目的:探讨多次暴露于吸入性麻醉药七氟醚后，七氟醚是否通过Tau/类微管蛋白酪氨酸样连接酶6（TTLL6）/微管切割蛋白（Spastin）信号通路引起幼鼠神经元树突棘重塑。方法:选取幼年[出生6 d（P6）]及成年[出生60 d（P60）]小鼠44只，采用随机数字表法将小鼠分为4组（每组11只）：幼年对照组（P6con组）、幼年麻醉组（P6sevo组）、成年对照组（P60con组）、成年麻醉组（P60sevo组）。P6sevo组和P60sevo组给予3%七氟醚+60%氧气3 d，每天2 h；P6con组和P60con组给予60%氧气3 d，每天2 h。造模结束后当天取小鼠海马组织采用免疫印迹法（Western blot）检测突触后致密蛋白95（PSD95）、Tau、TTLL6、Spastin水平，免疫荧光检测Tau、TTLL6、Spastin表达及Tau、TTLL6共定位情况。结果:与P6con组比较，P6sevo组海马PSD95水平较低（ P<0.05），Spastin水平较高（ P<0.05），Tau、TTLL6水平差异无统计学意义（均 P>0.05）；P60con组与P60sevo组海马组织PSD95、Tau、TTLL6、Spastin水平比较，差异无统计学意义（均 P>0.05）。免疫荧光染色结果显示，P6con组和P6sevo组小鼠海马组织Tau和TTLL6存在共定位，P60con组和P60sevo组小鼠海马组织Tau和TTLL6共定位不明显；与P6con组比较，多次七氟醚处理可使P6sevo组海马中Tau、TTLL6及Spastin阳性细胞明显增加（均 P<0.05），而在成年小鼠中变化不明显（ P>0.05）。 结论:七氟醚通过Tau/TTLL6/Spastin信号通路引起幼鼠神经元树突棘重塑。

目的:探讨有氧运动对糖尿病大鼠学习记忆功能、海马突触可塑性及脂联素信号通路的影响。方法:6周龄雄性SD大鼠随机分为空白对照组(NC组)和高脂饮食组，以5周的高脂饮食联合腹腔灌注低剂量链脲佐菌素(STZ)喂养高脂饮食组大鼠，诱导糖尿病大鼠模型，造模成功后分为糖尿病组(DC组)和糖尿病有氧运动组(DM组)。并对DM组大鼠实施了8周有氧跑台锻炼。8周后，用Morris水迷宫试验测定各组大鼠的学习记忆功能，血清相关指标，用高尔基染色观察分析海马区突触的变化，用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织脂联素、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)及突触可塑性相关蛋白(SYN)、突触后致密物(PSD-95)的蛋白质表达水平。结果:糖尿病大鼠血清空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HBA1c)在8周有氧运动后降低( F＝69.248、7.017，均 P<0.01)，血清脂联素和胰岛素在8周有氧运动后升高( F＝14.315、6.740，均 P<0.05)。海马高尔基染色海马CA3区树突棘数量( F＝9.307， P＝0.001)、树突棘密度( F＝6.734， P＝0.008)增加。糖尿病大鼠逃避潜伏期在8周有氧运动后降低( F＝13.934， P<0.01)，穿越平台次数增加( F＝5.864， P＝0.023)。糖尿病大鼠海马PSD-95、SYN、脂联素、p-AMPK、GLUT4蛋白表达水在平8周有氧运动后显著增加( F＝5.415、15.137、9.687、9.298、27.761，均 P<0.05)。 结论:8周有氧运动可改善糖尿病大鼠的学习记忆功能，其机制可能与运动诱导大鼠海马脂联素/AMPK/GLUT4信号通路的激活，导致其海马突触可塑性增强有关。

目的:了解电离辐射对幼鼠海马齿状回(DG)区和CA1区树突棘形态及结构随时间变化的特点，为研究放射性认知功能障碍发生的分子机制提供详尽直接的形态学依据。方法:给予21 d龄SD大鼠单次剂量10 Gy全脑照射，观察照射后1、3个月大鼠认知功能改变，海马DG区和CA1区中树突棘密度及形态学变化。Western blot检测电离辐射对突触后致密蛋白(PSD95)的影响。结果:SD幼鼠在照射后3个月发生明显的学习和记忆力损伤。海马DG区树突棘密度显著降低，照射后1、3个月分别降低了39.06%、29.27%( t＝14.96、12.35， P<0.05)。海马CA1区底树突的树突棘密度在照射后1个月降低了33.40%( t＝10.39， P<0.05)，而在照射后3个月其树突棘密度无明显变化；而CA1区顶树突的树突棘密度在照射后1、3个月均无明显变化。此外，海马DG区和CA1区树突棘形态处于动态变化的过程；突触后PSD95在照后1和3个月分别降低了24.6%和50.5%( t＝2.97、9.27， P<0.05)。 结论:电离辐射后幼鼠海马不同脑区树突棘密度及形态学变化提示PSD95可能通过影响树突棘的结构形态降低突触可塑性，从而参与放射性认知功能障碍的发生。

