骨骼肌衰老是机体衰老的相关生物学事件,以质量丢失和功能衰退为显著特征,金属组学尤其是铜金属组学在其中的功能角色正日益得到关注.铜金属组学在衰老状态下表现为铜过载,其触发的毒理效应具有激活骨骼肌细胞中发生凋亡、焦亡、铁死亡、铜死亡及并促进α突触核蛋白聚集的特异性分子潜力,相关的信号级联最终可诱导衰老肌纤维中蛋白质、线粒体和卫星细胞等内容物代谢失衡及裂解丢失,同时可触发神经肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)退化和异常,是骨骼肌衰老萎缩的新型病理生理机制.本综述首次系统地解码骨骼肌衰老萎缩调控网络中铜的分子生物学功能、衰老骨骼肌中铜过载的潜在机制,以及铜过载诱导的多种细胞死亡形式例如凋亡、焦亡、铁死亡及铜死亡的信号转导途径在骨骼肌衰老萎缩中的新角色,为临床上应用铜螯合改善和治疗骨骼肌衰老萎缩提供潜在分子靶点和方案选择.

研究过氧麦角甾醇线粒体靶向衍生物(Mito-EP)对乳腺癌的影响及作用机制.采用MTT法检测不同浓度Mito-EP(0、0.075、0.15、0.3、0.6、1.2、2.4 μmol·L-1)作用于MDA-MB-231细胞后增殖抑制情况.将实验分为空白对照组,低、中、高浓度(0.15、0.3、0.6 μmol·L-1)Mito-EP组及过氧麦角甾醇(EP)0.6 μmol·L-1组,培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧水平、线粒体膜电位变化以及细胞周期分布,并在激光共聚焦显微镜下观察细胞凋亡、细胞活性氧及细胞线粒体膜电位变化;通过构建4T1皮下移植瘤模型体内验证Mito-EP对乳腺癌的抑制作用;采用Western blot法检测细胞及肿瘤组织内B 淋巴细胞瘤-2 基因(Bcl-2)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)、细胞色素 C(Cyt C)、cleaved caspase-7、cleaved caspase-9 蛋白表达水平.结果表明,Mito-EP可呈浓度依赖性地降低MDA-MB-231细胞增殖率;与空白对照组相比,EP 0.6 μmol·L-1组细胞凋亡率、活性氧水平、线粒体膜电位变化不明显.与空白对照组相比,Mito-EP处理组细胞凋亡率明显增加(P＜0.05);活性氧水平明显升高(P＜0.05);线粒体膜电位明显降低(P＜0.05);Bax、Cyt C、cleaved caspase-7、cleaved caspase-9 蛋白表达显著上调,Bcl-2 蛋白表达显著下调(P＜0.05);肿瘤体积和质量明显减小.综上所述,Mito-EP可能通过激活线粒体凋亡途径促进乳腺癌细胞凋亡.

目的:观察组织蛋白酶（CTS）L抑制剂对视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡的作用及其对线粒体氧化应激的影响。方法:体外培养的人RPE细胞分为正常组、过氧化氢（H 2O 2）组、H 2O 2+CTSL抑制剂组。H 2O 2组、H 2O 2+CTSL抑制剂组置于含400 μmol/L H 2O 2的培养基孵育24 h；H 2O 2+CTSL抑制剂组同时加入10 μmol/l CTSL抑制剂。正常组为常规培养细胞。建模后24 h进行后续实验。流式细胞仪检测细胞凋亡率；细胞免疫荧光染色、蛋白质免疫印迹法、实时定量聚合酶链反应检测细胞中CTSL表达水平；MitoSOX荧光探针检测细胞中线粒体超氧化物表达水平；MitoTracker染色观察线粒体形态，定量分析线粒体平均面积、形状因子、分支节点。两组间比较采用双尾Student t检验；多组间比较采用单因素方差分析。 结果:与正常组比较，H 2O 2组细胞凋亡率明显增加，差异有统计学意义（ t=3.307， P=0.029 7）；细胞中CTSL表达水平升高（ t=19.950、6.916、14.220， P<0.05）。与H 2O 2组比较，H 2O 2+CTSL抑制剂组CTSL表达水平、细胞凋亡率、细胞线粒体超氧化物水平显著降低，差异有统计学意义（ t=11.940、4.718、16.680， P<0.05）。H 2O 2+CTSL抑制剂组细胞线粒体呈细长椭圆形或杆状；H 2O 2组细胞线粒体失去其连续轮廓与完整形态。4组细胞线粒体评价面积、形状因子、分支节点比较，差异有统计学意义（ F=251.700、34.010、60.500， P<0.000 1）。 结论:H 2O 2显著诱导RPE细胞的凋亡、CTSL表达升高；CTSL抑制剂可抑制H 2O 2诱导的RPE细胞凋亡，降低线粒体超氧化物水平，有效恢复线粒体形态。

