目的:考察电子束辐照和 60Co辐照对苦参药材、苦参中间体提取物及痢泻灵片中4种苦参碱类成分含量的影响。 方法:用电子束辐照和 60Co辐照2种辐照方法，分别以0、1.5、3、5、7、10、20、30、40 kGy剂量对苦参、苦参中间体提取物及痢泻灵片进行辐照，采用HPLC法测定其氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱含量，并比较辐照前后成分含量变化。 结果:氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱分别在0.046 9～0.937 4 μg、0.020 5～0.410 4 μg、0.098 9～1.977 9 μg、0.048 7～0.973 1 μg范围内线性关系良好，平均回收率分别为98.1%、100.1%、100.5%、96.6%， RSD分别为1.69%、2.03%、3.14%、1.10%。电子束辐照和 60Co辐照2种辐照方法对苦参药材中氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱含量基本无影响，对苦参中间体提取物和痢泻灵片4个成分含量有影响。 结论:所建立的苦参碱类成分测定方法准确、重复性好、简单实用，可作为痢泻灵片质控方法。辐照对苦参药材苦参碱类成分含量影响不显著，高剂量辐照对苦参中间体及成药有影响，可为企业质量控制及灭菌辐照提供依据。

目的:探究槐定碱(SRI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠的改善作用,并探究其作用机制.方法:随机取10只SD大鼠为空白组.50只SD大鼠采用脂多糖(LPS)气管滴注法构建ARDS大鼠模型.将造模成功大鼠随机分为模型组、SRI低剂量组、SRI中剂量组、SRI高剂量组、维替泊芬(Verteporfin)+SRI高剂量组,每组10只.造模2 h后SRI低、中、高剂量组分别予低(2 mg/kg)、中(6 mg/kg)、高(12 mg/kg)剂量SRI腹腔注射,Verteporfin+SRI高剂量组在腹腔注射Verteporfin(100 mg/kg)的基础上予SRI腹腔注射(12 mg/kg).空白组和模型组腹腔注射等体积生理盐水.给药10 h后检测大鼠血氧分压(PaO2)、氧指数[PaO2/吸入氧浓度(FiO2)]和肺湿/干(W/D)比,HE染色观察肺组织病理变化并进行病理损伤评分,酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1[3和IL-10的水平,BCA检测BALF中总蛋白水平,姬姆萨染色检测BALF中巨噬细胞和中性粒细胞数量,ELISA法检测肺组织丙二醛(MDA),比色法检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,荧光法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,Western blotting检测肺组织Hippo-YAP通路蛋白表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠肺组织结构破坏,大量炎症细胞浸润;与模型组比较,SRI低、中、高剂量组肺组织结构有所恢复;与SRI高剂量组比较,Verteporfin+SRI高剂量组肺组织损伤加重,肺泡肿胀、变性,炎症细胞浸润明显.模型组大鼠PaO2、PaO2/FiO2值低于空白组,W/D比、病理损伤评分高于空白组(P＜0.05);SRI低、中、高剂量组PaO2、PaO2/FiO2值高于模型组,W/D比、病理损伤评分低于模型组(P＜0.05);Verteporfin+SRI高剂量组PaO2、PaO2/FiO2值低于SRI高剂量组,W/D比、病理损伤评分高于SRI高剂量组(P＜0.05).模型组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、IL-10、总蛋白水平及巨噬细胞计数、中性粒细胞计数高于空白组(P＜0.05);SRI低、中、高剂量组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、总蛋白水平及巨噬细胞计数、中性粒细胞计数低于模型组,BALF中IL-10水平显高于模型组(P＜0.05);Verteporfin+SRI高剂量组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、总蛋白水平和巨噬细胞计数、中性粒细胞计数高于SRI高剂量组,BALF中IL-10水平低于SRI高剂量组(P＜0.05).模型组大鼠肺组织MDA、MPO、p-YAP蛋白相对表达量及p-LATS1/LATS1高于空白组,SOD活性及YAP、TEAD1蛋白相对表达量低于空白组(P＜0.05);SRI低、中、高剂量组大鼠肺组织MDA、MPO、p-YAP蛋白相对表达量及p-LATS1/LATS1低于模型组,SOD活性及YAP、TEAD 1蛋白相对表达量高于模型组(P＜0.05);Verteporfin+SRI高剂量组大鼠肺组织MDA、MPO、p-YAP蛋白相对表达量及p-LATS1/LATS1高于SRI高剂量组,SOD活性及YAP、TEAD1蛋白相对表达量低于SRI高剂量组(P＜0.05).结论:SRI能抑制ARDS大鼠炎症反应和氧化应激,其作用机制可能与激活Hippo-YAP信号通路有关.

