目的:探讨腺苷A2a受体激动剂(CGS21680)对体外循环(CPB)大鼠心肌功能的影响及其作用机制。方法:60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、骨折组和观察组。骨折组和观察组建立标准大鼠胫骨骨折模型，观察组大鼠灌胃给予淫羊藿总黄酮250 mg/kg，骨折组和对照组灌胃等体积生理盐水。治疗24 d后，采用X线片观察3组大鼠胫骨骨折愈合情况；采用Perkins法计算骨痂体积；采用分析天平称量全长胫骨湿重；采用骨密度仪测定3组大鼠骨密度值；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术分析3组大鼠骨痂组织中骨形成蛋白2(BMP-2)和血管生长因子(VEGF)的表达水平；采用蛋白质免疫印迹分析3组大鼠Runt相关转录因子2(RUNX2)和碱性磷酸酶(ALP)蛋白表达水平。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:观察组大鼠影像学评分[(6.22±0.76)分]明显高于骨折组[(4.16±0.59)分]，差异有统计学意义( t＝3.715， P<0.05)。观察组大鼠骨痂体积[(18.94±3.81) mm 3]明显高于骨折组大鼠骨痂体积[(5.99±1.21) mm 3]，差异有统计学意义( t＝6.192， P<0.05)。观察组大鼠胫骨湿重[(0.66±0.05) g]明显高于骨折组[(0.43±0.07) g]，差异有统计学意义( t＝3.612， P<0.05)。观察组大鼠胫骨骨密度[(0.18±0.03) mg/cm 2]明显高于骨折组[(0.11±0.02) mg/cm 2]，差异有统计学意义( t＝3.015， P<0.05)。观察组大鼠胫骨BMP-2和VEGF mRNA表达水平(0.76±0.10、0.61±0.09)明显高于骨折组(0.38±0.07、0.26±0.04)，差异有统计学意义( t＝2.901、2.374， P<0.05)。观察组大鼠胫骨RUNX2和ALP蛋白水平(1.31±0.12、1.20±0.11)明显高于骨折组(0.79±0.08、0.70±0.10)，差异有统计学意义( t＝3.093、2.895， P<0.05)。 结论:淫羊藿总黄酮通过促进骨形成相关的因子的表达，促进胫骨骨折大鼠的愈合，提高骨折部位的骨密度。

目的:观察淫羊藿与杜仲不同煎煮方法有效成分含量的变化及其抗衰老作用。方法:制备杜仲单煎液、淫羊藿单煎液、杜仲淫羊藿单煎合并液及杜仲淫羊藿合煎液，采用HPLC法检测其松脂醇二葡萄糖苷、淫羊藿苷含量，采用紫外分光光度计法测定总黄酮含量。将小鼠按体重随机分为正常组、模型组、给药组，每组12只。模型组和给药组小鼠颈背部皮下注射5% D-半乳糖0.25 ml制备亚急性衰老雌性小鼠模型。给药组小鼠灌胃杜仲淫羊藿水煎液8 g/kg；正常组和模型组灌胃等体积生理盐水，按0.08 ml/10 g小鼠体重灌胃，1次/d，连续造模和给药4周。观察小鼠一般行为及体重，采用跳台实验评价小鼠学习记忆能力，计算脏器系数。结果:杜仲淫羊藿单煎合并液中松脂醇二葡萄糖苷、淫羊藿苷含量高于杜仲淫羊藿合煎液，两者总黄酮含量无明显差异。与模型组比较，给药组小鼠体重升高( P<0.05)，跳台潜伏期[(278.06±81.16)s比(201.67±91.67)s]延长( P<0.01)，错误次数[(1.96±0.71)次比(2.21±0.69)次]减少( P<0.05)，脾脏指数[(48.29±14.69)比(44.95±10.87)]增加( P<0.05)。 结论:杜仲、淫羊藿不同煎煮方式导致其有效成分含量有所差异，以单煎合并液中主要成分含量高，有一定的抗衰老作用。

