目的:评价电针对三叉神经痛大鼠三叉神经节离子型嘌呤受体4(P2X4R)-p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)-脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路的影响。方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠36只，体质量190～230 g，2～3月龄，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：假手术组(S组)、三叉神经痛组(TN组)和电针组(E组)。采用三叉神经眶下支慢性缩窄术制备三叉神经痛模型。E组于造模后行患侧百会穴、下关穴电针刺激20 min，频率80 Hz，2次/d，连续14 d。于造模前1 d、造模后3、7、14、21和28 d时测定面部机械痛阈(FMT)。末次行为学测定结束后，处死大鼠取三叉神经节，采用Western blot法检测P2X4R、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和BDNF表达，采用ELISA法检测TNF-α、IL-1β和IL-6含量，HE染色观察三叉神经节组织病理变化。 结果:与S组比较，TN组造模后各时点FMT降低，三叉神经节P2X4R、p-p38 MAPK和BDNF表达上调，TNF-α、IL-1β和IL-6含量升高( P<0.05)，三叉神经节病理学损伤明显；与TN组比较，E组造模后各时点FMT升高，三叉神经节P2X4R、p-p38 MAPK和BDNF表达下调，TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低( P<0.05)，三叉神经节病理学损伤减轻。 结论:电针减轻大鼠三叉神经痛的机制可能与抑制三叉神经P2X4R-p38 MAPK-BDNF信号通路活性，减轻神经炎症有关。

目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/瞬时受体电位A1通道(TRPA1)通路探究川芎-天麻药对治疗偏头痛的可能作用机制.方法 48只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、川芎-天麻药对组,每组16只.对照组和模型组给予10 ml/kg生理盐水灌胃,川芎-天麻药对组给予0.675 g/kg川芎-天麻灌胃,均每天1次,连续8天.末次给药前造模,对照组皮下注射生理盐水10ml/kg,模型组和川芎-天麻药对组皮下注射硝酸甘油10 ml/kg制备偏头痛模型大鼠.运用Von Frey纤毛测定大鼠眶周机械痛阈值;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠血清、脑脊液中降钙素基因相关肽(CGRP)水平;一氧化氮(NO)试剂盒测定血清、脑脊液中NO水平;RT-PCR法检测大鼠三叉神经节中即刻早期基因(c-Fos)、CGRP、瞬时受体电位V1通道(TRPV1)、腺苷酸活化蛋白激酶A(PRKAA)及TRPA1 mRNA表达水平;免疫荧光法检测三叉神经颈复合体(TCC)中c-Fos阳性细胞数和三叉神经节磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)、TRPA1蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组大鼠机械刺激阈值、pAMPK蛋白表达降低,血清中CGRP、NO水平,三叉神经节c-Fos、CGRP、TRPV1、TRPA1 mRNA表达水平,TRPA1蛋白表达和TCC中c-Fos阳性细胞数均显著升高(P＜0.05).与模型组比较,川芎-天麻药对组大鼠机械刺激阈值、pAMPK蛋白表达显著上升,血清中CGRP、NO水平,三叉神经节中c-Fos、CGRP、TRPV1、TRPA1 mRNA表达水平,TRPA1蛋白表达和TCC中c-Fos阳性细胞数明显下降(P＜0.05).结论 川芎-天麻药对可能通过调控三叉神经节中AMPK/TRPA1通路,升高机械痛阈,从而改善偏头痛症状.

三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)是一种口面部神经病理性疼痛,被称为"天下第一痛",特点是反复发作、骤发、骤停,呈电击样痛或刺痛.TN可由面部或口内的非伤害性刺激诱发,包括日常生活中的说话、洗脸、咀嚼、刷牙等动作,这严重降低了TN患者的生活质量.TN的发病机制尚未完全阐明,目前认为TN的发生与发展可能与三叉神经根进入区的微血管压迫有关.此外,周围神经的损伤也可能引起口面部三叉神经分布区域内的神经病理性疼痛.基于目前有关TN潜在病因的假说,已有多种模拟TN发病特点的动物模型,包括三叉神经根或三叉神经节慢性压迫模型、周围神经慢性损伤疼痛模型、外周炎性痛模型、中枢致痛模型等.然而,国内外尚未能建立一种公认的能完全模拟TN发病过程的动物模型.选择合适的动物模型对于TN的研究具有重要意义,因此有必要对TN动物模型在动物品系、材料与操作方法、效果观察等方面的特点进行探讨,以提供TN动物模型研究进展的相关信息.未来有待开发更符合人类TN特点的动物模型,以期助力TN的基础及转化医学研究.