目的 探讨槐定碱通过靶向下调β-Catenin从而对前列腺癌PC3细胞增殖与侵袭的影响.方法 选取人前列腺癌PC3细胞,经CCK8实验(10、20、40、80、160、320、640mg/L槐定碱处理)检测增殖能力改变情况,计算出IC50,并取3个适合的作用浓度(50、100、200 mg/L组)处理细胞,以未加药处理为对照组,分别作用PC3细胞48 h后,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell侵袭实验检测侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测β-Catenin、Cyclin D1和基质金属蛋白酶(MMP-9)等Wnt/β-Catenin通路内关键蛋白的水平.通过分子对接预测槐定碱与β-Catenin相互作用.结果 CCK8实验表明,与对照组比较,10、20、40、80、160、320、640 mg/L槐定碱处理的PC3细胞抑制率升高(P＜0.01);与对照组比较,50、100、200 mg/L组PC3细胞迁移与侵袭能力下降(P＜0.05),100、200 mg/L组PC3细胞β-Catenin、CyclinD1及MMP-9蛋白下调(P＜0.05);与50 mg/L组比较,100、200 mg/L组PC3细胞迁移能力、侵袭能力及β-Catenin和CyclinD1蛋白水平下降(P＜0.05),200 mg/L组MMP-9蛋白下调(P＜0.05);与100组比较,200 mg/L组PC3细胞迁移能力、侵袭能力及β-Catenin和MMP-9蛋白水平下降(P＜0.05).经分子对接预测分析,槐定碱可能与β-Catenin蛋白上的Gln407、Lys233、Arg469、Lys180、Ser411和Asp412等多个位点发生相互作用.结论 槐定碱可能与β-Catenin蛋白相互作用,抑制PC3细胞内β-Catenin、CyclinD1及MMP-9蛋白的表达,从而影响Wnt/β-Catenin通路活性,抑制癌细胞的生长与侵袭,故槐定碱在前列腺癌中起到抑癌作用.

目的:建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,研究不同配伍的化学成分与细胞活力以及抗炎之间的关联性,明确不同配伍对细胞活力的影响以及抗炎作用的物质基础.方法:采用高效液相色谱(HPLC)建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,以 LPS 刺激 RAW 264.7建立炎症细胞模型,对不同配伍组合对炎症细胞模型肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及以细胞活力进行检测,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究苦豆子化学成分与抗炎作用的谱效关系,筛选苦豆子抗炎作用的物质基础.结果:苦豆子生物碱类成分HPLC 指纹图谱共有峰有8个,指认出5个共有峰,分别是槐果碱、槐定碱、苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱;黄酮类成分HPLC 指纹图谱共有峰有15个,指认出3个共有峰,分别为槲皮素、紫铆因和芹菜素.相关性分析结果表明,槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱与脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7)细胞释放的炎症因子TNF-α 水平呈显著负相关,槲皮素与细胞活力呈负相关,紫铆因、芹菜素与细胞活力呈正相关,槐定碱、氧化苦参碱与细胞活力呈负相关,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱与细胞活力呈正相关.结论:槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱可能是苦豆子抗炎的物质基础,可为挖掘苦豆子的质量标志物以及药材质量控制提供参考.

三物黄芩汤(Sanwu Huangqin Decoction,SHD)始载于《金匮要略》,由黄芩、苦参、地黄3味药组成,为滋阴清热之经典方剂.主要含有黄酮类、生物碱类、环烯醚萜苷类及苯乙醇苷类等化合物,具有抗肿瘤、抑菌、抗病毒、抗过敏、抗白塞病等药理作用,临床多用于发热性疾病、红斑性肢痛症、自身免疫性肝病、皮肤性疾病等.通过对SHD的处方考证与历史沿革、化学成分、药理作用及现代临床应用等进行系统分析,并在此基础之上,依据中药质量标志物(quality marker,Q-Marker)的五原则对SHD的Q-Marker进行预测,黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A,苦参中苦参碱、氧化苦参碱、氧化槐果碱、槐果碱、槐定碱、三叶豆紫檀苷、苦参酮,地黄中梓醇、地黄苷D可初步确定为SHD的Q-Marker,为完善SHD的制剂过程中质量溯源体系及其质量评价与控制体系奠定一定的基础.

