目的 探索叶酸缺乏(Folate deficiency,FD)对小鼠睾丸发育和精子发生的影响,筛选叶酸影响精子发生中关键差异基因及信号通路.方法 建立C57BL/6小鼠FD模型(从胚胎时期至成年期).HE染色分析出生后不同阶段鼠龄睾丸组织及附睾组织结构,精子PAS染色进行形态学观察.利用转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)技术筛选10周龄小鼠睾丸差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)并利用GO数据库和KEGG数据库进行基因功能富集.结果 与对照组比较,FD组生精小管细胞数量减少,减数分裂延迟,附睾管中精子稀少.精子计数结果显示,FD组精子密度显著低于对照组(P＜0.05).RNA-Seq分析共得到210个DEGs.差异基因主要富集在胰岛素样生长因子结合、胞外分泌、蛋白质酪氨酸/苏氨酸磷酸酶活性、细胞增殖调控、多糖生物合成等方面.KEGG富集分析提示差异基因主要富集于甲状腺激素信号通路、Toll样受体信号通路、甾类激素生物合成等.其中Fgf22、Lrrc31和Inmt等基因表达异常可能参与FD导致的生精功能障碍.结论 FD影响生精小管的发育和精子发生,其潜在机制可能涉及多个差异表达基因及细胞增殖调控、多糖生物合成和甾类激素生物合成等通路.

患者 男 ,31岁.婚后2年未育.夫妻双方体健 ,无有害物质及放射线接触史.查体 :患者身高160 cm ,体重50 kg.胡须稀少 ,汗毛不明显 ,睾丸略小.精液常规检查显示精子数量少且活动力差 ;Y染色体微缺失检测显示15个位点均无缺失 ;血清激素测定 :雌二醇、卵泡生成素、黄体生成素、睾酮、孕酮均正常.

目的:探讨采用经己酮可可碱(pentoxifylline,PF)处理后的睾丸不活动精子,行卵细胞胞质内单精子注射((intracytoplasmic sperm injection,ICSI)的临床效果.方法:选取81例梗阻性无精子症患者,女方常规超促排卵,在取卵日男方行睾丸穿刺抽吸取精术,将经体外孵育处理未获得活动精子作的样本为实验组(32例),加入含有效成分为PF的稀少精子体外培养液20 min后,挑选出有活动力的精子进行ICSI操作;另选择穿刺可见活动精子的患者为对照组(49例),直接进行ICSI操作.比较2组的受精率、正常受精率[2原核(2PN)率]、完全受精失败率、卵裂率、可用胚胎率、胚胎种植率、流产率、临床妊娠率等指标.结果:实验组(不动精子组)与对照组(活动精于组)间的成熟卵子百分比(80.2％比82.8％)、受精率(65.9％比65.9％)、异常受精率(7.6％比4.8％)差异无统计学意义(P＞0.05).2组间的受精失败发生率差异亦无统计学意义(3.1％比10.2％,P＞0.05),但2组间的卵裂率差异有统计学意义(914％比97.2％,P=0.007).不动精子组中行非优胚胎囊胚培养的百分比明显高于活动精子组(71.9％比46.9％),不动精子组可供移植或冷冻的D3或D5胚胎明显少于活动精子组(40.9％比52.2％,P=0.021).2组间的临床妊娠率(39.1％比39.3％)、胚胎种植率(25.6％比28.0％)及流产率、活产率差异均无统计学意义.冷冻睾丸(附睾)精子中,不动精子组的受精率、卵裂率、可用胚胎率、临床妊娠率、胚胎种植率均有低于活动精子组的趋势,但由于样本量较小,差异尚无统计学意义(P＞0.05);而在新鲜睾丸(附睾)精子中,不动精子组的以上指标均与活动精子组相接近(P＞0.05).结论:在睾丸(附睾)不动精子标本中加入PF,使不运动的精子获得运动能力,可帮助判断并挑选出有活性的精子,达到或接近于睾丸活动精子的水平,而其安全性还需进一步验证.

