠水合物混合制备单纯温敏水凝胶，在单纯温敏水凝胶中加入相应物质制备载单纯微球和载P311微球的温敏水凝胶，观察4种液体在37 ℃时倾斜状态下的形态变化，冷冻干燥后于扫描电子显微镜下观察微观形貌。取18只3~4周龄雄性SD大鼠，分为不进行任何处理的正常组及于背部脊柱两侧分别制作1个全层皮肤缺损创面并进行相应处理的敷贴组、壳聚糖组、单纯水凝胶组、载单纯微球水凝胶组、载P311微球水凝胶组，每组3只。取5组全层皮肤缺损大鼠，于伤后0（即刻）、5、10、15 d 观察创面愈合情况，计算伤后5、10、15 d创面愈合率；取5组全层皮肤缺损大鼠伤后15 d创面和创缘组织及正常组大鼠相同部位正常皮肤组织，行苏木精-伊红染色观察组织学变化，行免疫组织化学染色观测CD31及血管内皮生长因子（VEGF）的表达，采用蛋白质印迹法检测CD31及VEGF的蛋白表达。样本数均为3。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析及Bonferroni校正。结果:单纯微球呈球形，表面疏松多孔；P311微球及FITC-BSA微球表面光滑无孔隙，且FITC-BSA微球散发出均匀的绿色荧光；3种微球直径基本一致，为33.1~37.7 μm。在37 ℃时倾斜状态下，与壳聚糖溶液及单纯温敏水凝胶相比，载微球的2种水凝胶结构更稳定。载微球的2种水凝胶网状结构较壳聚糖溶液、单纯温敏水凝胶更致密，且其横断面可见直径约30 μm的微球。伤后15 d内，5组大鼠创面均不同程度愈合，其中载P311微球水凝胶组大鼠创面愈合情况最好。敷贴组、壳聚糖组大鼠伤后5、10、15 d创面愈合率分别为（26.6±2.4）%、（38.5±3.1）%、（50.9±1.5）%，（47.6±2.0）%、（58.5±3.6）%、（66.7±4.1）%，均明显低于载P311微球水凝胶组的（59.3±4.8）%、（87.6±3.2）%、（97.2±1.0）%， P<0.05或 P<0.01；单纯水凝胶组大鼠伤后10、15 d及载单纯微球水凝胶组大鼠伤后15 d创面愈合率分别为（76.0±3.3）%、（84.5±3.6）%、（88.0±2.6）%，均明显低于载P311微球水凝胶组（ P<0.05）。正常组大鼠正常皮肤中可见表皮、毛囊及皮脂腺，未见CD31和VEGF阳性表达；载P311微球水凝胶组大鼠伤后15 d创面已几乎完全上皮化，创面血管、毛囊、皮脂腺生成及CD31和VEGF阳性表达较其他4组全层皮肤缺损大鼠明显增加，CD31和VEGF蛋白表达均较其余5组大鼠明显增加（ P<0.01）。 结论:载P311微球的温敏壳聚糖水凝胶，可以缓释包载的药物，延长药物作用时间，并通过促进创面血管生成及再上皮化，促进全层皮肤缺损大鼠创面愈合。

目的 构建一种由PLGA-PEG-PLGA/甘油组成的温敏凝胶系统,用以负载盐酸布比卡因和多聚脱氧核糖核苷酸复方药物.方法 以胶凝温度作为关键响应参数,单因素法初步筛选凝胶基质浓度、药物装载量以及甘油添加量.随后,采用正交实验设计,并引入渗透压作为优化参数,以深化配方的优化过程.最后,对优选的配方进行质量评估.结果 优选配方包含16％PLGA-PEG-PLGA、5％甘油、2％盐酸布比卡因,0.4％多聚脱氧核糖核苷酸.常温下配方呈均一透明溶液态,胶凝温度33.83 ℃,胶凝时间100s,pH值3.11,渗透压836 mOsm,可注射性及黏附性良好.药物体外释放符合Ritger-peppas方程.开放型伤口模型证实了该样品能够有效促进伤口的愈合,达到镇痛的效果.结论 优选配方制备工艺简单,各项质量指标均符合要求,有望在临床中得到应用.

