白芷为我国药食同源的大宗常用中药材之一,临床应用广泛,主要产于河南、河北、四川、浙江等地.白芷主要含有香豆素类、挥发油类、多糖类、生物碱类、氨基酸类等化学成分,具有镇痛抗炎、抗氧化、抗肿瘤、美白等药理作用.本文在对白芷化学成分和药理作用分析的基础上,基于质量标志物(Q-marker)概念,从植物亲缘学及化学成分特有性、传统药效、传统功效、成分可测性、熏硫加工等角度对白芷的质量标志物进行多方面分析预测,为白芷质量评价体系的建立和开发利用提供参考.

为研究临床常用中药白芷中的化学成分,本实验利用各种色谱分离技术,结合核磁共振波谱对分离得到的单体化合物进行结构鉴定,结果从白芷乙醇提取物中共鉴定出18个非香豆素类化合物,分别为甘草素(1)、柚皮素(2)、橙皮素(3)、柚皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、橙皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、柚皮苷(6)、新橙皮苷(7)、柚皮芸香苷(8)、3-羟基-5,6,7,8,3',4'-六甲氧基黄酮醇3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、开环异落叶松脂醇(10)、松脂素单甲基醚-β-D-葡萄糖苷(11)、连翘苷(12)、牛蒡子苷(13)、(-)-松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、金钱草碱(15)、1-H-咪唑并[4,5-d]哒嗪-2-胺(16)、咖啡酸乙酯(17)、咖啡酸甲酯(18).除化合物15外,其他17个化合物均为首次从白芷中分离得到,对所有化合物进行抗炎活性筛选,结果表明化合物3和18对zymosan诱导中性粒细胞释放超氧化物具有一定的抑制作用,IC50分别为77.8±2.4 μmol/L和44.7±13.5 μmol/L;化合物1和18对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7的NO产生有一定抑制活性,IC50分别为44.7±4.1 μmol/L和94.5±1.9 μmol/L.

鸡血藤Spatholobi Caulis为藤茎类中药,在我国南方地区及东南亚国家药用历史悠久.研究表明鸡血藤成分复杂,主要包括黄酮类、苯丙素类、酚酸类等成分,具有调节血液系统、抗氧化、抗肿瘤及抗病毒等活性.通过对鸡血藤化学成分和药理作用进行综述,基于化学成分特有性、药性、药效、入血成分和成分可测性对鸡血藤的质量标志物(quality marker,Q-Marker)进行预测,表明儿茶素、染料木素、芒柄花素等黄酮类成分及原儿茶酸和没食子酸等酚酸类、芦荟大黄素等蒽醌类、3-羟基豆甾-5-烯-7-酮等甾体类、白芷内酯和spasuberol C等香豆素类可作为鸡血藤的主要Q-Marker,为鸡血藤的质量评价提供科学依据.

采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20和制备型高效液相等色谱方法对石椒草属植物石椒草Boenninghiausenia sessilicarpa全草乙醇提取物的石油醚萃取部位进行分离纯化,同时根据化合物波谱数据对单体化合物进行结构鉴定.从石油醚萃取部位共分离鉴定了 15个香豆素类化合物,结构鉴定分别为:欧芹烯酮酚甲醚(1)、九里香素(2)、3-(1,1-二甲基烯丙基)-8-羟基-7-甲氧基香豆素(3)、花椒毒素(4)、异茴芹素(5)、状芸香素(6)、异去甲基呋喃羽叶芸香素(7)、欧前胡素(8)、珊瑚菜内脂(9)、白芷脑素(10)、白当归素(11)、新比克白芷内酯(12)、chalepin(13)、鲁望桔内酯(14)、3-(1,1-二甲基烯丙基)-花椒内酯(15).化合物1～3、6～10和14～15均首次从石椒草中分离得到.

目的 白芷药材有效成分多且复杂,单一质量标准或者单一成分控制难以有效地衡量白芷药材的质量.通过探究白芷药材有效成分比例一致性,对白芷药材的质量进行评价和控制.方法 提取78篇文献中的1297个白芷药材样本中的有效成分:欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素、佛手柑内酯、水合氧化前胡素、白当归素、花椒毒酚的含量数据.对符合《中国药典》质量标准的1118个样本进行各有效成分含量比例一致性分析.结果 发现各个香豆素类有效成分与标志性成分欧前胡素含量比值在一定范围内波动,例如异欧前胡素和欧前胡素含量比值在0.08～1.08,氧化前胡素和欧前胡素含量比值在0.02～2.00,佛手柑内酯和欧前胡素含量比值0.02～0.29,含量比值在范围之外的白芷药材一般为不合格药材.然后将各个香豆素类有效成分与标志性成分欧前胡素含量比值作正态分布曲线,发现各含量比值以均数为中心呈正态分布,例如异欧前胡素和欧前胡素含量比值以0.451为中心,氧化前胡素和欧前胡素含量比值以0.719为中心,佛手柑内酯和欧前胡素含量比值以0.090 3为中心,越靠近中心则含量比值越稳定,药材质量越好.结论 单一的外观性状鉴别并不能全面反映出白芷药材质量,甚至白芷药材中的有效成分含量与按外观划分的等级相反,因此可以从有效成分的种类、组分比例和含量3个角度准确评价白芷药材质量,通过兼顾外观性状指标和化学质量指标,综合评价白芷药材的规格等级.

