目的:了解穿心莲内酯磺化物(ADS)雾化吸入对需要有创机械通气的儿童中重度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的治疗效果。方法:前瞻性随机对照单盲研究，收集2018年11月1日至2019年12月31日入住首都医科大学附属北京儿童医院PICU，年龄29 d~18岁，且需要有创机械通气治疗的中重度ARDS患儿。试验组患儿吸入ADS，对照组吸入生理盐水。试验前后分别留取支气管肺泡灌洗液行细胞因子检测。分析组间人口统计学、细胞因子水平及临床诊疗的差异。结果:共纳入患儿20例，男15(75.00%)例，中位年龄2.15(1.48，8.01)岁，中位第2代儿童死亡风险评分为12.25(4.53，16.30)分。两组患儿的人口统计学、基础临床资料及预后比较差异无统计学意义( P>0.05)。试验组患儿的单核细胞趋化蛋白-1降低，对照组上升，差异有统计学意义[967.50(119.25，5 206.00)pg/mL比-945.00(-3 935.50，495.09)pg/mL， P＝0.041]。试验组白细胞介素(IL)-8下降、对照组升高[303.22(-452.00，1 172.38)pg/mL比-490.14(-780.25，240.52)pg/mL， P＝0.151]；试验组IL-6升高幅度低于对照组[-24.53(-501.76，135.27) pg/mL比-325.85(-633.22，133.75)pg/mL， P＝0.364]；差异均无统计学意义( P>0.05)。试验组患儿研究结束时氧合指数优于对照组[11.35(6.00，15.83)比20.65(6.23，38.35)， P＝0.374]，ARDS好转率较高(80%比60%， P＝0.628)，但差异均无统计学意义( P>0.05)。两组患儿病死率及机械通气时间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:ADS雾化吸入或可降低中重度ARDS患儿支气管肺泡灌洗液内IL-6升高幅度，并降低单核细胞趋化蛋白-1、IL-8浓度，且可能改善肺部氧合功能。尚需进一步研究验证上述结论。

目的:探究布地奈德(BUD)对宫内感染致支气管肺发育不良(BPD)新生大鼠肺部血管发育及血管内皮生长因子(VEGF)和核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白3(NLRP3)表达的影响。方法:将孕15 d的SD大鼠分为对照组和感染组[0.35 mg/(kg·d)脂多糖腹腔注射]，并将各组所产的新生大鼠分为BUD组(0.5 mg BUD悬液)、正常对照组(NC组，等量9 g/L盐水)、BPD组(等量9 g/L盐水)，每组40只，均采用雾化吸入，2次/d，持续14 d。分别于出生时及给药后3 d、7 d、14 d选取10只新生大鼠，HE染色后观察肺组织病理变化和放射状肺泡计数(RAC)，并测量肺泡呼吸膜厚度；免疫组织化学法检测肺组织血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD 31)，并计算肺微血管密度；免疫印迹法检测肺组织VEGF、NLRP3及半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达水平；酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平。 结果:随日龄增加，NC组新生大鼠肺组织逐渐发育成熟，肺泡结构清晰、大小均匀、计数明显增加，未见明显病理变化；BPD组新生大鼠肺组织结构紊乱，肺泡大小不一、计数少，肺泡腔或肺泡间隔有炎症细胞渗出；与BPD组相比，BUD组新生大鼠肺组织病理变化显著减轻，给药后3 d、7 d、14 d，与NC组比较，BPD组和BUD组新生大鼠RAC减少，CD 31阳性细胞平均积分光密度值、肺微血管密度、肺组织VEGF蛋白水平降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，呼吸膜厚度增大，肺组织NLRP3、Caspase-1蛋白水平及血清IL-1β、IL-18水平升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；与BPD组比较，BUD组新生大鼠RAC增多，CD 31阳性细胞平均积分光密度值、肺微血管密度、肺组织VEGF蛋白水平明显升高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)，呼吸膜厚度减小，肺组织NLRP3、Caspase-1蛋白水平及血清IL-1β、IL-18水平明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:宫内感染致BPD新生大鼠病理变化的发生发展可通过肺组织炎症反应影响肺血管发育。BUD可通过降低炎症反应及上调VEGF表达，促进肺组织血管重塑，增加肺组织微血管密度，缓解BPD新生大鼠肺组织病理变化。

