目的 建立人尿中1,1,2,2-四氯乙烷的自动顶空-气相色谱检测方法.方法 准确移取5.00 mL待检尿样于20 mL顶空瓶中,加入2.0 g无水亚硫酸钠后立刻密封顶空瓶盖,置于自动顶空仪中80℃加热平衡50 min.在加热条件下,同时加入无水亚硫酸钠使得尿中1,1,2,2-四氯乙烷发生完全消去反应生成三氯乙烯,顶空瓶上方三氯乙烯蒸气经DB-624毛细管色谱柱分离,火焰离子化检测器检测,以三氯乙烯的峰面积对1,1,2,2-四氯乙烷的质量浓度绘制标准曲线进行定量.结果 实验结果表明,尿中1,1,2,2-四氯乙烷在质量浓度为0.008 3～32.000 mg/L范围内线性关系良好,相关系数＞0.999 4,方法检出限为2.5 μg/L,定量下限为8.3 μg/L.批内相对标准偏差为4.79％～5.28％,批间相对标准偏差为4.61％～6.44％.加标回收率为87.53％～101.17％.结论 自动顶空-气相色谱法测定尿中1,1,2,2-四氯乙烷灵敏度高、线性关系好、干扰少、精密度好、样品前处理简单,可用于人尿中1,1,2,2-四氯乙烷质量浓度的测定.

目的:建立定性和定量用阿戈美拉汀的首批国家对照品.方法:应用IR光谱、气质联用及NMR技术对阿戈美拉汀进行结构确证.采用HPLC法测定纯度并且对均匀性、稳定性进行研究,并测定干燥失重、炽灼残渣、热重分析等,通过质量平衡法计算阿戈美拉汀含量.结果:确证阿戈美拉汀的结构,确定首批阿戈美拉汀对照品含量为 99.9%,与核磁定量法测定的结果、高氯酸非水滴定结果、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)结果基本一致.结论:首批阿戈美拉汀国家对照品的研制可作为阿戈美拉汀原料及其相关制剂的鉴别和含量测定用对照品.

目的 制备一种律草黄酮外用凝胶,探讨其对湿疹的治疗作用.方法 采用溶剂提取法提取葎草中的黄酮,以卡波姆940作为凝胶基质,葎草黄酮水溶液作为分散介质,甘油作为保湿剂和增稠剂,制备葎草黄酮凝胶,对凝胶的酸碱度以及体外释放率进行质量评价.采用2,4-二硝基氯苯在小鼠背后建立特异性湿疹模型,造模成功后,连续10 d小鼠背部涂抹律草黄酮凝胶.观察记录湿疹小鼠30 min内瘙痒次数和瘙痒持续时间,免疫组织化学方法检测湿疹小鼠背部皮损处PAR-2的表达,酶联免疫吸附法测定血浆白细胞介素(IL)-2和IL4的含量以及皮损组织中白三烯B4(LTB4)和白三烯C4(LTC4)的含量.结果 葎草黄酮最优提取条件为液料比20∶1,提取温度70 ℃,提取时间90 min,提取剂浓度60％乙醇,葎草黄酮得率为1.780 3％;葎草黄酮凝胶最优制备条件为卡波姆940含量为4.72％,甘油含量为15.75％,粗黄酮含量为0.79％.制备的葎草黄酮凝胶外观呈棕黄色,均匀细腻,pH范围在6～7之间,葎草黄酮凝胶中黄酮含量为3.20 mg/g,葎草黄酮凝胶48 h的体外释放率为68％.葎草黄酮凝胶显著降低了湿疹小鼠30 min内瘙痒次数与瘙痒持续时间(P＜0.01),抑制湿疹小鼠皮损中PAR-2的表达(P＜0.01),上调湿疹小鼠血浆中IL-2的表达(P＜0.01),下调血浆中IL4的表达(P＜0.01),减少皮损组织中LTB4和LTC4的表达水平(P＜0.01).结论 成功制备葎草黄酮凝胶.葎草黄酮凝胶可以通过调节机体Th1/Th2平衡、抗炎和止痒对湿疹小鼠发挥治疗作用.