目的 分析不同配比"黄连-苦参"药对的特征性成分量-质变化相关性,为该药对的量-效相关性及临床应用提供合理的用量比例参考.方法 采用HPLC法,建立不同配比9批"黄连-苦参"药对(5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5),建立药对HPLC特征指纹图谱及其特征性成分含量测定方法,分析9组样品成分的差异性与相关性.结果 9种配比的黄连-苦参药对共确定16个共有峰,指认苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱共10个共有峰.含量测定结果显示,黄连-苦参配对后相比黄连药材及苦参药材,特征性成分均有显著性差异.黄连-苦参(5∶1)时苦参碱、槐定碱、木兰花碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异;黄连-苦参(4∶1)时,非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异,且黄连总生物碱溶出最高;黄连-苦参(1∶1)时苦参总生物碱含量最高,且药根碱含量为各比例最高;黄连-苦参(1∶3)时氧化苦参碱含量为各比例最高.结论 黄连-苦参不同配比时,以特征性成分个数与含量为标示的"质"与配伍用"量"之间的相关差异性较明显,显示出一定的成分相互促溶作用.苦参中3种成分的溶出量随黄连比例的降低呈现"U"型分布,而黄连中7种成分溶出量随黄连比例的降低整体呈现降低趋势.与黄连、苦参各药材单提相比,各比例下苦参中总生物碱类成分的溶出均有不同程度的提升,黄连中总生物碱类成分在黄连-苦参(5∶1)及(4∶1)比例下溶出表现为提升,其他比例表现为降低.药对中生物碱类成分的溶出规律与临床验方中药对的使用配比成正相关.为进一步开展该药对的量-效关联性分析确定了物质基础,也为临床潜方时确定适宜用量提供参考.

目的 建立一测多评(quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS)技术与化学模式识别及加权逼近理想解排序法(technique for order preference by similarity to ideal solution,TOPSIS)模型相结合的润燥止痒胶囊(Runzao Zhiyang Capsules,RZC)综合质量评价方法.方法 以Epic Polar C18 柱为色谱柱,乙腈-无水乙醇(80∶20)与0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为 320、280、220 nm,二苯乙烯苷为内参物,采用QAMS法同时检测 15 批RZC中焦地黄苯乙醇苷A1、毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B1、二苯乙烯苷、虎杖苷、桑皮苷A、桑辛素M、二氢桑色素、槐果碱、苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱和氧化苦参碱含量.通过对 13个成分含量检测数据进行化学模式识别分析,挖掘RZC质量差异性化学成分.同时以化学模式识别分析中变量重要性投影(variable importance projection,VIP)值为权重,建立加权TOPSIS模型,对不同批次RZC进行质量差异性评价.结果 RZC中 13 个成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999),平均加样回收率为 96.97%～100.12%,相对校正因子耐用性良好,外标法实测值与QAMS法计算值无明显差异.化学模式识别显示15 批样品聚为3 类,氧化苦参碱、二苯乙烯苷、桑皮苷A、苦参碱、氧化槐果碱、虎杖苷和毛蕊花糖苷是RZC质量差异性化学成分.加权TOPSIS模型显示 15批RZC欧氏贴近度0.122 0～0.728 0,提示产品质量存在一定的批间差异,质量优劣排序与化学模式识别聚类结果基本一致.结论 建立的QAMS与化学模式识别及加权TOPSIS模型相结合方法,可用于RZC质量差异性评价,为提升RZC质控标准和确保临床疗效一致性提供参考依据.

目的:研究苗药玫芦消痤膏治疗湿疹的作用机制,探索玫芦消痤膏治疗湿疹的作用靶标及信号途径.方法:在中药系统药理学数据库和分析平台,以及多个数据库中,联合检索筛选玫芦消痤膏活性成分-作用靶点,基因名注释使用UniProt数据库,并在OMIM数据库、GeneCards数据库、DrugBank数据库中检索湿疹的相关疾病靶标,再采用Rversion 3.6.2软件及Cytoscape 3.7.1软件构建玫芦消痤膏治疗湿疹的成分-作用靶点-通路网络,最后利用R语言中Bioc Manager包进行基因本体功能注释及KEGG通路富集分析.结果:经筛选得到玫芦消痤膏活性成分35个,槐定碱、槲皮素、苦参碱、木犀草素、鞣花酸、花生四烯酸、芦荟大黄素等是关键活性成分;作用靶标基因97个,核心蛋白有丝裂原活化蛋白激酶3前列腺素内过氧化物合酶,丝裂原活化蛋白激酶1、内皮一氧化氮合成酶、激素受体1、雄激素受体、脑源性神经营养因子、转录因子、过氧化物酶体增生激活受体等,参与调控高级糖基化终末产物-受体、肿瘤坏死因子、白细胞介素17、丝裂原活化蛋白激酶、PI3K-Akt等信号通路,从而发挥抗炎等作用.结论:玫芦消痤膏能有效缓解湿疹症状,可能与肿瘤坏死因子、PI3K-Akt等经典炎症通路有关,为后续分析玫芦消痤膏的药理机制和实验验证提供了理论支撑.

