Ahmed青光眼引流阀(AGV)植入术是治疗难治性青光眼的主要手段之一，其相对于常规滤过性手术具有更高的手术成功率。但AGV作为异物常会引起滤过区瘢痕组织增生，包裹引流盘，从而抑制房水外流，引起眼压重新升高，导致手术失败。尽管AGV植入术中和术后多次注射抗代谢药物可抑制术后滤过区瘢痕化，但术后多次结膜下注射不仅会引起患者的不适，而且会引起相应并发症，因此需要对AGV进行改进，避免反复注射药物，使药物在局部缓慢释放，同时减轻AGV的异物反应。最近，Ologen胶原蛋白、聚2-羟基甲基丙烯酸乙酯凝胶、聚乳酸－羟基乙酸共聚物和天然蛋白页岩等新型材料及技术的应用为抑制AGV植入术后滤过区瘢痕化提供了新的治疗方法选择。本文从AGV引流盘材料的发展、AGV联合新型材料药物缓释系统的构建、AGV引流盘结构的改进等方面对抑制滤过区瘢痕化的方法和研究进展进行综述。

目的:探讨CLC-2氯离子通道靶向阻滞对人结膜成纤维细胞(HConF)纤维化过程的抑制作用。方法:将HConF分为空白对照组、脂质体2000(Lipo2000)组、无义小干扰RNA(siRNA)组和CLC-2 siRNA转染组，其中空白对照组不做任何处理，其他各组分别采用含有相应转染试剂的培养基培养。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中CLC-2 mRNA的表达水平；采用CCK-8试剂盒检测各组HConF的增生能力，即吸光度( A)值；采用流式细胞仪检测各组HConF凋亡比例；采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测各组HConF迁移能力；采用胶原收缩实验检测各组胶原面积收缩率；采用Western blot法检测各组细胞胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、Collagen Ⅲ、PI3K、Akt、p-PI3K和p-Akt的蛋白表达水平。 结果:空白对照组、Lipo2000组、无义siRNA组和CLC-2 siRNA转染组CLC-2 mRNA相对表达量和细胞 A值总体比较差异均有统计学意义( F＝90.110、198.680，均 P<0.001)，其中CLC-2 siRNA转染组CLC-2 mRNA相对表达量和细胞 A值明显低于无义siRNA组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。空白对照组、Lipo2000组、无义siRNA组和CLC-2 siRNA转染组细胞凋亡率分别为(4.78±1.10)%、(4.54±1.51)%、(4.82±0.88)%和(28.90±0.91)%，总体比较差异有统计学意义( F＝363.260， P<0.001)，其中CLC-2 siRNA转染组细胞凋亡率明显高于无义siRNA组，差异有统计学意义( P<0.001)。各组细胞迁移率和细胞迁移数量总体比较差异均有统计学意义( F＝74.493、1 625.431，均 P<0.001)，其中CLC-2 siRNA转染组细胞迁移率明显低于无义siRNA组，细胞迁移数量明显少于无义siRNA组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。各组细胞胶原面积收缩率总体比较差异有统计学意义( F＝104.692， P<0.001)，其中CLC-2 siRNA转染组细胞胶原面积收缩率明显低于无义siRNA组，差异有统计学意义( P<0.001)。各组Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白相对表达量及p-PI3K/PI3K比值和p-Akt/Akt比值总体比较差异均有统计学意义( F＝112.073、456.931、340.889、43.021，均 P<0.001)，其中CLC-2 siRNA转染组Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白相对表达量及p-PI3K/PI3K比值和p-Akt/Akt比值明显低于无义siRNA组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:靶向抑制CLC-2氯离子通道基因表达可通过PI3K/Akt信号通路促进HConF凋亡，抑制细胞迁移、胶原合成及胶原收缩，抑制纤维化过程。

