目的:研究坐骨神经来源外泌体（SN-EXO）促进周围神经损伤（PNI）后轴突再生加速功能恢复的作用及机制。方法:2021年3月至2022年10月,郑州大学第一附属医院骨科通过EdU细胞增殖实验评价SN-EXO对许旺细胞（SCs）增殖能力的影响。21只健康雄性SD大鼠随机分为假手术（Sham）组、PNI组及SN-EXO治疗组,每组7只。Sham组仅显露右侧坐骨神经,PNI组及SN-EXO治疗组大鼠右侧坐骨神经挤压后神经外膜下分别注射PBS及SN-EXO。术后28 d进行步态分析和坐骨神经功能指数（SFI）检测,并处死各组大鼠取右侧坐骨神经,通过HE染色评价坐骨神经组织病理学变化及轴突排列情况,采用免疫荧光染色分析SCs及轴突再生情况。所得数据进行统计学分析, P<0.05为差异有统计学意义。 结果:SN-EXO可显著增强SCs增殖能力,差异有统计学意义（ P<0.05）。术后28 d,SN-EXO治疗组SFI为（-27.65±4.36）分,高于PNI组（-57.33±7.49）分,差异有统计学意义（ P<0.05）；SN-EXO治疗组轴突排列较PNI组更加致密且有序,损伤所致轴突崩解和空泡变性现象较少；SN-EXO治疗组NF200及S100β荧光强度高于PNI组,差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:SN-EXO通过增强SCs增殖能力促进PNI后轴突再生及功能恢复。

目的:探讨轴突导向分子Netrin-1对周围神经损伤后有序轴突再生及神经功能恢复的影响。方法:通过划痕实验及Transwell小室迁移实验检测Netrin-1对雪旺细胞(Schwann cells，SCs)迁移能力的影响。取21只健康雄性SD大鼠，随机分为3组，每组7只，即假手术组、周围神经损伤(peripheral nerve injury，PNI)组及Netrin-1治疗组。假手术组坐骨神经游离后不进行处理；PNI组及Netrin-1治疗组坐骨神经挤压后分别行神经内注射PBS及Netrin-1。术后7、14及28 d进行步态分析和坐骨神经功能指数(sciatic nerve function index，SFI)检测。术后28 d处死各组大鼠取右侧坐骨神经，采用HE及Masson染色评估坐骨神经组织病理学变化及轴突排列情况，通过免疫荧光染色分析SCs增殖及轴突再生情况。结果:Netrin-1治疗组SCs划痕愈合率及细胞迁移数均高于空白对照，差异有统计学意义( P<0.05)。术后28 d，Netrin-1治疗组轴突排列较PNI组紧密且有序，损伤所致轴突崩解和空泡化现象较少；Netrin-1治疗组NF200及S100β荧光强度高于PNI组，差异有统计学意义( P<0.05)；术后14及28 d，Netrin-1治疗组SFI高于PNI组，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:Netrin-1可通过定向SCs迁移介导有序轴突再生加速神经功能恢复。

目的 评价胶原支架结合脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)移植修复大鼠全横断脊髓损伤的效果.方法 将 32 只成年雌性 SD 大鼠随机分成 4 组(n=8):A 组为假手术组,只暴露T9、T10段脊髓;B、C、D 组切除长 4 mm 的 T9、T10段脊髓后,C、D 组分别于损伤处植入相应长度的线性有序胶原支架(linear ordered collagen scaffolds,LOCS)和结合了胶原结合结构域(collagen binding domain,CBD)-BDNF 的LOCS.术前及术后 3 个月内每周对大鼠进行 BBB 运动功能评分.术后 3 个月,实施神经电生理检测各组大鼠运动诱发电位(motor evoked potential,MEP);然后于 L2段脊髓组织注射荧光金(fluorogold,FG)实施逆行示踪, 1 周后取大鼠大脑及胸、腰段脊髓组织,脱水后观察脊髓组织形态;取包含损伤区的胸、腰段脊髓组织作切片.其中,脊髓冠状切片于激光共聚焦显微镜下进行观察,计算 FG 阳性细胞积分吸光度(IA)值;胸段脊髓组织水平切片采用免疫荧光染色,观察全横断脊髓损伤造模情况、脊髓损伤区轴突再生情况、D 组再生轴突的突触形成情况.结果 术后各时间点 B、C、D 组 BBB 评分均显著低于 A 组(P<0.05);术后 2～12 周 D 组 BBB 评分均明显高于 B、C 组(P<0.05).电生理检测示,B 组未观测到 MEP;C、D 组 MEP 潜伏期显著长于 A 组,C 组显著长于 D组,差异均有统计学意义(P<0.05).脊髓组织形态观察示,B 组脊髓损伤区域向两端延伸,损伤部位组织破坏严重;C、D 组脊髓形态恢复较好,D 组更接近正常组织形态.逆行示踪结果显示,各组大鼠损伤区以下的腰段脊髓灰质中均充满了 FG 阳性细胞;在损伤区以上的胸段脊髓中,A 组 FG 阳性区域 IA 值显著大于 B、C、D 组(P<0.05),C、D 组大于 B 组(P<0.05),C、D 组间差异无统计学意义(P>0.05).免疫荧光染色示,自同一脊髓背侧至腹侧选出的组织切片显示了明显异于正常组织的全横断脊髓损伤区域.A 组 NF 阳性轴突数明显多于 B、C、D 组,C、D 组多于 B 组,D 组多于 C 组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 LOCS 结合 CBD-BDNF 移植可以促进大鼠全横断脊髓损伤后轴突再生以及后肢运动功能恢复.