目的:探讨在蛛网膜下腔出血(SAH)早期阶段运用p38抑制剂后神经细胞线粒体蛋白表达的差异。方法:采用氧合血红蛋白(OxyHb)刺激Neuro-2a细胞(小鼠来源神经瘤母细胞，购买自中国科学院上海细胞库)，模拟SAH后血液中氧合血红蛋白对于神经细胞的刺激状态，建立体外SAH细胞模型，设立对照组(Con)、蛛网膜下腔出血组(SAH)及p38抑制剂组治疗组(p38+SAH组)，提取线粒体蛋白进行质谱分析，Maxquant软件和Perseus软件进行查库和非标记定量分析，两组间蛋白差异比较应用 t检验。对差异蛋白(p38+SAH/SAH组)进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路的富集分析；应用Multiple Experiment Viewer软件进行分层聚类热图分析；STRING在线工具构建出蛋白与蛋白互作网络(PPI)；通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)验证差异蛋白。 结果:3组中共筛出239个差异蛋白，上调差异蛋白105个，下调差异蛋白134个(符合差异倍数(FC)>1.5或<0.667， P<0.05)。GO富集分析表明，差异蛋白富集在调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的级联正调控、内吞作用、凋亡过程负调控等细胞生物学功能。在KEGG中：差异蛋白主要在p53信号通路、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路、轴突导向信号等通路富集。通过PPI分析：以Rab7a、Cox5a、Cacybp等蛋白为核心的9个蛋白互作网络SAH组Rab7a的表达低于CON组(蛋白：0.345±0.014比0.226±0.045， t＝13.920， P<0.05；mRNA：1.00比0.76±0.04， t＝9.813， P<0.05)；P38+SAH组中Rab7a的表达高于SAH组(蛋白：0.226±0.045比0.282±0.023， t＝-4.768， P<0.05；mRNA：0.76±0.04比0.95±0.02， t＝-6.802， P<0.05)，与蛋白组学结果一致。 结论:p38抑制剂并不是通过单一途径改善SAH后神经细胞线粒体功能障碍，而与多种蛋白及信号通路的调控有关。