目的 观察电针对硝酸甘油致偏头痛小鼠疼痛行为及三叉神经血管功能的影响,探讨其可能作用机制.方法 将20 只C57BL/6 雄性小鼠随机分为对照组、模型组、假针组、电针组,每组5 只.除对照组外,其余组小鼠于实验第1,3,5,7,9,11,13 天给予10 mg/kg硝酸甘油腹腔注射建立慢性偏头痛模型.在每次注射后 30 min,电针组和假针组进行电针干预.实验当天(第 0天)注射前及实验第2,4,6,8,10,12,14 天分别检测小鼠眶周机械痛阈及后足机械痛阈、热痛痛阈;实验第14 天,采用ELISA法检测血清一氧化氮(NO)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平,采用免疫荧光和Western blot法检测三叉神经节中c-Fos蛋白表达情况.结果 实验第6,8,10,12,14 天,模型组小鼠的眶周机械刺激反应评分均明显高于同期对照组(P均<0.05);实验第10,12,14 天,电针组小鼠的眶周机械刺激反应评分均明显低于同期模型组(P均<0.05),且电针组小鼠实验第12,14 天的眶周机械刺激反应评分均明显低于同期假针组(P均<0.05).实验第8,10,12,14 天,模型组小鼠的后足50%撤退阈值均明显低于同期对照组(P均<0.05),后足热痛撤退潜伏期均明显短于同期对照组(P均<0.05);实验第10,12,14 天,电针组小鼠的后足50%撤退阈值均明显高于同期模型组(P均<0.05),后足热痛撤退潜伏期均明显长于同期模型组(P均<0.05),且电针组小鼠实验第12,14 天的后足50%撤退阈值明显高于同期假针组(P均<0.05),后足热痛撤退潜伏期均明显长于同期假针组(P均<0.05).模型组小鼠血清NO、CGRP水平和三叉神经节中c-Fos阳性表达平均光密度、c-Fos蛋白相对表达量均明显高于对照组(P均<0.05),而电针组各指标均明显低于模型组(P均<0.05).结论 电针能明显改善硝酸甘油致慢性偏头痛小鼠的疼痛行为,其可能是通过降低血清NO、CGRP水平及三叉神经敏化蛋白c-Fos的表达,从而改善三叉神经血管功能障碍实现的.

目的 利用附子汤灌胃与电刺激三叉神经节构建肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠模型,探讨该模型的特征.方法 30只SD大鼠分为正常组、模型组、正天丸组(1.6 g·kg-1),每组10只.模型组、正天丸组大鼠灌胃附子汤(2.00 g·kg-1),每天1次,连续28天,建立肝阳上亢证;附子汤灌胃第15天,正天丸组大鼠同时给予正天丸药液,每天1次,共14天;第29天时,电刺激大鼠三叉神经节建立肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型.末次给药30 min后,观察大鼠宏观体征和行为表现,血液粘度仪检测血液流变学;免疫组化、RT-qPCR、Western blot法检测大鼠三叉神经颈髓复合体(TCC)中P物质(SP)阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量.结果 与正常组相比,模型组具有双目红赤,易怒,同笼打斗,舌质暗或有瘀点等宏观体征;出现有规律地摆头、频繁理毛等行为变化;中央区路程增加(P<0.05);全血高切相对粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均明显升高(P<0.05),红细胞变型指数明显降低(P<0.05);TCC中SP阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05).与模型组相比,正天丸组大鼠宏观体征及行为变化明显改善;中央区路程明显减少(P<0.05);全血高切相对粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数明显降低(P<0.05),红细胞变型指数明显升高(P<0.05);TCC中SP阳性表达、mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 SD大鼠附子汤灌胃4周结合电刺激三叉神经节可构建与临床表现基本相符的肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型.

