目的:探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKII）对离体心肌缺血-再灌注损伤的影响及对细胞凋亡与自噬的作用。方法:选取心电图正常的SPF级雌性SD大鼠（体重250~280 g），Langendorff灌流系统建立成功的离体心肌缺血-再灌注损伤模型共70只，随机分为五组（ n = 14），心脏缺血-再灌注组（IR组）、CaMKII磷酸化激活剂组（IR+异丙肾上腺素组）、CaMKII磷酸化抑制剂类似物组（IR+KN92组）、CaMKII磷酸化抑制剂组（IR+KN93组）、空白对照组（Control组）。采用再灌注末，左心室功能的变化、心肌细胞形态的变化评价心肌损伤程度；原位末端标记(TUNEL)法来检测细胞凋亡指数；蛋白印迹法（Western blot）检测CaMKII、受磷蛋白（PLN）的磷酸化水平（p-CaMKII/CaMKII、p-PLN/PLN）、以及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3和自噬标记蛋白LC3II/LC3I、Beclin-1、P62的表达水平。 结果:与Control组相比，IR组的大鼠左心室功能降低,心肌纤维形态排列紊乱，凋亡指数增高，p-CaMKII/CaMKII、p-PLN/PLN、Cleaved Caspase-3、Bax/Bcl-2、LC3II/LC3I、Beclin-1表达增多，P62表达减少，凋亡和自噬水平明显升高（均 P < 0.05）。与IR组相比，IR+KN93组的大鼠心肌损伤有明显改善，凋亡指数减少，p-CaMKII/CaMKII、p-PLN/PLN、Cleaved Caspase-3、Bax /Bcl-2、LC3II/LC3I、Beclin-1表达减少，P62表达增多，凋亡和自噬水平明显降低（均 P < 0.05）。IR+异丙肾上腺素组与IR组相比，进一步降低大鼠左心室功能，同时凋亡和自噬水平进一步升高（ P < 0.05），而IR+KN92组大鼠与IR组相比，心肌各指标比较差异无统计学意义（ P > 0.05）。 结论:抑制CaMKII磷酸化通过降低细胞凋亡和自噬进而减轻离体心肌缺血-再灌注损伤。

目的:探讨抑制晚钠电流的药物对短QT间期心脏可能的电生理作用及其机制。方法:采用Langendorff灌流装置制备兔离体心脏电生理研究模型。选择新西兰大耳白兔80只，首先任意选取34只，未用药时为对照A组（ n=34）、给予I KATP开放剂吡那地尔后为吡那地尔A组（ n=34），再从吡那地尔A组中选取27只，联用钠通道抑制剂或传统的用于治疗短QT综合征的药物奎尼丁后分为雷诺嗪联用组（ n=9）、美西律联用组（ n=9）、奎尼丁联用组（ n=9）。在剩余的46只新西兰兔中选取19只，未用药时为对照B组（ n=19），给予吡那地尔后为吡那地尔B组（ n=19）。其余27只分为雷诺嗪单用组（ n=9）、美西律单用组（ n=9）、奎尼丁单用组（ n=9）。采集对照A组、吡那地尔A组的心电生理参数，在对照B组、吡那地尔B组中采用程序电刺激诱发室性心律失常并采集心电图。采集吡那地尔联用组和单用药物组的心电生理参数，同时诱发室性心律失常并采集心电图。吡那地尔、雷诺嗪、美西律、奎尼丁药物浓度分别为30、10、30、1 μmol/L。 结果:与对照A组相比，吡那地尔A组的QT间期、心外膜和心内膜动作电位复极化完成90%处的时程（MAPD 90）缩短、跨室壁复极离散度（TDR）增大、有效不应期（ERP）和复极后不应期（PRR）降低（ P<0.05）。与吡那地尔A组相比，美西律联用组、奎尼丁联用组心外膜和心内膜MAPD 90和QT间期延长（ P<0.05），雷诺嗪联用组则不发生改变；TDR在3个联用组均显著降低，但ERP和PRR则延长（ P<0.05）。程序电刺激时对照B组室性心律失常诱发率为0，吡那地尔B组升高至10/19（χ2=13.6， P<0.05）。雷诺嗪联用组、美西律联用组和奎尼丁联用组室性心律失常的诱发率分别为1/9、1/9和0，均低于吡那地尔B组（χ2=4.5、4.5、7.4， P均<0.05）。 结论:在QT间期缩短的心脏，抑制晚钠电流不会加重电生理异常，而且会降低恶性心律失常发生的危险性，其机制与逆转短QT情况下TDR的增大和不应期（包括ERP及PRR）的缩短有关。

