目的 探究益母草碱调节IRE1α/TXNIP/NLRP3信号通路对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠炎症反应的影响.方法 将大鼠随机分为空白组、模型组、益母草碱低剂量组、益母草碱高剂量组、联用HY-N2485组(高剂量益母草碱+NLRP3激活剂).检测大鼠肺功能;血气分析仪检测氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2);ELISA法检测肺泡灌洗液白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;检测肺组织干湿比;检测肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;HE染色观察大鼠肺组织病理形态;Western blotting检测肺组织中IRE1α、TXNIP、NL-RP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-3蛋白表达.结果 与空白组相比,模型组肺组织形态有明显损伤,PEF、FVC和FEV0.3/FVC水平、PaO2、OI水平、肺泡灌洗液IL-10水平、肺组织CAT和SOD活性降低,PaCO2水平、肺泡灌洗液 IL-1 β、IL-6、TNF-α 水平、肺组织病理评分、肺组织 MDA 含量、IRE 1 α、TXNIP、NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高(P＜0.05);与模型组相比,益母草碱低、高剂量组大鼠肺组织损伤明显减轻,PEF、FVC和FEV0.3/FVC水平、PaO2、OI水平、肺泡灌洗液IL-10水平、肺组织CAT和SOD活性升高,Pa-CO2水平、肺泡灌洗液IL-1β、IL-6、TNF-α水平、肺组织病理学评分、肺组织MDA含量、IRE1α、TXNIP、NL-RP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平降低(P＜0.05);HY-N2485可减弱益母草碱对ARDS大鼠的改善作用(P＜0.05).结论 益母草碱可降低ARDS大鼠炎症和氧化应激,减轻肺组织损伤,改善肺功能,可能与抑制IRE1α/TXNIP/NLRP3信号通路有关.

目的 探讨二十碳五烯酸(EPA)通过调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对肥胖大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的改善作用.方法 将50只雄性Wistar大鼠随机分组为对照组、模型组、抑制剂组、EPA组、抑制剂+EPA组,每组10只,共干预6周.造模后抑制剂组灌胃1 mg/kg p38 MAPK抑制剂SB203580,EPA组灌胃70 mg/kg EPA,抑制剂+EPA组灌胃SB203580+EPA,模型组和对照组灌胃等体积生理盐水.测定大鼠空腹血糖、空腹血清胰岛素水平、骨骼肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,采用腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐受实验(ITT)评价大鼠胰岛素抵抗程度,采用Western blot法和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定大鼠骨骼肌组织中磷酸化p38(p-p38)蛋白及p38 mRNA表达情况.结果 与对照组相比,模型组大鼠体重、附睾脂肪湿重、空腹血糖、空腹胰岛素水平、IPGTT血糖水平、ITT血糖水平、MDA水平明显升高,GSH-Px和SOD活性明显降低,骨骼肌组织中p-p38蛋白表达和p38 mRNA表达明显升高(P＜0.05).与模型组相比,EPA组和抑制剂+EPA组大鼠的体重和附睾脂肪湿重明显降低,抑制剂组和EPA组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平、IPGTT血糖水平、ITT血糖水平、MDA水平明显降低,GSH-Px和SOD活性明显升高,骨骼肌组织中p-p38蛋白表达明显降低(P＜0.05),但骨骼肌组织中p38 mRNA表达无明显改变(P＞0.05).结论 EPA可能是通过抑制p38 MAPK信号通路减轻氧化应激反应,从而改善肥胖大鼠骨骼肌胰岛素抵抗.