目的:评价姜黄素对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠肾组织线粒体氧化应激、核转录因子-κB/NOD样受体蛋白3（NF-κB/NLRP3）炎症小体信号通路及组织细胞损伤的影响。方法:将24只SPF级健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、ARDS模型组及姜黄素小剂量和大剂量组，每组6只。气管内给予脂多糖（LPS）4 mg/kg雾化吸入制备ARDS大鼠模型；对照组给予生理盐水2 mL/kg。姜黄素小剂量和大剂量组于制模后24 h分别灌胃姜黄素100 mg/kg或200 mg/kg，每日1次；对照组和ARDS模型组给予等量生理盐水。7 d后处死大鼠取下腔静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平。取肾组织，采用ELISA法检测活性氧（ROS）水平；采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性；采用比色法检测丙二醛（MDA）水平；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、NF-κB p65、Toll样受体4（TLR4）的蛋白表达；采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HIF-1α、NLRP3、白细胞介素-1β（IL-1β）的mRNA表达；采用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测肾组织细胞凋亡；透射电镜下观察肾小管上皮细胞及线粒体形态变化。结果:与对照组比较，ARDS模型组大鼠表现为肾脏氧化应激和炎症反应，肾损伤标志物NGAL血清含量明显升高，NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路被激活，肾组织细胞凋亡率明显升高，且透射电镜下可见肾小管上皮细胞损伤，线粒体完整性破坏，提示模型成功诱发肾损伤。给予姜黄素干预后，大鼠肾小管上皮细胞及线粒体损伤均明显减轻，同时氧化应激明显减轻，NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路被抑制，肾组织细胞凋亡率明显降低，并均呈一定剂量依赖性；与ARDS模型组比较，姜黄素大剂量组血清NGAL和肾组织MDA、ROS水平均明显降低〔NGAL（μg/L）：13.8±1.7比29.6±2.7，MDA（nmol/g）：115±18比300±47，ROS（kU/L）：75±19比260±15，均 P<0.05〕，肾组织HIF-1α、caspase-3、NF-κB p65、TLR4的蛋白表达明显下调〔HIF-1α蛋白（HIF-1α/β-actin）：0.515±0.064比0.888±0.055，caspase-3蛋白（caspase-3/β-actin）：0.549±0.105比0.958±0.054，NF-κB p65蛋白（NF-κB p65/β-actin）：0.428±0.166比0.900±0.059，TLR4蛋白（TLR4/β-actin）：0.683±0.048比1.093±0.097，均 P<0.05〕，HIF-1α、NLRP3、IL-1β的mRNA表达亦明显下调〔HIF-1α mRNA（2 -??Ct）：2.90±0.39比9.49±1.87，NLRP3 mRNA（2 -??Ct）：2.07±0.21比6.13±1.32，IL-1β mRNA（2 -??Ct）：1.43±0.24比3.95±0.51，均 P<0.05〕，肾组织细胞凋亡率明显下降〔（4.36±0.92）%比（27.75±8.31）%， P<0.05〕，SOD活性明显升高（kU/g：648±34比430±47， P<0.05）。 结论:姜黄素可缓解ARDS大鼠肾损伤，其机制可能与增加SOD活性，减轻氧化应激，抑制NF-κB/NLRP3炎症小体信号通路激活有关。