目的 分析系统性红斑狼疮合并骨坏死的相关影响因素,以减少对患者生活质量的影响.方法 选取2013年1月-2022年12月山西白求恩医院风湿免疫科住院的系统性红斑狼疮(SLE)合并骨坏死(ON)者65例为骨坏死组,按年龄、性别1:1随机匹配65例未合并ON者为非骨坏死组.比较2组临床症状、实验室检查及治疗情况,采用logistic回归分析研究SLE合并ON的危险因素.结果 骨坏死组中双侧ON 53例(81.5％);骨表现为疼痛29例(44.6％),复合多症状18例(27.6％).单因素分析显示,2组SLE病程、激素累积时间、停经史、神经系统受累、肌痛肌无力差异均有统计学意义,实验室指标中白细胞计数、总T细胞及Ts细胞百分比、NKT细胞百分比及绝对值、标准化dRVVT比值、活化部分凝血活酶时间,用药情况中阿司匹林、他汀类、二磷酸盐、羟氯喹史和免疫抑制剂史差异均有统计学意义(P＜0.05).多因素logistic回归分析显示,总T细胞百分比、标准化dRVVT比值是SLE合并ON的影响因素.结论 SLE治疗时应合理使用免疫抑制剂,注意平衡药物间相互作用,同时需特别关注神经系统受累及肌痛肌无力患者.淋巴细胞亚群中的Ts细胞在ON中起到重要的调节作用.标准化dRVVT比值高者发生ON的风险更高,或可预测ON的发生,在临床诊断和治疗中应提高警惕.

目的 评价右美托咪定复合艾司氯胺酮在顽固性失眠伴抑郁症中的临床疗效.方法 选择顽固性失眠伴抑郁症患者68例,男26例,女42例,年龄18～64岁,BMI 18～28 kg/m2,ASA Ⅰ或Ⅱ级.将患者随机分为两组:右美托咪定复合艾司氯胺酮组(DE组)和右美托咪定复合生理盐水组(DS组),每组34例.两组分别用麻醉诱导睡眠平衡术治疗3个疗程,分别给予微泵注射右美托咪定1 μg/kg持续10 min以诱导睡眠,继以右美托咪定0.2～1.5 μg·kg-1·h-1维持睡眠.DE组同时泵注艾司氯胺酮0.5 mg/kg,DS组同时泵注生理盐水.分别在首次治疗前(T0)、第1疗程治疗后(T1)、第2疗程治疗后(T2)和第3疗程治疗后(T3)采取匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)和失眠严重程度指数(ISI)评估睡眠状况,采取汉密尔顿抑郁量表(HAMD)和视觉模拟抑郁量表(VAS-D)评估抑郁状况,分析汉密尔顿焦虑量表(HAMA)和血清皮质醇浓度的变化.记录与T0比较,T3时的临床疗效评价和治疗期间呼吸抑制、恶心、呕吐、胸闷、心动过缓、低血压、焦虑、解离症状、木僵状态和噩梦等不良反应发生情况.结果 与DS组比较,DE组T2、T3时PSQI和ISI评分均明显降低(P＜0.05),T1、T2、T3时HAMD和VAS-D评分明显降低(P＜0.05),T3时HAMA评分和血清皮质醇浓度明显降低(P＜0.05),T3时总有效率明显升高(P＜0.05).两组不良反应发生率差异无统计学意义.结论 右美托咪定复合艾司氯胺酮可明显改善顽固性失眠伴抑郁症患者的睡眠质量及抑郁焦虑症状,且无明显不良反应.

目的 建立顶空-气相色谱法测定中药到手香提取物中苯、丙烯腈、甲基丙烯酸甲酯、甲苯、1,2-二氯乙烷、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、氯苯、苯乙烯和二乙烯苯11种溶剂残留的分析方法.方法 供试品经顶空进样器85℃平衡45 min,分流比10∶1(V∶V),采用DB-WAX聚乙二醇为固定相的弹性石英毛细管柱(长 30 m,内径 0.32 mm,膜厚 0.5 μm),FID氢火焰离子化检测器进行分析.结果 11种挥发性有机物分离效果较好,在0.22～23.86 μg·mL-1 的浓度范围内线性关系良好(r≥0.99);方法 定量限为0.008 4 μg·mL-1≤LOQ≤0.543 2 μg·mL-1;低、中、高水平下各成分的平均回收率为84%～103%之间;相对标准偏差≤10%(n=6),经方法学验证后该方法符合实验要求.3批样品中甲苯、间二甲苯、邻二甲苯及二乙烯基苯有检出,低于定量限,均未超标.结论 该方法易于操作,结果可靠,可用于中药到手香提取物中的残留溶剂检测,亦为其他中药提取物中残留溶剂分析提供方法参考,确保用药安全.