目的 探究箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.叶片不同发育时期黄酮类成分变化与元素积累的规律,揭示其黄酮类成分的形成机制.方法 以箭叶淫羊藿叶片为研究对象,将其按照不同发育时期分为t1～t6共6个时期,高效液相色谱(HPLC)测定4种黄酮类成分含量,紫外分光光度法测定总黄酮醇苷含量;实时荧光定量法(RT-qPCR)测定17个与黄酮类成分合成关键酶基因的相对表达量;电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定25种元素含量;皮尔逊(Pearson)相关性分析黄酮类成分与元素的关系.结果 淫羊藿苷含量呈现先上升后下降的趋势,朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、总黄酮醇苷的含量显著降低,但是5种黄酮类成分总量却显著升高,在t4和t5时期大量积累.大部分黄酮类成分合成关键酶基因表达量在t4和t5时期显著上调,在t2时期显著下调,不同基因的表达量随叶片发育而变化;叶片中元素Mg、Ca、Ti、Mn、Fe、Sr和Ba元素含量显著升高,元素K和Co含量显著降低;元素P、K、V、Cu的含量与箭叶淫羊藿中黄酮类成分含量呈显著性正相关.结论 箭叶淫羊藿叶片中黄酮类成分形成过程受到叶片发育程度及相关基因表达的影响,黄酮类成分在叶片发育后期大量积累.

目的 研究淫羊藿总黄酮(total flavonoids of epimedium,TFE)对长双歧杆菌生长代谢的调控影响与长双歧杆菌发酵液的抗炎活性.方法 葡萄糖缺乏的MRS培养基中分别加入浓度为0.5％、1.0％、2.0％的淫羊藿总黄酮作为培养基,设置2.0％葡萄糖和2.0％低聚果糖培养基作为对照,测定发酵后长双歧杆菌的活菌数(CFU)、吸光度值等指标,以明确淫羊藿总黄酮对长双歧杆菌生长的影响,并使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)测定发酵液的体外抗氧化活性.以LPS诱导的RAW264.7为炎症模型,评价培养前后发酵液对造模前后相关炎症因子水平以确定抗炎作用.结果 TFE能够显著促进长双歧杆菌的增殖,5mg/mL、0.5 mg/mL、0.05mg/mL TFE的促生长率分别为59％、23％、20％,24h生长曲线也表明TFE的促增殖作用.胃肠道耐受性能研究发现,在长双歧杆菌生长环境中添加2％TFE能够提高菌株在0.3％胆盐(t=6.008,P＜0.01)、人工胃液(t=4.371,P＜0.05)和pH值为3的酸性环境(t=9.645,P＜0.001)中的稳定性,并提高了菌株在含有氯四环素、克林霉素、卡那霉素、甲硝唑、万古霉素的培养基中的生长浓度和体外抗氧化能力(t=15.141,P＜0.001).此外,添加TFE的长双歧杆菌发酵液可降低LPS诱导下的巨噬细胞表达促炎因子 TNF-α(t=4.655,P＜0.01)、IL-1β(t=7.775,P＜0.01)和 IL-6(t=7.775,P＜0.01)的水平,进而改善LPS诱导的炎症反应.结论 淫羊藿总黄酮可促进长双歧杆菌的生长与菌株稳定性,并增强长双歧杆菌的抗炎活性,有成为新型中药来源益生元的潜力.

探究不同比例有机肥和化肥配施对柔毛淫羊藿产量和品质的影响,为柔毛淫羊藿的高产优质栽培提供科学的施肥依据.该试验采用田间小区试验,以CK(不施肥)为对照,设置 5 个不同比例有机肥和化肥配施处理组,OF0(100%化肥)、OF25(25%有机肥配施)、OF50(50%有机肥配施)、OF75(75%有机肥配施)和OF100(100%有机肥),测定不同施肥模式对柔毛淫羊藿农艺性状、产量、有效成分含量、养分积累量及土壤理化的影响,并采用CRITIC权重法对药材产量及品质进行综合评价.结果发现各施肥处理药材产量均较CK显著增加,尽管各有机肥配施化肥处理产量略低于OF0 处理,但无显著差异,表明有机肥配施化肥可以保证药材产量.随着有机肥配比的提高,药效成分朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C呈先增后降趋势,以OF25 处理含量最高,淫羊藿苷则呈不断上升趋势,以OF100 处理最佳,但总体来说,总黄酮醇苷ABCI以OF25 处理积累最多.CRITIC法结果显示药材情况综合得分前三的施肥处理为OF25、OF50、OF75.有机肥配施化肥有利于提高土壤的持肥能力和供肥能力,土壤指标以OF100 处理最优,土壤酶活以OF75 处理活性最高,同时有机肥配施化肥有助于植株对养分的吸收积累,以OF25 处理促进最明显.综合不同比例有机肥配施化肥对柔毛淫羊藿产量、有效成分含量及养分积累量等指标,建议在柔毛淫羊藿生产中第一年采用 25%比例(7 500 kg·hm-2)的有机肥和化肥配施,以促进柔毛淫羊藿产业增产提质.