目的:研究负载曲安奈德(TA)的水凝胶缓释片在兔眼"单步隧道法"新型微创小梁切除术(SIGS)中的抗瘢痕作用及其安全性.方法:选择健康新西兰大耳白兔48只,随机分为四组(每组12只),小梁切除术组(Trab组)、SIGS组、在SIGS术中结膜瓣下植入聚乙烯醇水凝胶(PVAH)薄片(PVAH组)、在SIGS术中结膜瓣下植入负载TA的水凝胶缓释片(TA/PVAH组).分别于术后1、2、3、4 wk观察并记录各组眼压、滤过泡形态、前房反应及其它并发症情况,并处死动物,取右眼术区组织行病理组织石蜡切片,并行Masson染色、苦味酸-天狼星玫瑰红染色及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维细胞生长因子-2(FGF2)免疫组化染色.观察局部组织炎性细胞浸润情况、成纤维细胞增殖及Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维合成情况,计算并比较各组α-SMA、FGF2抗体免疫组化染色的平均阳性面积比.结果:术后2 wk TA/PVAH组均保持了弥散隆起的功能性滤过泡,而Trab组、SIGS组和PVAH组均有术眼出现扁平滤过泡.术后4wk,PVAH组、TA/PVAH组分别有1眼(33％)、2眼(67％)存在功能性滤过泡,其余滤过泡均扁平.Masson染色显示:术后4 wk PVAH组和TA/PVAH组水凝胶均未降解,相对于Trab组和SIGS组,滤过道更为明显,有较少胶原纤维增生.天狼星红染色显示:术后4 wk,与Trab组、SIGS组和PVAH组相比,TA/PVAH组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的表达更少.免疫组化染色显示:术后1 wk,TA/PVAH组α-SMA表达较Trab组和SIGS组均明显降低(P＜0.01);术后2 wk Trab组和SIGS组α-SMA表达最高,而PHAP组和TA/PVAH组结膜组织中α-SMA表达较前两组均显著降低(P＜0.01).与Trab组相比,PVAH 组、TA/PVAH 组术后 1、2、3、4 wk FGF2 表达均明显升高(P＜0.05);与SIGS组相比,TA/PVAH组术后4 wk FGF2表达明显升高(P＜0.05).结论:兔眼SIGS术中联合结膜瓣下填充负载TA的水凝胶缓释片能有效抑制手术区滤过道瘢痕化,可能是TA抗瘢痕作用与水凝胶支架作用的共同结果.

滤过性手术是目前治疗青光眼的主要手术方式,滤过泡瘢痕化是导致手术失败的主要原因.术中及术后应用抗代谢药物如丝裂霉素C(MMC)和5-氟尿嘧啶能够提高手术成功率,但相关并发症难以避免.动物实验与临床应用证实植入物的应用能有效保持滤过道通畅,将植入物赋予缓释抗代谢或抗瘢痕化的能力将会增强青光眼滤过手术的效果.该研究将对各种植入物在青光眼滤过手术中的应用作一综述.

青光眼已成为全球首位不可逆致盲疾病,眼压是预防视力丧失唯一可控因素.约20％的患者在药物治疗下眼压控制效果不佳,需行滤过手术,但术后滤过通道瘢痕化会导致眼压再度升高.房水与滤过通道瘢痕化的机制紧密相关,房水中各种细胞因子含量的变化为我们了解青光眼滤过术后滤过通道瘢痕化提供了重要线索.故本文针对细胞因子与滤过手术预后的相关性进行综述和回顾.

目的 探讨上调c-Ski基因表达对青光眼兔术后瘢痕形成及转化生长因子(TGF)-β、Ras同源家族成员A(RhoA)/Rho相关激酶(Rock)信号通路的影响.方法 取30只新西兰大白兔建立青光眼模型,并进行青光眼滤过手术.将其随机分为A组(仅造模及手术,不给药)、B组(结膜下注射 400 μg空白质粒)、C组(结膜下注射100 μg c-Ski质粒)、D组(结膜下注射200 μg c-Ski质粒)和E组(结膜下注射400 μg c-Ski质粒),每组6 只.分别于术后2 d、4 d、7 d、14 d和28d检测各组兔的眼压、滤过道组织中Ⅰ型和Ⅱ型胶原面积占比.术后28d采用实时荧光定量PCR检测各组兔滤过道组织中c-Ski、TGF-β1、Rock和RhoA mRNA表达水平,采用Western blot检测各组兔滤过道组织中TGF-β1、Rock及RhoA蛋白表达水平.结果 术后2d、4d、7 d、14 d、28 d,C组、D组及E组兔眼压均低于A组和B组,D组和E组兔眼压均低于C组(均P<0.05).术后2 d、4 d、7 d、14 d、28 d,C组、D组及E组Ⅰ型胶原面积占比依次降低且均低于A组和B组(均P<0.05);术后14 d,C组、D组及E组Ⅱ型胶原面积占比依次降低且均低于A组和B组(均P<0.05).术后28 d,C组、D组、E组兔滤过道组织中c-Ski mRNA表达水平均高于A组和B组,TGF-β1、Rock及RhoA 的mRNA和蛋白表达水平均低于A组和B 组,且C 组、D组、E 组c-Ski mRNA表达水平依次升高,TGF-β1、Rock及RhoA的mRNA和蛋白表达水平依次降低(均P<0.05).结论 上调c-Ski基因表达能够降低青光眼兔术后的眼压,减少胶原合成,抑制瘢痕形成,这可能与其抑制TGF-β1 及RhoA/Rock信号通路有关.

