目的:探讨细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)对肾细胞癌进展与舒尼替尼治疗敏感性的影响及其机制。方法:分析基因本体论(GO)细胞周期数据集与基因表达综合数据库(GEO)肾癌舒尼替尼耐药基因集，结合癌症基因组图谱(TCGA)数据，鉴定出差异表达的CDC25C基因。在Caki-1与786-O细胞系中转染CDC25C小干扰RNA(siRNA)及其阴性对照，通过细胞活性检测、集落形成和Transwell实验分别检测CDC25C对肾癌增殖、迁移和侵袭潜能的影响。通过免疫印迹法检测CDC25C蛋白表达，给予舒尼替尼处理探究CDC25C对肾癌靶向治疗敏感性的影响。Gene Ontology富集分析进一步明确CDC25C潜在的作用通路。采用 t检验及Anova-test等进行组间差异分析，Spearman检验进行相关分析，Kaplan-Meier法绘制生存曲线。 结果:CDC25C在肾癌组织中表达量(0.45±0.54)显著高于正常组织(0.07±0.15)，差异有统计学意义( t＝0.758， P<0.01)。生存分析显示CDC25C高表达患者中位生存期(63.7个月)显著低于低表达组(91.7个月)，差异有统计学意义(Log-rank＝9.860， P<0.01)。敲低CDC25C后Caki-1细胞克隆形成数目[(56.33±7.77)个]低于对照组[(111.67±17.50)个， t＝4.991， P<0.01]、侵袭细胞数[(81.33±9.02)个]低于对照组[(201.00±18.52)个， t＝10.006， P<0.01]，舒尼替尼半抑制浓度(IC 50)值[(0.35±0.19) μmol/L]也显著低于对照组细胞[(6.73±1.47) μmol/L， t＝7.439， P<0.01]，786-O细胞趋势一致。 结论:CDC25C在肾癌中表达增高并促进肿瘤细胞增殖、转移与舒尼替尼耐药性，靶向CDC25C作用轴有望进一步遏制肾癌进展。

目的 探讨分裂相关增强子1(Hairy and enhancer of split related protein 1,HESR-1)、细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(Cell division cycle 25C,CDC25C)在直肠癌组织中的表达及其临床意义.方法 选择166例行根治性手术的直肠癌患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织中HESR-1和CDC25C的表达,收集患者临床病理参数并进行随访,分析HESR-1和CDC25C表达对直肠癌患者临床病理参数及预后的影响.结果 肠癌组织中CDC25C、HESR-1的阳性率均高于癌旁组织(46.9％vs 12.6％,41.6％vs 7.6％),差异有统计学意义(P＜0.05).在癌组织中,CDC25C mRNA与HESR-1 mRNA的表达呈正相关(r=0.862,P=0.003).癌组织CDC25C及HESR-1表达阳性患者的肿瘤直径和淋巴结转移率均高于表达阴性者(P＜0.05).Cox多因素分析结果显示,肿瘤直径、淋巴结转移、CDC25C阳性及HESR-1阳性是影响直肠癌患者预后的独立危险因素(P＜0.05).结论 HESR-1和CDC25C在直肠癌组织中表达升高,且与患者预后密切相关.

目的 探讨细胞分裂周期蛋白25C(CDC25C)对黑色素瘤B16细胞线粒体应激反应和线粒体途径凋亡的影响.方法 取黑色素瘤B16细胞进行培养,将细胞随机分为转染组、转染对照组、空白对照组.转染组转染CDC25C低表达慢病毒质粒,转染对照组转染慢病毒空质粒,空白对照组正常培养.利用Rhod-2/AM与MitoSOX荧光探针检测细胞线粒体内Ca2+浓度及线粒体活性氧(ROS),RT-qPCR法和Western blotting法分别检测细胞线粒体应激反应相关分子ClpP、LONP1及线粒体途径凋亡相关分子Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达.结果 与转染对照组和空白对照组相比,转染组细胞线粒体Ca2+及ROS含量增加,ClpP、LONP1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或<0.01).结论 CDC25C表达下调激活黑色素瘤B16细胞发生线粒体应激反应,并诱导线粒体途径的细胞凋亡.