藓结皮是荒漠生物土壤结皮的重要类型,在荒漠生态系统碳固定与碳排放过程中具有重要作用.研究长期氮添加对藓结皮光合生理活性和土壤有机碳(SOC)组分的影响,有助于理解藓结皮光合生理活性特征与荒漠生态系统土壤碳固存之间的关系及其调控因子.为此,研究依托古尔班通古特沙漠野外长期(13a)氮添加实验,以齿肋赤藓形成的藓结皮为研究对象,选取0(N0)、1.0(N1)、3.0 g N m-2 a-1(N3)三种氮处理,阐明长期氮添加对藓结皮光合生理活性和SOC组分的影响.结果表明:(1)相比对照,长期氮添加对结皮层颗粒有机碳(POC)与矿物结合态有机碳(MAOC)含量无显著影响,但显著减少了 0-5 cm 土层POC和MAOC含量的积累;(2)N1处理显著提高了叶绿素和非结构性碳水化合物(NSC)含量,而N3处理叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素及NSC的含量分别显著降低了 50.94％、42.49％、46.71％和50.85％;(3)可溶性糖的含量在N1处理下显著增加,N3处理则显著抑制了其积累,脯氨酸的含量随氮浓度呈显著下降的趋势,长期氮添加对可溶性蛋白含量无显著影响;(4)相关性分析表明,长期氮添加、光合生理活性与POC和MAOC含量无显著相关性,酸碱度、微生物量碳氮、电导率、硝态氮和铵态氮皆显著影响POC和MAOC的含量积累.研究揭示了长期氮添加对藓结皮的光合生理活性和SOC组分的影响,且光合生理活性的响应无法有效反映SOC组分变化,为理解荒漠生态系统中氮沉降对生物土壤结皮的影响提供数据支持.

目的:构建EGFR-MEK-TZ三联合靶向分子LN-1，探讨其对去势抵抗性前列腺癌细胞的作用。方法:设计LN-1的分子结构，并据此展开药物分子合成步骤的研究。以去势抵抗性前列腺癌细胞株LNCap和PC3作为研究对象，分别分为实验组和对照组，前者为LN-1处理组（50 mmol）。利用细胞技术试剂盒CCK-8法、克隆形成实验和EdU荧光染色法检测LN-1对LNCap和PC3细胞增殖活性的影响，采用RT-qPCR法检测各组去势抵抗性前列腺癌细胞中凋亡相关基因的表达水平。结果:设计的LN-1分子由EGFR片段、MEK片段和TZ烷基化片段三个活性片段通过二乙醇胺片段相互连接构成，并且EGFR片段、MEK片段通过碳酸酯酰胺键进行偶联。以MEK片段作为起始原料，获得43.3%产率的目标产物LN-1。LN-1可有效抑制LNCap和PC3肿瘤细胞的增殖活性（P<0.05）。此外，Caspase-3、p53和Bax mRNA水平在实验组明显较对照组升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论:EGFR-MEK-TZ三联合靶向分子LN-1的成功构建提示该分子结构设计的合理性和可行性，其可通过抑制去势抵抗性前列腺癌细胞LNCap和PC3的增殖，并诱导其凋亡，从而发挥抗肿瘤作用。

醌式查尔酮属于黄酮类化合物,广泛存在于红花中,少数被发现于其他植物.在过去的几十年里,共发现了47 个醌式查尔酮类化合物,研究表明其具有广泛的药理活性,如抗炎、抗凝血、抗氧化、抗肿瘤等活性.近年来,与其相关的药物研究与开发利用也引起了极大关注,尤其是以羟基红花黄色素A为代表的醌式查尔酮碳苷类化合物,目前已被开发成红花注射剂等药物用于临床治疗.但由于存在口服生物利用度低以及不良反应等问题,在实际应用过程中仍受到限制.该文旨在总结醌式查尔酮类化合物的化学成分与药理活性研究进展,重点介绍其相关现代药理活性研究,指出醌式查尔酮类化合物现代应用的局限性,以期为醌式查尔酮的进一步开发利用提供参考.