目的:评价丹曲林对心肌缺血再灌注小鼠室性心律失常易感性的影响及其电生理机制。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠20只，6～8周龄，体重21～25 g，制备Langendorff离体心脏灌注模型。取离体灌注模型制备成功的心脏20个，采用随机数字表法分为对照组和丹曲林组，每组10个。采用停止灌流30 min后恢复灌流的方法建立全心缺血再灌注损伤模型。丹曲林组于再灌注时灌注含20 μmol/L丹曲林钠的Krebs液5 min。再灌注10 min时，通过程序电刺激诱发室性心律失常，记录室性心律失常成功诱发情况和持续时间。于停灌前和再灌注20 min时测定心室有效不应期(ERP)及左心室中段外膜心肌细胞动作电位时程(APD 50和APD 90)。再灌注30～60 min时采用光学标测技术检测心肌细胞内钙离子浓度变化，记录钙瞬变交替发生情况及舒张期细胞内钙离子浓度自发升高(SCaE)幅度。 结果:与对照组比较，丹曲林组室性心律失常诱发率降低，持续时间缩短，再灌注20 min时心室ERP、APD 50和APD 90延长，钙瞬变交替发生率及SCaE幅度降低( P<0.05)。 结论:丹曲林可降低心肌缺血再灌注小鼠室性心律失常的易感性，其电生理机制可能与降低心肌细胞传导性和兴奋性、延长复极时程以及恢复胞内钙离子稳态有关。

目的:探讨围术期急性缺血性卒中后，大鼠海马星形胶质细胞活化程度和表皮生长因子受体(EGFR)表达水平。方法:30只18月龄雄性SD大鼠分为3组，假手术组(Sham)、腹部手术组(Surg)、腹部手术＋局灶性脑缺血组(Surg＋FCI)，每组10只。分别予以仅麻醉不手术、麻醉下腹部手术、麻醉下腹部手术同时颈内动脉结扎处理。处理后24 h，大鼠心脏灌流处死全脑剥离，分离海马，固定切片后，进行免疫荧光染色和共聚焦观察，Image J计数IL-1R1阳性的神经元和小胶质细胞个数。组间比较采用单因素方差分析(ANOVA)，两两比较采用独立样本 t检验。 结果:Sham组、Surg组和Surg＋FCI组大鼠海马DG区神经细胞核DAPI阳性染色数目分别为(76.80±9.51)、(74.80±11.66)、(77.10±5.55)个；同Sham组比较，Surg组阳性染色数目差异无统计学意义( F＝0.66， P>0.05)。Sham组、Surg组和Surg＋FCI组大鼠海马DG区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性的星形胶质细胞数目分别为(54.30±9.56)、(46.70±11.73)、(18.60±5.64)个，差异无统计学意义( F＝2.52， P>0.05)，Surg＋FCI组阳性染色数目显著减少( F＝103.48， P<0.05)；同Surg组比较，Surg＋FCI组阳性染色数目亦显著减少( F＝46.62， P<0.05)。Sham组、Surg组和Surg＋FCI组大鼠海马DG区EGFR阳性染色数目分别为(18.80±3.22)、(19.60±7.23)、(47.5±4.43)个。同Sham组比较，Surg组阳性染色数目差异无统计学意义( F＝2.52， P>0.05)，Surg＋FCI组阳性染色数目显著升高( F＝103.48， P<0.05)；同Surg组比较，Surg＋CI组阳性染色数目亦显著升高( F＝46.62， P<0.05)。 结论:围术期急性缺血性卒中后，大鼠海马的星形胶质细胞活化程度降低，活化的星形胶质细胞上EGFR表达增多。