目的:探讨突触后致密物-95(postsynaptic density-95，PSD-95)在七氟烷麻醉致新生大鼠远期学习记忆功能损害机制中的作用。方法:选择SPF级鼠龄7 d的SD大鼠54只，按照随机数字法分为3组：对照组(暴露于空气)、模型组(暴露于2.1%的七氟烷，4 h/d，连续3 d)、PSD-95抑制剂组(吸入七氟烷+腹腔注射NA-1，连续5 d)，每组18只。Morris水迷宫实验和新异物体识别实验检测各组大鼠的视空间学习记忆和识别记忆能力；RT-qPCR检测大鼠海马组织kalirin、Rac1和PSD-95的mRNA水平；Western blot检测大鼠海马组织kalirin、Rac1、PSD-95及凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2和Bax的表达；免疫组化检测海马组织kalirin和Rac1的表达水平。采用SPSS 23 .0软件对数据进行统计分析，采用重复测量方差分析、单因素方差分析进行组间比较。结果:重复测量方差分析显示，在水迷宫实验中三组大鼠寻找平台潜伏期、游泳距离的组间和时间交互作用显著，均差异有统计学意义( F时间×组别＝36.539，41.548；均 P<0.01)。简单效应分析显示，模型组中第2~6天的平台潜伏期及游泳距离均长于对照组(第2~6天平台潜伏期： t＝14.039，17.147，13.155，13.831，27.247，均 P<0.01；第2~6天游泳距离： t＝10.122，20.987，7.267，10.011，8.121，均 P<0.01)。与模型组比较，PSD-95抑制剂组大鼠在2~6 d的平台潜伏期延长( t＝7.948，14.768，11.582，12.832，24.346；均 P<0.01)，游泳距离增加( t＝8.235，24.325，11.234，12.031，7.036；均 P<0.01)。新物体识别实验发现，模型组中的新物体探索时间显著长于对照组[(21.30±2.27)s，(19.21±1.42)s， t＝1.843， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的新物体探索时间[(26.83±2.13)s]明显长于模型组( t＝4.844， P<0.01)。模型组中的新异物体差异指数显著低于对照组[(0.41±0.12)，(0.59±0.10)， t＝3.416， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的新异物体差异指数[(0.37±0.08)]明显低于模型组( t＝0.696， P<0.05)。qRT-PCR结果发现，模型组中的Rac1、kalirin和PSD-95 mRNA表达均低于对照组( t＝9.969，3.954，6.561；均 P<0.05); PSD-95抑制剂组的Rac1、kalirin和PSD-95 mRNA表达均低于模型组( t＝2.132，2.251，3.502，均 P<0.05)。免疫组化结果显示，模型组大鼠海马CA1区的kalirin和Rac1均低于对照组[kalirin：(8.18±1.94)，(15.47±3.35)， t＝11.47， P<0.01；Rac1：(3.72±1.53)，( 8.17±2.91)， t＝6.76， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的kalirin(4.98±1.53)和Rac1(2.73±0.37)均低于模型组[kalirin： t＝10.28， P<0.01；Rac1： t＝4.72， P<0.05]。Western blot检测发现，模型组中的Caspase-3和Bax蛋白水平均明显高于对照组[Caspase-3：(1.37±0.16)，(0.54±0.01)， t＝5.71， P<0.01；Bax：(1.87±0.31)，(1.23±0.25)， t＝12.01， P<0.01]; PSD-95抑制剂组中的Caspase-3[(1.79±0.17)]和Bax[(2.19±0.21)]蛋白水平明显高于模型组( t＝9.87，16.19，均 P<0.01)；模型组中的Bcl-2蛋白水平明显低于对照组[(1.22±0.21)，(1.96±0.38)， t＝11.92， P<0.01]，PSD-95抑制剂组中的Bcl-2蛋白水平明显低于模型组[(1.01±0.19)， t＝10.73， P<0.01)]。 结论:七氟烷麻醉可致新生大鼠远期学习记忆功能损害和PSD95蛋白表达降低，抑制PSD95的表达可加重这种损害，这可能与PSD95参与的神经元突触可塑性和神经凋亡相关。

