目的:探讨体外膜肺氧合（extracorporeal membrane oxygenation，ECMO）在危重新生儿治疗中的有效性和安全性。方法:回顾性分析福建省儿童医院及福建省妇幼保健院2021年4月至2023年4月接受ECMO治疗的危重新生儿病例资料，总结使用ECMO的诊疗过程、结局和并发症。结果:共纳入28例，男21例，女7例；平均出生体重3 187 g（1 760~4 100 g）。原发病为新生儿持续性肺动脉高压23例（合并急性呼吸窘迫综合征13例，先天性心脏病6例，先天性膈疝3例，胎粪吸入综合征1例），心脏手术后低心排综合征2例，极重度贫血2例，心律失常1例。28例患儿均采用静脉-动脉ECMO模式。ECMO开始时间为生后37.0（19.5，93.8）h，77.3%入院后24 h内开始，ECMO运行时间79.5（46.0，96.8）h，住院时间23.0（6.5，29.5）d。20例（71.4%）ECMO成功撤机。ECMO治疗24 h后血管活性药物评分、氧合指数及血乳酸均较治疗前明显下降，差异有统计学意义（ P<0.05）。28例患儿均有不同程度的血小板减少（最低24×10 9/L）和血红蛋白下降（最低68 g/L），其他并发症包括肾功能不全及液体超载17例、机械装置相关并发症8例、神经系统并发症10例。 结论:对于新生儿持续性肺动脉高压等重症新生儿，ECMO治疗可以有效改善患儿呼吸和循环功能，但易合并不同程度的并发症。

目的:探讨环指蛋白187(RNF187)表达与肝癌侵袭转移和上皮间变的关系。方法:2019年4月至2019年10月，利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测高转移潜能肝癌细胞株(MHCC97-H)和低转移潜能的肝癌细胞株(PLC/PRF/5、HepG2，中国科学院上海生物所)中RNF187的表达。通过慢病毒转染技术沉默RNF187后，RT-qPCR和Western blot法分别检测RNF187 mRNA及蛋白的表达水平及上皮-间充质转化(EMT)分子标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、黏结合蛋白多糖-1(Syndecan-1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形纤维蛋白(Vimentin)的表达情况，噻唑蓝(MTT)法和Transwell法分别检测MHCC97-H细胞增殖和侵袭能力的影响。计量资料以均值±标准差( Mean± SD)表示，组间比较采用 t检验。 结果:高转移潜能组MHCC97-H的RNF187的mRNA表达(0.082±0.006)明显高于低转移潜能组PLC/PRF/5(0.014±0.003)、HepG2(0.017±0.002， t＝41.755、36.248， P均<0.05)，MHCC97-H的RNF187蛋白表达(2.8±0.3)明显高于PLC/PRF/5(1.8±0.2)、HepG2(1.7±0.2， t＝11.030、11.667， P均<0.05)。MHCC97-H-Mock和MHCC97-H-短发卡RNA(shRNA)-RNF187的EMT分子标志物的表达分别为，上皮标志物E-cadherin(0.81±0.08，0.31±0.06)、Syndecan-1(0.70±0.08，0.22±0.07)；间皮标志物N-cadherin(0.28±0.04，0.73±0.09)和Vimentin(0.26±0.03，0.68±0.08)。两组细胞株EMT各分子标志物的表达比较差异有统计学意义( t＝22.312、24.634、19.424、17.854， P均<0.05)，提示MHCC97-H-shRNA-RNF187细胞株EMT过程显著下调。MTT法示，72 h后，MHCC97-H-shRNA-RNF187的增殖能力(2.2±0.4)明显低于MHCC97-H-Mock(4.5±0.6， t＝2.428， P<0.05)。Transwell小室法示，MHCC97-H-shRNA-RNF187组细胞穿过微孔滤膜的细胞数量[(178±67)个]明显少于MHCC97-H-Mock组[(482±73)个， t＝14.563， P<0.05]。 结论:RNF187表达可诱导EMT并参与肝癌细胞的侵袭与转移过程。