临床资料患者女,32岁,汉族,文盲,智力低下,体型一般,面部畸形,身高154 cm,体重55 kg,头发稀少,枯燥偏黄带白发,只能进行简单的语言交流.三岁半走路,四岁说话,只会算个位整数内加减.14岁初潮,月经量偏少,月经周期26 ～ 32 d,每次持续3～5d.检查乳房、外阴发育正常,处女膜破裂,阴道畅.B超显示卵巢大小正常,子宫大小5.1 cm×3.8cm×2.1 cm,造影检查显示双侧输卵管通畅,性激素六项检查正常.患者趾指甲变形,增厚,灰白褐色,经常脱发,头部、前胸、后背、腰部、腹股沟、肛周、臀部、双上肢及大腿出现红色斑丘疹,伴鳞屑、色素沉着,但边缘清楚,自觉症状为剧烈瘙痒,皮损部位取材镜检真菌阳性,诊断为泛发性体癣.肝功能、肾功能、血糖正常.18岁结婚,一直不孕.患者配偶检查精子量偏少,精子活动力偏低.

目的:回顾性分析常规精子冷冻技术和稀少精子冷冻技术对重度少精子症患者精子冷融效果,探索稀少精子冷冻保存的有效方法. 方法:收集82例重度少精子症患者精液,采用稀少精子冷冻技术冷冻标本,与24例采用常规冷冻技术冷冻的少精子症(精子浓度＜ 15×106/ml)标本进行比较.前者又根据按不同浓度分为A组(精子浓度＜1×106/ml,n =54)、和B组(1×106/ml≤精子浓度＜5×106/ml,n=28),后者为C组.比较3组精子冷冻复苏率和回收率. 结果:A、B、C组3组复苏率分别为(62.8±18.7)％、(61.9±17.2)％、(50.7±13.5)％,回收率分别为(68.7±18.4)％、(70.7±15.5)％、(29.2±12.4)％;以上指标,A、B组之间均无显著差异(P＞0.05),但A组和B组均显著高于C组(P＜0.05). 结论:稀少精子冷冻技术在临床中已趋于成熟,冻融结局相对稳定,是一种值得推广的男性生育力保存方式.

目的 探讨解脲脲原体(ureaplasmaurealitycum,UU)感染对大鼠睾丸组织结构及分泌功能的影响.方法 40只清洁级SD大鼠随机分为4组,每组10只,实验组A、B(7 d组、14 d组),对照组C、D(7 d组、14d组).实验组膀胱注射0.6 mL UU4型菌株[107颜色改变单位(CCU)/mL],对照组膀胱注射等体积的UU液体培养基.分别于注射后7d、14 d取各组大鼠睾丸组织于光镜和透射电镜观察镜下结构;化学发光法检测血浆睾酮和睾丸间质液睾酮含量.结果 光镜观察实验组(A、B)为炎症性病变,如生精细胞数量和层次减少,炎性细胞浸润,成熟精子数量稀少等,且B组损伤性病变较A组轻,C、D对照组无明显炎症病变.透射电镜观察实验组(A、B)为生精细胞凋亡表现,如生精细胞核膜皱缩、核染色质浓缩、核破裂等,且B组凋亡情况较A组轻,C、D对照组睾丸生精细胞形态结构较为完整.血浆睾酮水平检测实验组(A、B)均低于C、D对照组(P＜0.01),但A、B组间差异无统计学意义.睾丸间质液睾酮水平检测实验A组低于其余3组(P＜0.01),而其余3组间差异无统计学意义.结论 UU感染大鼠睾丸组织可出现多种病理损伤进而引起分泌功能改变,进一步证实UU感染与男性不育的关系,但上述改变均可自行恢复.

随着经济社会的不断发展、环境的污染和人民生活压力的逐渐增加,外界对生育能力的不良影响也逐渐加大,特别是男性的生育能力明显下降. 国外学者综合过去开展的185项精液分析数据统计显示,从1973年到2011年期间,欧美地区的男性精液精子含量下降了52％,从每毫升精液含有大约9900万个精子,下降到大约每毫升4700万个精子. 一项关于中国男性精子质量调查显示,在过去14 年对30636名年轻中国男性精子质量分析中发现,精子浓度下降15％,正常形态精子锐减20％ [1]. 生活环境的恶化、激素滥用、吸烟、饮酒等不良因素使男性精子质量和数量不断下降,男性不育比例日益增高[2-4]. 有60％ ～75％的男性不育患者表现为少精子症、弱精子症、无精子症等精子质量异常. 其中梗阻性无精子症和隐匿精子症患者通常不易获得精子,只有通过手术或者偶尔处于治疗情况较好的状态时才有少量活动精子,因此这种来之不易的精子就迫切成为要求被储备的对象,若能储存成功将避免再次手术或者取卵日无精子可用的风险. 目前,对于这种类型的精子冷冻复苏效果差[5-6] ,解冻回收率为59％ ～100％,而存活率在8％ ～85％ [7].

