目的:探讨细胞黏附分子CHL1在高糖高脂诱导的胰岛素抵抗细胞和小鼠模型中的作用及其机制。方法:将前脂肪细胞系3T3-L1通过完全随机法分为对照组和CHL1过表达组，分别转染空载体和CHL1过表达载体，随后通过胰岛素诱导分化为成熟脂肪细胞，再通过高糖高脂诱导胰岛素抵抗。葡萄糖消耗实验检测成熟脂肪细胞胰岛素抵抗效应。Western blot法检测两组细胞CHL1和葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的表达水平以及丝氨酸/苏氨酸激酶（AKT）磷酸化水平，实时定量PCR（RT-PCR）法检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-6的 mRNA表达水平。然后，选取6~8周龄的C57BL/6雄性小鼠24只，体重20~25 g，通过完全随机法分为常规饲料组（常规组）、高脂饲料组（高脂组）、过表达对照+高脂组和CHL1过表达+高脂组，每组6只。通过高脂饲料饲喂小鼠构建胰岛素抵抗小鼠模型，通过尾静脉注射慢病毒过表达CHL1。各组小鼠饲养4个月后称重，然后处死收集附睾白色脂肪并称重，苏木素-伊红染色观察小鼠附睾白色脂肪病理情况，免疫组织化学染色观察其CHL1表达情况，RT-PCR法检测小鼠附睾白色脂肪组织中CHL1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达水平。结果:（1）细胞实验结果：Western blot结果示CHL1过表达组细胞中CHL1蛋白表达高于对照组（ P<0.01）；葡萄糖消耗实验结果示，CHL1过表达组细胞葡萄糖剩余量低于对照组（ P<0.05）；RT-qPCR结果示，CHL1过表达组细胞TNF-α和IL-6 mRNA表达水平均低于对照组（ P均<0.01）；Western blot结果示，CHL1过表达组细胞GLUT4和p-AKT/AKT蛋白表达均高于对照组（ P均<0.01）。（2）动物实验结果：饲养4个月后高脂组和过表达对照+高脂组小鼠体重和附睾白色脂肪质量均高于常规组（ P均<0.01），CHL1过表达+高脂组则均低于过表达对照+高脂组（ P均<0.01）；苏木素-伊红染色结果示，高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪细胞体积大于常规组，CHL1过表达+高脂组则小于过表达对照+高脂组（ P均<0.01）；RT-qPCR结果示，高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪组织中IL-6和TNF-α mRNA表达水平均高于常规组（ P均<0.01），CHL1过表达+高脂组则均低于过表达对照+高脂组（ P均<0.05）；免疫组织化学染色半定量结果示，高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪组织中CHL1蛋白表达水平均低于常规组（以常规组的表达量为1，高脂组、过表达对照+高脂组的表达量分别为0.344、0.427），CHL1过表达+高脂组（表达量1.465）则高于过表达对照+高脂组；RT-qPCR结果示，高脂组和过表达对照+高脂组小鼠附睾白色脂肪组织中CHL1 mRNA表达水平均低于常规组（ P均<0.01），CHL1过表达+高脂组则高于过表达对照+高脂组（ P<0.01）。 结论:CHL1可改善高糖高脂诱导的细胞和小鼠模型的胰岛素抵抗，其机制可能与抑制AKT激活和相关炎症反应有关。

