补体凝集素途径是补体系统激活的一种途径,纤维胶凝蛋白(ficolin)与甘露糖结合凝集(MBL)是激活免疫补体途径的一类起始物,两者结构及功能极其相似,可通过识别病原表面的某些物质,激活补体,加强调理吞噬作用或直接杀灭和溶解相关病原,从而在免疫系统中尤其在抗感染方面发挥重要作用.呼吸系统疾病多以感染性疾病为主.近年来,也有相关研究报道ficolin/MBL与众多其他呼吸系统疾病具有相关性,本文就ficolin/MBL与呼吸系统疾病的相关研究进行综述,以期为相关研究提供理论支撑.

目的 检测肝细胞肝癌患者血浆中甘露糖结合凝集素(MBL)、MBL相关丝氨酸蛋白酶-2(MASP-2)的表达水平,探讨其与肝细胞肝癌发生发展的相关性.方法 用酶联免疫吸附测定方法检测64例肝细胞肝癌患者及30例健康人血浆中MBL及MASP-2的表达水平,并用统计学方法分析患者血浆中MBL及MASP-2的浓度与各临床指标的相关性.结果 肝细胞肝癌患者血浆中MBL和MASP-2的浓度均显著高于健康人群(P=0.014、0.002),MBL/MASP-2比值在健康人群与肝细胞肝癌患者中的差异无统计学意义,此外,患者血浆中MBL与MASP-2并无相关性.在肝细胞肝癌患者中,血浆MBL水平与肿瘤的血管侵犯(r=0.253,P=0.047)和总胆红素水平(r=0.283,P=0.024)呈正相关;血浆中MASP-2水平与肝细胞肝癌的TNM分期呈正相关(r=0.276,P=0.027),而与血浆白蛋白呈负相关(r=0.-0.317,P=0.015).经ROC曲线分析,MBL和MASP-2曲线下面积分别为0.665(P=0.010)和0.694(P=0.003),对肝细胞肝癌诊断的敏感性分别为50%和89.1%.结论 补体凝集素途径的关键分子MBL、MASP-2与肝细胞肝癌患者的炎症状态和疾病进展相关,参与了肝癌的发生与发展.

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3(MASP3)是补体凝集素途径的酶成分之一,由MASP1/3基因编码.既往资料证实,MASP3不参与凝集素途径活化,对补体蛋白C3、C4以及C2均无酶切活性,而近期研究表明MASP3是参与补体D因子活化的关键酶,进而可能是联系补体凝集素途径和旁路途径活化的重要成分.此外,人们通过动物疾病模型研究发现MASP3可能作为补体旁路途径异常相关疾病的新治疗靶点,从而为相关疾病提供新的治疗思路.本文旨在对MASP3的编码基因、蛋白结构、生物学功能以及其在旁路途径功能异常相关疾病模型中的研究进展进行综述.

补体系统是固有免疫系统的重要组成部分,通过经典途径、旁路途径及凝集素途径被激活.越来越多的研究表明,补体系统凝集素途径可能参与了糖尿病及其血管并发症的发生发展.参与凝集素途径的起始因子有甘露糖结合凝集素、纤维胶凝蛋白等,当模式识别分子识别并结合病原体,以酶原形式存在的甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶被激活,进而启动后续级联反应并达到最终清除病原体的目的.本文就凝集素途径上游起始因子甘露糖结合凝集素、纤维胶凝蛋白及下游关键酶甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶与糖尿病及其肾病的关系进行综述,以阐述补体系统凝集素途径在糖尿病肾脏疾病(DKD)发病机制中的作用.

目的 通过观察高糖培养下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的CD26表达变化、甘露聚糖结合凝集素(MBL)补体途径的激活及炎症因子(IL-6和NF-kB)的表达,探讨CD26在糖尿病肾病(DN)慢性炎症发病机制中的作用.方法 体外培养HUVEC,分别设置对照组、高渗组、高糖组,采用免疫组化法及Western Blot检测细胞表面CD26、MBL、C3和膜攻击复合物(MAC)蛋白,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测细胞中CD26、IL-6和NF-kB的mRNA.结果 与对照组及高渗组相比,高糖组CD26、MBL、C3、MAC的蛋白表达量明显升高(P＜0.05),且高精组CD26、IL-6、NF-kB mRNA的相对表达量较其余两组亦明显升高(P＜0.05);而高渗组与对照组相比,各指标蛋白及mRNA表达量均无统计学意义(P＞0.05).结论 高糖作用下的HUVEC CD26蛋白表达量是增高的,其作用机制可能是通过激活MBL介导的甘露糖结合凝集素补体途径,使炎症因子IL-6、NF-kB表达增加,从而引起细胞的炎症反应.

