本研究旨在阐明烟草甲Lasioderma serricorne Defensin(LsDef1 和LsDef2)基因在响应细菌侵染过程中的功能.利用生物信息学分析了 LsDef1 和 LsDef2 编码蛋白的结构、特征和系统进化关系.采用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)技术检测LsDef1 和LsDef2 在烟草甲不同发育阶段(卵、1龄幼虫、2龄幼虫、3龄幼虫、4龄幼虫、蛹、成虫)、4 龄幼虫不同组织(脂肪体、表皮、中肠、血细胞和马氏管)、病原微生物诱导情况、细菌及细菌细胞壁成分胁迫后的表达模式.序列比对发现烟草甲LsDef1 和LsDef2 具有典型的6个半胱氨酸,形成3对二硫键,属于β防御素.RT-qPCR显示LsDef1 和LsDef2 基因在烟草甲不同发育阶段均有表达,在幼虫 4 龄处于高水平表达;主要表达组织为脂肪体(Fat body)和血细胞(Hemocyte),其次为表皮和中肠,而在马氏管的表达水平最低.外来病原物诱导后,LsDef1 和LsDef2 基因表达量显著增加,对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus诱导最为敏感,进一步得细菌和细菌细胞壁成分诱导表达模式显示金黄色葡萄球菌诱导高峰期出现在诱导后 6 h;PGN-SA 诱导表达高峰期为3 h.烟草甲LsDef1 和LsDef2 是一类可被革兰氏阳性菌诱导的抗菌肽,研究结果为进一步研究昆虫防御素类抗菌肽的功能奠定了基础.

目的:了解云南省某三甲医院内科住院患者吸烟情况，为此部分特殊人群控烟策略的制定提供参考。方法:本研究为横断面研究，整群抽取2022年2～3月云南省某三甲综合医院呼吸内科、心血管内科、内分泌科、消化内科、肾脏风湿免疫科、神经内科、肿瘤科和血液科的2 033例住院患者进行问卷调查，内容包括基本人口学特征、吸烟量、戒烟意愿和Fagerstr?m烟草依赖评估量表(FTND)。由专人在巡回病房时现场发放和回收问卷，并整理和分析数据。计算总体、不同性别患者的吸烟率，以及各科室男性患者的吸烟率和戒烟率。比较不同年龄(15～24岁、25～44岁、45～64岁、65～80岁)，学历(初中及以下、高中及以上)，婚姻(已婚、其他婚姻情况)，家庭人均月收入(<3 000元、3 000～6 000元、>6 000元)和民族(汉族、其他民族)的男性吸烟患者吸烟率、每日吸烟量、戒烟意愿和FTND≥7分的分布情况。结果:本次调查共发放问卷2 033份，收回有效问卷1 941份，有效回收率为95.5%，其中男1 116例(57.5%)，女825例(42.5%)。总体吸烟率为22.4%(435/1 941)，其中男性患者吸烟率为38.8%(433/1 116)，女性患者吸烟率为0.2%(2/825)。呼吸内科、心血管内科、内分泌科、消化内科、肾脏风湿免疫科、神经内科、肿瘤科和血液科男性患者吸烟率37.0%(61/165)、44.1%(112/254)、47.5%(58/112)、43.4%(46/106)、38.6%(44/114)、43.3%(58/134)、31.1%(33/106)、18.3%(21/115)，戒烟率分别为51.2%(64/125)、35.3%(61/173)、24.7%(19/77)、19.3%(11/57)、32.3%(21/65)、32.6%(28/86)、57.7%(45/78)、53.3%(21/45)。83.4%(361/433)的男性吸烟患者吸烟量≥10支/d。87.3%(378/433)的男性吸烟患者属于中重度尼古丁依赖，61.0%(264/433)的男性吸烟患者有戒烟意愿。男性患者戒烟率为38.7%(273/706)。不同年龄的内科男性住院患者吸烟率比较，总体差异有统计学意义( χ2＝11.56， P＝0.009)45～64岁年龄段的吸烟率较65～80岁年龄段的吸烟率高(45.1%比28.5%， P<0.01)。不同家庭人均月收入的内科男性住院患者吸烟率比较，总体差异有统计学意义( χ2＝15.69， P<0.001)；<3 000元的吸烟率较3 000～6 000元和>6 000元的吸烟率高(90.4%比37.9%、26.1%， P<0.01)。不同年龄、学历、婚姻、家庭人均月收入、民族的内科男性住院吸烟患者每日吸烟量≥10支、有戒烟意愿和FTND≥7分的占比差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:云南省某三甲医院内科男性住院患者吸烟率、尼古丁依赖程度、每日吸烟量均高，但戒烟意愿也高。制定控烟策略应重点关注心血管内科、神经内科和内分泌科等收治烟草相关疾病的科室，以及中青年、低收入的内科男性住院吸烟患者。

环境烟草烟雾(ETS)是室内空气污染物的一个主要来源,其成分有一氧化碳、铅、尼古丁和4-甲基亚硝氨基-1-(3-吡啶基)-1-丁酮等.ETS暴露会危害未成年人的记忆力和注意力等认知功能.该文就ETS暴露对未成年人认知功能的影响及相关机制给予阐述,以期为该领域的进一步研究提供参考.

