对瓦尼桑黄(Sanghuangporus vaninii)固体发酵产物的化学成分及生物活性进行研究.采用超声提取、柱层析以及半制备高效液相色谱等方法分离纯化,通过波谱数据鉴定了化合物的结构,并对所得单体化合物进行体外抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和黄嘌呤氧化酶抑制活性筛选.从瓦尼桑黄固体发酵产物中分离得到17个化合物,分别为(2Z,4E)-γ-ionylideneacetic acid(1)、phellinulin E(2)、phellinulin F(3)、phellinulin G(4)、phellinulin J(5)、phellinulin L(6)、phellinulin M(7)、phellinulin N(8)、elgonenes D(9)、咖啡酸(10)、hispidin(11)、3-hydroxyhispidin(12)、原儿茶酸(13)、4-(3-ethoxy-4-hydroxyphenyl)but-3-en-2-one(14)、丁子香酚(15)、亚油酸甲酯(16)、硬脂酸(17),其中化合物 1～9为首次从瓦尼桑黄中分离得到.活性测试结果显示化合物10～13表现出良好的抗氧化活性,对DPPH自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为 16.45、37.52、82.71、50.46 μg/mL,对 ABTS 自由基的 IC50值分别为 1.43、2.26、34.55、21.60 μg/mL,对羟基自由基的IC50值分别为38.43、49.46、86.74、69.16 μg/mL.化合物10、11还对黄嘌呤氧化酶表现出良好的抑制作用,IC50值分别为28.73和44.80 μg/mL.化合物17具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其IC50值 2.31 μg/mL.

本研究以产自安徽的鲍姆桑黄、产自浙江和吉林的瓦尼桑黄、产自山东的粗毛纤孔菌以及采自山西的野生桑树桑黄为研究对象,检测桑黄子实体乙醇提取物中的总多酚、三萜及麦角甾醇含量.结果表明:不同物种和不同来源的桑黄子实体中总多酚、三萜、麦角甾醇含量存在差异,其中总多酚含量最高的是产自浙江的瓦尼桑黄(1.99％),三萜含量最高的是产自山东的粗毛纤孔菌(产孢前,1.32％),麦角甾醇含量最高的是产自吉林的瓦尼桑黄(0.19％).以丙二醛(MDA)为指标比较不同来源桑黄子实体乙醇提取物的抗氧化活性.结果表明,4种桑黄子实体提取物对大鼠肝微粒体脂质过氧化酶MDA的产生均表现出良好的抑制能力,其中浙江桑黄抗氧化活性最佳,MDA抑制率达到96.53％.应用液相色谱-离子阱-飞行时间质谱联用(LC-IT-TOF-MS)技术从桑黄子实体的乙醇提取物中鉴定了 19种化合物,其中浙江的瓦尼桑黄、吉林的瓦尼桑黄和安徽的鲍姆桑黄子实体的化合物组成较为相似,主要为hispidin的衍生物;野生的桑树桑黄子实体主要产物也为hispidin衍生物,但结构类型不同于上述3种桑黄;山东的粗毛纤孔菌子实体中则含有大量的hispidin单体,hispidin衍生物含量很少.综上所述,不同来源桑黄的化合物组成、活性产物含量和抗氧化活性存在较大差异,特别是不同种属桑黄样品所含活性产物的种类以及含量差异较大.本研究为桑黄抗氧化产品的开发提供了科学参考.

本研究以杂木屑及桑枝屑栽培的瓦尼桑黄子实体为研究对象,基于液质联用技术检测出代谢产物共 2 996 种,其中差异代谢物 628 种,上调 435 种,下调 193 种,主要集中在有机酸及其衍生物,有机杂环化合物、脂质和类脂分子、有机含氧化合物、苯环型化合物、苯丙素类和聚酮类、核苷酸及其类似物、氨基酸和糖苷类等.KEEG 代谢通路分析结果表明,差异显著的代谢通路有5 条,分别为磷酸戊糖途径、果糖和甘露糖代谢、糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚生物合成、硫胺素代谢和嘧啶代谢,主要围绕糖类物质代谢为主.通过本研究发现,桑枝屑的添加对瓦尼桑黄子实体中次级代谢产物的合成和累积具有显著的促进作用,为瓦尼桑黄的精准化栽培和开发利用提供技术支撑.

