-
阻止成纤维细胞中的Engrailed-1 基因激活可使皮肤创面愈合而不留下瘢痕
编辑人员丨1周前
瘢痕作为成人创伤愈合的终点,对于组织新生和功能恢复是不利的。一般认为Engrailed-1+ Fb谱系(EPF)在瘢痕形成过程中发挥作用,但是对Engrailed-1- Fb谱系(ENF)的研究较少。为了回答瘢痕形成过程中发挥纤维化作用的EPF本来就存在于组织中还是部分由ENF产生这个问题,研究人员首先利用细胞移植和转基因模型小鼠成功鉴定出了一种皮肤ENF亚群,该细胞亚群能够在小鼠出生后创伤愈合过程中通过激活Engrailed-1 基因产生新的EPF。其次,通过研究ENF对机械力的响应情况,研究人员还观察到,机械力能通过经典的机械转导信号激活Engrailed-1 基因。研究人员进一步证实,利用机械转导的最终转录效应子(YAP)抑制剂维替泊芬或转基因方法对Fb进行特异性YAP 基因敲除能阻断机械转导信号、抑制Engrailed-1 基因的激活。提示,ENF可以介导创面的再生,且YAP机械信号转导途径在ENF到EPF的转变过程中发挥着重要的作用。该研究的结果证明,出生后的创伤愈合有2种可能结果:一种是由EPF介导的纤维化反应,一种是由ENF介导的再生反应。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
维替泊芬对异丙肾上腺素诱导小鼠心肌纤维化的影响
编辑人员丨1周前
目的:探讨维替泊芬(VP)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌纤维化是否有抑制作用及对心功能的影响。方法:6周龄C57BL/6小鼠(购自中山大学实验动物中心)随机分为4组。对照组予以尾静脉注射1%二甲基亚砜(DMSO);ISO组予以皮下注射ISO (每天20 mg/kg);VP组予以尾静脉注射VP(每天2 mg/kg);ISO+VP组分别予以皮下注射ISO(每天20 mg/kg)和尾静脉注射VP(每天2 mg/kg)。连续给药7 d后行超声心动图检查评估心脏形态及功能。取材后行心脏质量、心脏体重比测定,天狼猩红染色检测心肌纤维化变化情况。酶联免疫吸附测定(ELISA)血浆氨基末端脑钠素原(NT-pro BNP)浓度。组间比较采用单因素方差分析。结果:成功建立了ISO诱导小鼠心脏纤维化模型。ISO组小鼠的左心室收缩末内径[(2.20±0.63) mm比(1.44±0.45) mm, F=9.730, P<0.05]及容积[(18.33±12.17) μl比(6.32±5.04) μl, F=8.890, P<0.05]较ISO+VP组增大,差异有统计学意义,左心射血分数(EF)较ISO+VP组降低[(56.65±11.41)%比(82.35±10.30)%, F=15.670, P<0.05],差异有统计学意义;ISO组小鼠的心脏质量[(0.11±0.01) mg比(0.10±0.01) mg, F=13.560, P<0.05]及心脏体重指数[(0.57±0.03)%比(0.51±0.02)%, F=23.950, P<0.05]均大于ISO+ VP组,差异有统计学意义;ISO组小鼠血浆NT-pro BNP浓度较VP组升高[(0.57±0.16) μg/L比(0.23±0.07) μg/L, F=9.340, P<0.05],差异有统计学意义;天狼猩红染色结果显示ISO组小鼠左室心肌纤维化较ISO+VP组严重[(17.48±5.85)%比(9.27±2.62)%, F=30.190, P<0.05],差异有统计学意义。 结论:VP可抑制ISO诱导的心脏纤维化并改善左心收缩功能。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
红藤方从Hippo/YAP通路抑制子宫腺肌症纤维化的机制研究
编辑人员丨1周前
