睾丸具有分泌雄激素和产生精子两大功能,是男性重要的生殖器官之一.雄激素及生精功能是睾丸功能的评价要素,雄激素缺乏或生精功能减退既是睾丸衰老的标志性表现,也是睾丸衰老的"产物".为更好研究阐释睾丸衰老与全身健康的关系,本文以雄激素缺乏与各系统疾病关系为主线梳理相关文献,认为睾丸衰老通过不同渠道影响心血管系统、神经系统的健康及影响着代谢性疾病、骨科疾病、前列腺癌、肾病、消化性溃疡等疾病的发生发展,提示我们要关注男性生殖健康及其对全身健康的影响,为临床诊疗提供新的思考和借鉴.

目的 观察艾灸是否通过影响氧化应激,维护生殖系统中睾酮之水平,以期为深入研究艾灸延缓生殖衰老机制问题奠定基础.方法 以自然衰老小鼠(18月龄)为衰老模型,随机分为衰老组、艾灸组;另设青年组(3月龄).艾灸组进行麦粒灸双侧足三里穴,艾绒制成麦粒大小的艾炷,置于涂抹凡士林的穴位上,线香引燃,每穴5壮,衰老组只在相同部位做抓取固定动作,不做艾灸,麦粒灸每干预5次间隔2 d.采用HE染色、衰老相关β半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色观察麦粒灸足三里穴干预自然衰老小鼠的效应,并应用ELISA法测量血清睾酮(testosterone,T)含量,WB法测量p53、p21、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)表达量.结果 HE染色结果显示麦粒灸足三里穴可改善自然衰老小鼠睾丸组织形态学,SA-β-gal染色结果显示麦粒灸足三里穴可改善自然衰老小鼠睾丸衰老程度.与青年组比较,衰老组p53、p21表达均显著升高,表明造模成功,而经过麦粒灸足三里穴干预后,均显著降低;衰老组血清T显著降低,而艾灸组显著上升;在氧化与抗氧化指标方面,衰老组MDA明显上升,而艾灸组MDA水平下降,衰老组MnSOD、GPX4都下降,而艾灸组显著升高.结论 麦粒灸足三里穴可以提高自然衰老模型小鼠的血清睾酮水平,而这种作用的发挥与氧化应激密切相关,艾灸通过抑制活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生与增强抗氧化能力,进而阻碍氧化应激,维护了睾丸间质细胞的结构与功能,提高了睾酮水平,从而延缓了睾丸间质细胞的衰老.

目的:探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）移植对氧化损伤衰老小鼠睾丸功能的影响及分子机制。方法:共纳入18只6~8周SPF级C57BL/C雄性小鼠，完全随机分组法分为3组，对照组：小鼠注射等量生理盐水；模型组：颈背部皮下注射D-半乳糖连续9周，造模第4周末，每只小鼠尾静脉注射生理盐水；hUCMSCs组：颈背部皮下注射D-半乳糖连续9周，造模第4周末，每只小鼠尾静脉注射hUCMSCs。9周后，称取小鼠体质量和睾丸重量，计算睾丸指数，酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法检测小鼠血清睾酮水平、睾丸组织丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量。肉眼观察睾丸外观，苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察睾丸组织病理学变化，实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting分别检测核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）信号转导相关基因和蛋白表达。结果:模型组小鼠睾丸指数［（0.64±0.05）%］较对照组［（0.81±0.13）%， P=0.006］降低，睾丸体积缩小，生精小管完整性破坏，生精细胞和精子减少，间质稀疏；血清睾水平［（4.10±0.67）μg/L］、睾丸组织SOD活性［（48.87±6.40）U/mg Prot］较对照组［（5.71±0.81）μg/L， P=0.002；（78.53±9.70）U/mg Prot， P=0.001］均降低，而MDA含量［（1.11±0.19）nmol/mg Prot］较对照组［（0.77±0.07）nmol/mg Prot， P=0.001］增加。 Keap1 mRNA和蛋白表达量较对照组均增高（ P=0.006， P=0.043）， Nrf2、 SOD和 NQO1 mRNA表达量较对照组减少（ P=0.002， P<0.001， P=0.001），Nrf2、HO-1蛋白表达量较对照组均明显降低（ P=0.011， P=0.021）。与模型组比较，hUCMSCs组小鼠睾丸指数［（0.79±0.03）%， P=0.010］增高；睾丸组织结构较为清晰、完整，生精小管各级生精细胞和精子及间质细胞较丰富；血清睾酮水平［（5.24±0.21）μg/L， P=0.028］及睾丸组织SOD活性［（79.47±14.32）U/mg Prot， P=0.001］增高，MDA含量［（0.77±0.08）nmol/mg Prot， P=0.001］降低； Nrf2、 SOD和 NQO1 mRNA表达量均增高（ P=0.024， P=0.037， P=0.005）， Keap1 mRNA表达量减少（ P=0.044），Nrf2、HO-1蛋白表达量均增高（ P=0.009， P=0.012），Keap1蛋白表达量降低（ P=0.035）。hUCMSCs组小鼠睾丸指数、血清睾酮、SOD活性及MDA含量都与对照组差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:hUCMSCs明显改善氧化损伤所致衰老小鼠睾丸结构和功能损伤，其作用机制与上调Nrf2信号转导及其相关下游抗氧化活性SOD、HO-1蛋白表达，减少Keap1介导的Nrf2降解有关。