目的 基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键因子探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制.方法 将40只雄性SD大鼠按照体质量随机区组分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍总苷组,每组10只.除空白组外,其余各组大鼠连续6周腹腔注射20％四氯化碳橄榄油溶液,并灌胃甲状腺片(30 mg/kg)以制备化学性肝损伤肝阴虚证病证结合大鼠模型.造模期间,空白组、模型组大鼠每天灌胃蒸馏水,一贯煎组及白芍总苷组大鼠分别灌胃一贯煎水煎液(635 mg/kg)及白芍总苷混悬液(50 mg/kg),连续6周.给药期间每2周检测大鼠体质量、肛温;给药结束后观察大鼠24 h摄食量和摄水量、舌面湿度;采用酶联免疫吸附测定法检测血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)含量,并计算cAMP/cGMP;采用比色法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)含量;采用Masson染色法观察肝脏纤维化程度,并计算胶原面积百分比;采用实时荧光PCR法和蛋白质印迹法检测大鼠肝脏PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠第2、4、6周体质量降低,第2、4、6周肛温升高,24 h摄食量增加;cAMP升高、cGMP下降、cAMP/cGMP升高,IL-1、IL-6、TNF-α含量均升高,IL-10、IL-1Ra含量均降低,ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL、TBA水平均升高,肝脏胶原面积百分比增加,PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白磷酸化表达升高(均P<0.05).与模型组比较,白芍总苷组大鼠第2、4、6周肛温下降,24 h摄食量和饮水量减少,舌面湿度升高;一贯煎组和白芍总苷组大鼠cAMP降低、cGMP升高、cAMP/cGMP下降,IL-1、IL-6、TNF-α均下降,IL-10升高,肝脏胶原面积百分比降低;白芍总苷组大鼠ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL均下降,PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白磷酸化表达降低(均P<0.05).结论 白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠具有较好的保护作用,可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路的激活,减少促炎细胞因子分泌,增加抗炎细胞因子释放,从而发挥白芍调节阴阳平衡的作用.

目的 探讨六君子汤加味灌肠法对肥胖大鼠肠道菌群的影响.方法 将40只雄性SD大鼠按体质量随机分为4组,分别为正常组、模型组、菌液灌肠组、六君子汤加味灌肠组,每组10只.除正常组外,其他组采用高脂饲料喂养复制肥胖大鼠模型,造模成功后,给予菌液灌肠组粪菌液2 mL灌肠,六君子汤加味灌肠组给予六君子汤加味药液2 mL灌肠,正常组与模型组给予0.9％氯化钠溶液2 mL灌肠.灌肠操作1周3次,隔天1次,连续3周.实验结束后,称重检测大鼠体质量,生物化学法检测大鼠血清中甘油三酯含量,并收集各组大鼠粪便进行16SrRNA高通量测序.结果 与正常组比较,模型组大鼠体质量显著升高(P＜0.01);与模型组比较,菌液灌肠组与六君子汤加味灌肠组体质量均有明显下降(P＜0.01).与正常组相比,模型组和六君子汤加味灌肠组大鼠血清甘油三酯水平升高(P＜0.01);与模型组比较,菌液灌肠组大鼠血清甘油三酯水平下降(P＜0.05);六君子汤加味灌肠组较菌液灌肠组大鼠血清甘油三酯水平升高(P＜0.05).高脂饮食诱导的肥胖大鼠存在肠道菌群失调,其肠道菌群物种丰富度与多样性均出现上升.六君子汤加味灌肠可上调肥胖大鼠的迷踪菌门、迷踪菌纲、氨基酸球菌科、产碱杆菌科、红螺菌科、肠杆菌科、迷踪菌科、琥珀酸弧菌科、未分类的脱硫弧菌科、蛭弧菌科、毛螺菌科、脱硫弧菌属、粪芽胞菌属、变形杆菌属、考拉杆菌属、寡源杆菌属、未分类的红螺菌属、镰刀菌属、丁酸球菌属的丰度;下调肥胖大鼠的8变形菌纲、巴斯德氏菌科、消化链球菌科、螺杆菌科、未分类的根瘤菌科、梭菌科1、链球菌科、罗姆布茨菌属、幽门螺杆菌属、狭义梭菌属、罗氏菌属、链球菌属、苏黎世杆菌属、韦荣氏球菌属的丰度.结论 菌液灌肠与六君子汤加味灌肠均能在一定程度上减缓高脂饮食诱导的肥胖大鼠体质量增加.肥胖大鼠出现肠道菌群失调,六君子汤加味灌肠可帮助肥胖大鼠重构体内肠道菌群组成,上调有益菌,下调致病菌丰度以达到新的平衡从而减缓肥胖发展进程.提示六君子汤加味灌肠可以调节肥胖大鼠肠道菌群紊乱.