糖尿病肾病是糖尿病最严重的微血管并发症,是终末期肾病的重要病因之一.甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)是糖尿病肾病发生发展重要的生物标志物,H型纤维胶原凝集素(H-ficolin)也与糖尿病肾病的发展有关,而MBL相关丝氨酸蛋白酶与糖尿病肾病的关系有待进一步研究.

目的:探讨甘露糖结合凝集素(MBL)途径相关蛋白甘露糖结合丝氨酸蛋白酶-2(MASP2)、MASP3在C3肾小球病(C3G)患者血清中的表达及其在C3G发病中的作用.方法:回顾性分析15例C3G患者(14例C3肾小球肾炎和1例致密物沉积病)的临床资料,用ELISA测定肾活检当天血清MASP2、MASP3水平,分析MASP2、MASP3与临床及病理指标的关系.10名健康志愿者为对照.结果:C3G患者血清MASP2、MASP3水平均高于对照组(P<0.05).血清MASP2、MASP3水平与肾小球滤过率及血清补体C3水平均无关(P>0.05),血清MASP3水平与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.563,P=0.036).C3荧光强度高或有基底膜内电子致密物沉积的C3G患者血清MASP2水平较低(P<0.05).结论:C3G患者尿蛋白量随着血清MASP3的升高而升高,提示MBL途径可能参与该病的发生发展;MASP2水平的异常降低可能与C3G病理损伤程度加重有关.

为研究旋毛虫感染的致病机制, 探讨旋毛虫钙网蛋白对补体凝集素途径活化的影响, 本文首先通过ELISA和Far western blot方法检测重组旋毛虫钙网蛋白 (recombinant Trichinella spiralis calreticulin, rTs-CRT)与甘露糖结合凝集素 (mannose binding lectin, MBL) 的相互作用情况, 随后采用ELISA法研究rTs-CRT对血清中的MBL以及重组MBL分子与甘露糖的结合的抑制作用, 最后, 研究这种抑制效果是否会抑制补体凝聚素途径的活化. ELISA及Far western blot结果证实rTs-CRT可结合MBL分子, 且二者的结合可抑制血清以及重组MBL分子结合甘露糖.同时, 这种抑制作用会减弱补体凝集素途径活化后C4b的沉积.结果表明, rTs-CRT可通过结合补体MBL抑制其识别甘露糖, 进而减弱补体凝集素途径的活化.

目的:研究血清甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2、3(MASP2、MASP3)在IgA肾病(IgAN)患者血清中的表达及其在IgAN发病中的作用.方法:收集我院2016年9月至2017年3月首次经肾活检确诊的143例IgAN患者作为病例组,同期在我院体检科的60例健康体检者作为对照组.用ELISA方法测定血清MASP2、MASP3浓度,分析血清MASP2、MASP3浓度与各临床指标、牛津病理评分、IgA/C3免疫荧光沉积强度以及预后的关系.结果:(1)IgAN组与对照组血清MASP2浓度无统计学差异(Z=-0.347,P=0.729),IgAN组血清MASP3浓度高于对照组(Z=-3.8,P<0.001).(2)与血清中等浓度MASP2(224.22,2540.50 ng/ml)的IgAN患者相比,血清低浓度MASP2(<224.22 ng/ml)患者肉眼血尿发生率更高(χ2=9.892,P=0.002),而血清高浓度MASP2(>2540.50 ng/ml)患者有更严重的蛋白尿(Z=-2.64,P=0.008)和更高的新月体评分(χ2=5.165,P=0.023).(3)与血清低中量浓度MASP3(≤2512.83 ng/ml)的IgAN患者相比,血清高浓度MASP3(>2512.83 ng/ml)患者有更严重的蛋白尿(Z=-4.526,P<0.001),且系膜增生比例、毛细血管内增生比例、肾小管萎缩/间质纤维化比例、新月体比例较高(χ2=8.955,P=0.003;χ2=4.484,P=0.034;χ2=9.853,P=0.002;χ2=9.516,P=0.002).(4)IgA荧光强度弱阳性组血清MASP2浓度高于强阳性组(Z=-2.546,P=0.011),不同C3荧光强度血清MASP2、MASP3浓度间差异均无统计学意义(P>0.05).(5)Kaplan-Meier生存曲线显示血清MASP2低浓度组和高浓度组患者肾脏生存率明显低于中等浓度组(P<0.05).血清高MASP3浓度组患者肾脏生存率明显低于低中量浓度组(P<0.05).结论:(1)血清中过高或过低浓度的MASP2在IgAN的发展中均起作用,MASP2可能在IgAN中具有多重作用机制.(2)血清中高浓度的MASP3可能促进了IgAN的进展.