目的:总结体外膜肺氧合辅助心肺复苏（extracorporeal cardiopulmonary resuscitation, ECPR）治疗心脏性猝死（sudden cardiac death, SCD）的经验和效果。方法:回顾性分析南京医科大学第一附属医院急诊中心2015年4月至2023年4月120例成人SCD-ECPR的资料，以90 d存活/死亡、OHCA/IHCA（out-of-hospital/in-hospital cardiac arrest）、是否为急性心肌梗死（acute myocardial infarction, AMI）和心脏骤停至ECMO（extracorporeal membrane oxygenation）转流时间（CA-Pump On时间）60 min为界进行分组，比较年龄、性别、查尔森合并症指数、IHCA/OHCA、初始心律、无灌流时间、CA-Pump On时间、ECMO撤离成功率、90 d存活率、ECMO治疗时间的差异。结果:①114例SCD-ECPR患者纳入分析，90 d存活45例（39.5%），其中40例（88.9%）神经功能预后良好。②90 d存活组的年龄和无灌流时间显著低于死亡组，且IHCA和初始可电击心律的比例高。③IHCA组的无灌流时间显著低于OHCA组，且90 d存活率高。④OHCA和院际联动延长CA-Pump On时间，降低90 d存活率。⑤AMI组的年龄大且查尔森合并症指数高，90天存活率显著低于非AMI组。结论:ECPR改善SCD患者的预后，健康预期寿命长、IHCA、初始可电击心律、无灌流时间短的患者高获益。流畅的SCD-ECPR生命救治链提高存活率，筛选OHCA、ECPR启动延迟或需要院际联动的高获益人群，尽管CA-Pump On时间>60 min，仍有生存潜力。

目的:评价降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠心室肌细胞动作电位时程(APD)的影响及K ATP通道在其中的作用。 方法:酶解法急性分离SD大鼠心室肌细胞( n＝6)。采用给药前后自身对照的方法，先给予单纯台式液灌流2 min，随后依次给予含CGRP 10 -10 mol/L、CGRP 8-37 10 -9 mol/L和Glibenclamide 10 -5 mol/L的台式液灌流2 min，采用全细胞膜片钳技术记录APD和确定K ATP通道电流密度，并计算APD 90。 结果:与单独台式液灌流比较，给予CGRP后心室肌细胞APD 90缩短，K ATP通道电流密度升高( P<0.05)；与给予CGRP后比较，给予CGRP 8-37或Glibenclamide后APD 90延长，K ATP通道电流密度降低( P<0.05)。 结论:CGRP可通过其特异性受体缩短大鼠心室肌细胞APD，K ATP通道激活参与了这一过程。

目的 分析不同浓度、不同种类吸入性麻醉药物对小鼠大脑核团中c-Fos表达的影响,探讨核团激活(或抑制)在吸入性麻醉药诱导的意识消失中的可能作用.方法 选择成年雄性C57BL/6小鼠30只,8周龄,体质量22～23 g.将小鼠随机分为5组:对照组(C组,吸入100％纯氧)、吸入0.8％异氟醚组(IL组)、吸入1.4％异氟醚组(IH组)、吸入1.3％七氟醚组(SL组)和吸入2.5％七氟醚组(SH组),每组6只.所有小鼠接受气体暴露2 h后立即进行心脏灌流和剥离取脑.采用免疫荧光染色检测小鼠全脑c-Fos表达情况,采用c-Fos和精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)或c-Fos和催产素(oxytocin,OXT)共同免疫荧光染色检测小鼠视上核(supraoptic nucleus,SON)中AVP和OXT的表达情况.结果 5组小鼠大脑核团中的 SON、中央杏仁核(central amygdala,CeA)、终纹床核(bed nucleus of stria terminalis,BNST)、前背侧视前核(anterodorsal preoptic nucleus,ADP)、下丘脑外侧区(lateral hypothalamic area,LHA)、扣带回皮质(cingulate cortex,Cg)、次级运动皮质(secondary motor cortex,M2)的c-Fos表达数量差异有统计学意义.与C组相比,IL组、IH组、SL组和SH组SON、CeA和BNST中c-Fos阳性细胞显著增加(P＜0.05),而ADP和LHA中c-Fos阳性细胞显著减少(P＜0.05);IH组和SH组Cg中c-Fos阳性细胞显著减少(P＜0.05);IH组M2中c-Fos阳性细胞显著减少(P＜0.05).与IL组、SL组相比,IH组和SH组SON中c-Fos阳性细胞明显增加(P＜0.05).与C组相比,IL组、IH组、SL组和SH组SON脑区AVP神经元激活百分比显著升高(P＜0.000 1).结论 吸入不同浓度异氟醚或七氟醚可增加小鼠大脑核团SON、CeA和BNST中c-Fos阳性细胞数量,减少小鼠大脑核团ADP、LHA、Cg和M2中c-Fos阳性细胞数量.SON脑区AVP神经元激活可能参与异氟醚或七氟醚诱导的意识消失.