目的 探讨槐定碱通过调节高迁移率族蛋白l(HMGB1)-晚期糖基化终产物受体(RAGE)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响.方法 将体外培养的A549和HAECⅡ细胞随机分为5组:对照组、LPS组、LPS+槐定碱组、LPS+空载组、LPS+槐定碱+HMGB1过表达组,除对照组外其余各组细胞以LPS诱导建立损伤模型,同时以槐定碱和质粒分组处理.以细胞计数试剂盒-8法、原位末端标记法检测各组细胞活力与凋亡率;以蛋白质印迹法检测各组细胞HMGB1和RAGE蛋白表达.结果 对照组、LPS组、LPS+槐定碱组、LPS+空载组和LPS+槐定碱+HMGB1过表达组的A549细胞活力分别为(100.00±0.00)％、(56.73±8.31)％、(90.02±11.24)％、(53.26±9.15)％和(60.84±8.13)％,HAEC Ⅱ 细胞活力分别为(100.00±0.00)％、(50.86±7.56)％、(93.05±12.38)％、(54.10±8.42)％和(54.43±6.14)％,A549 细胞凋亡率分别为(2.11±0.65)％、(42.46±5.20)％、(4.01±1.31)％、(44.74±4.93)％和(39.75±4.86)％,HAEC Ⅱ 细胞 凋亡率 分别为(2.30±0.72)％、(48.14±4.87)％、(3.83±1.23)％、(45.72±5.14)％和(44.81±5.25)％,A549 细胞中 HMGB1 蛋白水平分别为 0.16±0.02、0.87±0.13、0.19±0.04、0.89±0.11 和 0.84±0.12,RAGE 蛋白水平分别为0.19±0.03、0.94±0.16、0.21±0.04、0.96±0.15 和 0.90±0.17,HAEC Ⅱ 细胞中 HMGB1 蛋白水平分别为 0.13±0.04、0.79±0.10、0.15±0.04、0.80±0.14和 0.75±0.12,RAGE 蛋白水平分别为 0.28±0.07、1.08±0.19、0.31±0.06、1.10±0.21和1.04±0.15.上述指标:LPS组与对照组比较,LPS+槐定碱组与LPS组比较,LPS+槐定碱+HMGB1过表达组与LPS+槐定碱组比较,在统计上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 槐定碱可通过降低HMGB1-RAGE信号活性而清除活性氧,减少炎症因子产生,增强抗氧化酶活性,进而抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞炎症与氧化应激,最终减轻其细胞损伤.

肺癌是最常见的恶性肿瘤,其发病机制复杂、恶性程度高,严重威胁了患者的生命健康.p53信号通路是影响肺癌进程的重要通路,被众多研究者视为肺癌靶向治疗的潜在靶点之一.近年来,已有较多研究深入探讨了中药调控p53信号通路干预肺癌的可行性.基于此,本文系统总结了中药调控p53信号通路干预肺癌的作用机制研究进展,发现清金得生片、调气消积汤、补肺通络解毒方、健脾补肾方及益气扶正解毒方等中药复方及制剂可通过激活p53信号通路,促进肺癌细胞自噬及凋亡,抑制肺癌细胞生长及转移,增强机体免疫功能,发挥抑癌作用;拟人参皂苷Rh2、柴胡皂苷D、重楼皂苷Ⅶ、石斛碱、槐定碱、藤黄酸、雷公藤甲素及雷公藤甲素丁二酸单酯YJ-4等中药单体可通过激活p53信号通路,促进肺癌细胞凋亡,抑制肺癌细胞增殖,调控肺癌细胞周期,发挥抑癌作用.