目的:探讨补充维生素D对D-半乳糖诱导的衰老大鼠睾丸功能的作用及可能机制。方法:利用皮下注射D-半乳糖诱导衰老大鼠模型，将实验动物随机分为6组：衰老(DG)组、衰老+低剂量维生素D补充(LD)组、衰老+高剂量维生素D补充(HD)组、正常对照组(NC)、正常+低剂量维生素D补充(LN)组、正常+高剂量维生素D补充(HN)组。测定各组大鼠体重、睾丸重量、血清睾酮浓度、精子质量。利用光镜检测睾丸形态学变化，利用分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平，利用Western blot检测睾丸维生素D受体(VDR)、Nrf2、GCLC及SOD2的表达水平。`结果:与NC组相比，DG组大鼠睾丸重量、血清睾酮水平、SOD活性、Nrf2、GCLC、SOD2表达水平显著降低，而MDA水平显著升高。经维生素D补充后，HD及LD组大鼠睾丸重量、睾酮水平及SOD活性显著升高，而MDA水平较前显著下降；Nrf2、GCLC、SOD2及VDR表达水平显著升高。结论:维生素D可能通过激活Nrf2-ARE信号通路提高睾丸抗氧化应激能力，从而改善D-半乳糖诱导的衰老大鼠睾丸功能。

目的 探讨何首乌饮能否通过DNA甲基转移酶 1(DNMT1)延缓大鼠睾丸间质细胞衰老.方法 40只Wistar雄性大鼠随机分为 4 组,每组 10 只.免疫组织化学检测各组大鼠睾丸组织中DNMT1 表达水平.ELISA实验检测各组大鼠血清中的睾酮含量.通过自由基氧化损伤建立大鼠睾丸间质细胞衰老模型.在睾丸间质细胞中使用慢病毒敲低DNMT1,通过β-半乳糖苷酶(β-GAL)染色、免疫荧光染色和ELISA实验检测细胞衰老状态和细胞上清液中睾酮和睾酮合成关键酶 3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、细胞色素P450 家族成员 11A1(CYP11A1)的含量.结果 与青年对照组相比,自然衰老组大鼠睾丸组织中P16 蛋白表达和β-GAL阳性率明显升高,DNMT1 表达和血清睾酮含量降低(P＜0.05);何首乌饮干预能够降低衰老大鼠睾丸组织P16 蛋白表达和β-GAL阳性率,提高DNMT1 表达和血清中的睾酮含量(P＜0.05).衰老的睾丸间质细胞中呈现相同的趋势.在睾丸间质细胞中敲低DNMT1 后,β-GAL阳性率和 P16 蛋白表达明显增加,睾丸间质细胞的睾酮分泌量和睾酮合成关键酶 3β-HSD、CYP11A1 含量明显减少,与正常组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).加入何首乌饮后,上述现象得到改善.结论 何首乌饮可以通过DNMT1延缓大鼠睾丸间质细胞衰老.

目的:探讨黄精对自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退的保护作用及机制.方法:17 月龄SPF级雄性SD大鼠随机分为衰老模型组及黄精低(0.125 g/kg)、高(0.5 g/kg)剂量组,衰老模型组和黄精给药组分别给予普通饲料和含药饲料饲养 5 月;以 5 月龄雄性SD大鼠为正常对照组.大鼠称量质量后处死,取出睾丸和附睾并称量质量,计算其脏器指数;采用伊红染色检测附睾中精子活率,血球计数板光镜下计数精子数量并计算精子浓度;HE染色观察睾丸组织形态变化,统计分析生精上皮厚度、生精小管直径及各类生精细胞数目;TUNEL染色检测生精细胞凋亡情况,并计算生精细胞凋亡指数;Western Blot检测睾丸组织中凋亡相关蛋白Caspase-3、cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2及Nrf2 通路相关蛋白Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白表达;生化试剂盒检测大鼠睾丸组织中 Caspase-3、SOD、CAT、GSH-Px、MDA水平;免疫荧光法检测Nrf2 在生精细胞中的表达和定位.结果:与模型组比较,黄精可显著升高衰老大鼠睾丸质量及其指数、精子活率、精子浓度.组织病理学检查结果显示,黄精能明显改善衰老大鼠睾丸组织形态,显著增加生精上皮厚度及生精细胞数目,对生精小管直径无明显影响.TUNEL结果显示,黄精可显著减少衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡,降低凋亡指数.Western Blot及免疫荧光结果显示,黄精可显著促进Nrf2 核移位,显著上调Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白表达,显著下调Bax、cleaved Caspase-3 蛋白表达及Bax/Bcl-2、cleaved Caspase-3/Caspase-3比值.生化试剂盒检测结果显示,黄精可显著升高衰老大鼠睾丸组织中SOD、CAT、GSH-Px水平,降低Caspase-3、MDA水平.结论:黄精可通过激活Nrf2 信号通路,提高睾丸组织抗氧化能力,进而抑制生精细胞凋亡,减轻自然衰老大鼠睾丸生精功能衰退.