目的:评价艾司氯胺酮对小鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其与线粒体应激的关系。方法:实验Ⅰ　SPF级雄性C57BL/6小鼠18只，8～12周龄，体质量28～30 g，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(IR组)和艾司氯胺酮＋脑缺血再灌注组(E＋IR组)。采用大脑中动脉栓塞1 h，再灌注24 h的方法制备脑缺血再灌注损伤模型；E组造模前20 min腹腔注射艾司氯胺酮10 mg/kg。采用Zea Longa评分及平衡木实验(Feeney评分)评估小鼠神经功能；TTC染色法测定脑梗死体积。实验Ⅱ　将原代皮层神经元采用随机数字表法分为3组( n＝42)：对照组(C组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)和艾司氯胺酮＋OGD/R组(E＋OGD/R组)。采用氧糖剥夺1 h，复氧复糖24 h的方法制备OGD/R模型。E＋OGD/R组加入25 μmol/L艾司氯胺酮处理40 min后制备模型。采用CCK-8法检测神经元活力，透射电镜下观察神经元超微结构，检测ROS、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)和MDA的水平，JC-1试剂盒检测线粒体膜电位，TUNEL染色法测定神经元凋亡率，Western blot法测定Bax、细胞色素C(Cyt C)、cleaved-caspase-9、caspase-3和cleaved-caspase-3的表达。 结果:实验Ⅰ　与S组相比，IR组Zea Longa评分、Feeney评分和脑梗死体积升高( P<0.01)；与IR组相比，E＋IR组Zea Longa评分、Feeney评分和脑梗死体积降低( P<0.01)。实验Ⅱ　与C组相比，OGD/R组神经元活力和GSH-px活性降低，神经元凋亡率、ROS、MDA水平、线粒体膜电位和cleaved-caspase-3/caspase-3比值升高，Bax、Cyt C和cleaved-caspase-9表达上调( P<0.01)；与OGD/R组相比，E＋OGD/R组神经元活力和GSH-px活性升高，神经元凋亡率、ROS、MDA水平、线粒体膜电位和cleaved-caspase-3/caspase-3比值降低，Bax、Cyt C和cleaved-caspase-9表达下调( P<0.01)。 结论:艾司氯胺酮可减轻小鼠脑缺血再灌注损伤，其机制可能与抑制神经元线粒体应激，改善线粒体功能，抑制线粒体途径的神经元凋亡有关。

目的:观察氟化钠（NaF）对人成骨肉瘤Saos-2细胞磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号表达及凋亡的影响。方法:采用成组设计，按NaF剂量将Saos-2细胞分为0（对照）、5、10、20、40 mg/L染氟组（ n = 3）。体外培养24、48 h后收集细胞，采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测PI3K、Akt和线粒体凋亡途径相关分子Forkhead转录因子（FoxO）1的蛋白表达，采用流式细胞仪检测Saos-2细胞的凋亡水平。 结果:体外培养24、48 h时，各组Saos-2细胞PI3K、Akt蛋白表达比较，差异均无统计学意义（ P均> 0.05）。24 h时，5、10、20、40 mg/L染氟组磷酸化PI3K（p-PI3K）蛋白表达（0.40 ± 0.06、0.45 ± 0.02、0.37 ± 0.06、0.32 ± 0.06）均高于对照组（0.28 ± 0.04， P均< 0.05）；48 h时，5、10 mg/L染氟组p-PI3K蛋白表达（0.46 ± 0.06、0.58 ± 0.03）均高于对照组（0.29 ± 0.04， P均< 0.05），而40 mg/L染氟组（0.21 ± 0.03）低于对照组（ P < 0.05）。24 h时，5、10、20 mg/L染氟组磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达（0.27 ± 0.01、0.30 ± 0.03、0.27 ± 0.03）均高于对照组（0.20 ± 0.02， P均< 0.05）；48 h时，5、10 mg/L染氟组p-Akt蛋白表达（0.42 ± 0.04、0.60 ± 0.02）均高于对照组（0.27 ± 0.01， P均< 0.05），而40 mg/L组（0.18 ± 0.02）低于对照组（ P < 0.05）。24 h时，10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达（0.38 ± 0.07、0.41 ± 0.06、0.47 ± 0.08）均高于对照组（0.34 ± 0.04， P均< 0.05）；48 h时，5、10、20、40 mg/L染氟组FoxO1蛋白表达（0.36 ± 0.08、0.37 ± 0.10、0.54 ± 0.04、0.73 ± 0.04）均高于对照组（0.28 ± 0.04， P均< 0.05）。24、48 h时，对照组和5、10、20、40 mg/L染氟组细胞凋亡率分别为（2.867 ± 0.583）%、（3.647 ± 0.035）%、（3.773 ± 0.095）%、（5.440 ± 0.325）%、（7.203 ± 0.476）%，（3.707 ± 0.286）%、（4.023 ± 0.241）%、（4.970 ± 0.368）%、（12.473 ± 0.949）%、（19.387 ± 1.892）%。24 h时，40 mg/L染氟组凋亡水平高于对照组（ P < 0.05）；48 h时，20、40 mg/L染氟组凋亡水平均高于对照组（ P均< 0.05）。 结论:氟可以直接激活成骨细胞内的PI3K/Akt信号通路，进而产生抗凋亡作用。