桑黄Sanghuangporus spp.是一类具有广泛的药理活性的大型真菌,其卓越的抗氧化活性备受关注.本研究比较了桑树桑黄Sanghuangporus sanghuang(桑黄)和瓦尼桑黄S.vaninii(杨黄)发酵产物乙醇提取物的抗氧化活性,并分析它们化学成分的差异.实验以 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率、羟基自由基引起的DNA损伤的保护作用和L929细胞抗衰老实验作为指标比较其抗氧化活性差异.结果表明,桑树桑黄和瓦尼桑黄发酵产物提取物均表现出良好的抗氧化性,而且桑树桑黄发酵物的抗氧化能力显著高于瓦尼桑黄.通过超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-triple-TOF-MS)从桑黄中共鉴定出11种多酚类物质,瓦尼桑黄发酵产物成分相对简单.

风味是影响消费者对产品接纳度的主要因素之一.为探究不同桑黄类真菌挥发性化合物的差异,使用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用技术对2株桑树桑黄Sanghuangporus sanghuang、3株瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii.1株忍冬桑黄Sanghuangporus lonicericola和1株粗毛纤孔菌Inonotus hispidus的挥发性风味成分进行了分析,并结合相对气味活度值(relative odor activity values,ROAV)分析不同组分对整体风味的贡献.CAR/PDMS、DVB/CAR/PDMS两种萃取头从7个供试菌株中检测出62种挥发性成分,其中相同成分有31种,表明使用多种类型萃取头能提高提取效果.整体而言,CAR/PDMS萃取头提取菌株SH77、SH86、SH91中挥发性成分效果更好,DVB/CAR/PDMS萃取头提取菌株SH48、SH89、SH92、SH93中的挥发性成分效果更好.各菌株主体挥发性成分有较大差异,同种菌株挥发性成分组成更相近,己醛是共有的主体挥发性成分.桑树桑黄SH89和SH93共有的主体挥发性成分(ROAV≥1)有萘、壬醛、己醛和2-十一酮,瓦尼桑黄SH48、SH91和SH92的主体挥发性成分是己醛,忍冬桑黄SH77的主体挥发性成分有壬醛、葵醛等.粗毛纤孔菌SH86的主体挥发性成分有庚醛、1-庚醇等.不同栽培时间SH91挥发性物质比较结果显示,50 d的SH91较为浓郁,100 d的最淡.本研究可为以后桑黄类真菌品种改良以及产品的开发利用提供参考.

为研究瓦尼桑黄提取物的降尿酸作用,筛选了瓦尼桑黄子实体降尿酸作用的活性部位并初步探究其机制.为建立大鼠高尿酸动物模型,将SPF级雄性SD大鼠随机分为8组:正常对照组(NC组)、模型组(Model组)、阳性对照组(PC组)、醇提物组(CT组)、水提物组(ST组)、20％醇沉多糖组(ST20组)、50％醇沉多糖组(ST50组)和70％醇沉多糖组(ST70组).连续灌胃8周后处死,测定血清中尿酸、肌酐、尿素氮、AST(丙氨酸氨基转移酶)和ALT(天冬氨酸氨基转移酶)水平,根据肝肾病理切片和免疫组化分析瓦尼桑黄提取物降尿酸的效果及对肾脏的保护作用.与模型组相比,瓦尼桑黄提取物各组血清尿酸、尿素氮和ALT水平显著降低(P＜0.05),HE及Masson染色显示肾脏结构明显清晰,细胞坏死和纤维化等病理现象改善明显,且瓦尼桑黄子实体降尿酸的活性部位主要集中在水提多糖,且粗多糖ST20组分降尿酸活性最佳.免疫组化结果显示,瓦尼桑黄多糖显著增强了大鼠肾脏组织中尿酸转运蛋白ABCG2表达水平.瓦尼桑黄子实体降尿酸的活性部位主要是水提物,且大分子粗多糖ST20效果最佳,初步证明瓦尼桑黄多糖通过激活肾脏ABCG2转运蛋白,促进尿酸排泄并缓解肾脏的病理损伤.瓦尼桑黄多糖作为一种尿酸转运蛋白ABCG2的药理诱导剂,可以作为治疗痛风性关节炎的潜在药物.

目前桑黄市场产品趋向多样化,产业蓬勃发展,越来越多的省份颁布了桑黄质量标准或炮制标准,对桑黄产品质量控制起到了较好的规范和指导作用.同时,由于尚无国家级桑黄质量控制标准,各省桑黄质控评价指标和测定方法存在差异,不利于桑黄品质的横向比较和市场监管.此外,各省级桑黄标准中未对有害重金属元素进行限定.针对以上问题,本研究选定长白山地区3种桑黄类真菌子实体为研究对象,建立并优化"一提多测"方法优化提取工艺,高效测定桑黄中多糖、总黄酮、总酚、三萜和甾醇多指标性物质含量;对目前省级标准中NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法与AlCl3法两种桑黄总黄酮测定方法进行比较,择优选之.参考《中华人民共和国药典》2020版方法,采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定铅、镉、砷、汞和铜含量.结果显示,所用测定方法准确且满足方法学验证需求;总黄酮含量测定选择方法稳定性更好的AlCl3法;人工栽培瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii活性物质含量高,有害重金属元素含量低,作为 目前市场上应用广泛的桑黄类真菌质量有一定保证;鲍姆桑黄Sanghuangporus baumii活性物质含量较低;蒙古锈迷孔菌Porodaedalea mongolica活性成分较高,铅、铜含量明显高于其他桑黄样品.未来桑黄类真菌应用与研究中,应注意监测活性成分与有害重金属含量.本研究建立的评测方法可为桑黄科学、高效质量评价提供参考.