目的 研究川芎-天麻不同剂量配伍醇提液对附子汤和电刺激大鼠三叉神经节致肝阳上亢偏头痛模型大鼠的药效学差异.方法 雄性SD大鼠56只,随机分成正常对照组、假手术组、模型对照组、川芎-天麻(4∶1,1∶1,1∶4,川芎在前,以下简称4∶1、1∶1、1∶4组)醇提物组、舒马曲坦组.灌胃附子汤(2g·kg-1·d-1)加电刺激三叉神经节复制肝阳上亢偏头痛模型.取血及脑分别检测血清和脑匀浆中降钙素基因相关肽(CGRP)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的含量.结果 在血清中,与正常组比较,模型组CGRP、6-keto-PGF1α、NOS含量升高,TXB2含量降低,有显著性差异(P＜0.05).与模型组比较,舒马曲坦组和4∶1组CGRP、NOS降低,TXB2、TXB2/6-keto-PGF1α比值升高,1∶1组CGRP含量降低,1∶4组CGRP、6-keto-PGF1α、NOS含量降低,TXB2/6-keto-PGF1α比值升高,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).与1∶1组比较,4∶1组TXB2含量升高,NOS含量降低;1∶4组6-keto-PGF1α、NOS含量降低,TXB2/6-keto-PGF1α比值升高,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).在脑匀浆中,与正常组比较,假手术组CGRP、6-keto-PGF1α含量降低,ET、TXB2/6-keto-PGF1α比值升高;模型组与假手术组比较,CGRP升高,NOS、6-keto-PGF1α、TXB2/6-keto-PGF1α比值降低,差异有显著性(P ＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,4∶1组NOS降低,1∶1组6-keto-PGF1α 、TXB2/6-keto-PGF1α比值升高,1∶4组6-keto-PGF1α含量降低、TXB2/6-keto-PGF1α比值升高,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).与1∶1组比较,4∶1组6-keto-PGF1α含量升高,NOS含量降低,1∶4组6-keto-PGF1α含量降低、TXB2/6-keto-PGF1α比值升高,差异有显著性(P ＜0.05或P＜0.01).结论 川芎-天麻三个组对肝阳上亢型偏头痛有均有一定的疗效,其中以1∶4组效果最优,推测治疗机制与调节血管舒缩因子CGRP、NOS、6-keto-PGF1α 、TXB2有关.但从血清和脑匀浆的检测结果看,模型组NO、ET含量与正常组差异不大,故推测电刺激大鼠三叉神经节致偏头痛的机制可能与NO、ET调节无关.

目的 本实验通过炎性汤(IS)反复刺激大鼠上矢状窦区硬脑膜疼痛感受器建立慢性偏头痛(CM)大鼠模型,研究瞬时受体电位离子通道A1(TRPA1)及降钙素基因相关肽(CGRP)在CM大鼠模型中的作用,探讨TRPA1在CM发生发展中的可能作用及氟桂利嗪对其影响.方法 清洁级SD雄性大鼠48只,体重250～300 g,按随机数字法分为4组(n=12):正常对照组(A组)、假手术组(B组)、CM模型组(C组)及药物干预组(D组).注射试剂1 h后安静环境中进行大鼠行为学观察及机械刺激缩足反应阈值(PWMT)测定.采用Elisa、Real-Time PCR及Western-Blot技术检测大鼠硬脑膜、三叉神经节(TG)及三叉神经脊束核尾核(TNC)组织部位TRPA1及CGRP表达情况.结果 与A组、B组相比较,C组大鼠行为学评分明显升高,PWMT测定值降低,大鼠硬脑膜、TG及TNC组织部位中CGRP及TRPA1表达量均明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);与C组相比较,D组大鼠行为学评分降低,PWMT测定值升高,硬脑膜、TG及TNC组织部位CGRP及TRPA1表达量均下调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 I TRPA1受体可能参与CM发作的病理生理过程;氟桂利嗪可能通过影响TRPA1受体表达,引起CGRP表达下调,从而缓解CM症状.

目的 通过建立电刺激大鼠三叉神经节(TG),记录三叉神经脊束核尾侧亚核(SPVC)生物电活动的技术,观察咬合干扰对三叉神经痛觉传入通路功能、SPVC神经元兴奋性的影响.方法 取雄性健康Wistar大鼠(体质量250～280 g)20只,随机均分为对照组和模型组(n=10).模型组大鼠用光固化流动树脂粘接法在大鼠右上第一磨牙牙合面制造咬合高点造模,持续咬合干扰30 d,期间用von Frey尼龙毛检测咬肌压痛并进行痛敏评分鉴定.然后在乌拉坦麻醉下同步记录SPVC生物电活动和心电、呼吸肌肌电、体温等多项生理指标,并观察电刺激TG对各项指标的影响.结果 与对照组相比,模型组大鼠在造模后1 d即开始出现咬肌的痛敏评分升高,7 d后达到高峰;咬合干扰30 d后模型组大鼠SPVC自发放电频率增加(P<0.05);给予TG不同强度的单脉冲刺激(0.5～8.0 mA,0.1～0.2 ms),在两组大鼠SPVC均可诱发放电性反应,其幅值具有刺激强度依赖性(P<0.05),在4 mA和8 mA强度模型组大鼠的反应幅值与对照组相似(P>0.05);给予TG高频串刺激(0.2 ms,1 mA,30 s,100 Hz),在两组大鼠SPVC均引发放电频率呈一过性升高,但仅模型组刺激后放电频率升高有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠三叉神经痛觉传入通路的活动可用电刺激TG记录SPVC生物电活动的方法进行检测,咬合干扰可能提高该通路的敏感性和SPVC神经元的兴奋性,导致通路的神经可塑性变化.

