目的 研究管式燃烧—液体闪烁计数法测定海产品中碳-14活度浓度的方法,为海产品中碳-14的监测提供技术支撑.方法 通过研究黄花鱼、海白虾、梭子蟹、蛏子、海藻 5种海产品干样的热解特性,设定适合海产品氧化燃烧的温控程序,并验证燃烧效果、碳元素的回收率和方法正确度、精密度.结果 管式氧化燃烧装置在推荐燃烧程序下对大部分海产品的燃烧效率在 98%以上,对碳元素的回收率与燃烧葡萄糖计算得到的回收率结果相近,均在 95%以上.4家实验室通过测定中国糖碳标准物质中碳-14活度浓度对方法正确度进行了验证,相对误差为 1.03%～3.41%,相对误差均值为 2.36%;通过测定黄花鱼样品中碳-14活度浓度对方法精密度进行了验证,实验室内相对标准偏差为5.11%～9.35%,实验室间相对标准偏差为 4.04%.结论 采用管式燃烧-液闪测量法测定海产品中碳-14活度浓度,推荐的氧化燃烧程序对海产品更有针对性,耗时更短,方法正确度和精密度满足要求,适用于海产品中碳-14的测定.

综述几丁质酶的分类,并以 50 条甲壳动物几丁质酶为例,验证氨基酸同源性的分类方式可以将甲壳动物几丁质酶细分为Group 1～Group 7.重点介绍甲壳动物几丁质酶的结构和功能,结构方面主要从Group 1～Group 7几丁质酶氨基酸序列的保守基序(Motif)组成特点和Group 1～Group 7 几丁质酶结构域组成特点进行阐述,并以三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)几丁质酶为例结合解析过的几丁质酶结构,预测甲壳动物几丁质酶三维空间结构特点;功能方面几丁质酶主要参与几丁质食物的消化、蜕皮时旧壳的消化以及通过降解病原体几丁质外壳来对抗病原,发挥免疫防御的功能.

为探究局地尺度下近岸岛礁海域之多变水体环境、极高空间异质性对生物群落的影响,于2020-2021年4个季度在大陈岛礁海域底拖网采样,利用等级聚类(cluster)、非度量多维标度(NMDS)等多元统计方法分析甲壳类群落结构的时空格局,并整合温度、盐度、深度等环境因子进行冗余分析(RDA)以解析影响因素,同时利用丰度生物量曲线(ABC)及W统计量评估群落稳态.结果显示:全年共采集甲壳类53种,隶属2目13科29属,虾类占总种类数的56.60％,种类数秋季(43种)＞冬季(41种)＞春季(31种)＞夏季(26种).优势种的季节更替明显,夏秋季以哈氏仿对虾(Parapenaeopsis hardwickii)、中华管鞭虾(Solenocera crassicornis)和三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)为代表的中大型经济种为主,冬春季则以双斑蟳(Charybdis bimaculata)和细巧仿对虾(Parapenaeopsis tenella)为代表的小个体饵料种为主,口虾蛄(Oratosquilla oratotria)在各个季节皆为优势种.甲壳类资源密度季节间变化明显,空间分布不均,呈现秋季最高,春季最低,夏秋两季极显著高于冬春季(P＜0.001),且近岩礁区资源密度最大,河口侧浅水区最小的特点.受洄游物种的季节性迁移和选择性分布,以及岛礁系统内水文环境的区域分化等因素影响,甲壳类群落结构具有显著的季节和空间差异,形成夏秋季异质性高,冬春季相似性大,河口侧浅水区与外侧深水区分化程度突出的格局.底层水温、底层盐度、底层溶氧和水深等环境因子与群落异质性存在显著关系.ABC曲线表明甲壳类群落状态稳定,具有较强的抗干扰能力.研究表明,大陈岛礁海域优势甲壳类季节变动强烈,且在局地尺度上一定程度表现出区域化的群落结构,但皆保持着较高的资源水平,对当地渔业资源的维系发挥着积极作用,也为当地海洋牧场的功能设计提供了资源基础.