目的:探究丰富环境对坐骨神经分支选择性损伤模型(selective nerve injury，SNI)大鼠神经病理性疼痛及焦虑、抑郁样行为的作用及其潜在机制。方法:清洁级健康雄性SD大鼠36只，6~8周龄，采用随机数字表法分为3组(每组 n＝12)：假手术组+标准环境组(假手术组) 、SNI+标准环境组(标准环境组)、SNI+丰富环境组(丰富环境组)。采用坐骨神经分支选择性损伤模型构建大鼠神经病理性疼痛模型。丰富环境从术前7 d开始，持续至术后21 d。测定机械缩足阈值(paw withdraw threshold，PWT)及热缩足潜伏期(paw withdraw latency，PWL)以评估痛觉超敏及痛觉过敏行为，测试旷场实验、高架十字迷宫实验、新环境进食抑制实验以及强迫游泳实验以评估焦虑、抑郁样行为。采用免疫蛋白印迹(Western blot)法检测脊髓及前扣带皮质(anterior cingulate cortex，ACC)突触可塑性相关分子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein，CREB)及其磷酸化形式(p-CREB)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)、突触后致密物-95(postsynaptic density-95，PSD-95)以及神经连接蛋白2(neuroligin 2，NLGN2)的表达。采用免疫荧光测定CREB、BDNF在ACC中表达含量的改变。采用GraphPad prism 8.0和SPSS 23.0进行数据分析，组间比较采用单因素方差分析，PWT、PWL结果采用双因素重复测量方差分析，进一步两两比较采用Tukey检验。 结果:(1)重复测量方差分析结果显示，在PWT、PWL实验中，各组大鼠PWT的分组与时间的交互作用、组别主效应与时间主效应均显著( F＝13.4，39.6，369.6，均 P<0.05)，PWL的分组与时间的交互作用、组别主效应与时间主效应均显著( F＝3.8，10.3，58.8，均 P<0.05)。与假手术组相比，标准环境组PWT[(8.0±3.5) g，(2.4±1.4) g，(2.3±1.1) g，(2.2±1.6) g，(1.6±0.5) g]与PWL[(8.6±1.3) s，(7.3±1.5) s，(7.9±1.0) s，(6.6±1.1) s，( 7.7±1.4) s]各个时间点均较低(均 P<0.05)。(2)与假手术组相比，标准环境组旷场实验中进入中央区次数[(1.3±1.7)次]及停留时间[(1.6±1.3) s]显著减少( t＝4.585，5.423，均 P<0.05)，高架十字迷宫实验中进入开放臂次数的比率[(8.0±7.8) %]及停留时间的比率[(1.3±1.2) %]也明显减少( t＝4.682，5.202，均 P<0.05)，新环境进食抑制实验中进食潜伏期[(365.2±94.4) s]及强迫游泳实验不动时间[(127.6±24.3) s]显著增长( t＝6.008，14.290，均 P<0.05)。丰富环境组大鼠开放臂进入次数和开放臂停留时间均高于标准环境组(均 P<0.05)，进食潜伏期和强迫游泳不动时间均低于标准环境组(均 P<0.05)。(3)与假手术组相比[CREB：(1.6±0.2)，(0.8±0.5)；BNDF：(0.8±0.5)，(1.0±0.4)]，标准环境组脊髓和ACC中CREB[(1.8±0.1)，(1.5±0.2)]，BDNF[(0.9±0.6)，(1.4±0.3)]表达增多(脊髓： t＝3.283，4.989；ACC: t＝5.502，4.257，均 P<0.05)，ACC中突触标志物PSD-95[(1.6±0.2)，(1.0±0.2)]以及NLGN2[(1.5±0.5)，(1.1±0.2)]表达增多( t＝4.257，2.214，均 P<0.05)。与标准环境组相比，丰富环境组脊髓中CREB(1.3±0.3)、BDNF(0.7±0.4)、PSD-95(1.0±0.3)以及NLGN2(1.1±0.4)表达降低( t＝5.007，2.166，2.358，2.322，均 P<0.05)。与标准环境组相比，丰富环境组ACC中PSD-95(1.2±0.3)和NLGN2(1.1±0.2)表达水平也显著降低( t＝2.674，2.944，均 P<0.05)，而ACC中p-CREB(1.7±0.6)，BDNF(2.4±0.2)表达水平却显著升高( t＝4.180，7.610，均 P<0.05)。 结论:丰富环境可以改善SNI大鼠神经病理性疼痛及其所致焦虑、抑郁样行为，这可能与干预脊髓及ACC中突触可塑性相关。