目的:观察沉默环指蛋白(RNF)187基因的慢病毒载体对人高转移性肝癌细胞裸鼠中成瘤效应的影响。方法:将靶向RNF187基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒(LV-shRNA-RNF187)和阴性对照慢病毒(LV-shRNA-NC)转染至高转移性肝癌细胞(MHCC97-H)，并分别作为vshRNF187组和vshNC组，未转染MHCC97-H细胞作为空白对照(Control)组。将3组细胞系接种于裸鼠后观察裸鼠移植成瘤情况及移植瘤生长情况。4周后测量肿瘤的体积和重量，绘制移植瘤生长曲线。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测裸鼠移植瘤中RNF187的表达。计量资料进行 t检验分析，计数资料组间分析采用 χ2检验。 结果:3组裸鼠接种癌细胞后均有肿瘤形成。vshRNF187组裸鼠的肿瘤体积[(746±154) mm]，明显低于vshNC组和Control组[(1 502±315)、(1 590±418) mm]，差异有统计学意义( t＝5.885、5.083， P<0.01)。vshRNF187组裸鼠瘤体重量[(0.79±0.13) g]，低于vshNC组和Control组[(1.57±0.32)、(1.63±0.41) g]，差异有统计学意义( t＝5.618、4.926， P<0.01)。vshRNF187组瘤组织中RNF187 mRNA的表达量(0.39±0.06)明显低于vshNC组和Control组(1.03±0.06、1.02±0.07， t＝21.192、1.623， P<0.01)，vshRNF187组瘤组织中RNF187蛋白的表达量(0.365±0.049)明显低于vshNC组和Control组(1.018±0.123、1.168±0.137， t＝13.663、14.798， P<0.01)，差异均有统计学意义。 结论:沉默RNF187基因能有效抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长。

目的:探讨环指蛋白187(RNF187)调节自噬水平产生对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:通过生物信息学手段分析RNF187在肝癌中的mRNA水平。分别使用小干扰RNA(siRNA)阴性对照和靶基因进行转染的Huh7细胞作为未经转染(NC)组和敲低RNF187组；以上两组细胞转染24 h后添加二甲基亚砜(DMSO)的细胞分别作为NC+DMSO组和敲低RNF187+DMSO组；行siRNA靶基因转染24 h后添加巴弗洛霉素A1(BFA)的细胞作为敲低RNF187+BFA组。通过CCK8细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell实验和蛋白质印迹法探究RNF187对肝癌细胞恶性生物学行为和自噬水平的调控。结果:与正常肝脏组织样本比较，RNF187在肝癌样本中的mRNA水平升高，差异有统计学意义( P<0.05)。与NC组相比，敲低RNF187组细胞在48 h和72 h的吸光度以及12 h和24 h的划痕愈合率均降低，差异具有统计学意义(均 P<0.001)。敲低RNF187组24 h后的穿膜细胞数(39.50±5.57)个低于NC组的(128.25±17.35)个，差异具有统计学意义( t＝9.74， P<0.001)。与NC组相比，敲低RNF187组总LC3和Beclin-1的相对表达量均增加，而磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的相对表达量降低，差异具有统计学意义(均 P<0.05)。与敲低RNF187+DMSO组相比，敲低RNF187+BFA组的自噬流水平、48 h和72 h的吸光度以及24 h的划痕愈合率均增加，差异具有统计学意义(均 P<0.001)。敲低RNF187+BFA组24 h的穿膜细胞数(119.00±2.65)个多于RNF187+DMSO组的(57.67±2.52)个，差异具有统计学意义( t＝29.09， P<0.001)。 结论:RNF187在肝癌细胞中高表达，敲低RNF187可通过升高细胞自噬水平来抑制肝癌细胞恶性生物学行为。