目的:建立采用1H定量核磁共振(qNMR)波谱法测定那红地那非对照品的含量.方法:在1 H qNMR中,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代氯仿为溶剂,采用noesyigld1 d脉冲序列,弛豫延迟时间为30 s,扫描次数32次.结果:以那红地那非δ8.15和δ9.14的氢质子响应信号作为样品定量信号,以1,3,5-三甲氧基苯δ6.09的氢质子响应信号作为内标物定量信号.样品δ8.15与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为y=0.1197 x+0.0034,相关系数为0.9991,重现性实验的RSD为1.66％(n=5),重复性实验的RSD为0.76％,测得那红地那非的含量为97.48％;样品 δ9.14与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为:y=0.1168 x+0.0045,相关系数为0.9991,重现性实验的RSD为1.69％,重复性实验的RSD为0.43％,测得那红地那非的含量为95.35％.1 H qNMR法测得那红地那非的含量(两组响应信号测得的含量平均值)为96.42％,与质量平衡法结果(96.54％)以及HPLC外标一点法结果(97.07％)一致.结论:本研究建立的核磁定量方法可用于那红地那非的含量测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力的佐证.

目的 基于骨保护素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)信号通路探讨黄精多糖(PSP)对糖尿病大鼠骨质疏松骨代谢的影响及作用机制.方法 选取 50 只 2 月龄雄性 Wistar大鼠并随机分为对照组、糖尿病骨质疏松(DOP)模型组,高、中、低PSP(H-PSP、M-PSP、L-PSP)组各10 只,DOP模型组和PSP组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后饲喂20w建立DOP模型,造模成功后对照组和DOP模型组灌胃0.9%氯化钠溶液,剂量为10 ml/(kg·d),H-PSP、M-PSP、L-PSP组灌胃PSP溶液,剂量分别为700、400、200 mg/(kg·d),每周检测大鼠体质量.给药8w后,双能X线骨密度仪检测大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验测定大鼠血清中骨钙素(OC)及尿液中脱氧嘧啶啉(DPD)含量,全自动生化仪检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)、钙(Ca)、磷(P)及尿钙磷和肌酐(Cre)含量.Western印迹检测股骨OPG、RANKL蛋白表达.结果 与对照组比较,造模成功后DOP及PSP组体质量显著增加(P<0.05);给药4w后,H-PSP、M-PSP组体质量均较模型组明显降低(P<0.05).给药8w后,DOP组股骨BMD较对照组显著降低(P<0.05);H-PSP、M-PSP组BMD均较DOP模型组明显升高(P<0.05).与对照组比较,DOP模型组血清ALP、OC、TRAP、Ca、P及尿Ca、P、DPD/Cre含量显著增加(P<0.05);PSP各剂量组血清ALP、OC、TRAP、Ca、P及尿Ca、P、DPD/Cre均较DOP模型组均有不同程度降低,H-PSP组差异显著(P<0.05).PSP组股骨组织中RANKL蛋白表达水平较DOP模型组明显降低(P<0.05);各组股骨组织OPG蛋白表达水平均明显升高,H-PSP、M-PSP组与DOP干预组差异有统计学意义(P<0.05).结论 PSP可调节DOP大鼠骨代谢平衡,提高股骨骨密度,对骨质疏松具有改善作用,其作用机制可能与PSP提高OPG蛋白表达和降低RANKL蛋白表达有关.