目的 制备一种具有缓释和保留性能,用于直肠给药的美沙拉嗪温敏凝胶(MZ-Gel).方法 以胶凝温度为评价指标,采用星点设计-响应面法对泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的用量进行优化.以Franz扩散池法进一步考察体外释药行为,得到最佳处方并对其进行质量评价.结果 MZ-Gel优化处方为P40722.56％,P188 3.34％,胶凝温度为(32.8±0.3)℃;MZ-Gel的体外释药符合一级动力学特征,具有缓释效果;胶凝时间平均值为38.3 s,pH平均值为4.07,膨胀系数平均值为4.81％,持水率平均值为99.78％;红外表征表明,美沙拉嗪的加入并没有破坏温敏凝胶结构.结论 此方法制备工艺简单,性质稳定且具有良好的体外释药特征.

目的 观察重组人干扰素-α2b(rhIFN-α2b)联合5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗宫颈上皮内病变合并人乳头状瘤病毒(HPV)感染患者的临床疗效及安全性.方法 回顾性分析宫颈上皮内病变合并HPV感染患者临床资料,按队列法分为对照组和试验组.对照组给予重组人干扰素α2b凝胶1支放置于阴道后穹窿,每天1次;试验组在对照组的基础上给予ALA-PDT治疗,将盐酸氨酮戊酸外用散(118 mg)温敏凝胶配制成5％浓度ALA温敏凝胶湿敷于阴道表面,并进行光疗,每周1次.比较2组患者的临床疗效、临床症状恢复时间、复发率、治疗前后细胞因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、γ-干扰素(IFN-γ)]和免疫功能[T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+]变化,并比较2组的安全性.结果 试验组98例,对照组100例.治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为93.88％和83.00％,在统计学上差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,试验组和对照组的小腹坠痛缓解时间分别为(3.65±0.52)和(5.26±0.65)d,白带异常恢复时间分别为(5.77±0.83)和(7.16±0.92)d,阴道不规则流血恢复时间分别为(4.82±0.62)和(6.94±0.77)d,HPV清除率分别为58.16％和42.00％,IL-6分别为(0.16±0.09)和(0.23±0.05)mg·L-1,IL-8 分别为(0.47±0.05)和(0.66±0.07)mg·L-1,IFN-γ 分别为(10.07±0.98)和(7.24±0.65)ng·mL-1,CD3+分别为(71.06±8.29)％和(61.36±6.88)％,CD4+分别为(48.25±5.94)％和(42.25±5.13)％,CD8+分别为(20.37±2.42)％和(24.69±2.51)％,CD4+/CD8+分别为2.11±0.27和1.36±0.16,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).试验组和对照组的复发率分别为5.10％和14.00％,在统计学上差异有统计学意义(P＜0.05).试验组和对照组的总药物不良反应发生率分别为26.53％和21.00％,在统计学上差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rhIFN-α2b联合ALA-PDT治疗宫颈上皮内病变合并HPV感染患者临床疗效较好,在提高患者免疫力、减轻炎症反应和降低复发率等方面有明显优势,安全性好.

目的 研究复方葛根温敏凝胶(TISG of Gegen compound)的处方与制备工艺,并进行体外质量评价.方法 以泊洛沙姆(P407、P188)为凝胶基质处方,以胶凝温度作为评价指标,采用Box-Beheken法确定复方葛根温敏凝胶的处方和制备工艺,并对其进行流变学特性、体外释放等评价.结果 复方葛根温敏凝胶的最佳处方为葛根-桂枝提取物3％、精油微乳9％、PEG6000 1.54％、P407 20.18％、P188 4.97％,胶凝温度为(32.3±0.3)℃,24 h 内葛根素和肉桂酸的累计释放量分别为(6069.03±2403.78)μg·cm-2、(229.94±36.21)μg·cm-2,均符合零级动力学方程.结论 精油微乳和提取物复配制备成的温敏凝胶具有控释作用,能延长药物停留时间,可为临床治疗项背疼痛的制剂提供参考.