目的:评价脑源性神经营养因子(BDNF)/原肌球蛋白相关激酶B (TrkB)信号通路在预先注射青年大鼠血浆减轻七氟烷诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用。方法:SPF级健康雄性SD大鼠80只，18月龄，体重550~650 g，采用随机数字表法分为4组( n＝20)：对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)、青年大鼠血浆组(Y组)和BDNF/TrkB信号通路抑制剂K252a组(K组)。Y组和K组尾静脉注射经过处理的3月龄青年大鼠血浆100 μl/次，C组和S组尾静脉注射等容量生理盐水，2次/周，共4周。处理结束后S组、Y组和K组吸入3%七氟烷麻醉3 h，麻醉前K组尾静脉注射K252a 25 mg/kg。于麻醉后3 d时行旷场试验及Morris水迷宫实验评估大鼠自发运动能力和认知功能；随后处死大鼠分离海马组织，采用Western blot法测定BDNF、磷酸化TrkB(p-TrkB)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)和突触囊泡蛋白(SYN)的表达，行高尔基染色记录海马CA1区神经元树突长度和树突棘密度，透射电镜下记录突触数量并测量突触活性区长度。 结果:与C组比较，S组逃避潜伏期延长，穿越原平台次数减少，海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达下调，海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度降低( P<0.05)。与S组比较，Y组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增加，海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达上调，海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度升高( P<0.05)。与Y组比较，K组逃避潜伏期延长，穿越原平台次数减少，海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达下调，海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度降低( P<0.05)。 结论:预先注射青年大鼠血浆减轻七氟烷诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制与激活BDNF/TrkB信号通路，改善海马突触可塑性有关。

目的:探讨右美托咪定预防七氟烷对新生小鼠脑神经毒性的机制与Tau蛋白磷酸化的关系。方法:SPF级健康C57BL/6野生型新生小鼠72只，6日龄，采用随机数字表法分为4组( n＝18)：正常对照组(C组)、右美托咪定对照组(D组)、七氟烷脑神经毒性组(S组)和右美托咪定预防组(SD组)。在出生后第6、9和12天分别吸入2.1%~3.3%七氟烷麻醉2 h，SD组麻醉前30 min腹腔注射右美托咪定10 μg/kg，结束后随机取6只小鼠海马组织，采用Western blot法测定Tau-PS202和Tau-PT205位点磷酸化Tau蛋白(AT8)和Tau46蛋白的表达；在出生后第29~30天行新物体识别实验(观察新物体辨别比)；在出生后第31~37天行Morris水迷宫实验(记录逃避潜伏期及穿越平台次数)，随后麻醉下取小鼠海马组织，采用Western blot法测定突触后致密物-95(PSD-95)表达。 结果:与C组相比，S组海马AT8表达上调，PSD-95表达下调，穿越平台次数减少，新物体辨别比降低( P<0.05)，Tau46蛋白表达与逃避潜伏期差异无统计学意义，D组和SD组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与S组相比，SD组海马AT8表达下调，PSD-95表达上调，穿越平台次数增加，新物体辨别比升高( P<0.05)，Tau46蛋白表达和逃避潜伏期差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:右美托咪定预防七氟烷诱发新生小鼠脑神经毒性的机制与抑制Tau蛋白磷酸化有关。

目的:探讨可乐定预防七氟烷对新生小鼠脑神经毒性的机制与Tau蛋白磷酸化的关系。方法:SPF级健康C57BL/6野生型新生小鼠72只，6日龄，按随机数字表法分为4组( n＝18)：正常对照组(C组)、可乐定对照组(CC组)、七氟烷脑神经毒性组(S组)和可乐定预防组(SC组)。在出生后第6、9、12天，S组、SC组吸入3%七氟烷麻醉2 h ，在麻醉前分别腹腔注射生理盐水或可乐定1 mg/kg 。在出生后第12天麻醉结束后，每组随机取6只小鼠海马组织，采用Western blot法测定Tau-PS202和Tau-PT205位点磷酸化Tau蛋白(AT8)和总Tau蛋白(Tau46)表达，并计算其比值(AT8/Tau46比值)。每组另外12只在出生后第29、30天行新物体识别实验(观察新物体辨别比率)；在第31～37天行Morris水迷宫实验(观察逃逸时间和穿越平台次数)，行为学实验结束后麻醉下取海马组织，采用Western blot法测定突触后致密物-95(PSD-95)表达。 结果:与C组相比，S组AT8表达上调，AT8/Tau46比值升高，PSD-95表达下调，穿越平台次数和新物体辨别比率下降( P<0.05)；与S组相比，SC组AT8表达下调，AT8/Tau46比值降低，PSD-95表达上调，穿越平台次数和新物体辨别比率明显升高( P<0.05)；海马Tau46表达和逃逸时间各组比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:可乐定预防七氟烷诱发新生小鼠脑神经毒性的机制可能与抑制Tau蛋白磷酸化有关。