目的 探讨人脑膜瘤组织细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(Cdc25C)的表达及其临床意义.方法 选取手术切除并经病理证实的36例人脑膜瘤组织和6例人正常脑组织,提取相应组织的总RNA后,分别以RT-PCR和qPCR技术检测Cdc25C cD-NA和mRNA,并结合病人的临床资料进行统计分析.结果 Cdc25C在人脑膜瘤组织中的阳性率为66.67％,明显高于其在正常人脑组织中的阳性率16.67％(P＜O.05);Cdc25C mRNA在人脑膜瘤组织中的表达量约为其在人正常脑组织中的3.3倍(P＜0.05).Cdc25C在脑膜瘤组织中的阳性率和阳性表达水平均与病人的年龄、性别、肿瘤大小、病理类型及WHO病理分级等临床病理特征无关(P＞0.05).结论 Cdc25C过表达可能与脑膜瘤的发生相关.

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制肝癌相关抗原细胞分裂周期蛋白25(Cdc25C)表达对小鼠肝癌细胞Hepa1-6增殖和迁移的作用及其机制.方法:将细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染阴性siRNA)及3个实验组(转染siRNA-Cdc25C-1组、转染siRNA-Cdc25C-2组、转染siRNA-Cdc25C-3组).转染8h后,通过荧光显微镜观察转染效率,并采用Western blotting法检测各组Cdc25C蛋白的表达,筛选出最有效的siRNA序列;用荧光定量PCR(qPCR)法检测内质网应激反应(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X-盒结合蛋白(XBP-1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达,CCK-8法和Transwell实验检测Hepa1-6细胞增殖和迁移能力.结果:成功构建Cdc25C低表达的Hepa1-6细胞株,转染siRNA-Cdc25C-1组的转染效率最高且Cdc25C蛋白表达水平最低.与阴性对照组比较,转染siRNA-Cdc25C-1组Hepa1-6细胞的迁移率明显降低,细胞增殖抑制率及GRP78、XBP-1、CHOP基因相对表达量明显升高(P＜0.05).空白对照组与阴性对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论:Cdc25C基因低表达能抑制肝癌细胞增殖和迁移,其机制可能与ERS有关.

目的 探究细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)在肝癌中的表达及其意义,为指导临床治疗、评估患者预后及制订肝癌防治策略与措施提供科学依据.方法 利用基因表达谱数据交互分析(GE-PIA)数据库、UALCAN在线数据库分析CDC25C在肝癌组织中的差异表达,以及CDC25C在肝癌组织中相应表达水平与预后的关系.应用癌症基因组图谱(TCGA)数据集分析CDC25C在肝癌及其他组织中的基因突变情况.通过相互作用基因库检索工具(STRING)数据库进一步构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络.结果 与正常肝组织样品相比,肝癌组织中CDC25C的表达明显增强(P<0.01).CDC25C的高表达可明显降低肝癌患者的无病生存期和总体生存期(P<0.01).CDC25C在肝癌组织中的表达与肝癌的分级、分期相关(P<0.05或P<0.01).另外,CDC25C的4个特异性基因突变(V41A、L87H、N222K和X309-splice)发生在肝癌样品中,这些独特的突变在其他肿瘤组织中均未发现.GO基因功能注释及KEGG通路富集分析结果提示,CDC25C可能与细胞周期信号通路密切相关.结论 CDC25C在一定程度上影响着肝癌的发生、发展,有望成为肝癌基因诊断、治疗及预后的靶点.

目的 探讨食管鳞状细胞癌(以下简称食管鳞癌)组织中细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(Cdc25C)的表达与放疗抵抗间的关系.方法 回顾性分析2011年1月—2016年12月在湖南省肿瘤医院接受根治性放疗的食管鳞癌患者50例,采用免疫组织化学法检测放疗前食管鳞癌组织中的Cdc25C的表达水平,分析Cdc25C表达与放疗后食管鳞癌患者近期疗效及生存预后的关系.结果 食管鳞癌Cdc25C高表达组患者与低表达组患者的生存率比较,差异有统计学意义(P <0.05),高表达组患者生存率低于低表达组患者.Cdc25C在食管鳞癌中高表达与预后不良相关.结论 Cdc25C的高表达可能增强食管癌对放疗的抵抗,Cdc25C有望作为食管鳞癌放射治疗中潜在判断预后的分子标志物.