桑黄是最早收录于我国中药古籍中的一类大型珍稀药用真菌的总称,具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化和降尿酸等多种功效作用.现代分类学研究结果表明,桑黄具有丰富的物种多样性,广泛分布于我国及北半球不同地区,并生长在桑树、杨树、丁香、忍冬、栎树、锦带花、水曲柳、枣树和核桃楸等多种阔叶树上.自20世纪90年代以来,我国开始了桑黄人工驯化,目前主要用于桑黄产业的种类有桑树桑黄Sanghuangporus sanghuang、瓦尼桑黄(又称杨树桑黄)Sanghuangporus vaninii、鲍姆桑黄 Sanghuangporus baumii 和粗毛纤孔菌 Inonotus hispidus 等,产业规模正在逐年扩大,形成具有广阔发展潜力的健康产业,产生了较高的经济价值和社会效益.本文从桑黄的历史记载、分类地位的演变、功效研究、产业发展进程及面临的瓶颈等问题进行了分析与总结,提出了促进桑黄产业健康发展的建议,并对产业发展愿景进行了展望.

以桑枝屑作为栽培基质,传统的木屑栽培基质为对照,对瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii菌株进行栽培,测定菌丝生长、产量、子实体多糖、黄酮和多酚含量,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、羟自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力评价其活性成分的抗氧化活性,研究桑枝屑对瓦尼桑黄生长、活性成分含量和抗氧化活性的影响.结果表明,与传统木屑相比,桑枝屑对瓦尼桑黄菌丝生长、产量、活性成分含量和抗氧化活性4方面的影响均具有显著差异,随着桑枝屑含量的增加,瓦尼桑黄的菌丝生长、活性成分含量和抗氧化活性呈现逐渐上升的趋势,除菌丝生长速度均低于木屑栽培瓦尼桑黄外,活性成分和抗氧化活性均高于木屑栽培瓦尼桑黄;桑枝屑添加量为40％-60％产量最高.Pearson分析发现黄酮、多酚与DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除能力均呈极显著正相关,多糖与超氧阴离子清除能力呈极显著正相关,与羟自由基清除能力呈显著正相关.综合产量、活性成分含量和抗氧化活性分析,确定适宜瓦尼桑黄菌株栽培的桑枝屑添加量宜控制在40％-60％,研究结果为瓦尼桑黄栽培基质的优化和瓦尼桑黄子实体质量评价提供了科学参考.

对桑树木屑代料栽培瓦尼桑黄Sanghuangporus vaninii子实体分级醇沉粗多糖组分的多糖含量、总酚含量、重均分子量分布、红外光谱、单糖组成、抗氧化活性和免疫活性进行了研究,并采用Pearson相关性分析对各醇沉粗多糖组分的组成特征与活性进行了关联性分析.结果表明,不同醇沉组分粗多糖的组成特征及活性差异较大,其中,各分级醇沉粗多糖组分的多糖含量随着醇沉浓度的增加而增加;20％醇沉多糖组分的总酚含量较高,50％醇沉多糖组分中的总酚含量较低;粗多糖重均分子量随着醇沉浓度的增加而降低;红外光谱结果表明,70％醇沉组分的多糖羟基振动峰不显著,与其分子量分布较低相关;就单糖组成而言,在50％醇沉组分中,果糖及甘露糖含量较高,而在20％和70％醇沉组分中含量较高的单糖是葡萄糖.相关性分析结果显示,子实体粗多糖组分中的总酚含量与DPPH及ABTS自由基清除能力呈显著正相关关系;3个粗多糖组分均能激活RAW264.7细胞释放NO,促进其分泌肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等免疫调节因子,NO释放量与多糖含量呈显著正相关关系,总酚含量较低,且半乳糖和果糖含量较高的S50具有较好的体外免疫活性.本研究为代料栽培瓦尼桑黄子实体多糖类功效成分的研究及开发利用提供参考.