目的:探讨NEMO结合域肽（NBDP）对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）小鼠肺组织炎症和细胞凋亡的影响及其机制。方法:采用随机数字表法将36只雄性BALB/c小鼠分为生理盐水（NS）对照组、ARDS模型组、NBDP阴性对照组及6、12、18 μg NBDP预处理组，每组6只。雾化吸入脂多糖（LPS）50 μL制备ARDS小鼠模型；NS对照组吸入等量NS。在雾化吸入LPS前30 min，NBDP阴性对照组吸入非功能性NBDP类似物；NBDP预处理组分别吸入6、12、18 μg NBDP 50 μL。吸入LPS 6 h后处死小鼠取肺组织，观察肺组织病理损伤及水肿程度；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肺组织中核转录因子-κB（NF-κB）信号通路蛋白〔NF-κB抑制蛋白（IκB）激酶α/β（IKKα/β）、IκBα和NF-κB p65〕的磷酸化（p-IKKα/β、p-IκBα、p-p65）水平及凋亡蛋白天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达。收集支气管肺泡灌洗液（BALF），采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测髓过氧化物酶（MPO）、白细胞介素（IL-1β、IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等炎症指标的水平。结果:光镜下显示，ARDS模型组存在明显水肿、出血，肺泡结构破坏，透明膜形成等，符合ARDS肺组织病理学特征，说明ARDS模型制备成功。ELISA显示，ARDS模型组BALF中MPO、IL-1β、IL-8、TNF-α水平均明显高于NS对照组；NBDP阴性对照组上述炎症指标与ARDS模型组差异无统计学意义；NBDP预处理组MPO、IL-1β、IL-8、TNF-α水平均明显低于ARDS模型组，并呈一定剂量依赖性，以18 μg NBDP作用更加显著，与ARDS模型组比较差异有统计学意义〔MPO（ng/L）：393.32±19.35比985.87±101.50，IL-1β（ng/L）：43.05±5.11比97.68±10.88，IL-8（ng/L）：84.64±2.32比204.00±17.37，TNF-α（ng/L）：229.13±17.03比546.73±62.72，均 P<0.05〕。Western blotting显示，ARDS模型组p-IKKα/β、p-IκBα、p-p65及caspase-3蛋白表达均较NS对照组明显升高；NBDP阴性对照组NF-κB信号通路蛋白及凋亡蛋白表达与ARDS模型组差异无统计学意义；NBDP预处理组p-IKKα/β、p-IκBα、p-p65和caspase-3蛋白表达均较ARDS模型组明显降低，且呈一定剂量依赖性，以18 μg NBDP作用更加显著，与ARDS模型组比较差异有统计学意义〔p-IKKα/β蛋白（p-IKKα/β/β-actin）：0.15±0.02比0.42±0.04，p-IκBα蛋白（p-IκBα/β-actin）：0.10±0.01比0.93±0.30，p-p65蛋白（p-p65/β-actin）：0.22±0.05比1.37±0.21，均 P<0.05〕。 结论:NBDP可剂量依赖性抑制ARDS肺组织炎症反应和细胞凋亡，其机制与干扰NF-κB信号通路转导有关。

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)-维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)-白细胞介素17(IL-17)信号通路在中性粒细胞哮喘小鼠气道炎症中的作用机制。方法:本研究为实验研究。按随机数字表法将36只雌性BALB/C小鼠分为3组：正常对照组、嗜酸粒细胞哮喘组、中性粒细胞哮喘组，每组12只。腹腔注射卵清蛋白(OVA)致敏、雾化OVA激发制备嗜酸粒细胞哮喘模型；OVA腹腔注射联合脂多糖经鼻滴入、OVA雾化激发制备中性粒细胞哮喘模型；正常对照组以生理盐水代替OVA致敏及激发。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计算细胞总数及HE染色行分类计数。肺组织HE染色观察病理改变，免疫组织化学法检测STAT3、RORγt蛋白表达，流式细胞术检测肺组织Th17细胞比例。酶联免疫吸附试验法检测血清及BALF中IL-17、IL-6水平。结果:与正常对照组比较，嗜酸粒细胞哮喘组气道炎性细胞浸润显著，BALF细胞总数及中性粒细胞比例增高( P值均<0.01)，血清和BALF中IL-17、IL-6含量增加( P值均<0.05)，肺组织Th17细胞比例增多( P<0.01)；与嗜酸粒细胞哮喘组比较，中性粒细胞哮喘组气道炎性细胞增多，BALF细胞总数及中性粒细胞比例增高，嗜酸粒细胞比例减低( P值均<0.05)，血清和BALF中IL-17、IL-6含量及肺组织Th17细胞比例增多( P值均<0.05)，与正常对照组和嗜酸粒细胞哮喘组比较，中性粒细胞哮喘组肺组织STAT3、RORγt蛋白表达均增强( P值均<0.05)。 结论:STAT3-RORγt-IL-17信号通路参与哮喘不同炎症表型发病机制，但在中性粒细胞型哮喘的气道炎症中发挥更为重要的作用。

