目的:开发和评估一种快速、简单和经济的替代测序的Omicron变异株荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)。方法:针对SARS-CoV-2 ORF1ab保守区域、Omicron变异株S基因高频共同突变位点设计引物和TaqMan探针，建立Omicron株RT-qPCR检测方法，用经全基因组测序确定型别的样本进行验证，并对该方法的特异度和敏感度进行评估。结果:本研究建立的RT-qPCR分型法可以将Omicron变异株与包括早期A型流行株、Alpha和Delta变异株在内的SARS-CoV-2毒株进行区分，结果与全基因组测序结果一致，符合率为100.00%(28/28)；与其他6种呼吸道病毒及柯萨奇病毒A组16型无交叉反应；该方法RNA标准品在10 9~10 3拷贝/μl之间呈良好的线性关系，相关系数 R2均大于0.99，检测敏感度为10 3拷贝/μl。 结论:本研究设计的针对Omicron变异株的RT-qPCR敏感度高且特异度好，在任何可以进行PCR检测的实验室中都容易开展，可极大地促进对Omicron变异株的传播监测。

目的 建立一种基于离心式微流控技术的检测流感病毒分型的直扩PCR法.方法 设计特异性引物探针,采用离心式微流控芯片对流感病毒不同分型进行直扩荧光PCR检测,进一步评价该方法灵敏度、特异性、重复性和线性关系;用该直扩荧光PCR法检测576例临床标本,并用核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行验证.结果 离心式微流控直扩PCR法的总体最低检出限为500 copies/mL;与常见呼吸道病原体无交叉反应;精密度均小于4.34％;具有良好的线性关系(R2均>0.98);576例临床标本中检出甲型流感病毒通用型75例,其中H1N126例,H3亚型49例;乙型流感病毒通用型74例,均为Victoria系.与对照试剂比较,离心式微流控PCR法在流感病毒不同分型的灵敏度、特异性、总符合率均高于92.9％,两种方法检出阳性率(IAV、H1N1、H1、H3、IBV和IBV-V)差异均无统计学意义(χ2值分别为3.200、0.500、0.500、1.333、2.250、2.250,P均>0.05),具有极好的一致性(Kappa值均>0.96).结论 建立的离心式微流控直扩PCR法操作简便,灵敏度和特异性较高,可为流感病毒的临床诊断和流行病学调查提供有效的检测工具.

目的:观察立极针法联合中药口服治疗寒凝血瘀型原发性痛经的疗效及其对血液流变学的影响.方法:选取本院2020 年6 月—2021 年12 月收治的寒凝血瘀型原发性痛经患者90 例,随机数字表法分组,两组均为45 例.对照组患者接受立极针法治疗,观察组患者接受立极针法联合中药口服治疗,治疗3 个月经周期;评价治疗效果,治疗前后进行痛经视觉模拟量表(VAS)及 COX痛经症状量表(CMSS)评分,血流变检测仪检测血液流变学指标(全血黏度低切、中切、高切和血浆黏度).结果:观察组疗效明显优于对照组(P＜0.05);治疗后两组患者疼痛VAS评分和CMSS评分明显降低,全血黏度低切、中切、高切和血浆黏度明显降低;观察组疼痛VAS评分、CMSS评分、血液流变学指标改善较对照组明显(均P＜0.05).结论:立极针法联合中药口服治疗寒凝血瘀型原发性痛经疗效更优,并且能改善患者血液流变学指标.

B淋巴细胞瘤/白血病因子3(B cell CLL/lymphoma 3,BCL3)是一个转录辅调节因子,通过结合转录因子对基因表达起激活或抑制作用,维持细胞存活,但其机制尚不清楚.该研究采用 CRISPR/Cas9技术建立BCL3基因敲除的人宫颈癌HeLa细胞,实时荧光定量PCR和Western blot验证敲除情况.使用特异性荧光探针法、萤火虫荧光素酶法、活细胞能量代谢动态分析法等技术手段检测基因敲除(BCL3-KO)对细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)水平、线粒体膜电位、线粒体呼吸作用以及ATP生成的影响.结果发现,BCL3-KO细胞内的相对ROS水平上升约50％,采用转染的方式恢复细胞内表达BCL3基因则可抑制ROS水平的上升;与野生型HeLa细胞相比,BCL3-KO细胞的线粒体膜电位明显降低(P<0.001);BCL3敲除不影响细胞基础有氧呼吸速率,但引起碳酰氰4-(三氟甲氧基)笨腙[carbomyl cyanide 4-(trifluorometyocy)phenylhydrazone,FCCP]诱导的最大(极限)呼吸速率显著上升(P<0.001);相比野生型细胞,BCL3-KO细胞中的ATP的浓度下降40％.该研究揭示了BCL3对线粒体功能的调控作用,可能是其维护癌细胞存活的原因之一.

目的 观察立极针法治疗寒湿凝滞型原发性痛经的临床疗效及对其相关生活质量评价.方法 采用随机单盲对照试验,将符合纳入标准的寒湿凝滞型原发性痛经患者76例,随机分为两组,立极针法组38例和传统体针法组38例,两组均治疗3个月经周期,采用生活质量评价量表SF-36、痛经症状评分和VAS评分法,观察其近期疗效,并对患者治疗前后的健康相关生活质量进行评价,包括生理机能(PF)、生理职能(RP)、躯体疼痛(BP)、一般健康状况(GH)、活力(VT)、社会功能(SF)、情感职能(RE)、精神健康(MH)等,用累计得分换算法进行分析.结果 立极针法组脱落2例,传统体针法脱落1例,经过治疗后,立极针法组和传统体针法组总有效率分别为91.67％和83.78％,两组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组VAS评分、痛经症状评分在治疗期间均有不同程度的下降(P＜0.05),两组间比较,立极针法组明显优于传统体针法组(P＜0.05).两组SF-36量表各维度评分在治疗期间均有不同程度提高(P＜0.05),除PF外,各维度两组间比较,立极针法组明显优于传统体针法组(P＜0.05).结论 立极针法治疗寒湿凝滞型原发性痛经临床疗效显著,能明显减轻疼痛,并能改善痛经所伴随症状,从而提高痛经患者的生活质量,值得临床推广.

