CRISPR/Cas是原核生物在进化过程中获得的一种免疫防御系统,用于抵抗外来遗传物质的入侵,近年来被开发成为高效的基因编辑、基因调控以及分子诊断工具.其可编程靶向机制揭开了利用该系统进行基因组操作的序幕,并允许在活性范围内实现动态调节和控制基因表达.作为现有基因修饰手段中灵活性最强和成本最低的技术之一,已被广泛应用于临床疾病治疗、工农业生产、可持续染料开发和化学品加工等领域.随着对CRISPR/Cas系统的不断深入挖掘和探索,大量研究报道了 gRNA工程改造及优化方法,包括改变间隔序列长度、调节恒定区和可变区的结构、向末端或中间延伸添加额外功能序列及化学合成修饰等,以期降低脱靶突变率,提高作用效率,充分激发CRISPR基因操纵工具在生物医学方面的潜力.基于此,本综述将介绍CRISPR/Cas9和CRISPR/Cas12系统中gRNA工程化设计方法及应用研究的最新进展,分析探讨了当前工程化gRNA技术面临的机遇和挑战,旨在为获得性能更加优异的gRNA提供思路和方向,从而提高利用CRISPR/Cas系统探测人类细胞基因组的能力,进一步为可编程生物学带来更多可能性.

鼠李科枣属植物包含原变种枣(Ziziphus jujuba Mill.var.jujuba)、无刺枣(Ziziphus jujubavar.inermis)、酸枣(Ziziphus jujuba var.spinosa)等许多品种,而其中大枣在全国各地有最丰富的栽培变种,如哈密大枣、黄河滩枣等.枣属植物品种丰富且药食两用,多糖作为枣的主要活性成分之一,是其发挥功效的重要药效物质基础.枣多糖已被发现具有促造血、抗氧化、抗肿瘤、修复肝损伤、免疫调节、抗炎等多种药理活性.本文通过对不同品种和不同产地来源的枣类多糖文献进行全面归纳分析,综述了枣多糖发挥生物活性的潜在作用机制,汇总了枣多糖相对分子质量、单糖组成、糖残基连接方式等一级结构特征,并对枣多糖硫酸化、磷酸化、羧甲基化、硒化、乙酰化的取代基修饰进行总结,以期为枣类在多糖创新药物、功能食品等领域的研究与开发利用提供参考.

目的:通过物联网平台对传统病房进行智慧升级，实现病区智慧化、精细化管理，对升级后的效果进行评价。方法:于2020年6月，便利抽样法选取山东第一医科大学附属省立医院心内科2个病区作为试点单元,实施智慧化病房管理模式。以易改造、易施工、易维护为原则，在实现物联网全覆盖的基础上，接入硬件和软件系统，完成传统病房智慧升级，采用结构化观察、半结构式访谈法评估升级后工作效率以及患者的使用体验。结果:升级后生命体征采集与记录耗时、护理风险评估与耗时、标识牌制作与悬挂耗时分别为（4.24 ± 0.87）、（4.07 ± 0.86）、0 min与升级前的（6.50 ± 2.95）、（4.73 ± 1.62）、（1.13 ± 0.43）min相比均降低，差异均有统计学意义（ t=8.04、3.99、28.96， P<0.01）。半结构式访谈结果显示，患者认为智慧病房智能化，节省人力和等待时间；操作简单，改善医护工作者和患者使用体验；系统更新不及时等问题。 结论:传统病房智慧升级有助于患者精细化管理，提高工作效率，改善医护工作者和患者使用体验，在未来发展中不断改进，可为同类病区的智慧升级提供实践路径借鉴。

目的:了解炎症性肠病患者心理弹性的保护性因素，为提高患者心理弹性水平提供依据。方法:于2020年12月—2021年3月采用目的抽样法选择在北京协和医院消化内科病房住院的16例炎症性肠病患者为研究对象，对其进行半结构式深入访谈，使用定向内容分析法对访谈资料进行整理和分析。结果:共提炼出个体内在特征、社会支持网络、环境感知及主动改造3个主题及10个亚主题。其中个体内在特征包括坦然接受疾病、积极的疾病认知、恰当的情绪调节、明确的目标动机，社会支持网络包括坚实的家庭支持、专业的医疗照护、稳定的人际关系、如常的工作状态，环境感知及主动改造包括选择性感知环境和积极的行为应对。结论:医护人员应与患者的家人、朋友等多方协同配合，实施认知干预，完善支持体系，促进积极行为，从而提高患者的心理弹性。

人乳外泌体是母乳中新发现的活性信号小体，内含丰富的核酸、蛋白质和脂质，对新生儿肠道黏膜屏障的发育和成熟具有重要作用。此外，人乳外泌体还具有可改造和可修饰的特殊性质，有望为新生儿肠道疾病提供更加高效的防治策略。本文就人乳外泌体的来源、分离、鉴定、标记、结构特征、组成、生物学功能，及其对新生儿肠道黏膜屏障功能的影响进行综述。

开发具有高特异性、高灵敏度、低毒性的影像探针是推动肿瘤分子影像技术发展的核心。天然表达纯化的蛋白纳米笼作为一种能够在生物体内外自组装形成特定笼状结构的纳米粒子，具有粒度高度分散均一、优良生物相容性和生物可降解性以及工程化改造方法简单多样等优势，已被广泛应用于开发各类肿瘤分子影像探针。该文从天然蛋白纳米笼的种类和特性、工程化改造方法以及其在肿瘤分子影像的应用几个方面来综述其研究进展。