目的:通过观察红藤方对子宫腺肌症(ADS)小鼠子宫组织上皮细胞间充质转化(EMT)、成纤维细胞向肌成纤维细胞转化(FMT)及Hippo通路中关键蛋白的影响,探讨红藤方抑制ADS纤维化的作用机制。方法:将小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、红藤方组、维替泊芬组,每组8只。小鼠出生当日为第0天,从第1天开始,模型组、红藤方组、维替泊芬组小鼠灌胃1 mg/kg他莫昔芬溶剂,连续给药 5 d。造模后第42天,经HE染色验证造模成功。第43天开始,红藤方组小鼠每日灌胃红藤方水煎液16.5 g/kg,每3日腹腔注射0.9%NaCl溶液(100 μl/10 g);维替泊芬组小鼠每3日腹腔注射维替泊芬溶液100 mg/kg,同时每日灌胃蒸馏水100 μl/10 g;空白组及模型组小鼠每日灌胃等体积蒸馏水及每3日腹腔注射等体积0.9%NaCl溶液,共给药60 d。采用Masson染色法评估各组小鼠子宫组织纤维化程度;采用免疫组化染色及Western blot法检测各组小鼠子宫组织中E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Yes相关蛋白(YAP)、锌指转录因子(Snail)表达情况。结果:与模型组比较,红藤方组Masson染色蓝染面积与总染色面积比值降低( P<0.05);免疫组化和Western blot检测显示,与模型组比较,红藤方组小鼠子宫组织E-cadherin表达升高( P<0.05),Vimentin、α-SMA、YAP表达降低( P<0.01或 P<0.05)。 结论:红藤方可抑制ADS发生EMT、FMT,从而抑制纤维化,其作用机制与调控Hipoo/YAP通路相关。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
合理选择中心性浆液性脉络膜视网膜病变的治疗时机及治疗方法
编辑人员丨1周前
中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)是一种常见的黄斑疾病,主要表现为黄斑区浆液性脱离,虽有自限性,但接近一半的患者长期迁延不愈或反复发作最终导致不可逆的视力损伤。半剂量光动力疗法(PDT)是治疗CSC的有效方法,但在光敏剂维替泊芬短缺的情况下,如何有效治疗CSC成为眼科医生共同关心的话题。根据CSC患者中心凹外核层厚度变化与自然病程、PDT治疗关系的最新研究成果,CSC患者应尽早接受有效治疗,以防止中心凹外核层变薄导致视功能损伤不可逆转。针对目前文献报道的除PDT以外的多种治疗方法,建议根据是否存在渗漏点及其渗漏点与中心凹的位置关系,首先考虑渗漏点激光光凝或阈值下微脉冲激光治疗;当合并黄斑部脉络膜新生血管和(或)息肉样脉络膜血管病变时,可考虑抗血管内皮生长因子药物治疗。不建议选择未经循证医学证实有效的其他治疗手段。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
YAP1/DEPDC1B调控mTOR信号通路促进肝母细胞瘤增殖的机制研究
编辑人员丨1周前
目的:研究YAP1/DEPC1B信号轴在调控肝母细胞瘤细胞(hepatoblastoma,HB)增殖中的作用及潜在机制。方法:从GEO数据库获取相关转录组测序数据集并行相应的生物信息学分析。实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blot实验检测基因表达水平变化。MTT实验和平板克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖能力变化。基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)来探究YAP1/DEPDC1B调控的潜在信号通路。结果:GSEA表明与正常肝脏组织相比,Hippo信号通路在肝母细胞瘤组织中异常激活,进一步分析证实YAP1在肝母细胞瘤组织中呈异常高表达。细胞学实验证实YAP1特异性抑制剂维替泊芬能显著抑制HB细胞HUH-6的增殖( P<0.05)。韦恩图和相关性分析表明YAP1可能调控DEPDC1B的表达,qRT-PCR和Western blot证实抑制YAP1表达后DEPDC1B表达量降低。GSEA表明在HB组织中,高表达的DEPDC1B能异常激活mTOR信号通路,进一步研究证实敲低DEPDC1B后,mTOR信号通路关键基因HRAS、MAP2K2的表达量明显降低。 结论:Hippo-YAP1信号通路在肝母细胞瘤中异常激活,YAP1可能通过DEPDC1B调控mTOR信号通路促进肿瘤细胞增殖,YAP1可能是治疗HB的潜在靶标。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
半剂量维替泊芬光动力治疗飞行员中心性浆液性脉络膜视网膜病变一例并文献复习
编辑人员丨1周前