目的 研究补体旁路途径(altemative complement pathway)过度活化在恶性高血压肾硬化中的作用.方法 (1)选取本院经肾穿刺活检证实为恶性高血压肾硬化患者50例为病例组,零点行肾穿刺活检的供肾者25例为正常对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆及尿液中的补体旁路途径活化起始B因子、正向调节P因子、负向调节H因子及补体活化终末产物C3a、C5a水平.(2)免疫组化法检测补体活化终末产物C5b-9、C4d及凝集素途径活化产物甘露糖结合凝集素(MBL)在肾活检组织的沉积;免疫荧光双染检测C5b-9与CD34(内皮细胞标志物)在小动脉内皮及肾小球毛细血管内皮的沉积.结果 (1)恶性高血压肾硬化患者血浆及尿液中补体B因子、P因子、C3a及C5a均高于正常对照组(均P＜0.05),而H因子则低于正常对照组(P＜0.05).(2)恶性高血压肾硬化患者血浆中补体P因子与24 h尿蛋白量呈正相关(rs=0.465,P=0.001),而补体B因子、H因子、C3a、C5a与血肌酐及24 h尿蛋白量无明显相关性.恶性高血压肾硬化患者尿B因子/尿肌酐、尿P因子/尿肌酐、尿C3a/尿肌酐与血肌酐均呈正相关(rs=0.483,P＜0.001;rs=0.352,P=0.012;rs=0.319,P=0.024),尿H因子/尿肌酐与血肌酐及24 h尿蛋白量均呈负相关(rs=-0.299,P=0.035;rs=-0.342,P=0.015),尿C5a/尿肌酐与血肌酐及24 h尿蛋白量均呈正相关(rs=0.525,P＜0.001;rs=0.496,P＜0.001).(3)免疫组化显示,恶性高血压肾硬化患者C5b-9沉积于小动脉壁及肾小球毛细血管壁,而正常对照组肾组织中未见沉积.恶性高血压肾硬化患者肾脏C5b-9沉积强度评分与血肌酐及24 h尿蛋白量呈正相关(rs=0.791,P＜0.001;rs=0.345,P=0.014).双重免疫荧光标记法可见C5b-9、CD34沉积于小动脉内皮及肾小球毛细血管内皮.(4)恶性高血压肾硬化患者血浆中B因子与C3a(r=0.331,P=0.022)、P因子与C5b-9评分(rs=0.300,P=0.034)均呈正相关;尿液中补体旁路途径活化B因子与C3a、C5a及C5b-9均呈正相关(rs=0.311,P=0.028;rs=0.465,P=0.001;rs=0.428,P=0.002),P因子与C3a、C5a也均呈正相关(rs=0.307,P=0.030;rs=0.442,P=0.001).恶性高血压肾硬化患者免疫组化可见C4d沉积于小动脉及肾小球,而未见凝集素途径活化产物MBL沉积.结论 补体旁路途径过度活化可能参与恶性高血压肾硬化的发生.恶性高血压肾硬化严重程度与补体旁路途径的活化水平相关.