[目的]低温处理是我国主要储烟害虫烟草甲Lasioderma serricorne的有效控制手段之一,但是在低温条件下烟草甲的种群动态及适应机制鲜有报道.昆虫的亚致死低温效应是我们了解昆虫适应低温的有效途径.本研究通过分析亚致死低温对烟草甲后代生命表参数的影响,以揭示烟草甲的低温适应能力和种群发展潜力.[方法]将烟草甲末龄幼虫暴露于-20℃下若干时长,构建时间-死亡率曲线,分别计算其死亡率为10％和50％的致死时间(即LT10和LT50);然后分别构建烟草甲末龄幼虫经-20℃低温处理LT10和LT50时长后存活F1代种群的年龄-龄期两性生命表.[结果]-20 ℃低温对烟草甲末龄幼虫的亚致死时间LT10和LT50值分别为5.32和12.84 min.在-20℃下暴露LT10和LT50时长后获得的F1代种群,90％以上的个体存活并能完成整个生活史,其卵-成虫总寿命、雌成虫寿命及净繁殖率(R0)、内禀增长率(rm)和周限增长率(λ)均与28℃下饲养的对照种群无显著差异.但是,与对照相比,-20℃低温处理烟草甲末龄幼虫LT10和LT50时长显著降低了F1代卵和1龄幼虫的起始生命期望值、F1代1龄幼虫历期以及幼虫阶段的繁殖值,且使F1代种群的雄性比例增大.[结论]-20℃低温处理烟草甲末龄幼虫LT10和LT50时长能够降低F1代起始生命期望值和种群繁殖率,但是其种群结构和基本生命表参数正常.结果表明,烟草甲幼虫对低温具有较好的适应性,在经历低温处理后幸存个体能够再次迅速扩繁.

近年来,空气污染物对儿童神经发育障碍的影响受到广泛关注.生命早期是大脑快速发育的关键时期,该时期暴露于空气污染物,大脑功能可能产生永久性改变.本文主要回顾了近年来国内外有关生命早期空气污染物暴露和儿童神经发育障碍之间关联的流行病学研究,重点讨论了生命早期室外空气污染物(如PM2.5、PM10、NOx、CO等)和室内空气污染物(如烹饪油烟、烟草和蚊香烟雾、家居装饰产生的甲醛)对儿童神经发育的影响,归纳了其背后可能的生物学机制.多数研究指出生命早期不同暴露时期和暴露水平的污染物会对儿童神经发育产生负面影响且某些空气污染物与儿童神经发育障碍之间可能存在剂量-反应关系.目前有关室内空气污染物对儿童神经发育障碍的研究集中于烟草烟雾暴露,其他室内空气污染物如油烟、室内装饰材料产生的有机化合物等报道较少且其潜在的生物学机制尚不明确.提示未来需要进一步的流行病学研究、动物和细胞实验为空气污染物暴露的神经发育毒性提供佐证,以期为环境优生学提供理论依据,促进儿童健康发展.

目的 克隆获得丹参SmCYP76S7 基因序列,并对其进行生物信息学和表达特性分析.方法 克隆获得SmCYP76S7的 cDNA 及基因组 DNA 序列,运用生物信息学软件对该基因及其编码蛋白进行结构和理化性质分析.构建融合表达载体pEGAD-SmCYP76S7-eGFP,转化烟草后分析SmCYP76S7 蛋白的亚细胞定位.利用qRT-PCR测定SmCYP76S7 基因在各器官中的表达量,同时分别利用不同光质和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)处理丹参幼苗和丹参毛状根,探究SmCYP76S7基因对光质和MeJA的响应.结果 SmCYP76S7 基因包含 2个外显子和 1 个 1 506 bp的开放阅读框,编码 501 个氨基酸.该基因在根、茎、叶和花中均有表达,其中花中表达量最低.SmCYP76S7 蛋白除定位于内质网外,还分布于多个细胞结构.SmCYP76S7 基因的表达在红光处理和MeJA处理样品中显著上调,是典型的光和MeJA诱导基因.结论 SmCYP76S7 基因是CYP76 家族成员,结合其表达特性和同家族其他成员的催化活性,该蛋白很可能参与丹参酮类成分的生物合成,其具体的生物学作用值得进一步深入挖掘.