本期《头颈部鳞状细胞癌免疫检查点抑制剂治疗专家共识》系统阐述了免疫检查点抑制剂的机制与治疗数据、免疫治疗技术参数、免疫相关不良事件及处理，以及临床诊疗实践，旨在指导国内同行安全、科学和规范地开展头颈部鳞状细胞癌的免疫治疗及相关的临床试验。论著《携带线粒体DNA致病突变家庭的聋病遗传咨询特征分析》发现携带线粒体DNA致病突变个体及其母系家庭成员发生耳聋的风险较高，但携带者的发病年龄、听力损失程度及外显率等存在显著差异，在遗传咨询中需要明确排除核基因可疑致病变异并分析携带者的线粒体DNA突变比例，同时完善首诊个体及其母系家庭人员的听力检测，以咨询家庭为单位进行线粒体突变表型-基因型特征分析，有利于线粒体耳聋遗传咨询个性化的临床决策。论著《坏死性外耳道炎23例临床分析》提出坏死性外耳道炎临床表现缺乏特异性，诊断需根据病史、体格检查及辅助检查综合判断；可根据不同临床分期制定相应的治疗措施；治疗以多学科综合治疗为基础，以手术治疗为主；尽早干预预后较好，但合并多组颅神经损伤及颅内感染的患者预后不佳。论著《顺铂诱导氧化应激引起耳蜗血管纹周细胞线粒体途径的细胞凋亡》发现顺铂可升高耳蜗内氧化应激水平导致C57BL/6J小鼠耳蜗血管纹周细胞凋亡，从而提血迷路屏障的通透性，造成听力损失。论著《siRNA沉默STAT6抑制嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎产生的实验性研究》发现经鼻滴入信号传导和转录激活因子6（STAT6）小干扰RNA（siRNA）可下调鼻黏膜STAT6表达，降低磷酸化STAT6（p-STAT6）水平，抑制小鼠嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎的产生。新技术新材料《汉语普通话CMnBio测听句表的编制及在成年人工耳蜗植入者中的验证》建立了面向成年人工耳蜗植入者、具有良好等价性的26张普通话CMnBio句表，并提供了使用单张表和二张表时识别率得分95%置信度下的临界差值，为普通话成人人工耳蜗临床实践及开展跨语种成效对比研究，提供了一个可避免天花板效应的实用工具。

近年来，脓毒症的患病率呈上升趋势，是引起儿童死亡的重要原因。心功能抑制是引起脓毒症相关死亡的主要因素，功能紊乱的线粒体作为持续炎症刺激，诱发细胞凋亡，导致心肌功能障碍。线粒体自噬是对脓毒症引起炎症反应的代偿机制之一，能够特异性清除因氧化应激、钙超载、细胞能量代谢障碍等引起的受损线粒体，维持细胞活力和呼吸，为机体提供足够的ATP。PINK1/Parkin及线粒体自噬受体(BNIP3L/NIX、FUNDC1等)是主要的线粒体自噬途径，通过控制线粒体质量可一定程度上保护细胞生命、促进细胞修复。本综述主要关注近年来线粒体自噬调控机制的研究进展，总结了线粒体自噬对脓毒症心肌的影响，以及线粒体自噬途径的信号传导途径，揭示线粒体自噬参与心肌保护的作用机制，为寻找靶向性调节线粒体自噬的分子或药物提供参考，为预防和治疗脓毒症心肌损伤提供新思路。