目的:评价布地奈德混合沙丁胺醇雾化吸入对单肺通气兔肺功能的影响。方法:健康雄性新西兰大白兔32只，5～6月龄，体重2.5～3.0 kg。采用随机数字表法分为4组( n＝8)：双肺通气组(TLV组)、单肺通气组(OLV组)、布地奈德雾化吸入组(B组)和布地奈德混合沙丁胺醇雾化吸入组(B＋S组)。TLV组双肺通气3 h，余3组左侧单肺通气2 h，随后双肺通气1 h，B组于单肺通气前雾化吸入布地奈德1 mg(生理盐水稀释至2 ml)，B＋S组于单肺通气前雾化吸入沙丁胺醇0.15 mg/kg＋布地奈德0.5 mg(生理盐水稀释至2 ml)。TLV组与OLV组均雾化吸入等量生理盐水。采用容量控制通气模式，于吸入前(T 0)、吸入后15 min(T 1)、吸入后1 h(T 2)和通气结束即刻(T 3)时采集股动脉血样行动脉血气分析，计算氧合指数，采集混合静脉血样测定相应指标，计算肺内分流率(Qs/Qt)，记录气道峰压(P peak)、气道平台压(P plat)、气道阻力(Raw)和肺顺应性(C dyn)。 结果:与TLV组比较，OLV组、B组和B＋S组T 2，3时乳酸浓度升高，T 1-3时氧合指数和C dyn降低，Qs/Qt、Raw、P plat和P peak升高 ( P<0.05)；与OLV组比较，B组和B＋S组T 2，3时乳酸浓度降低，T 1-3时氧合指数和C dyn升高，Qs/Qt、Raw、P plat和P peak降低( P<0.05)；与B组比较，B＋S组T 1-3时C dyn升高，Qs/Qt、Raw和P peak降低( P<0.05)。 结论:布地奈德混合沙丁胺醇雾化吸入可有效改善单肺通气兔肺功能。

目的:研究大鼠硬金属肺病（HMLD）进展不同阶段肺泡灌洗液（BALF）和血清中细胞因子的动态变化情况。方法:于2019年03月，将大鼠随机分为6组，每组8只，生理盐水组（C组）和硬质合金粉染毒组（HM组）各3组。HM组用肺部气管雾化滴注给药套装给予10 mg/只硬质合金粉。染毒4、8和12周取BALF及血清进行基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的酶联免疫吸附试验（ELISA）。结果:C组和HM组大鼠各染毒时间行为活动、饮食和皮毛无异常，两组大鼠体重差异无统计学意义（ P>0.05）。与C组比较，HM组大鼠BALF中MMP-1水平在染毒4、8和12周明显升高（P<0.05），TIMP-1水平在染毒8和12周明显升高（ P<0.05）。而两组间血清中MMP-1和TIMP-1水平在各染毒时间点差异无统计学意义（ P>0.05）。C组和HM组大鼠BALF和血清中TNF-α水平在各染毒时间比较，差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:MMP-1和TIMP-1的动态变化趋势为筛选HMLD诊断和监测潜在的生物标志物提供依据。