目的:探讨神经细胞黏附分子(neural cell adhesion molecule，NCAM)衍生肽P2对缺血性脑卒中大鼠神经功能损伤的修复作用及机制。方法:提取并培养原代皮质神经元，氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation，OGD)造模后采用CCK-8法观察不同浓度P2对OGD条件下皮质神经元活性的影响，Western blot检测凋亡相关蛋白及细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal regulated kinase 1/2，Erk1/2)的表达。选取清洁级雄性SD大鼠进行动物实验，采用大脑中动脉线栓法(middle cerebral artery occlusion，MCAO)建立大鼠脑卒中缺血/再灌注损伤动物模型，造模成功的大鼠按照随机数字表法分为假手术组、MCAO组和MCAO+P2组，每组12只。术后MCAO+P2组大鼠每日一次皮下注射1 mg/kg P2，持续至术后14 d，其余两组大鼠均皮下注射等体积0.9%氯化钠溶液。平衡木实验观察大鼠运动功能损伤及恢复情况。免疫荧光染色检测大鼠脑梗死灶周边的神经元凋亡比率，Western blot检测大鼠脑梗死灶周边脑组织内Erk1/2蛋白的表达。采用SPSS 22. 0进行统计分析，平衡木实验数据采用重复测量方差分析，其他实验数据以单因素方差分析进行检验。结果:与OGD组相比，0.5，1.0和2.0 μmol/L的P2均可以提高OGD条件下神经元细胞活性，其中1 μmol/L的P2效果最好(2.436±0.284，1.551±0.410， P<0.05)。Western blot结果显示，加入1 μmol/L P2后凋亡相关蛋白bax [(76.120±3.232)%，(88.965±5.208)%， P<0.05]、cleaved caspase-3[(76.736±4.306)%，(97.781±8.111)%， P<0.05]和cleaved caspase-9[(88.833±6.581)%，(104.962±4.788)%， P<0.05]表达均低于OGD组，bcl-2[(56.146±3.882)%，(43.170±6.945)%， P<0.05]以及磷酸化Erk1/2蛋白[(73.583±8.557)%，(55.219±4.615)%， P<0.05]表达均高于OGD组。与MCAO组相比，P2干预后第14天时大鼠瘫痪侧后肢的滑脱率低[(23.438±11.540)%，(41.733±13.631)%， P<0.05]，病灶周边神经元凋亡比率低[(13.144±6.485)%，(26. 699±6. 402)%， P<0.05]，大鼠梗死灶周边脑组织内磷酸化Erk1/2蛋白表达高[(74.062±7.458)%，(53. 327±7.093)%， P<0.05]。 结论:低浓度NCAM衍生肽P2可对OGD条件下的神经元以及缺血性脑卒中大鼠发挥神经保护作用，其作用机制可能与Erk信号通路的活化有关。

L1细胞黏附分子(L1CAM)是一种细胞间黏附分子,由一系列蛋白分子以线性结构连接组成,在调控神经细胞运动、生长等方面发挥重要作用.研究表明,肿瘤细胞中表达L1CAM可促进细胞增殖、迁移、侵袭与转移,从而影响肿瘤患者的预后.近期有文献报道通过免疫组化等方法检测L1CAM在早期子宫内膜癌(EC)组织中的表达情况,联合临床数据,分析了L1CAM对EC患者预后的不良影响.本文通过阐述L1CAM在肿瘤细胞转移中的相关机制,尤其对其和上皮间质转化(EMT)机制关系的相关研究,概述其对EC患者预后影响的相关研究结果,为进一步探讨EC的不良预后因素从而制定更精准的后续治疗方案提供依据.

目的 定量检测原发性开角型青光眼(POAG)和年龄相关性白内障患者房水中多种细胞因子的质量浓度.方法 采用横断面研究设计,选取2016年6-12月就诊于第三军医大学大坪医院眼科医院的POAG患者24例24眼为试验组,年龄相关性白内障患者22例22眼为对照组.术前所有患者进行眼压和眼轴长度的测量.在小梁切除术或白内障超声乳化术中,于角膜缘内1 mm行前房穿刺,收集50 ～100μl房水样本.使用悬浮液相芯片检测2个组房水中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、可溶性神经细胞黏附分子(sNCAM)和可溶性血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)的质量浓度并进行比较,进行细胞因子间的相关性分析.结果 试验组患者房水中MCP-1、sVCAM-1、sNCAM质量浓度均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P=0.017、0.007、0.001);试验组中bFGF-2质量浓度显著低于对照组,差异有统计学意义(P=0.027);2个组房水中BDNF和sICAM-1的质量浓度比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).细胞因子间相关性分析中,MCP-1、sICAM-1、sNCAM和sVCAM-1两两相关(均P＜0.005),其他因子不具有相关性(P＞0.005). 结论 MCP-1、sVCAM-1和sNCAM在POAG患者房水中水平升高,提示POAG是一种神经退行性疾病,且在发病过程中有神经炎症发生.