目的:研究芎麻汤提取物对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响.方法:将50只雄性自发性高血压(SHR)大鼠按血压随机分为模型对照组、正天丸阳性对照组(1.6 g/kg)和芎麻汤提取物低、中、高剂量组(4.5、9.0、18.0 g/kg,以生药量计),每组10只;并另取10只正常大鼠作为正常对照组.给药组大鼠分别灌胃相应药物,每天1次,连续28 d;正常对照组和模型对照组大鼠灌胃等体积生理盐水.末次给药后,除正常对照组外,其余各组大鼠均采用电刺激三叉神经节(10 min)法复制肝阳上亢兼瘀血型偏头痛大鼠模型,并于造模后再维持给药1次.30 min后,观察大鼠一般行为学及舌质情况,测定大鼠血压,采用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织中5-HT、CGRP含量,并采用Western blot法测定大鼠脑组织中CGRP蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠出现眼结膜颜色加深变红、过度理毛、甩头等行为学变化,大部分大鼠舌质紫暗,并且其收缩压和脑组织中CGRP含量及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),脑组织中5-HT含量显著降低(P<0.01).与模型对照组比较,各给药组大鼠的上述行为学变化及舌质变化均明显改善;正天丸阳性对照组和芎麻汤提取物高剂量组大鼠收缩压、脑组织中CGRP含量及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);正天丸阳性对照组和芎麻汤提取物中、高剂量组大鼠脑组织中5-HT含量显著升高(P<0.05).结论:芎麻汤提取物对肝阳上亢兼瘀血型偏头痛模型大鼠有明显的保护作用,其机制可能与降低脑组织中CGRP含量、升高脑组织中5-HT含量有关.

目的 探讨细胞色素P450(CYP)抑制剂酮康唑抑制氧化亚油酸代谢物(OLAM)介导的外周炎性疼痛的机制.方法 通过弗罗因德佐剂(CFA)模型研究OLAM在炎症过程中作用,CYP酶在OLAM对热痛觉过敏过程中的影响进行研究.结果 培养的三叉神经节(TG)神经元在使用递质进行预处理后,随后进行亚油酸(LA)刺激,[Ca2+]i呈现3倍的增长,至(0.156±0.01).酮康唑的预处理消除LA对[Ca2+]i增强的影响(P<0.05).再悬浮的提取物引起降钙素与基因相关肽(CGRP)释放增至(980.39±21.04)％,与瞬时受体电位香草酸亚型-1(TRPV1)拮抗剂I-RTX共同处理提取物的CGRP释放减弱至(200.31±10.01)％,CFA/酮康唑+递质处理提取物的CGRP释放减弱至(498.03±13.02)％.在对照组(未发炎)后足中注射LA不显著延长自发性伤害性反应行为的时间.在CFA炎症建立后24 h,足底注射LA产生剂量依赖的伤害性镇痛效应,自发性伤害性反应行为时间上调至(148.92±13.42)s.使用阻断剂的预处理可减少被唤起的非综合行为.与野生型小鼠相比,在基因敲除TRPV1的小鼠中,LA-激发的疼痛行为显著减少,非综合行为的时间为(5.31±0.41)s.与接受对照抗山羊IgG抗体(HBSS)组比较,足底注射抗9和抗13-HODE抗体对LA诱导的伤害性行为减少约72％.注射LA前30 min用酮康唑预处理大鼠发炎后足,酮康唑对LA的抑制作用达到70％,伤害性行为时间下调至(11.28±4.10)s.结论OLAM对外周产生炎症性痛觉,而CYP酶在调节OLAM对炎症性热痛觉过敏的作用方面起着至关重要的作用.