目的:研究环状RNA ras同源物基因家族成员T1(CircRHOT1)调节miR-187-3p/性别决定区Y框蛋白4(SOX4)轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响.方法:采用实时荧光定量PCR和Western blot检测体外培养的人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞MCF-7、Hs-578T、MDA-MB-231中CircRHOT1、miR-187-3p与SOX4表达;将体外培养的MCF-7细胞随机分为对照组、CircRHOT1敲低(转染CircRHOT1 siRNA质粒)组、miR-187-3p mimics(转染miR-187-3p mimics)组、共转染阴性对照(转染空载质粒和miR-187-3p inhibitor阴性对照)组、CircRHOT1敲低+miR-187-3p inhibitor(转染Cir-cRHOT1 siRNA质粒和miR-187-3p inhibitor)组,分组转染后,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测各组细胞CircRHOT1、miR-187-3p与SOX4表达;采用EdU染色和平板集落形成实验检测各组细胞增殖;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡;采用免疫荧光染色检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达比值(Bax/Bcl-2).各组细胞与人外周血淋巴细胞共培养并分组转染后,采用流式细胞术检测各组人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例;采用MTT法检测人外周血淋巴细胞对各组MCF-7细胞的杀伤率.采用双荧光素酶报告实验检测MCF-7细胞CircRHOT1对miR-187-3p、miR-187-3p对SOX4的靶向调控.结果:与人正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,人乳腺癌MCF-7、Hs-578T、MDA-MB-231细胞CircRHOT1、SOX4蛋白与mRNA表达明显升高(P<0.05),miR-187-3p表达明显降低(P<0.05).与对照组相比,CircRHOT1敲低组、miR-187-3p mimics组细胞SOX4蛋白与mRNA表达、EdU阳性率、集落生成率降低(P<0.05),miR-187-3p表达、凋亡率、Bax/Bcl-2、人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例及其对MCF-7细胞杀伤率升高(P<0.05).与CircRHOT1敲低组相比,CircRHOT1敲低+miR-187-3p inhibitor组细胞CircRHOT1表达差异无统计学意义(P>0.05),SOX4蛋白与mRNA表达、EdU阳性率、集落生成率升高(P<0.05),miR-187-3p表达、凋亡率、Bax/Bcl-2、人外周血淋巴细胞中活化CD8+T细胞比例及其对MCF-7细胞杀伤率降低(P<0.05);共转染阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:敲低CircRHOT1可通过上调miR-187-3p而降低SOX4表达,从而减弱乳腺癌细胞增殖活性,并促进其凋亡,还可抑制CD8+T细胞活化并增强其癌细胞杀伤力,减弱乳腺癌细胞免疫逃逸.

目的 总结血清甲胎蛋白(AFP)异常升高卵巢恶性生殖细胞肿瘤(MOGCTs)的诊治方法.方法 回顾性分析1例血清AFP异常升高MOGCTs的临床资料.结果 患者以"发现盆腔肿物50 d"为主诉入院,入院前50天患者扪及自身下腹部肿物,偶有腹痛,无发热、乏力、腹胀、腹坠等症状.妇科B超检查提示盆腔实囊性肿物,12.3 cm×9.7 cm×9.7 cm,形态不规则,回声不均匀,内大部分为实性回声,可见少量液性暗区,内为稀疏颗粒,血流短枝状.腹盆部核磁共振检查提示双侧卵巢恶性肿瘤,盆腔积液.血清AFP 142 779 ng/mL,血清糖链抗原125 187 U/mL,其余实验室检查结果无异常,结合患者临床表现、影像学检查及实验室检查,患者具备手术指征,遂行手术治疗[卵巢癌根治术(全子宫 + 双附件 + 大网膜切除术)+ 盆腔淋巴结切除 + 腹主动脉旁淋巴结切除 + 腹膜活检术],术后病理诊断为左MOGCTs(卵黄囊瘤)FIGOⅠC2期,T1C2N0M0.术后以长春新碱 + 更生霉素 + 环磷酰胺方案(VAC方案)行3个疗程化疗(2021年11月5日—12月28日),监测到血清AFP水平下降后又升高,妇科超声提示盆腔偏右侧液性包块(断端前方偏右侧可见液性暗区50 mm),核磁共振提示肿瘤转移,考虑肿瘤未控,遂更改化疗方案为平阳霉素+ 依托泊苷 + 顺铂方案(BEP方案),其中博来霉素使用国产博来霉素类抗肿瘤药平阳霉素,继续行6个疗程化疗(2022年1月24日—5月17日),各项指标均恢复至正常范围并保持稳定,改为门诊监测至今,未见肿瘤复发和转移.结论 卵巢卵黄囊瘤属于MOGCTs,是以盆腔巨大肿物为主要临床表现的少见的卵巢恶性肿瘤;妇科B超和核磁共振检查对该类疾病诊断有一定价值,血清AFP异常升高有助于该类肿瘤与其他卵巢恶性肿瘤的鉴别诊断,最终明确诊断需行病理检查;手术及术后化疗是该类肿瘤的主要治疗方式,治疗过程中监测血清AFP水平变化有助于及时发现肿瘤进展并调整治疗方案.