黑水虻Hermetia illucens L.是世界范围内重要资源昆虫,过量锌离子(Zn2+)胁迫会对其幼虫的生长发育产生影响,而转录组分析有助于揭示Zn2+胁迫影响黑水虻幼虫发育的分子机制.本试验以不同浓度Zn2+(75、150、300、1 200 mg/kg)对黑水虻幼虫进行连续5代胁迫,利用Illumina HiSeq 4 000高通量测序平台对第5代6龄幼虫转录组进行测序及分析.结果显示,Zn2+胁迫影响了第5代黑水虻幼虫的基因表达水平,75、150、300和 1 200 mg/kg Zn2+处理幼虫中上调/下调的差异表达基因分别是1 293/1 839、1 277/2 306、1 080/1 966和1 444/2 170个;GO富集分析结果表明,差异表达基因在细胞过程中所占比例最大,细胞组分中主要是细胞和细胞成分,分子功能中主要为催化活性和细胞结合;KEGG富集差异分析显示,75 mg/kg Zn2+胁迫下差异表达基因主要富集在免疫相关反应、免疫相关信号传导途径及脂类物质代谢,300 mg/kg Zn2+处理组差异表达基因主要富集在氨基酸代谢和碳水化合物代谢;1 200 mg/kg Zn2+胁迫下氨基酸和脂类代谢、免疫相关反应和生长均受到严重影响,这些富集的与上述有关的差异基因大多表达下调.本研究表明,Zn2+胁迫影响了黑水虻幼虫基因表达,高浓度Zn2+胁迫基因表达影响尤为显著,主要表现在细胞过程、催化活性和结合的基因表达下调;高浓度Zn2+胁迫还导致了黑水虻幼虫免疫系统、环境相关信号传导途径和脂质代谢等的紊乱.

目的:建立工作场所空气中甲基丙烯酸异丁酯的气相色谱测定方法。方法:于2019年7至10月，对工作场所空气中的甲基丙烯酸异丁酯采用活性炭管采集，以二硫化碳解吸后毛细管柱气相色谱法测定。结果:该方法测定甲基丙烯酸异丁酯在0~800 μg/ml浓度范围呈线性关系， r=0.999 93；检出限为0.35 μg/ml，最低检出浓度为0.12 mg/m 3；批内精密度为2.06%~2.72%，批间精密度为3.03%~3.83%；平均解吸效率为96.7%；穿透容量大于14.46 mg，采样效率达100%；样品在室温下至少可保存7 d。 结论:甲基丙烯酸异丁酯的气相色谱测定方法操作简便，灵敏度高，精密度好，能准确测定空气中的甲基丙烯酸异丁酯。

目的:探讨低侵入性肺表面活性物质治疗（less invasive surfactant administration, LISA）技术联合经鼻间歇正压通气（nasal intermittent positive pressure ventilation, NIPPV）治疗早产儿呼吸窘迫综合征（respiratory distress syndrome, RDS）的临床疗效及安全性。方法:选择2019年10月至2021年11月徐州市中心医院新生儿监护病房收治的胎龄≤34周的RDS早产儿进行前瞻性研究，随机（随机数字法）分为LISA+NIPPV组和气管插管-使用肺表面活性物质-拔管（intubation-surfactant-extubation，INSURE）+经鼻持续气道正压通气（nasal continuous positive airway pressure, NCPAP）组。LISA+NIPPV组在NIPPV支持下，经喉镜气管内置入LISA管，注入肺表面活性物质（pulmonary surfactant, PS）。INSURE+NCPAP组暂停NCPAP支持，采取INSURE技术给予PS后继续给予NCPAP治疗。比较两组注入PS后1 h、6 h的血气分析、操作过程中的不良反应、临床疗效和支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia, BPD）等并发症。结果:共纳入RDS早产儿112例，LISA+NIPPV组58例，INSURE+NCPAP组54例。①LISA+NIPPV组注入PS后1 h、6 h的血氧分压（PaO 2）及PaO 2/吸入氧气分数（FiO 2）（P/F）显著高于INSURE+NCPAP组相应时间点，二氧化碳分压（PaCO 2）则显著低于INSURE+NCPAP组，差异均有统计学意义（ P<0.05）。②与INSURE+NCPAP组相比，LISA+NIPPV组72 h内气管插管机械通气率（15.5% vs. 33.3%）、无创呼吸支持时间[（7.5 ± 4.3） d vs. （9.9 ± 5.5）d]、总用氧时间[（10.5 ± 3.5）d vs. （13.3 ± 4.1）d]、撤机失败率（8.6% vs. 31.0%）、呼吸暂停次数[7.0次（3.0~21.0）次 vs.15.0次（4.0~28.0）次]及2次使用PS率（17.2% vs. 33.3%）均降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。③LISA+NIPPV组PS反流发生率低于INSURE+NCPAP组（13.8% vs. 35.2%），差异有统计学意义（ P<0.05），两组置管所用时间差异无统计学意义（ P>0.05）。④LISA+NIPPV组患儿BPD发生率低于INSURE+NCPAP组（10.3% vs. 25.9%），差异有统计学意义（ P<0.05）；其他并发症比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:LISA技术联合NIPPV治疗早产儿RDS，能有效改善氧合，减少二氧化碳潴留，降低气管插管机械通气率、缩短无创呼吸支持时间，减少BPD的发生。