[目的]了解梭子蟹、虾蛄中重金属镉的污染情况,及时发现食品安全问题和隐患.[方法]对上海市市售的产自不同省份的梭子蟹、虾蛄,按不同区域和场所分类采集,并对部分样品进行组织部位制样.采用石墨炉原子吸收光谱法进行镉项目检测,并对梭子蟹和虾蛄中镉残留展开暴露评估.[结果]124批梭子蟹中,镉检出率为100%(124/124);63批虾蛄中,镉检出率为100%(63/63).不同组织部位的镉含量不同,梭子蟹和虾蛄可食部位中肝胰脏镉的富集程度最高.梭子蟹肝胰脏镉平均检出值、P50、P95分别占每月耐受摄入量(PTMI)的52.64%、49.28%和98.65%;虾蛄肝胰脏镉平均检出值、P50、P95分别占PTMI的30.76%、32.04%和46.16%.[结论]梭子蟹和虾蛄中的重金属镉平均残留量整体处于安全范围内.

为研究三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)高迁移率族蛋白B(High-mobility group box protein,HMGB)在其先天免疫中发挥的功能,利用RACE技术首次克隆得到了三疣梭子蟹HMGBa基因,命名为PtHMGBa.其cDNA序列全长1030 bp,其中5'端非编码区(UTR)为94 bp,3'端非编码区(UTR)为255 bp,开放阅读框(ORF)为681 bp,编码一个含有227个氨基酸,分子量25.82kD,理论等电点为5.94的蛋白质.PtHMGBa蛋白包含2个HMG盒结构域和一个酸性尾部结构域.分析表明,三疣梭子蟹HMGBa氨基酸序列与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) HMGBa相似度最高.实时荧光定量PCR结果显示,PtHMGBa基因在血细胞和肝胰腺的表达量最高,在眼柄中表达量最低.在副溶血弧菌和WSSV感染过程中,PtHMGBa基因在肝胰腺和血细胞中均出现了表达上调.其中,经副溶血弧菌感染后,该基因在上述2种组织中分别于48h和6h达到表达量的峰值;经WSSV感染后,该基因在2种组织中均在12h达到表达量的峰值.结果表明PtHMGBa基因参与了三疣梭子蟹抵御外来病原的免疫响应,研究为深入开展三疣梭子蟹和其他甲壳动物的免疫调控机理提供了科学依据.

为深入研究三疣梭子蟹Toll受体的功能,在前期工作的基础上构建了PtToll-1胞外结构域原核表达载体,并成功获得其重组蛋白.将获得的重组蛋白免疫小鼠获得抗此重组蛋白免疫抗血清用于后续研究.SDS-PAGE结果表明,体外诱导表达重组蛋白rPt Toll-1以包涵体的形式出现在大肠杆菌裂解液的沉淀中,分子量大小约为87.18 kD;Western-Blot分析表明,小鼠抗血清能与rPt Toll-1特异性结合.利用免疫荧光及细胞免疫化学方法对三疣梭子蟹PtToll-1在消化道、肝胰腺、鳃、心脏和肌肉等组织及血淋巴细胞中的分布进行研究.此外成功构建PtToll-1完整蛋白的真核表达载体pEGFP-N2-Pt Toll-1,并转染HEK293T细胞研究其在哺乳动物细胞HEK293中的表达.组织免疫荧光结果显示,Pt Toll-1在三疣梭子蟹消化道、肝胰腺、鳃、心脏及肌肉等组织中均有分布,但在鳃及消化道的组织结构中表达较强;细胞免疫荧光及免疫化学结果均表明Pt Toll-1主要分布在血淋巴的细胞膜上;激光共聚焦显微技术观察发现,pEGFP-PtToll-1融合蛋白也主要在HEK-293T细胞膜上表达.研究结果将为三疣梭子蟹Toll受体蛋白的免疫学功能的研究奠定基础.