目的 评价杞蛎还少方对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)致亚急性衰老小鼠性激素水平紊乱与睾丸组织氧化损伤的改善作用与机制研究.方法 将105 只雄性小鼠随机分成正常组,模型组,杞蛎还少方低、中、高剂量组,维生素E组和金匮肾气丸组,通过连续腹腔注射D-gal建立亚急性衰老模型小鼠,同时各组分别给予杞蛎还少方提取物、维生素E和金匮肾气丸.通过HE染色法检测睾丸组织病理损伤情况,ELISA法检测小鼠血清中相关性激素水平,试剂盒检测氧化应激因子表达,TUNEL法检测睾丸细胞凋亡,Western blot法检测小鼠睾丸组织中氧化应激与凋亡相关蛋白表达.结果 相较于衰老模型小鼠,杞蛎还少方各剂量组均能改善睾丸组织病理损伤;提高血清T、E2、GnRH含量,降低LH、FSH含量(P＜0.01);增强血清与睾丸组织中SOD活力(P＜0.01)、GSH含量(P＜0.01),降低MDA含量(P＜0.01).杞蛎还少方中剂量组能够显著抑制睾丸细胞凋亡(P＜0.01),提高模型组小鼠睾丸组织Nrf2、HO-1 蛋白表达及Bcl-2/Bax比值(P＜0.05),下调Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-Caspase-9/Caspase-9 凋亡蛋白表达水平(P＜0.05).结论 杞蛎还少方可有效改善衰老小鼠的性激素紊乱,保护睾丸组织,其作用机制可能与抑制睾丸组织慢性氧化应激诱导的细胞凋亡有关.研究结果将为枸杞子及其组方临床应用与抗衰老功能性产品开发提供借鉴和奠定基础.

目的:观察加减地黄饮子对衰老小鼠睾丸组织沉默信息转录调节基因 3(SIRT3)表达的影响.方法:选取 2 月龄雄性ICR小鼠作为青年组,20 月龄小鼠作为老年组、维生素E组和加减地黄饮子组.青年组、老年组以生理盐水灌胃,维生素E组、加减地黄饮子组以对应药物灌胃.干预 60d后计算睾丸器官指数,观测睾丸组织病理学变化,检测各组小鼠血清睾酮和肝肾功能,检测睾丸组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,以RT-PCR和Western-blot法检测SIRT3 基因的mRNA和蛋白表达.结果:与老年组比较,加减地黄饮子组小鼠睾丸器官指数无差异(P＞0.05);睾丸组织结构清晰稳定,精原细胞、精母细胞、支持细胞增多;血清睾酮水平升高,肝肾功指标正常,SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平降低,SIRT3 基因mRNA及其蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:加减地黄饮子可能影响SIRT3 基因表达,减少小鼠睾丸氧化应激损伤而延缓睾丸衰老.

阻塞性呼吸睡眠暂停低通气综合征(OSAHS)是以慢性间歇性低氧伴高碳酸血症以及睡眠片段化为特征,对全身系统产生影响的睡眠呼吸疾病.睾酮在维持其他组织器官正常的生理活动及人体精神活动中具有不可或缺的作用.OSAHS中的间歇性低氧不仅可以通过使神经肽RF-酰胺相关肽-3表达升高、模仿衰老、促进炎症因子表达、引起胰岛素抵抗和瘦素抵抗等影响下丘脑-垂体-性腺对睾酮合成和分泌的调节,也可通过促进炎症因子表达、炎症细胞聚集、代谢紊乱等直接使睾丸间质细胞生成睾酮减少.OSAHS中的睡眠片段化可通过使肾上腺轴功能、褪黑素分泌节律异常使血清睾酮水平下降,此外,OSAHS引发的肠道菌群失调、铁调素浓度异常也可导致睾酮水平降低.

肠道微生物数量庞大,对人体健康具有重要作用.肠道微生物基因数比人体自身基因多 150 倍,其中99. 1％源于肠道菌群,是人体的"第二基因"和代谢"器官" ,有学者预测其代谢能力的重要性甚至超过宿主本身[1-3] . 雄激素主要包括睾丸分泌的睾酮及少部分由肾上腺分泌的睾酮前体物质,如脱氢表雄酮与硫酸脱氢表雄酮,其作用贯穿男性生长、发育与衰老全生命周期,与男性疾病的发生发展密切相关[4] .