赖新生教授治疗面肌痉挛注重调神、养神、安神、固元,认为其与心、脑情志功能相关,病位与胃经、肝经、膀胱经等相关.“通元针法”是赖新生教授在继承老一辈针灸学家司徒铃、靳瑞教授学术精髓的基础上进一步创新发展建立的科学有效的针灸取穴和操作方法,该法以督脉穴位(印堂、百会、前顶和后顶等)及五脏背俞穴(心俞、膈俞、肝俞和肾俞等)通督养神,腹部穴位(中脘、天枢、关元、气海和中极等)引气归元,配伍五输穴及辨证选穴调节气血、脏腑功能,配合补泻手法,以改善面肌抽动症状,故起到满意的治疗效果.

目的:评价立极针法治疗寒湿凝滞型原发性痛经的远期疗效.方法:将76例寒湿凝滞型原发性痛经患者随机分为立极针法组和体针组,每组各38例,治疗3个月经周期,并在治疗后第3个月经周期及半年后随访.使用腹痛视觉模拟评分量表、痛经症状评分量表等作为疗效观察指标,排除脱落患者后,比较2组患者的远期疗效和各项指标的评分.此外,认真观察并记录研究中可能出现的不良反应或副作用.结果:立极针法组脱落2例,传统体针法脱落1例,经过治疗后,立极针法组患者的临床综合疗效优于体针组 (P ＜0.05),2组VAS评分、痛经症状评分在治疗后及随访期间均有不同程度的下降 (P ＜0.05),其中体针组半年后随访数据较治疗后第3个月经周期随访数据有所上升,2组间比较,治疗后第3个月经周期随访 (P ＜0.05) 、半年后随访 (P ＜0.01),立极针法组明显优于传统体针法.立极针法和体针组治疗满意率分别为91.67％、72.97％.2组患者在研究期间均未出现不良反应.结论:立极针法能有效缓解痛经症状及其引起的全身不适,远期疗效稳定持久,治疗寒湿凝滞型原发性痛经的远期疗效确切;此外,患者对立极针法的治疗满意率更高,值得临床推广应用.

江夏方舱医院是武汉唯一一家中医方舱医院,医院以中医为主、中医药疗法全覆盖的方式运行,于2月14日开舱,运行26日,共收治新型冠状病毒肺炎患者564例,无一例转重症,获得零死亡、零转重、零复阳、零回头、零感染(包括医护人员、后勤安保人员)、零投诉的好成绩.医院在给予患者统方("新冠2号""新冠3号")基础上,针对患者"发热""咳嗽""无特殊症状""焦虑失眠"症状分别给予中药协定处方,再灵活选用针灸、外治、温灸、耳压、经络拍打等手段缓解不同患者的病痛,同时结合养生功法帮助康复,心理疏导调畅情志,最终获得了很好的疗效."三因司天方""太极六气针法"的使用对于病毒转阴起到了一定的作用,对于便血、疼痛、失眠等症状甚至有立竿见影的效果.

目的:观察左氏立极针法联合金匮肾气丸治疗肾阳虚证老年性功能性便秘的临床疗效.方法:将纳入治疗的老年性功能性便秘患者60例随机分为2组,对照组给予乳果糖口服治疗,治疗组使用左氏立极针法联合金匮肾气丸治疗,疗程为28 d,比较2组Wexner评分、布里斯托粪便性状评分(Bristol评分)及临床疗效.结果:治疗后,2组Bristol评分均较前上升,差异均有统计学意义(P＜ 0.05),提示两种治疗方法均可以改善患者大便性状.治疗后,2组Wexner评分均较前下降,差异均有统计学意义(P＜0.05),提示两种治疗方法均可以改善患者便秘情况.治疗后,治疗组Bristol评分高于对照组,Wexner评分则低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).提示治疗组治疗方法在改善患者大便性状、便秘情况及临床疗效方面,均优于对照组.结论:左氏立极针法联合金匮肾气丸治疗肾阳虚证老年功能性便秘患者疗效优于常规乳果糖口服治疗.

目的:观察立极针法治疗糖尿病前期的临床疗效.方法:将60例符合纳入标准的糖尿病前期患者按简单随机法分为对照组30例(糖尿病前期教育)和观察组30例(立极针法+糖尿病前期教育).观察组每周治疗3次,治疗4周为1疗程,对照组糖尿病前期教育由医生通过电话每周三次指导监督患者.治疗1个疗程后,进行临床评估,包括治疗后IGR转化为NGT的转归率,治疗前、后患者空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)的变化情况.结果:治疗前2组患者FPG和2hPG,差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后对照组FPG及2hPG改善不明显,而观察组两项指标比治疗前明显降低,组内和组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);治疗后观察组IGR向NGT转化率为76.67％,明显高于对照组(36.67％),两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论:立极针法治疗糖尿病前期具有较好的临床疗效,值得推广.