探究淫羊藿总黄酮胶囊对脑卒中后认知障碍(post-stroke cognitive impairment,PSCI)大鼠的作用.构建大鼠大脑中动脉短暂性缺血(transient middle cerebral artery occlusion,tMCAO)模型,将出现神经功能受损的大鼠随机分为模型对照组,淫羊藿总黄酮胶囊低、中、高剂量组,尼莫地平片组.给药后检测大鼠认知功能,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织病理变化,免疫荧光法检测脑组织中神经元细胞标记物(neuronal nuclei,NeuN)和星形胶质细胞标记物(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达分布情况;检测大鼠血清中β淀粉样蛋白1-42(amyloid beta 1-42,Aβ1-42)、神经元烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、乙酰胆碱(acetylcholine,ACH)、多巴胺(dopamine,DA)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和超敏 C 反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)的含量.另外,采用 Western blot 检测海马组织中核转录因子-κB(nuclear fac-tor-kappaB,NF-κB)、p-NF-κB、NF-κB 抑制蛋白 α(alpha inhibitor of NF-κB,IκBα)、p-IκBα 蛋白的表达量.实验结果显示,淫羊藿总黄酮胶囊可改善模型大鼠的认知功能,其作用机制可能是通过调节p-IκBα和p-NF-κB蛋白的表达,进而抑制缺血再灌注引起的炎症反应.

目的:探究内生菌深绿木霉对宿主植物朝鲜淫羊藿生长及药效成分含量的影响.方法:以朝鲜淫羊藿为试验材料,采用大田试验,设置对照组、商品菌组和S6 菌组,商品菌组和S6 菌组分别浇灌 200 mL浓度 1.0×108个/mL的菌悬液,对照组浇灌等量PDB培养基,15 d浇灌一次并测定植物生物量、光合作用参数、抗氧化酶活性、黄酮类化合物合成关键酶活性、总黄酮及总黄酮醇苷含量.结果:S6 菌组与对照组相比,在45、60 d时,鲜重分别显著高出 20.36%、15.38%;15、30、60 d时,Pn 分别显著高出 49.20%、44.79%、345.33%;45、60 d时,Gs 分别显著高出26.83%、33.47%;15 d时,Ci 显著高出 12.79%;15、30、60 d时,WUE分别显著高出 49.27%、77.39%、514.03%;45、60 d时,SOD活性分别显著高出 93.64%、155.03%;15～60 d 期间,POD 活性分别显著高出 23.12%、110.79%、141.98%、174.84%;15、60 d时,PAL 活性分别显著高出 106.85%、35.21%;30、45 d 时,F3H 含量分别显著高出25.17%、66.67%;15 d时,FNS含量显著高出 21.18%;15～60 d 期间,总黄酮醇苷含量分别显著高出 28.96%、28.37%、30.90%、66.56%.结论:深绿木霉能够促进朝鲜淫羊藿的生长及药效成分累积.

目的 探索淫羊藿总黄酮联合骨营养剂治疗骨质疏松的协同作用,讨论中西药联用的潜在作用机制.方法 通过去除卵巢建立绝经后骨质疏松大鼠模型,设置假手术组(Sham)、模型组(OVX)、戊酸雌二醇组(EV)、淫羊藿总黄酮提取物组(T)、淫羊藿总黄酮提取物配伍骨营养剂组(TG),每组 7 只.给药干预 8 周后,通过酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清骨代谢标志物和炎症因子的变化,利用Micro-CT和生物力学分析测定骨密度和显微结构、采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H&E)和抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)观察骨病理损伤及破骨细胞数量,使用免疫组化和实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测量大鼠股骨中TLR4、PI3K和AKT的基因转录和表达.结果 与OVX组相比,EV组、T组和TG组的骨小梁数目增多,排列整齐,结构较为完整,血清骨代谢指标、血清炎症因子、骨小梁参数、骨生物力学参数和破骨细胞数量显著改善(P<0.05),PI3K、AKT的阳性区域及mRNA表达明显升高(P<0.05),TLR4 的阳性区域及 mRNA表达明显降低(P<0.05).与 T组相比,TG组的药效作用更显著(P<0.05),TLR4 mRNA表达明显降低(P<0.05),PI3K mRNA表达明显升高(P<0.05).结论 淫羊藿总黄酮联合骨营养剂可在TLR4/PI3K/AKT信号通路中协同发挥药效,缓解大鼠骨质疏松的症状.