目的 观察银杏酮酯预处理对大鼠急性心肌缺血再灌注模型的预防作用.方法 Langendorff离体心脏灌流建立缺血再灌注损伤模型,检测大鼠左心室心功能变化,HE染色观察心肌组织病理改变,Hoechst染色测定心肌细胞凋亡,Western blot法检测ATP敏感的钾通道(KATP)蛋白亚基Kir6.2和SUR2表达;急性分离心室肌细胞,记录IKATP.结果 心肌缺血再灌注30 min后,mLVSP、DP、+dP/dtmax降低(P＜0.01),-dP/dtmax、mLVDP升高(P＜0.01),心肌组织损伤,心肌细胞凋亡率和SUR2亚基表达升高(P＜0.01);银杏酮酯(25mg/L)灌流使左心室DP、+dP/dtmax升高(P＜0.05,P＜0.01),mLVDP降低(P＜0.01),减少心肌组织损伤和心肌细胞凋亡率(P＜0.01),这些作用可被KATP通道的阻断剂格列本脲阻断.缺血再灌注心室肌细胞KATP通道开放(P＜0.01);而使用银杏酮酯灌流则进一步促进KATP通道的开放(P＜0.01).结论 银杏酮酯通过激活ATP敏感的钾通道,抑制缺血再灌注导致的心肌组织和心功能损伤,发挥保护心肌的作用.

Langendorff离体心脏灌流模型技术具有可重复性强、给药方便和技术要求低等特点,常被用于研究心肌缺血再灌注损伤.该模型排除了其他器官系统、神经系统或体液等影响.本文对该技术的步骤、动物的选择、灌流模式、灌注液的选择、检测的指标、缺血方式以及缺血和灌流时间的选择等方面进行了综述和优缺点的评价.

目的 观察快律宁(KLN)对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)及内向整流钾电流(IK1)的影响,探讨KLN抗心律失常的作用机制.方法 Langendorff离体心脏灌流系统灌流消化分离出单个豚鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录方法,依次给予低剂量KLN(2.5 mg/ml)、中剂量KLN(5 mg/ml)、高剂量KLN(10 mg/ml),于细胞外灌流药物5 min后,依次记录各剂量给药后电流值.以正常细胞外液冲洗细胞洗脱药物5 min,记录冲洗后电流值.观察KLN对IK及IK1的影响.结果 KLN可降低IK及其尾电流(IK.tail)的电流幅度,使电流密度-电压关系曲线下移;KLN能显著抑制IKs及IKs,tail,作用呈剂量依赖性.低剂量KLN对IK1无明显作用,中、高剂量KLN可显著降低IK1内向电流;高剂量KLN对IK1外向电流有抑制作用.结论 KLN对IK具有剂量依赖性抑制作用,高剂量KLN可抑制IK1内、外向电流,这可能是其发挥抗心律失常作用的机制之一.