目的 探讨环指蛋白 187(RNF187)在前列腺癌细胞中的表达及其对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响.方法 通过癌症基因组图谱(TCGA)和高通量基因表达(GEO)数据库分析前列腺癌组织和正常组织间RNF187 的表达差异,体外培养正常前列腺上皮细胞系RWPE-1 和人前列腺癌细胞系LNCaP、C4-2、DU145、PC-3,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定RWPE-1、LNCaP、C4-2、DU145、PC-3 中RNF187 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法测定RNF187 蛋白表达水平.转染RNF187-siRNA1、RNF187-siRNA2 至DU145、PC-3,RT-qPCR 测定RNF187 mRNA相对表达量、CCK-8 法测定细胞活性,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹法检测RNF187 和上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白及基质金属蛋白酶(MMP-9)的蛋白表达水平.结果 TCGA和GEO数据集中,前列腺癌组织中RNF187 表达量均高于正常前列腺组织,Gleason评分及分期较高者的表达量较高(P均＜0.05).人前列腺癌细胞PC-3、LNCaP、C4-2、DU145 中RNF187 mRNA及蛋白表达均高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1(P均＜0.01).RNF187-si1 组、RNF187-si2 组DU145、PC-3中的RNF187 mRNA相对表达量分别低于Control组的DU145 和PC-3 中的RNF187 mRNA相对表达量(P均＜0.001).RNF187 敲减后,DU145、PC-3 细胞增殖活性及增殖、侵袭和迁移能力下降,RNF187、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、MMP-9 蛋白相对表达量均降低,上皮钙黏蛋白(E-cadherin)相对表达量升高(P均＜0.05).结论 RNF187 在前列腺癌组织中过表达,敲减RNF187 可降低前列腺癌DU145、PC-3 的细胞增殖活性及增殖、侵袭和迁移能力.

目的 探讨β1肾上腺素能受体自身抗体(β1AR)表达增强对心房颤动(简称房颤)及心房电重构的影响.方法 24只新西兰大白兔随机分为对照组(Con组)和β1AR组.β1AR组给予2 mgβ1受体细胞外第二环功能表位肽段与佐剂背部皮下多点注射,对照组给予佐剂背部皮下多点注射.每2周注射1次,共4次.于0、2、4、6 W采耳缘静脉血,离心取血清通过酶联免疫吸附测定血清中抗体滴度,验证造模是否成功.每只兔子在免疫前后,采用S1 S2递减刺激测量心房有效不应期(AERP),通过Burst刺激测量房颤诱发率和持续时间.免疫结束后取心房肌组织进行蛋白免疫印记法检测各组内离子通道蛋白(Kir3.1及Cav1.2)和缝隙连接蛋白(Cx43和Cx40)总量的表达变化,逆转录聚合酶链反应分析上述指标各组内mRNA的表达变化.结果 ①与0 w比较,β1AR组在2、4和6 w血清中β1AR水平逐渐增加(P<0.05),而Con组内各个时间点血清中β1AR水平无差异(P>0.05);与Con组相比,除0 w两组比较无差异外,其余β1AR组血清中β1AR水平高于Con组(P<0.05).②β1AR组免疫后较免疫前AERP缩短[(65±8.5)ms vs(116±23.4)ms,P<0.05],平均心率显著增快[(290±35.3)次/分vs(187±31.1)次/分,P<0.05];与Con组相应时间比较,β1AR组免疫后均出现AERP缩短[(65±8.5)ms vs(116±25.3)ms,P<0.05]和平均心率增快[(290±35.3)次/分vs(198±13.7)次/分,P<0.05].③β1AR组免疫后较免疫前房颤诱发率增加[83.3％(10/12)vs 0(0/12),P<0.05]及持续时间延长[(24.66±40.92)s vs(0±0)s,P<0.05];与Con组相应时间比较,β1AR组房颤诱发率显著增加[83.3％(10/12)vs 0(0/12),P<0.05]及持续时间延长[(24.66±40.92)s vs(0±0)s,P<0.05];④与Con组相比,β1AR组Cx43和Cav1.2蛋白水平及mRNA水平显著降低(P<0.05).Kir3.1及Cx40蛋白水平及mRNA含量显著升高(P<0.05).结论 β1AR表达增强能缩短AERP,增加房颤易感性和持续时间,通过改变离子通道特性造成心房肌电重构,促进房颤的发生和维持.