目的:探讨隐丹参酮在体外对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:以浓度为0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、8.0 μmol/L的隐丹参酮处理J82细胞48 h后，采用CCK-8法检测其对J82细胞增殖的影响。Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测J82细胞凋亡情况。免疫印迹法(Western blotting)检测细胞增殖及凋亡相关蛋白p65、caspase 3、caspase 8、caspase 9表达的差异。结果:CCK-8法结果显示各组的450 nm吸光度( A)值：对照组(1.77±0.06)，0.5 μmol/L组(1.78±0.08)，1.0 μmol/L组(1.64±0.05)，2.0 μmol/L组(1.48±0.12)，3.0 μmol/L组(1.20±0.07)，4.0 μmol/L组(0.93±0.10)，5.0 μmol/L组(0.76±0.02)，8.0 μmol/L组(0.05±0.01)，各组的450 nm A值差异有统计学意义( F＝329.83， P＝0.00)，除0.5 μmol/L组外其余各两组间的差异均有统计学意义(均 P<0.05)。流式细胞术检测结果显示三组的早期凋亡率和总凋亡率在总体上差异均有统计学意义( F＝32.49， P＝0.00； F＝6.39， P＝0.03)；两个实验组的早期凋亡率均高于对照组(均 P<0.05)，且3.0 μmol/L组比1.0 μmol/L组更高[(11.83±1.12)%比(7.01±1.84)%， t＝3.73， P<0.05]。Western blotting结果显示隐丹参酮处理后p65蛋白表达减少，caspase 3、caspase 9蛋白表达增加。 结论:隐丹参酮在体外可能通过抑制NF-κB信号转导通路来抑制人膀胱癌J82细胞增殖，并通过线粒体途径诱导其凋亡。

目的:探讨Alisertib(ALS)对人结直肠癌HT29和Caco-2细胞(来自美国典型菌种保藏中心)的诱导细胞凋亡性程序性死亡的作用及与p53表达状态间的关系。方法:采用人结直肠癌HT29和Caco-2细胞进行实验。对照组用同浓度的二甲基亚砜(DMSO)，实验组用0.1、1.0、5.0 μmol/L ALS处理细胞。噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活力，计算半数抑制浓度(IC 50)；流式细胞术检测细胞的凋亡率；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞凋亡过程中关键调节分子的蛋白表达。应用Prism软件多重比较通过单因素方差分析(ANOVA)，然后进行Tukey的多重比较。 结果:ALS作用于HT29和Caco-2细胞24、48 h后，IC 50值分别为48.4、9.9、89.2和52.1 μmol/L。用1.0、5.0 μmol/L ALS处理HT29和Caco-2细胞，Aurora A激酶(AURKA)的磷酸化(p-AURKA)水平分别减少为对照组的45.6%、6.3%( F＝100.400, P<0.01)和65.7%、30.7%( F＝26.410， P<0.01)。HT29细胞表达p53蛋白，而Caco-2细胞不表达p53蛋白。与对照组比较，1.0、5.0 μmol/L ALS处理HT29和Caco-2细胞后，细胞凋亡率升高为13.4%、14.3%( F＝11.240, P<0.05)和11.8%、10.5%( F＝9.357, P<0.05)。5.0 μmol/L ALS引起HT29细胞的B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、细胞色素C(Cyt-C)、裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)和裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的表达水平分别升高85%( F＝7.289, P<0.05)、1.6倍( F＝9.640, P<0.05)、1.3倍( F＝12.120, P<0.05)、4.3倍( F＝56.320, P<0.05)，B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的表达降低为28%( F＝8.849, P<0.01)。在Caco-2细胞中5.0 μmol/L ALS引起RIP、磷酸化Fas相关死亡域蛋白(p-FADD)和cleaved PARP的表达分别增加1.5倍、83%和1.1倍。 结论:ALS分别通过线粒体途径和死亡受体途径诱导HT29和Caco-2细胞发生凋亡性程序性细胞死亡，与p53蛋白是否表达有关。