目的:研究曲古抑菌素A(TSA)对青光眼滤过术(GFS)术后滤过道瘢痕化细胞模型Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.方法:构建GFS术后滤过道瘢痕化细胞模型,RT-PCR、Western blotting法分别检测600 nmol/L TSA对组蛋白乙酰基转移酶Ⅰ型胶原蛋白mRNA及蛋白表达的影响.结果:RT-PCR、Western blotting均证实600 nmol/L TSA对Ⅰ型胶原蛋白在基因转录及蛋白表达水平有抑制作用(P<0.01和P<0.05).结论:TSA能减弱GFS术后滤过道瘢痕化细胞模型中Ⅰ型胶原纤维基因转录及蛋白表达水平.

粘小管手术是一类经粘小管引流房水的手术的统称.因其并发症少,尤其是无滤过道瘢痕化等问题日益受到人们的重视.但面对不断涌现的各种术式,临床医师必需客观理性地认识.本文阐述了粘小管与房水阻力及青光眼之间的关系、临床上所观察到的青光眼患者中存在的粘小管结构与功能的异常、手术的演变、各类粘小管手术(小梁切开术、小梁消融术、iStent植入术、激光小梁打孔术、粘小管成形术和黏弹物质小管切开术)的设计原理及效果以及目前存在的问题,以期提高临床医师对这类手术的认识.

目的 探讨大蒜素对青光眼滤过术后兔眼滤过泡瘢痕化的抑制作用.方法 取健康同品系大白兔36只72眼,随机分成大蒜素组、丝裂霉素组、生理盐水组,每组24眼,均行小梁切除术.各组分别将浸有大蒜素(1.112 kg·L-1)、丝裂霉素(0.3g· L-1)、生理盐水的棉片放置于结膜囊-巩膜瓣-巩膜床层间,5 min后完全取出棉片,充分冲洗.术后各组分别测眼压,观察滤过泡的形态,计算滤过泡面积并行眼前节照相.术后28 d处死各组兔,行HE染色及Masson染色对比观察各组结膜下瘢痕增生情况.结果 术后第1天3组眼压较术前降低,随后眼压逐渐回升.各组不同时间内的眼压差异均有统计学意义(均为P＜0.05).术前及术后1d、4d、7d、14 d两两比较中除术后4d丝裂霉素组眼压比生理盐水组低(P =0.025)外,其余各时间眼压两两比较,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).术后28 d生理盐水组眼压高于大蒜素组和丝裂霉素组(均为P＜0.05),大蒜素组和丝裂霉素组相比差异无统计学意义(P＞0.05).术后1～4d3组滤过泡面积分别达到最大值,之后滤过泡面积逐渐减小.统计学分析结果示3组滤过泡面积减小量在不同的时间点上是不同的(P＜0.05).不同分组之间的滤过泡面积减小量有明显差异(P＜0.05).术后大蒜素组与丝裂霉素组滤过泡面积减小幅度相同,差异无统计学意义(P＞0.05),生理盐水组比大蒜素组和丝裂霉素组的滤过泡面积减小速度更快,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).术后28 d各组结膜上皮均完整无破损及增厚.HE染色显示大蒜素组和丝裂霉素组兔眼瘢痕组织较少,滤过通道较宽;生理盐水组兔眼瘢痕组织较多,滤过通道狭窄.Masson染色显示大蒜素组和丝裂霉素组可见少量炎性细胞浸润,滤过区成纤维细胞及胶原纤维疏松,结膜及巩膜间隙较宽;生理盐水组可见大量炎性细胞浸润,滤过区成纤维细胞及胶原纤维致密,结膜及巩膜间隙较窄,形成大量的瘢痕组织.术后28 d根据胶原纤维占整个结膜和巩膜空间总面积的百分比分析,大蒜素组[(58.13±5.33)％]比丝裂霉素组[(62.42±2.95)％]胶原纤维少,差异有统计学意义(P＜0.05),大蒜素组和丝裂霉素组均比生理盐水组[(89.75±3.91)％]胶原纤维少,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 大蒜素和丝裂霉素有着相同的功效,可通过抑制小梁切除术后滤过泡瘢痕化,对功能性滤过泡有一定的维持作用.

青光眼滤过手术是治疗青光眼的主要手术方式,影响手术成功率的主要因素即为手术部位过度愈合、滤过道瘢痕化产生.滤过道瘢痕化的主要特点即为细胞通过上皮间充质转化过程转化为肌成纤维细胞.形成的肌成纤维细胞迅速产生过量的细胞外基质,并通过细胞外基质产生收缩力,造成组织结构的异常,妨碍滤过道引流.本文主要就肌成纤维细胞在青光眼滤过术后伤口愈合过程中的病理作用进行综述.