细胞分裂周期蛋白25(cell division cycle 25,Cdc25)是一种重要的双特异性磷酸酶,对卵母细胞减数分裂进程和胚胎发育具有重要的调控作用.本研究利用RACE技术克隆获得了光裸星虫(Sipunculus nudus)Cdc25(Sn-Cdc25)cDNA 全长.Sn-Cdc25全长为4 130 bp,其中3'UTR 为 1 849 bp,5'UTR 为427 bp,开放阅读框为1 854 bp,编码617个氨基酸.序列分析显示,Sn-Cdc25蛋白分子量为69.58kD,具有M相诱导磷酸酶结构域(M-phase inducer phosphatase domain)和硫氰酸酶同源结构域(rhodanese-like domain)两个典型的Cdc25蛋白结构域,以及能催化去磷酸化过程的活性位点序列HCX5R.多序列比对发现Cdc25同源蛋白的C端同源性较N端的高.三级结构预测表明Cdc25同源蛋白及其活性位点的三级结构构象高度相似.motif分析中共发现5个motifs,其中motif 1和motif 2分别为Paxillin LD基序和MYND结构域结合基序.系统进化树分析显示,无脊椎动物和脊椎动物的Cdc25分别聚为两大支.RT-qPCR结果显示,在不同发育时期卵母细胞中,Sni-Cdc25的表达差异显著,具有两个峰值,从卵黄形成初期至卵黄旺盛合成后期(O1～O3)Sn-Cdc25表达量上升可能与Cdc25促进DNA的复制过程相关;而从体腔液中进入到肾管后(O4～O5),表达量的迅速上升可能有利于成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)的活化.研究结果为深入认识星虫动物卵母细胞发育调控机制和优化人工繁育技术积累基础资料.

目的:研究棕矢车菊素对宫颈癌(cervical carcinoma,CC)细胞Hela的增殖抑制和周期阻滞能力,探索棕矢车菊素是否具有宫颈癌治疗药物的潜力.方法:MTT比色法检测细胞活力;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl amino ester,CFSE)法检测细胞增殖水平变化;碘化丙啶(propidium,PI)单染检测细胞周期;免疫印迹法(western blot,WB)检测细胞蛋白表达水平.采用裸鼠成瘤检测棕矢车菊素体外抑制肿瘤效果.结果:棕矢车菊素可以显著抑制Hela细胞活力水平,且具有时间和浓度依赖性;棕矢车菊素抑制Hela细胞增殖,且100μmol/L棕矢车菊素可显著诱导细胞发生G2/M周期阻滞.分子机制上,研究证明了棕矢车菊素可以通过促进细胞周期检验点激酶(checkpoint kinase 2,CHK2)激活,抑制细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cyclin 25 homolog C,CDC25C)活力,从而提高无活性的pCDC2水平.棕矢车菊素同时降低了Cyclin B1表达.因此,棕矢车菊素通过抑制G2/M期调控蛋白Cyclin B1/CDC2复合物活性来诱导细胞发生G2/M期阻滞.同时,体外裸鼠成瘤,棕矢车菊素灌胃4周后,小鼠肿瘤体积显著减小.结论:在Hela细胞上,棕矢车菊素具有抑制细胞增殖和诱导G2/M期阻滞的作用,证明了棕矢车菊素具有抗宫颈癌细胞的治疗潜力.

目的 研究核转运蛋白α2(KPNA2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)在肝细胞癌组织中的表达及相关性.方法 回顾性收集山西省人民医院2012年9月至2015年10月手术切除的肝细胞癌石蜡包埋组织标本100例,另选取20例癌旁组织石蜡包埋标本.采用免疫组织化学染色检测肝细胞癌和癌旁组织中KPNA2和CDC25C的表达情况,采用Pearson相关性方法分析KPNA2和CDC25C表达的相关性,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线.结果 肝细胞癌组织中KPNA2、CDC25C高表达率均高于癌旁组织(均P<0.05).Pearson相关性分析结果显示,KPNA2与CDC25C的表达呈正相关(r=0.317,P=0.002).将患者分为KPNA2高表达组(53例)和低表达组(47例),CDC25C高表达组(65例)和低表达组(35例).KPNA2高表达组和CDC25C高表达组甲胎蛋白>400μg/L、肿瘤直径>5 cm比例均高于相应的低表达组,差异均有统计学意义(均P<0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,KPNA2高表达组和CDC25C高表达组总生存率均低于相应的低表达组(Log-rankχ2=3.887、10.339,P=0.049、0.001).结论 肝细胞癌组织中KPNA2、CDC25C表达增加,且二者表达呈正相关.KPNA2、CDC25C高表达患者总生存率较低.