对于少弱精子症、隐匿性无精子症及手术取精的患者而言,精子冷冻能有效保存其生育力,避免取卵当日无精子可用的情况发生.但由于冷冻复苏过程中温度的剧烈变化,可能存在精子复苏后仍不符合卵胞浆内单精子注射技术的条件,无法使用的情况.本文就1例稀少精子冷冻复苏后无足够精子可用行睾丸显微取精ICSI病例进行分析总结,并结合相应文献进行讨论.

本文报道一起父、母和儿子3人受10居里铯-137连续意外照射150日的家族性事故。按物理学估算累积剂量约为8～15Gy，染色体畸变分析相当于一次5Gy的全身照射，被诊为亚急性放射病，例3（父）还合并放射性皮肤烧伤。主要临床表现是倦怠、出血、体力衰退和全血细胞减少。Hb50～60g/L，WBC0.4～1.0×10 9/L,BpC8～12×10 9/L。髂后骨穿细胞稀少，示增生减低。造血祖细胞培养产率低于正常。E-玫瑰花结、淋巴细胞转换率减低。血栓弹力图异常与血小板数减少一致。甲皱微循环观察示血流缓慢、微小血管排列紊乱。例1（子）在住院期间两次精液检查精子缺如。3例肝、肾功能和尿常规多次检查正常。治疗采用大剂量康力龙和654-2合用，用时予以输血、抗感染措施。例1、3还分别输8次胎肝：例1在WBC0.4×10 9/L时，住层流病房隔离。经过6个月治疗全部活存并基本康复出院。

目的 探讨冷冻微量精子相关参数与体外受精周期实验室及临床结局的关系.方法 回顾性分析2016年1月至2020年12月在生殖医学科行稀少精子冷冻复苏后卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)的118个周期相关资料.根据冷冻精子的冷冻方法分为微量冷冻组、传统常规冷冻组;按精子来源分为丈夫射精组、附睾穿刺组、睾丸穿刺组;根据精子质量分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型严重少弱组.分别比较各组之间一般资料、实验室及临床结局等;采用多因素二元Logistic回归分析冷冻精子相关参数对临床结局的影响.结果 ①一般资料:按冷冻精子的冷冻方法、精子来源和精子质量分组,女方的年龄、体质量指数、不孕年限、基础促卵泡素(FSH)、抗苗勒氏管激素(AMH)、Gn天数、Gn总量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日雌二醇(E2)水平、获卵数、MⅡ卵数各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);②实验室指标及临床结局:微量冷冻组与传统常规冷冻组两组组间胚胎利用率、临床妊娠率之间差异均无统计学意义(P>0.05),2PN率(P=0.002)、2PN卵裂率(P=0.036)、优胚率(P=0.002)差异均有统计学意义.丈夫射精组、附睾穿刺组和睾丸穿刺组组间比较,2PN率、临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05);2PN卵裂率(P<0.001)、胚胎利用率(P=0.048)、优胚率(P=0.002)差异均有统计学意义.Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型严重少弱组3组间比较,2PN率、胚胎利用率、优胚率之间差异均无统计学意义(P>0.05);2PN卵裂率(P<0.001)、种植率(P=0.005)、临床妊娠率(P=0.048)差异均有统计学意义;③多因素二元Logistic回归分析结果显示,Ⅲ型严重少弱精组相对Ⅰ型严重少弱精组是低临床妊娠率危险因素[OR:0.259,95％CI、0.075～0.887].结论 微量冷冻和常规冷冻可获得相似临床妊娠率,精子来源不影响临床妊娠率,极严重少弱精可能降低临床妊娠率,但还需要扩大样本量进一步证实.