目的 研究夏天无Corydalis decumbens (Thunb.) Pers.对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响.方法 30只小鼠随机均分为模型组、夏天无组、假手术组,Masson染色检测损伤区胶原纤维、炎性细胞、神经纤维分布,免疫荧光染色检测层黏连蛋白(LN)、施万细胞标记物S-100、小G蛋白Rac1表达及轴突再生情况,HE染色检测神经功能恢复情况.结果 与模型组比较,夏天无组胶原纤维、炎性细胞减少,神经纤维有序,LN、Rac1、S-100表达,再生轴突数量,腓肠肌纤维横截面积和腓肠肌质量显著增加(P＜0.05).结论 夏天无可通过减少胶原纤维生成和炎症细胞浸润,增加LN、Rac1、S-100表达,改善坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境来促进轴突再生和神经功能恢复.

目的 建立周围神经断裂动物模型,自体富血小板血浆注射损伤的周围神经局部,观察局部微环境与神经修复的量变关系,分析可能存在的原理及机制.方法 36只实验大白兔随机均分三组;建立坐骨神经断裂损伤修复的动物模型,组1在神经缝合断端及周围注入0.4mL NS,组2、组3同法注入0.4mL APRP,术后第1、3、5周在超声引导下组1、组2注入0.4mL NS,组3注入0.4mLAPRP,共4周.术后8周,取下坐骨神经,进行神经电生理及组化等分析.结果 APRP中平均血小板浓度为1336.42×109/L,为全血中的4.38倍.术后8周坐骨神经动作电位(CNAP)在组3、组2恢复优于组1,且三组间比较有统计学意义(P<0.05);三组坐骨神经断裂侧腓肠肌中乙酰胆碱酯酶(AChE)含量有统计学意义(P<0.05);HE和免疫组化染色显示:组3包绕神经元长轴突的髓鞘排列规整,而组2较组1稍显有序;神经断端的细胞因子VEGF和IGF-1在各组均为阳性,组3明显高于其他两组.结论 兔坐骨神经断裂局部注射APRP可促进神经CNAP的恢复及ACh的合成和释放,促进施旺细胞的分裂增殖,而不同时间点多次应用APRP效果更明显,且增加坐骨神经局部微环境参数VEGF、IGF-1的含量,增强周围神经损伤后运动终板的修复,有利于周围神经的再生修复及功能恢复.

周围神经损伤后再生常会出现错配、卷曲及迷乱等新生轴突无序再生的情况,这是限制周围神经损伤后有效再生的重要原因之一,因此实现周围神经损伤后的有序再生,有助于提高再生的效率与功能恢复.硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)作为传统的轴突再生抑制性分子,在周围神经系统正常发育过程中具有重要作用.本文从CSPGs的分类、作用特点及其时空分布等方面来探讨其在促周围神经有序再生过程中所扮演的角色及应用转化的可能性,有助于增加轴突再生数量的神经移植物的设计,进一步指导周围神经移植物的仿生构建,从而促进周围神经损伤后的有序及有效再生.