背景:防止宫腔粘连复发的关键是重建具有正常功能的子宫内膜,国内外对于宫腔粘连复发治疗的最新突破在于利用可降解材料制备水凝胶类物质防止粘连复发.目的:综述宫腔粘连中水凝胶促内膜修复的研究进展.方法:系统检索PubMed数据库、Web of Science、中国知网、万方数据库,以"宫腔粘连,子宫内膜损伤,子宫内膜再生,水凝胶,Intrauterine adhesions,Endometrial injury,Endometrium regeneration,hydrogel"为关键词,收集各数据库1990年1月至2023年3月发表的相关文献.结果与结论:近年来国内外关于宫腔粘连中水凝胶促内膜修复的研究取得了一定进展,对于宫腔粘连的防治和促进内膜修复具有重要作用:①水凝胶作为组织工程中一大重要载体,它本身具有优秀的生物相容性、生物降解性和三维网状结构,可以更好地应用在宫腔粘连治疗中;②以水凝胶为基础的搭载体系,可以通过运输药物/生物制剂/干细胞来促进子宫内膜上皮细胞的增殖分化,并恢复正常子宫形态,防止粘连复发;③透明质酸类水凝胶在满足良好生物相容性的同时还可以促进内膜上皮细胞的增殖分化,且在子宫内会被相应的酶类物质水解,不会影响机体正常代谢,是目前临床常用的子宫防粘连剂,也是组织工程研究中最常用的一种水凝胶载体;④以温敏特性出众的泊洛沙姆水凝胶可以在进入体内迅速凝胶化,快速形成物理屏障,并可对搭载物质起到缓释作用和提供细胞生长/黏附平台;⑤利用不同特性材料制备治疗性水凝胶的前景广阔,比如温敏特性水凝胶、pH响应性水凝胶以及光敏水凝胶等,但还存在诸多问题需要解决,例如水凝胶体系的安全性以及降解产物是否引起免疫反应、对正常机体经期是否具有影响等问题,还需要大量动物实验及临床试验来验证其安全性和有效性,不断完善治疗策略.

背景 Dickkopf相关蛋白 3(Dickkopf-3,DKK3)具有治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的潜力,羟丁基壳聚糖(hydroxybutyl chitosan,HBC)温敏水凝胶是一种新型药物载体.目的 探讨负载DKK3的HBC(DKK3-loaded HBC)水凝胶对OA大鼠的影响.方法 制备DKK3-loaded HBC,通过恒温水浴测定凝胶时间,酶联免疫吸附实验计算体外释放曲线,细胞毒性实验验证安全性.将 24只大鼠随机均匀分为假手术组、OA模型组、OA + DKK3组、OA + DKK3-loaded HBC组,每组 6只.使用前交叉韧带离断法造模后,不同组别大鼠分别关节腔注射磷酸盐缓冲溶液、DKK3或DKK3-loaded HBC干预.步态分析后分离大鼠膝关节,进行显微计算机断层扫描评估骨质改变,苏木精和伊红染色以及免疫组化染色评估软骨改变.结果 DKK3-loaded HBC溶液在 37℃条件下 10s内形成水凝胶,DKK3在 24h内迅速释放并持续超过 168 h.DKK3和HBC浸取液对软骨细胞活力没有显著影响.与OA模型组相比,OA + DKK3-loaded HBC组大鼠的步速、步幅、后爪与地面接触时间提高(P均<0.05),骨和软骨的完整性提高,软骨基质的损失和软骨基质酶的表达减少(P均<0.05).结论 HBC具有良好的药物缓释能力,关节腔注射DKK3-loaded HBC可能通过降低软骨基质酶的表达延缓大鼠OA的进展,改善疼痛和运动能力.

目的 制备帕瑞昔布钠鼻用温敏凝胶(PS-TNG)并对其体外性质进行评价.方法 以胶凝温度为主要观察指标,采用星点设计-效应面法对PS-TNG处方进行优化,然后以离体羊鼻黏膜为模型,采用Franz透皮扩散池法筛选PS最佳促渗剂,最后制备PS-TNG并对其体外性质进行研究.分别测定该制剂的胶凝温度、胶凝时间、pH值、体外溶蚀率、药物释放率以及药物释放度,并考察温度和转速对制剂黏度的影响以及制剂的膨胀系数和持水能力.结果 PS-TNG理想处方组成为:5.0%PS、20.88%F127、3.28%F68、0.28%HPMC、5.0%HP-β-CD、0.05%尼泊金乙酯及适量水.测得PS-TNG的胶凝温度为32.2℃,胶凝时间为48.2 s,pH值为7.4;PS-TNG体外累积溶蚀与药物累积释放量间具有良好的线性关系(r=0.9997);制剂释放度试验表明,PS-TNG具明显缓释特征.此外,发现温度和搅拌对制剂的黏度均有明显影响,该制剂的持水能力强且膨胀系数小.结论 PS-TNG处方组成合理,制备工艺简单,其胶凝温度、胶凝时间、pH值、膨胀系数和持水能力适宜,药物缓释作用明显,预计有良好的临床应用前景.