目的 探讨细胞黏附样分子L1(CALL)在食管鳞状细胞癌发生、发展中的作用.方法 纳入2007年7月至2010年12月行食管癌根治术的100例食管鳞状细胞癌患者,获取其食管鳞状细胞癌组织和对应的癌旁正常组织.采用组织微阵列技术,应用免疫组织化学ABC法检测组织中CALL的表达情况.建立CALL过表达的食管癌细胞株,采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验验证CALL对细胞迁移、侵袭的影响,应用纤丝状肌动蛋白(F-actin)染色分析CALL对肌动蛋白微丝的影响.统计学方法采用卡方检验、Fisher确切概率法、多因素分析、t检验.结果 CALL在食管鳞状细胞癌组织中的正常表达率为56％(56/100),低于癌旁正常组织的95％(95/100),差异有统计学意义(x2=41.114,P＜0.01).CALL蛋白质表达在不同分化程度、病理T分期、淋巴结转移、TNM分期的食管鳞状细胞癌患者中差异均有统计学意义(x2=13.702、5.317、21.453,Fisher确切概率法;P均＜0.05).CALL蛋白质表达下调的食管鳞状细胞癌患者5年疾病相关生存率为0(0/49),低于CALL蛋白质正常表达者的25.5％(13/51),差异有统计学意义(x2=43.338,P＜0.01);CALL蛋白质表达下调组中位生存期为1 7个月,正常表达组为3 8个月.CALL蛋白质表达是疾病特异性生存率的独立危险因素[风险比(HR) =0.353,95％CI 0.188～0.666,P=0.001].细胞划痕实验显示,划痕后24 h CALl过表达组CALL k30细胞较对照组Vec k30细胞迁移能力弱.Transwell侵袭实验显示,CALL k30细胞附着于膜下表面的迁移细胞数为44.000±13.748,少于对照组Vec k30细胞的154.333±25.007,差异有统计学意义(t=5.136,P=0.036).F actin染色结果显示,CALL-k30细胞中肌动蛋白微丝数量为234.667±65.1 1 8,低于Vec-k30细胞中的597.000±119.929,差异有统计学意义(t=4.707,P=0.042).结论 CALL通过抑制F-actin微丝形成减弱食管癌细胞的迁移和侵袭能力,其表达异常可能在食管鳞状细胞癌的发生、发展和预后中有重要作用.

目的:探讨皮肤结外NK/T细胞淋巴瘤(cutaneous extranodal NK/T cell lymphoma,CNKTL)的临床特点,提高对CNKTL诊治和预后的认识.方法:回顾性分析5例CNKTL患者的临床资料,并分析其临床特点.结果:5例患者均以皮肤病变就诊,起病时多累及四肢,下肢多见;其中3例以多发性丘疹和皮下结节为主要表现,2例以单一部位肿块和溃疡为主要表现.经组织病理诊断为CNKTL,免疫病理:神经细胞黏附分子(CD56)阳性、穿孔素(pefforin)阳性、T细胞胞质内抗原(TIA)-1阳性、颗粒酶(Gran)B多数阳性.Ann Arbor分期:4例为Ⅳ期、1例为Ⅰ期;2例伴有高热,4例并发噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS).5例患者均采用联合化疗,3例无效、2例达完全缓解(complete remission,CR),其中1例复发,l例行自体干细胞移植但死于Epstein Barr病毒(EBV)相关的HPS,最终5例患者全部死亡,病程3～27个月.结论:CNKTL以多部位侵犯为主,易并发HPS.

目的 分析神经细胞黏附分子(CD56)阳性的初治原发急性髓系白血病(AML)患者的临床特征.方法 回顾性分析2015年1月至2016年12月该院血液科144例初治原发A M L住院患者的临床资料,其中男76例,女68例,根据患者免疫分型是否伴有CD56表达,分为CD56+组(n=48)和CD56-组(n=96).分别采用t检验、秩和检验或 χ2检验比较各组临床特征的差异.结果 CD56+组出现发热症状、AML-M2b亚型、伴有AML-ETO融合基因和IKZF1基因突变患者比例高于CD56-组(χ2=4.064、11.359、11.359、4.781,P<0.05);CD56+组出现乏力症状、出血、AML-M3亚型、伴有PML-RARA融合基因和DNMT3A基因突变患者比例低于CD56-组(χ2=4.704、5.262、6.272、4.013、4.442,P<0.05).结论 CD56+患者多为W HO急性髓系白血病分型中伴有重现性遗传学异常的M2b型,常见发热症状,易伴IKZF1基因突变;而少见WHO急性髓系白血病分型中伴有重现性遗传学异常的M3型、乏力和出血症状,少伴DNM T3A基因突变.

分析5例宫颈混合性腺癌-神经内分泌癌患者的临床特点、病理形态和免疫表型.5例患者发病年龄38～82(平均54)岁,因不规则阴道出血或接触性出血入院.病理形态均表现为小细胞癌合并有多少不等的腺癌成分.免疫组织化学染色结果显示:5例小细胞癌区均表达广谱细胞角蛋白(cytokeratin pan,CK-P)、突触素(synaptophysin,Syn)、神经细胞黏附分子56(neuronal cell adhesion molecule,CD56),2例表达嗜铬素蛋白(chromogranin,CgA),2例表达甲状腺转录因子1(thyroid transcription factor-1,TTF-l).5例腺癌区均表达CK-P、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA),神经内分泌标志Syn,CgA,CD56均阴性.5例患者治疗后随访3～36个月,其中3例死亡,2例存活.宫颈混合性腺癌-神经内分泌癌是罕见的宫颈恶性肿瘤,预后差.确诊需要结合组织形态学和免疫组织化学标志.