在川白芷生长旺盛期叶面喷施锌、硼、钼,研究微量元素锌、硼、钼配合喷施对川白芷主要有效成分含量的影响以及最适宜的喷施量.结果表明:叶面喷施锌、硼、钼有利于川白芷欧前胡素和总香豆素含量的提高,对异欧前胡素含量的影响不显著;硼对欧前胡素和总香豆素含量的积累影响最大,锌次之,钼最小;硼和钼互作对欧前胡素含量有拮抗效应,锌和硼互作对总香豆素含量有协同效应;施锌0.15～0.24 kg·hm-2、硼2.02～2.36 kg·hm-2、钼0.08 ～0.13 kg·hm-2时,川白芷总香豆素含量≥0.7％;施锌0.15～0.20 kg· hm-2、硼1.37～ 1.47kg·hm-2、钼0.09～0.13 kg·hm-2时,欧前胡素含量≥0.2％.叶面喷施锌、硼、钼有利于川白芷中香豆素类成分的积累和品质的提高.

建立测定大鼠血浆中多烯紫杉醇LC-MS方法,并分别研究白芷中3个香豆素成分(欧前胡素、异欧前胡素及氧化前胡素)对多烯紫杉醇药代动力学的影响.以紫杉醇为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白,LC-MS测定,方法经特异性、线性范围、准确度、精密度、稳定性等确证适合用于血浆中多烯紫杉醇的测定.试验采用每组6只大鼠,分别口服灌胃给予多烯紫杉醇(50 mg·kg-1)组、氧化前胡素(8 mg· kg-1)配伍多烯紫杉醇(50mg·kg-1)组;欧前胡素(15 mg·kg-1)配伍多烯紫杉醇(50 mg· kg-1)组、异欧前胡素(15 mg·kg-1)配伍多烯紫杉醇(50mg·kg-1)组.LC-MS测定给药后血浆中多烯紫杉醇浓度,绘制血药浓度-时间曲线,并用DAS 2.0软件计算相关药代动力学参数.结果显示多烯紫杉醇与3个香豆素成分配伍前后其药代动力学参数有了明显的变化.血药浓度-时间曲线下面积(AUC)显著性增加,药峰浓度(Cmax)显著提高.表明白芷香豆素类化合物能促进多烯紫杉醇的口服生物利用度,三者对多烯紫杉醇口服生物利用度的影响作用氧化前胡素最强、异欧前胡素次之、欧前胡素最弱.

目的:研究白芷香豆素类成分欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素对硫酸长春新碱肠道转运及药代动力学的影响.方法:采用MDCK-MDR1细胞模型,考察欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素对硫酸长春新碱肠道转运的影响.采用LCMS/MS测定给药后不同时间血浆中药物浓度,研究欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素成分对硫酸长春新碱药代动力学的影响.结果:长春新碱配伍质量浓度为10.80,5.42,1.35 mg·L-1欧前胡素的表观渗透系数(Papp)分别为(0.287 2±0.0266)×10-6,(0.351 5±0.041 6) ×10-6,(0.294 9±0.006 8)×10-6 cm·s-1,三者与硫酸长春新碱的Papp[(0.227 2±0.014 8)×10-6 cm·s-1]比较有显著性差异(P＜0.05).硫酸长春新碱与欧前胡素、异欧前胡素、氧化前胡素配伍后药时曲线下峰面积(AUC0-t)分别为(343.50±10.29),(348.70±27.99),(235.70±17.56) μg·h·L-1,与硫酸长春新碱组比较有显著性差异(P＜0.01).药峰浓度(Cmax)分别为(81.870±8.517),(83.010±9.276),(60.440±6.679)μg· L-1,与硫酸长春新碱组的比较有显著性差异(P＜0.01).结论:白芷香豆素类成分能促进硫酸长春新碱的肠道转运,提高其生物利用度.

目的 制备白芷香豆素储库型贴剂,考察其体外释药特性和离体皮肤渗透性,筛选有效的透皮吸收促进剂,提高白芷香豆素的透皮吸收速率.方法 选取羟丙甲纤维素为储库介质,以乙烯-醋酸乙烯共聚物膜为控释膜,制备白芷香豆素储库型透皮贴剂.用Franz扩散池进行乳猪离体皮肤渗透实验,用HPLC测定欧前胡素量,考察凝胶用量、药物用量、促渗剂对药物透皮速率的影响,并对优选的贴剂进行体外释放研究.结果 最佳处方为1％羟丙基甲基纤维素(HPMC)、1％白芷香豆素、3％肉豆蔻酸异丙酯、3％氮酮;由该处方制得的贴剂稳态透皮速率(Js)达到0.713 μg/(cm2·h),体外释放速率接近零级.结论储库型白芷香豆素贴剂有较高的经皮渗透速率,体外释药完全,有望成为新型的透皮制剂.

目的 制备白芷香豆素黏胶分散型贴剂,考察其离体皮肤渗透性和物理性状,筛选贴剂处方,提高白芷香豆素的透皮吸收速率.方法 将白芷香豆素分散于尤特奇压敏胶中,采用流涎工艺制备黏胶分散型贴剂.用Franz扩散池进行乳猪离体皮肤渗透实验,用HPLC测定欧前胡素的含量,考察了白芷香豆素含量、促渗剂的种类和用量、压敏胶的种类和用量、工艺参数对药物稳态透皮速率和贴剂的物理性状的影响.结果 优选出最佳处方为:药物含量1.0 mg·cm-2,Eudragit E100 9 mg·cm-2,油酸0.6 mg·cm-2;固化时间为40 min,稳态透皮速率达到0.82μg·cm-2-h-1.结论 制得的黏胶分散性白芷香豆素贴剂有较高的经皮渗透速率和较好的物理性状,优选出的处方及工艺稳定、可行.