目的:探讨耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii，CRAB)血流感染患者的临床特征、治疗策略和死亡危险因素，为临床CRAB血流感染的治疗选择、预后评估提供依据。 方法:纳入2012年1月至2017年12月于四川大学华西医院诊断为CRAB血流感染的224例患者，根据患者自取标本日后28 d的临床转归，分成存活组和死亡组，分析其临床特征及治疗方案。计量资料比较采用 t检验或Mann-Whitney U检验，计数资料比较采用 χ2检验，并应用logistic回归分析CRAB血流感染患者死亡的危险因素。 结果:224例CRAB血流感染患者中，死亡121例(54.02%)，主要分布于重症监护病房和血液科，基础疾病以急性重症胰腺炎和严重心脑血管事件多见。死亡组白细胞介素-6水平[中位数(四分位数间距)]为480.40 ng/L(1 432.95 ng/L)，高于存活组的107.05 ng/L(263.08 ng/L)，差异有统计学意义( Z＝4.526， P<0.01)；死亡组和存活组的降钙素原水平[中位数(四分位数间距)]分别为3.81 μg/L (17.26 μg/L)和2.12 μg/L(12.74 μg/L)，差异无统计学意义( P>0.05)。经验性使用无抗不动杆菌活性抗菌药物治疗组(单药或联合)、使用抗不动杆菌活性抗菌药物单药治疗组，以及使用至少含一种抗不动杆菌活性抗菌药物的联合治疗组的病死率分别为57.14%(64/112)、45.68%(37/81)和64.52%(20/31)，差异无统计学意义( P＝0.130)。肾功能损伤[比值比(odds ratio， OR)＝2.181， P＝0.024]、合并多器官功能障碍综合征( OR＝20.376， P<0.01)是CRAB血流感染患者死亡的危险因素。 结论:CRAB血流感染患者病死率高，合并肾功能损伤和多器官功能障碍综合征患者的预后更差，除早期有效抗感染外，还需实施个体化综合治疗以提高疗效。

目的:确定环腺苷酸(cAMP)受体蛋白(CRP)对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)肠杆菌素铁载体相关基因 entC的调控机制。 方法:以CRKP-27野生株构建 crp基因缺失株Δ crp和回补株c-Δ crp。利用铬天青S(CAS)定量试验观察CRP对CRKP铁载体分泌量的影响。RT-qPCR试验和 lacZ报告基因融合试验研究CRP对 entC表达及对其启动子的调控。凝胶阻滞试验(EMSA)确定CRP是否与 entC启动子区结合，DNaseⅠ足迹试验进一步确定结合序列。 结果:成功构建Δ crp和c-Δ crp菌株；在正常条件和缺铁条件下，Δ crp菌株的铁载体分泌量均高于野生株和c-Δ crp菌株，但仅在正常环境中有统计学意义( P<0.05)；正常条件和缺铁条件下，Δ crp菌株中 entC基因的mRNA相对表达量较野生株和c-Δ crp菌株明显降低( P均<0.05)；正常条件和缺铁条件下，Δ crp菌株中 entC基因的启动子活性低于野生株和c-Δ crp菌株( P均<0.05)；EMSA结合试验显示随着CRP蛋白量的增加， entC探针朝正极移动的距离都相应缩短，出现阻滞现象；DNaseⅠ足迹试验进一步检测到 entC启动子区与CRP特异性结合位点为：5′-AAGGTGATAAATGCGTCTCATTTTCAA-3′。 结论:CRKP中CRP能特异地结合到 entC启动子区并直接促进其转录表达。