目的 分析大剂量辛伐他汀联合阿替普酶静脉溶栓对急性脑梗死(ACI)患者神经功能及血清血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的影响.方法 选取收治的111例ACI患者,采取简单随机化法均分为3组,对照组给予阿替普酶静脉溶栓治疗,小剂量组给予20 mg辛伐他汀联合阿替普酶静脉溶栓,大剂量组给予40 mg辛伐他汀联合阿替普酶静脉溶辁,比较3组治疗6周后的总有效率、美国国立卫生研究院卒中量表评分(NIHSS)、日常生活能力量表评分(ADL)、Fas/Fas蛋白配体(FasL)信号通路变化[可溶血Fas(sFas)、可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)和可溶血Fas配体(sFasL)]、NSE、泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、中枢神经特异性蛋白(S-100β)、P-选择素、VCAM-1水平及不良反应发生情况.结果 大剂量组(94.59％)和小剂量组(91.89％)治疗6周后的总有效率均高于对照组(67.57％)(P＜0.05),但大、小剂量组间比较差异无统计学意义;大、小剂量组治疗6周后NIHSS评分均低于时照组,ADL评分均高于对照组(P＜0.05);大剂量组治疗6周后NIHSS和ADL评分高于小剂量组(P＜0.05);大、小剂量组治疗6周后sFas、sTRAIL和sFasL均低于对照组(P＜0.05);大剂量组治疗6周后sFas、sTRAIL和sFasL均低于小剂量组(P＜0.05);大、小剂量组治疗6周后NSE、UCH-L1、MBP、GFAP和S-100β均低于对照组(P＜0.05);大剂量组治疗6周后NSE、UCH-L1、MBP、GFAP和S-100β均低于小剂量组(P＜0.05);大、小剂量组治疗6周后P-选择素和VCAM-1均低于对照组(P＜0.05);大剂量组治疗6周后p-选择素和VCAM-1均低于小剂量组(P＜0.05);3组均无明显不良反应发生.结论 大剂量辛伐他汀联合阿替普酶静脉溶栓治疗ACI,能促进患者神经功能恢复,改善患者日常生活能力,减少对神经细胞的损伤,抑制动脉粥样硬化,安全可靠,其机制可能与抑制Fas/FasL信号通路有关.

目的 检测冠心病患者的神经细胞黏附分子-1(NCAM-1)、氨基末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)和肌钙蛋白I(cTnI)浓度,并探讨其临床诊断价值.方法 将惠州市第六人民医院2019年1～6月诊治的67例冠心病患者纳入冠心病组,同期年龄和性别匹配的健康志愿者70例作为对照组.冠心病组又分为急性心肌梗死(AMI)组、不稳定型心绞痛(UAP)组和稳定型心绞痛(SAP)组.所有受检者采用ELISA法检测血清NCAM-1浓度,免疫荧光法检测NT-proBNP和cTnI浓度.采用受试者工作曲线(ROC)分析NCAM-1、NT-proBNP和cTnI对冠心病的诊断价值.结果 冠心病组患者的血清NCAM-1浓度明显低于对照组,而血清NT-pro BNP和cTnI浓度明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);AMI组、UAP组和SAP组患者的血清NCAM-1浓度依次升高,而NT-proBNP和cTnI浓度依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05).患者的血清NCAM-1浓度随心功能分级增高而降低,而血清NT-proBNP和cTnI浓度随心功能分级增高而增高,差异均有统计学意义(P<0.05),当截断值为133.43 ng/mL时,血清NCAM-1浓度诊断冠心病的ROC曲线下面积(AUC)为0.953(95％CI 0.919～0.977,P=0.0008),敏感性和特异性分别为89.9％和97.5％;当截断值为321.00 ng/L时,血清NT-proBNP诊断冠心病的AUC为0.941(95％CI 0.932～0.960,P=0.0017),敏感性和特异性分别为85.1％和97.0％;当截断值为0.205μg/L时,血清cTnI诊断冠心病的AUC为0.855(95％CI 0.792～0.919,P=0.0013),敏感性和特异性分别为65.5％和97.5％.结论 血清NCAM-1、NT-proBNP和cTnI均可作为冠心病的诊断指标,NCAM-1对冠心病诊断价值高,其可能为冠心病潜在血清标志物.