目的 基于鼻黏膜-海马神经免疫机制探讨醒鼻凝胶滴鼻剂对变应性鼻炎(AR)大鼠的影响.方法 选择21日龄(PND21)SPF级SD大鼠40只,采用随机数字表法分为正常组、模型组、中药组、西药组,每组10只.除正常组外,其余3组均采用卵清蛋白(OVA)致敏的方法构建AR动物模型.造模成功后,正常组和模型组均给予生理盐水滴鼻(50 μL/次),中药组给予醒鼻凝胶滴鼻剂滴鼻(50 μL/次),西药组给予布地奈德鼻喷雾剂滴鼻(20 μL/次),2次/d,连续治疗12 d.采用AR大鼠行为学评分标准对大鼠进行鼻炎行为学评分;采用Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆功能;采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清免疫球蛋白E(IgE)、转化生长因子-β1(TGF-β1)含量;采用苏木精-伊红染色法(HE)观察鼻黏膜组织病理变化及嗜酸性粒细胞(EOS)计数;采用免疫组化法检测海马组织非受体酪氨酸激酶Fyn、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、神经肽Y(NPY)表达水平;采用实时聚合酶链式反应(RT-PCR)检测海马组织Fyn、SP、VIP、NPY mRNA转录水平.结果 ① 鼻炎行为学评分:与正常组比较,模型组、中药组、西药组治疗前鼻炎行为学评分均明显更高(P＜0.05);与模型组比较,中药组和西药组治疗后鼻炎行为学评分均明显更低(P＜0.05).与治疗前比较,中药组和模型组治疗后鼻炎行为学评分均明显更低(P＜0.05).② 学习记忆功能:与正常组比较,模型组平台潜伏期、游泳总路程均明显更长(P＜0.05),穿越平台次数、目标象限停留时间均明显更低(P＜0.05);与模型组比较,中药组和西药组治疗后平台潜伏期和游泳总路程均明显更短(P＜0.05),穿越平台次数、目标象限停留时间均明显更高(P＜0.05).③ 血清IgE、TGF-β1含量:与正常组比较,模型组血清IgE、TGF-β1含量均明显更高(P＜0.05);与模型组比较,中药组和西药组治疗后血清IgE、TGF-β1含量均明显更低(P＜0.05).④ 鼻黏膜组织病理变化及EOS计数:模型组鼻黏膜水肿,上皮细胞排列紊乱;中药组和西药组治疗后鼻黏膜水肿明显减轻,上皮细胞结构较完整.与正常组比较,模型组、中药组、西药组治疗后大鼠鼻黏膜EOS计数均明显增多(P＜0.05);与模型组比较,中药组和西药组治疗后鼻黏膜EOS计数均明显减少(P＜0.05).⑤ 海马组织Fyn、SP、VIP、NPY mRNA转录水平和蛋白表达水平:与正常组比较,模型组海马组织Fyn、SP、VIP mRNA转录水平和Fyn、SP、VIP平均OD值均明显升高(P＜0.05),NPY mRNA转录水平和NPY平均OD值均明显降低(P＜0.05).与模型组比较,中药组和西药组治疗后海马组织Fyn、SP、VIP mRNA转录水平和Fyn、SP、VIP平均OD值均明显降低(P＜0.05),NPY mRNA转录水平和NPY平均OD值均明显升高(P＜0.05).结论 醒鼻凝胶滴鼻剂可改善AR大鼠鼻炎行为学和学习记忆功能,可能与通过Fyn信号通路调节鼻黏膜-海马神经免疫机制有关.

目的 观察一种双链季铵盐消毒液在-40℃低温环境中的消毒效果,为低温消毒应用提供参考.方法 采用载体定量杀菌试验和现场消毒试验方法,对该双链季铵盐消毒液在低温条件下环境表面消毒效果进行观察.结果 该双链季铵盐消毒液原液含量为37 g/L,pH值为5.03.该消毒液在-40℃下放置>8 h后无析出,无结晶.在-40℃低温冷库中,原液喷洒作用30 min,对织物样片上大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的杀灭对数值均>3.00;原液按10 mL/m3喷雾作用60 min,对玻璃表面的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌杀灭对数值均>3.00.该消毒液原液对新西兰兔完整皮肤无刺激性,对小鼠急性经口毒性试验为无毒级,对小鼠无致微核作用.结论 该双链季铵盐消毒液在-40℃低温下可杀灭环境表面大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌,属于实际无毒物质.

目的 制备盐酸伊伐布雷定缓释微丸,考察其载药率、体外释放度及其在大鼠体内的药动学特征.方法 采用流化床包衣法制备盐酸伊伐布雷定缓释微丸,以载药率为评价指标,通过正交试验设计优化载药层工艺参数;以体外释放度为评价指标,通过响应面实验设计优化缓释层处方.健康雄性SD大鼠随机分成2 组:盐酸伊伐布雷定缓释微丸组和盐酸伊伐布雷定片组,单次给药后,测定不同时间点的血药浓度,运用Das2.0 软件计算药动学参数.结果 载药层处方:盐酸伊伐布雷定原料药0.75 g、羟丙基甲基纤维素1.80 g、水40 g,流化床工艺参数:进风量 13 m3·h-1、进风温度50℃、雾化压力1.2 bar、蠕动泵流速0.9 mL·min-1;缓释层处方:乙基纤维素7.8%、聚乙二醇4000 9.1%、柠檬酸三乙酯20%.平均载药率92.4%,12 h累计释放度为92.37%;盐酸伊伐布雷定缓释微丸较普通片剂的相对生物利用度为135.59%.结论 盐酸伊伐布雷定缓释微丸制备工艺重现性良好,体内外缓释效果明显,生物利用度显著提高,为盐酸伊伐布雷定缓释制剂的研究提供了基础.