目的:对比呼吸道合胞病毒(RSV)融合前F蛋白(PreF)和融合后F蛋白(PostF)的免疫原性差异。方法:通过SDS-PAGE及Western blot鉴定PreF和PostF的表达，使用Octet仪器检测F蛋白与特异性抗体的亲和力，用PreF和PostF免疫小鼠，检测免疫血清的结合抗体与中和抗体差异。结果:PreF经改造后以稳定的三聚体形式存在，与单抗D25、8897、AM14、Palivizumab以及Motavizumab均具有很高的亲和力，但PostF缺乏表位?构象，并呈现单体构象，与D25、8897、AM14并无明显结合。PreF和PostF免疫小鼠的研究发现，AS01佐剂比铝佐剂更能诱导出高滴度结合抗体和针对RSV Long株的中和抗体。PreF与PostF免疫后诱导的结合抗体与PreF的结合能力相当，PostF免疫后诱导的结合抗体与PostF的结合水平显著高于PreF。结论:PreF拥有更多的抗体结合表位，改造后稳定的PreF三聚体重组蛋白能够诱导更强的中和抗体。同时，AS01佐剂免疫效果优于铝佐剂。因此，基于PreF稳定的三聚体结构改造及佐剂的研发对于RSV疫苗的发展至关重要。

目的:构建社区老年人居家环境适老化改造需求评估体系，为科学评估社区老年人的居家环境适老化改造需求提供理论依据。方法:于2021年6月—2022年5月通过文献回顾法、半结构式访谈法初步构建社区老年人居家环境适老化改造需求评估体系的各级指标，于2022年6—8月采用德尔菲法对17名专家进行2轮专家函询，通过指标的筛选与修改完成社区老年人居家环境适老化改造需求评估体系的构建。结果:经过2轮专家函询，问卷有效回收率均为100.00%，专家权威系数为0.815、0.850，肯德尔和谐系数分别为0.390、0.277（ P均<0.05），专家意见趋于一致。最终形成了包含5个一级指标（安全防护需求、辅具配备需求、智能优化需求、心理调适需求、健康管理需求）和46个二级指标的社区老年人居家环境适老化改造需求评估体系。 结论:本研究基于社区老年人需求构建的居家环境适老化改造需求评估体系具有科学性、合理性、实用性，可为未来居家环境适老化改造研究提供借鉴和参考。

目的:探究以本地需求为目标改造亨利福特医院健康系统(HFHS)RapidPlan肺癌立体定向放疗(SBRT)商用模型后用于放疗计划的可行性和优化效果。方法:结合最新临床指南证据和本单位临床实际对Eclipse内置HFHS模型做出如下适应性改造：①增加靶区结构内在肿瘤靶区体积(IGTV)、危及器官结构肺(Lung)，并设置相应参数。②将计划靶区体积(PTV)结构上限(Upper)值由109%调整至125%。③用本单位73例历史同步推量计划替换其原训练集，并在模型分析(Model Analytics)软件辅助下进行统计学确认和离群值处置。选取10例未参与建模的病例用于独立验证和比较改造前后模型在相同布野条件下的自动优化结果。靶区剂量归一后比较：PTV适形指数、危及器官平均剂量、最大剂量和剂量-体积参数等。结果:改造后的模型验证计划(M local_P)PTV DVH"尾部"与IGTV DVH"肩部"及"尾部"表现较原HFHS模型验证计划(HFHS_P)高。M local_P的PTV_CI(1.07±0.13)显著小于HFHS_P(1.25±0.24)，差异有统计学意义( Z＝－2.497， P<0.05)。除心脏_ D15cc、心脏_ Dmax外M local_P绝大部分危及器官剂量学参数均较HFHS_P更低，且标准差更小。但对于心脏_ D15cc和心脏_ Dmax，两种计划差异不超过3.06%。HFHS_P不满足要求剂量学参数达10项次，其中两项未通过例数的PTV_CI值为1.52与1.74，远超临床可接受范围。 结论:HFHS商用模型可通过计划训练集替换、参数调整等方法进行本地化改造。且改造后模型优化的计划在靶区适形性与高量等方面更满足本单位临床要求，在危及器官保护和一致性等方面也表现更优。

为切实发挥病原学诊断在抗菌药物合理使用中的指导作用，各级医院亟须建立临床微生物标本送检的有效管控体系。针对我国医疗机构普遍存在的抗菌药物治疗前微生物标本送检率较低、微生物标本结构不合理以及大多采集晨痰、晨尿标本进行病原学检测等问题，浙江大学医学院附属第二医院运用人工智能技术构建了临床微生物标本送检信息化管控系统，运用内置智能规则引擎对医生开立抗菌药物时的微生物标本采样送检实行全过程管控，促使医生在抗菌药物治疗使用前执行有样必采的要求，并推荐优先采集无菌标本；此外，以能够24 h不间断接收微生物标本并实时处理为目标改造实验室及送检流程。该管控系统于2015年12月开始在全院应用，2016—2023年每年6月的首剂治疗性使用抗菌药物前微生物标本送检率均值为79.2%，较2014年6月的41.7%提高90.2个百分点( χ2＝467.781， P<0.01);微生物标本结构持续优化，无菌标本在所有送检标本中的占比由2014年的47.2%提升至2023年的49.9%( χ2＝139.119， P<0.01);晨痰和晨尿标本的占比分别从2014年的65.2%和60.6%降至2023年的11.1%和16.9%( χ2值分别为19 787.434和4 346.664， P<0.01)，为临床提供了更可靠的病原学诊断依据，可为医疗机构改进病原学标本送检管理提供参考。