目的:探讨术前伴凝血功能异常的A型主动脉夹层(AAD)手术方式及相关治疗策略.方法:回顾性分析2014-01-2018-06于南部战区总医院心脏外科中心治疗的230例AAD患者,根据临床病史及检查结果判断术前是否伴有凝血功能异常并进行分组,其中试验组伴凝血异常患者43例,对照组未发现明确凝血异常患者187例.全组患者入院后积极完善术前检查后均行急诊外科手术治疗,凝血异常治疗策略在实验室凝血相关检查结果指导下进行,凝血异常患者优先考虑采用自体主动脉或人工血管补片行吻合口覆盖性包裹治疗.比较两组患者术前一般情况、手术情况、输血相关指标及术后恢复情况.结果:全组AAD患者均完成外科手术操作.与对照组比较,试验组患者术前肝功能异常比例及凝血相关指标异常的发生率较高,全弓置换率较低,手术时间相对较长,围手术期浓缩红细胞、新鲜冰冻血浆、血小板和凝血成分如凝血酶原复合物、重组人凝血因子Ⅶ和纤维蛋白原输注较多,且术后24 h引流量较多,ICU滞留时间较长,再次开胸止血、血滤治疗、纵膈感染及院内死亡比例相对较多(均P＜0.05).两组患者体外循环时间、主动脉阻闭时间及术中最低温度、术后肺部感染率均无明显统计学差异.结论:伴凝血功能异常的AAD患者急诊手术风险高,术后并发症多,对此类患者应给予针对性的相关药物治疗,同时选择相对简易的手术方式,手术效果尚可接受.

目的 探讨溶栓后中性粒细胞升高与缺血性脑卒中早期神经功能恶化(early neurological deterioration,END)发生的相关性.方法 收集2017年1月-2018年11月的发病4.5 h内接受阿替普酶静脉溶栓治疗患者的临床资料.根据是否出现END,分为END组和非END组,观察两组患者溶栓前后中性粒细胞、淋巴细胞等指标的变化,以探讨基线及溶栓后中性粒细胞、淋巴细胞和中性粒细胞/淋巴细胞比率与END的相关性.结果 共纳入患者187例,其中END组48例,非END组139例.溶栓前,两组患者除总蛋白(t=2.130,P=0.035)、白蛋白(t=2.777,P=0.007)外,其余指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).溶栓后,白细胞计数、中性粒细胞计数、中性粒细胞/淋巴细胞比值、纤维蛋白酶降解产物、基线和变化美国国立卫生研究院卒中量表评分、心源性脑卒中、责任血管狭窄程度及前循环皮质梗死部位,END组均高于非END组(P＜0.05);而总蛋白、白蛋白、淋巴细胞计数、前白蛋白END组低于非END组(P＜0.05).溶栓前后,END组中性粒细胞增加明显(Z=-2.314,P=0.021).中性粒细胞计数[比值比=1.288,95％置信区间(1.069,1.552)]为静脉溶栓END的独立影响因素之一;且预测END的特异度最高(灵敏度为62.5％,特异度为71.9％).结论 溶栓后中性粒细胞升高与END的发生有一定相关性.动态监测静脉溶栓治疗后的中性粒细胞可有助于预测END的发生.