背景:既往研究发现嗅鞘细胞培养上清可以促进脊髓损伤后轴突再生及功能恢复,但应用于周围神经损伤治疗方面鲜有报道.目的:探讨嗅鞘细胞培养上清是否有助于周围神经损伤后的神经修复.方法:分离纯化嗅鞘细胞并鉴定,制备嗅鞘细胞培养上清.在体外环境将嗅鞘细胞培养上清作用于背根神经节组织块,观察背根神经节轴突生长情况;在体内环境将嗅鞘细胞培养上清应用于大鼠坐骨神经缺损模型,观察坐骨神经轴突再生及髓鞘化情况.结果与结论:①嗅鞘细胞纯度高达(94.4±3.1)％;②与空白对照组和低剂量嗅鞘细胞上清组对比,高剂量嗅鞘细胞上清组背根神经节组织块的5根最长神经轴突平均长度显著增加(P<0.05);③免疫荧光显示嗅鞘细胞上清处理组与自体神经移植组类似,再生神经贯通缺损区域,并且再生神经排列有序,神经再生情况显著优于空白对照组;④透射电子显微镜观察显示嗅鞘细胞上清处理组再生神经轴突的数量和髓鞘厚度显著高于空白对照组(P<0.05);⑤结果表明,嗅鞘细胞培养上清能够促进周围神经损伤后轴突再生及再生轴突的髓鞘化,为周围神经损伤提供了一种新的基于嗅鞘细胞的无细胞疗法.

与外周神经系统的神经元不同,中枢神经系统中成熟的神经元往往无法实现损伤后再生.近期,有研究发现钙离子传导损伤信号、线粒体运输、细胞骨架重构和蛋白质合成在轴突再生中发挥重要的功能.神经元损伤发生后,细胞内钙离子浓度升高,通过钙离子介导的环腺苷酸(cAMP)-蛋白激酶A(PKA)信号通路活化可激活下游双亮氨酸激酶(DLK),在多种动物损伤模型中促进轴突再生.轴突再生需要生长锥的重构,这一进程需要细胞骨架的有序组装,在损伤处表达特定促进微管和微丝聚合的基因可有效促进生长锥的重构.此外,负责供能的线粒体也会影响生长锥的重构和轴突再生能力.最后,研究还发现多个调控基因表达与蛋白合成的通路可促进轴突再生.本综述将重点概括这些对轴突再生有重要作用的生理过程和分子机制.

目的 探究不同剂量天麻素对兔坐骨神经挤压伤的修复作用.方法 将40只新西兰白兔随机分为4组,模型对照组(生理盐水5 mL/kg)、天麻素低剂量组(200 mg/kg肌注)、天麻素高剂量组(400 mg/kg肌注)、阳性药组(甲钴胺50μg/kg肌注),分笼专人饲养.每只兔子取左腿坐骨神经干用钳夹法造模,造模成功后每日定时定量给药,连续给药4周.造模后每日对家兔进行整体观察;术后每隔1周统计并计算坐骨神经功能指数,并检测记录患肢神经传导速度;4周后处死并取神经行HE染色观察病理;取靶肌肉(小腿三角肌)称肌湿重计算恢复率,免疫荧光观察轴突处神经生长相关蛋白GAP-43的表达及对比累计吸光度值分析轴突再生情况.结果 天麻素高剂量组和阳性药组的神经指数、神经传导速度、靶肌肉恢复率、免疫荧光累计吸光度均高于模型对照组(P<0.05).HE染色显示,天麻素高剂量组及阳性药组雪旺细胞增殖增多,轴索分列较模型对照组有序,瘢痕少.结论 一定质量浓度的天麻素对促进周围神经损伤修复具有积极意义.

目的 观察应用动脉套管联合小间隙缝合聚乙二醇(PEG)冲洗法修复大鼠周围神经损伤的效果.方法 建立大鼠坐骨神经离断后神经重建模型,144只大鼠平均分为4组,每组36只,均选用雄性SD大鼠,体重200～250g.其中坐骨神经断端采用小间隙缝合盐水冲洗修复为A组,小间隙缝合PEG冲洗修复为B组,动脉套管联合小间隙缝合盐水冲洗修复为C组,动脉套管联合小间隙缝合PEG冲洗修复为D组.评估神经功能恢复时,采用行为学坐骨神经功能指数(SFI)及电生理神经冲动传导与复合肌肉动作电位(CMAP)对4组数据进行分析.评估神经再生情况时,应用苏木精-伊红染色法(HE染色)和透射电子显微镜(TEM)对4组数据进行采集.所有数据在各组术后1、4和8周进行检测.结果 D组行为学SFI值显著优于其他组;电生理学示各组在术后所有时间点均产生混合肌肉运动电位CMAP,但D组运动电位峰值高于其他组;组织病理学HE染色示D组下肢肌肉萎缩程度小于其他组且在对坐骨神经进行染色时发现D组再生神经纤维排列有序,具有正常直径和施万细胞,成纤维细胞较少;TEM示D组再生神经纤维数量最多、轴突最厚、髓鞘外观正常.结论 在对大鼠坐骨神经损伤模型中应用动脉套管联合小间隙缝合PEG冲洗修复效果显著优于其他方法,通过后期的临床转化,有望为临床上周围神经损伤的修复提供一种新的思路.