薄荷作为药食同源植物,具有重要经济价值.茉莉酸信号抑制子JAZ蛋白在调节植物应答逆境胁迫方面具有重要作用.克隆薄荷MeJAZ8基因,并分析其蛋白特征、蛋白互作和表达模式,为薄荷抗逆分子育种提供基因资源.该实验将通过生物信息学、酵母双杂交、烟草叶片瞬时表达、qRT-PCR等技术对McJAZ8的蛋白结构特征、亚细胞定位、蛋白互作与基因表达进行分析.结果显示:①McJAZ8基因全长543 bp,编码180个氨基酸,McJAZ8蛋白具有保守的TIFY和Jas结构域,与拟南芥AtJAZ1和AtJAZ2同源性较高.②McJAZ8蛋白定位于细胞核和细胞质.③酵母双杂交结果显示,McJAZ8与其自身或Mc-JAZ1/3/4/5蛋白互作形成同源或异源二聚体.④McJAZ8在不同组织中均有表达,幼叶中表达量最高.在叶序中,McJAZ8在第4片叶中表达量最高,而第2片叶中表达量最低.⑤在叶片和根中,McJAZ8在茉莉酸甲酯(MeJA)、干旱、NaCl处理下的表达呈不同程度地上调;McJAZ8的表达在CdCl2处理下呈先上调而后下调的模式;在叶片中,McJAZ8的表达在CuCl2处理下呈逐渐下调的趋势,而在根中呈先下调后上调再下调的趋势;在叶片和根中,MeJAZ8在A1C13处理下的表达均呈不同程度的下调.该研究丰富了薄荷中茉莉酸信号抑制子JAZ基因的研究,并为薄荷分子育种提供了基因资源.

薄荷是我国传统中草药,具有极大的药用和经济价值.脱落酸(ABA)受体PYLs在植物生长发育及逆境响应方面具有重要作用.克隆薄荷McPYL4 基因,对其蛋白特征、基因表达和蛋白互作进行分析,将为薄荷抗逆遗传改良和分子设计育种提供基因资源.故而通过生物信息学分析、烟草叶片瞬时表达、RT-qPCR、Y2H技术对McPYL4 的蛋白特性、亚细胞定位、基因表达模式和蛋白互作进行分析.结果显示,McPYL4 基因全长 621 bp,编码 206 个氨基酸,其蛋白具有SRPBCC保守结构域,与丹参SmPYL4 最同源;McPYL4 蛋白定位于细胞膜和细胞核;McPYL4 基因在薄荷的各个组织中均有表达,根中表达最高,叶片次之,叶 1 至叶 8 呈现先上后下的表达模式;在叶片和根中,McPYL4 基因均响应外源激素ABA、茉莉酸甲酯(MeJA)以及干旱、AlCl3、NaCl、CdCl2 和CuCl2 处理,并且,McPYL4 在MeJA处理下的叶片和根中,以及AlCl3 胁迫处理 1 h的叶片中上调表达,而其他处理下McPYL4 在叶片和根中均呈现下调的趋势;蛋白互作结果显示,McPYL4 以ABA不依赖的形式与AtABIs蛋白相互作用.该研究表明McPYL4 响应ABA、茉莉酸(JA)以及多个非生物胁迫处理,并且McPYL4 参与薄荷中ABA信号转导,从而参与薄荷的叶片发育及各种非生物胁迫的调控.

干旱和土地盐渍化是制约林业可持续发展的重要因素,植物在遭受生物或非生物胁迫时,会在叶片释放萜类等挥发性物质.1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是MEP 途径的末端活性酶,具有提供前体萜类物质和主要限速作用.为探究马尾松HDR基因是否参与干旱和盐胁迫条件下的胁迫响应,该研究克隆了马尾松HDR基因开放阅读框,并初步分析了其生物信息、组织特异性表达水平和初步功能.结果表明:(1)PmHDR基因编码区长度为1 458 bp,编码485 个氨基酸,其编码蛋白包含LytB/IspH基因超家族的核心序列和PLN02821 多功能结构域,属于HDR家族.(2)PmHDR密码子使用偏好性较弱,偏好使用A/U结尾的密码子,烟草、拟南芥与酿酒酵母更适合作为其异源表达受体.(3)qRT-PCR结果显示,PmHDR基因在马尾松老叶中表达量最高,其次为幼叶、幼茎和老茎,在根中表达量最低.(4)构建基因表达载体pBI121-PmHDR并转化拟南芥,转基因拟南芥对干旱和盐胁迫表现出更强的抗逆性.以上研究结果表明PmHDR参与了植物干旱和盐胁迫的响应和调节,并为马尾松抗逆育种提供了一定的理论支持.

为寻找新型植物病毒抑制剂,以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒,研究发现入侵植物椴叶鼠尾草提取物具有抗TMV活性.通过半叶枯斑法不同施药方式筛选发现,在质量浓度为 1mg/mL时,石油醚萃取物的保护作用和钝化作用最强,抑制率为40.95％和52.85％;乙酸乙酯萃取物的治疗作用最强,抑制率为52.85％,与阳性对照药剂宁南霉素无显著差异.石油醚萃取物各馏分中,Fr7的保护作用和治疗作用最好,抑制率为40.51％和45.52％,Fr6的钝化作用最好,抑制率为74.63％.乙酸乙酯萃取物各馏分中,Fr1'的保护作用最强,抑制率为61.77％,Fr3'的治疗作用最强,抑制率为55.02％,Fr4'的钝化作用最强,抑制率为60.22％.运用现代色谱波谱技术分离鉴定了 5个化合物分别为tilifodiolide、eupatoric acid、熊果酸、齐墩果酸和2-甲基-5,7-二羟基色原酮.