研究采用雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)藻粉作为天然虾青素源, 配制4种不同虾青素含量(含量分别为0、26.60、41.62和81.37 mg/kg)的饲料(记为饲料1#—4#),对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus )雌体进行为期45d的育肥实验, 研究其对雌蟹卵巢发育、色泽、抗氧化能力、免疫性能和生化组成的影响.结果表明: (1)育肥饲料中虾青素含量对雌蟹性腺指数(GSI)和肝胰腺指数(HSI)均无显著影响.(2)肝胰腺、卵巢和头胸甲中的总类胡萝卜素含量、红度(a*)值和黄度(b*)值均随饲料虾青素含量的升高而升高, 而3种组织的亮度(L*)值呈显著下降趋势(P＜0.05).(3)对抗氧化指标而言, 虾青素添加组(饲料2#—4#)血淋巴超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活力均显著低于无虾青素组(饲料1#); 血淋巴中的总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及肝胰腺中的SOD和T-AOC活力均随饲料中虾青素水平升高而上升, 而血淋巴和肝胰腺中的丙二醛(MDA)含量呈下降趋势.(4)对免疫指标而言, 血淋巴和肝胰腺中的酸性磷酸酶(ACP)活力均在饲料4#组最高, 而饲料1#组血淋巴中的血蓝蛋白(Hc)含量显著高于其他组(P＜0.05).(5)对生化组成而言, 肌肉和肝胰腺中的总脂、总碳水化合物及卵巢中总脂含量均随饲料中虾青素含量的升高呈上升趋势, 饲料2#组卵巢中的总碳水化合物含量最高(P＜0.05).综上所述, 三疣梭子蟹雌体育肥饲料中添加虾青素对其卵巢发育无显著影响, 但可改善色泽和提高其抗氧化能力及可食组织中的总脂和碳水化合物含量, 三疣梭子蟹雌体育肥饲料中虾青素适宜含量为50 mg/kg饲料左右.

抗菌肽Scygonadin是一种存在于甲壳动物中与生殖免疫相关的抗菌肽.研究采用RT-PCR和RACE技术,克隆三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)Scygonadin基因并进行序列分析.结果表明,三疣梭子蟹Scygonadin cDNA序列全长为549 bp,含有一个372 bp的开放阅读框(ORF),编码123个氨基酸,其中含29个氨基酸的信号肽,5′和3′非编码区分别为56 bp和121 bp.与已报道的锯缘青蟹(Scylla serrata)Scygonadin核苷酸序列的同源性为77.4％,氨基酸序列的同源性为68.3％.三疣梭子蟹Scygonadin基因序列的获得为研究其免疫防御机制和基因功能打下基础.

长江口及其邻近海域是连接河流和海洋的重要枢纽,但对该海域生物多样性和相关生态过程,尤其是无脊椎动物群落的了解仍然较少.本研究根据2014年2月、5月、8月和11月4个航次长江口及其邻近海域渔业资源综合调查数据,探讨该海域无脊椎动物群落时空分布特征及其群聚结构变化与环境因子的关系.结果表明:2014年长江口及其邻近海域4个航次渔业资源调查共采集无脊椎动物35种,隶属于3门10目20科,以甲壳动物(19种)和软体动物(13种)的物种数最为丰富,资源优势种包括葛氏长臂虾、脊腹褐虾、细点圆趾蟹、中国毛虾、三疣梭子蟹和双斑蟳.2014年长江口无脊椎动物丰度和生物量分别为4518.96 kN·km-2和173.09 kg·km-2,春季最高,秋季最低.春季和冬季无脊椎动物多样性最高,夏季最低.长江口无脊椎动物各季节群聚结构存在显著差异,冬季、夏季和秋季以南部和北部的差异为主,春季则以近岸和远岸的差异为主.温度和溶解氧驱动无脊椎动物群落季节的时间变异,初级生产水平和营养要素驱动群落季节内的空间变异.

目的 评价日本福岛核电站事故对南通市海产品放射性水平的影响程度.方法 2010-2017年每年分季度(除封海季节外)分类别采集贝类、鱼类、虾类、蟹类等海产品,送实验室检测总α、总β放射性水平.2017年鲳鱼和文蛤送江苏省疾病预防控制中心进行放射性核素检测.结果 文蛤、金钩虾、梭子蟹、小黄鱼总α和总β放射性水平各年份间均无回归关系(P＞0.05);鲳鱼总α放射性水平各年份间无回归关系(F(1,25)=0.126,P＞0.05),总β放射性水平各年份间有回归关系(F(1,27)=4.65,P＜0.05).2017年文蛤和鲳鱼天然核素铀-238、钍-232、镭-226、钾-40等均在本底水平,碘-131、铯-134、铯-137等3种人工核素水平小于检测限.结论 截止到2017年,日本福岛核电站事故暂时未影响到南通市沿海海域海产品,仍需继续监测,以掌握南通市沿海海域海产品放射性水平动态变化趋势.