目的:探讨通过支持接触共培养模式，小鼠前庭支持细胞体外诱导人羊水干细胞向功能性神经元分化的可行性。方法:分离培养人来源的羊水干细胞。从新生C57BL/6J小鼠获取内耳前庭组织，经酶解消化、细胞培养，选取其空心球体，制备单细胞饲养层。将标记慢病毒载体介导产生绿色荧光蛋白nGFP的羊水干细胞种植在饲养层表面，形成支持接触共培养，期间不添加任何外源性神经生长因子及神经元信号诱导因子。检测分化后的羊水干细胞中神经元标记物β微管蛋白（β-Tubulin，Tuj1）、突触后致密蛋白PSD95的表达；标记功能性突触小泡技术（FM1-43穿透）检测分化后细胞是否具有神经元离子通道。同时观察羊水干细胞单独分化、小鼠前庭支持细胞单独分化、Transwell共培养体系中羊水干细胞和饲养层细胞神经元的分化情况。结果:单细胞饲养层表达内耳支持细胞特异性标记物细胞周期蛋白激酶抑制因子P27 kip1。nGFP标记过的羊水干细胞接种于饲养层后，nGFP表达阳性的部位有（52.0±3.0）%的细胞表达Tuj1，并具有典型的神经元形态特征，突起长度平均（110.7±6.2） μm。饲养层细胞单独分化，仅有（1.1±0.6）%的细胞表达Tuj1阳性且形态典型的神经元；羊水干细胞单独分化，（92.0±1.0）%的细胞表达神经元标记物Tuj1，但无典型的神经元形态特征，突起长度平均（16.0±4.1） μm。将羊水干细胞与饲养层在Transwell中共培养，虽然（92.0±1.0）%的羊水干细胞表达Tuj1，但仍无典型的神经元形态特征，突起长度平均（17.0±4.5）μm，饲养层仅有（1.2±0.9）%的细胞Tuj1表达阳性且具有典型的神经元形态。 结论:通过支持接触共培养模式，由小鼠前庭来源的内耳支持细胞制备的饲养层，可成功将人羊水干细胞定向诱导分化为功能性神经元。

目的:评价依达拉奉对术后认知功能障碍(POCD)老龄大鼠海马细胞外信号调节激酶(ERK)-cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠60只，20月龄，体质量650~700 g，采用随机数字表法分为4组( n＝15)：对照组(C组)、POCD组(P组)、依达拉奉组(E组)和ERK抑制剂组(I组)。P组、E组和I组采用3%七氟烷麻醉下行剖腹探查术的方法制备大鼠POCD模型。E组和I组术前30 min时腹腔注射依达拉奉3 mg/kg，I组尾静脉注射ERK抑制剂PD98059 0.3 mg/kg。于术后3 d时行旷场实验测定大鼠自主运动功能，于术后3~7 d行Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能。水迷宫实验结束后处死大鼠取海马组织，采用Western blot法检测磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化CREB(p-CREB)、突触素和突触后致密蛋白95(PSD-95)的表达，行高尔基染色记录海马CA1区神经元树突长度和树突棘密度。 结果:与C组比较，P组大鼠术后逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马p-ERK、p-CREB、突触素和PSD-95表达下调，神经元树突长度缩短，树突棘密度降低( P<0.05)；与P组比较，E组大鼠术后逃避潜伏期缩短，穿越原平台位置次数增多，海马p-ERK、p-CREB、突触素和PSD-95表达上调，神经元树突长度和树突棘密度增加( P<0.05)；与E组比较，I组大鼠术后逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马p-ERK、p-CREB、突触素和PSD-95表达下调，神经元树突长度缩短，树突棘密度降低( P<0.05)。 结论:依达拉奉改善老龄大鼠POCD的机制与激活ERK-CREB信号通路，改变海马突触可塑性有关。