目的:通过HPLC法测定不同产区淫羊藿中淫羊藿总黄酮醇苷、淫羊藿总黄酮、浸出物的含量差异,同时结合计量统计学分析方法,科学的对不同区域淫羊藿进行质量评价.方法:采用HPLC法检测甘肃省不同产地淫羊藿、柔毛淫羊藿、制淫羊藿等37个品种的化学成分,并且结合化学计量学的分析方法[主成分分析(principal component analysis,PCA)、聚类分析(cluster analysis,CA)、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least square discriminate analysis,OPLS-DA)]对37个产地的淫羊藿进行质量评价研究.结果:SPSS软件对主成分进行分析,共得到3个主成分,其方差贡献率83.868%,依据主成分计算最后得分,得到定西的淫羊藿样品整体较好,其次是陇南、天水、平凉、庆阳及甘南;选择平方欧式距离作为测度进行聚类分析,同时运用多变量统计软件SIMCA14.1分析,结果CA和PCA结果基本一致;最后采用监督模式识别,偏最小二乘法得R2回归线截距0.00867,Q2截距为?0.196,R2>Q2,且Q2为负值,说明预测能力较好,说明产地分类的合理性.结论:HPLC含量测定法结合化学统计学可全面反映甘肃地产淫羊藿质量及品质特色的标准体系,为合理开发野生资源,建立淫羊藿生产加工基地,确保岷州淫羊藿的道地优质性提供技术支撑.

目的 脱髓鞘病是临床上广泛存在的一种病症,常见于脑小血管病、脑卒中、多发性硬化等神经系统常见重大疾病中.脱髓鞘病主要病理表现为髓鞘的脱失及白质的变性,影像学研究发现在神经系统白质可见多个脱髓鞘病灶.针对脱髓鞘疾病,临床上缺少有效的治疗药物.本研究拟研究药物淫羊藿总黄酮(EF)对脱髓鞘模型的作用,探讨其在脱髓鞘病中的潜在应用.方法 应用掺入 0.2%cuprizone(CPZ)的特制饲料饲喂雌性C57BL/6J 小鼠造模,持续8周,至实验结束.于造模4周后开始ig给淫羊藿总黄酮提取物(EF)75,150和300 mg·kg-1(相当于目前上市药临床剂量的25%,50%和1倍),每日1次,持续4周.结果 及结论 EF 150和300 mg·kg-1灌胃给药4周能够显著改善CPZ致脑白质脱髓鞘模型小鼠的空间工作记忆障碍(Y迷宫试验)、识别记忆障碍(物体识别试验),并减轻模型小鼠的抑郁状态(悬尾试验).磁共振-弥散张量成像显示,EF明显改善CPZ模型小鼠胼胝体部位的白质传导束病变,保护神经纤维的完整性,减轻髓鞘脱失.透射电镜检测显示,EF能够改善CPZ模型小鼠脑白质区域(胼胝体)的髓鞘肿胀、板层分离和髓鞘脱失,显著降低髓鞘脱失轴突占总轴突数量的比例.LFB染色、油红O染色和黑金染色显示,EF明显改善CPZ模型小鼠胼胝体部位的髓鞘脱失.免疫组化染色显示,EF显著增加髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达,促进髓鞘形成.Western印迹结果显示,EF明显增加CPZ模型小鼠胼胝体部位髓鞘相关蛋白MBP和CNPase的表达,并增高轴突标记蛋白NF-200的表达,有利于促进髓鞘修复和再生、减轻轴突损伤.此外,EF可显著促进CPZ模型小鼠胼胝体部位少突胶质前体细胞分化为成熟少突胶质细胞,从而促进髓鞘再生.进一步研究发现,EF显著抑制CPZ模型小鼠胼胝体部位小胶质细胞和星形胶质细胞的活化,具有抗神经炎症作用.同时,EF明显抑制CPZ模型小鼠脑内细胞坏死性凋亡关键调控因子RIPK/MLKL的激活,提示其可能为EF发挥抗炎及神经细胞保护作用的潜在机制.