目的:探讨半剂量维替泊芬光动力学疗法(photodynamic therapy,PDT)治疗飞行员中心性浆液性脉络膜视网膜病变(central serous chorioretinopathy,CSC)的飞行适应性及航空医学的鉴定原则。方法:分析1例预警机飞行员单眼CSC的临床诊断、治疗过程及医学鉴定情况,复习相关文献。结果:本例飞行员诊断为右眼中心性浆液性脉络膜视网膜病变6个月,保守治疗无效。眼科检查未见治疗禁忌症,行半剂量维替泊芬PDT治疗。3.0 mg/m 2的维替泊芬静脉注入开始后15 min,使用波长689 nm、能量50 J/cm 2 半导体激光照射83 s。治疗后避光休息48 h。1个月后复查,右眼视物变形症状消失,视力正常,眼底自发荧光、对比敏感度、Amsler格检查恢复正常,黄斑相干光断层扫描(optical coherence tomography,OCT)显示黄斑区色素上皮层轻度紊乱、视网膜下液体完全吸收。根据飞行员体检标准,给予飞行合格。治疗后正常参加原机型飞行60 h(其中包20 h夜间飞行)。 结论:军事飞行员半剂量PDT治疗慢性CSC后,视功能恢复正常者可以考虑放飞。飞行适应性评价除常规定期视功能检查外,应进行眼底自发荧光、对比敏感度、Amsler格检查、黄斑OCT等与CSC相关的特殊眼科检测。半剂量PDT是治疗军事飞行员慢性CSC的有效方法。
...不再出现此类内容
编辑人员丨1周前
-
汉黄芩素调节Hippo/YAP信号通路对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响
编辑人员丨2周前
目的:探究汉黄芩素调节Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌纤维化的影响.方法:采用腹腔注射阿霉素的方式构建大鼠CHF模型,成功造模36只大鼠,将其随机分为模型组、汉黄芩素组(汉黄芩素100 mg/kg)、汉黄芩素+维替泊芬组(100 mg/kg汉黄芩素+100 mg/kg维替泊芬),每组12只.剩余12只大鼠作为对照组.采用彩色多普勒超声系统检测各组大鼠心功能参数:左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD);称重并计算各组大鼠心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI);酶联免疫吸附法(ELISA)检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;Masson染色法检测大鼠心肌胶原容积分数(CVF)和血管周围纤维面积和血管管腔面积比值(PVCA/LA);苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理学变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测大鼠心肌组织Hippo/YAP信号通路相关蛋白、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、结缔组织生长因子(CTGF)表达.结果:与对照组相比,模型组大鼠LVEF、LVFS、心肌组织SOD水平及哺乳动物ste-20样激酶(MST)1/2、大型肿瘤抑制因子(LATS)1/2磷酸化水平明显降低(P<0.05),LVEDD、LVESD、HMI、LVMI、心肌组织MDA水平、CVF、PVCA/LA、心肌组织YAP、MMP-2、MMP-9、CTGF蛋白表达明 显升高(P<0.05),心肌组织出现大量胶原纤维沉积和损伤.与模型组相比,汉黄芩素组LVEF、LVFS、心肌组织SOD水平、MST1/2、LATS1/2磷酸化水平明显升高(P<0.05),LVEDD、LVESD、HMI、LVMI、心肌组织 MDA 水平、CVF、PVCA/LA、心肌组织 YAP、MMP-2、MMP-9、CTGF 蛋白表达明显降低(P<0.05),心肌组织胶原纤维沉积和损伤减少.维替泊芬增强了汉黄芩素对CHF大鼠心肌纤维化的改善作用.结论:汉黄芩素可能通过激活Hippo/YAP信号通路、抑制YAP表达来减轻CHF大鼠心肌纤维化.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2周前
-
槐定碱调节Hippo-YAP信号通路对急性呼吸窘迫综合征大鼠的改善作用
编辑人员丨3周前
目的:探究槐定碱(SRI)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠的改善作用,并探究其作用机制.方法:随机取10只SD大鼠为空白组.50只SD大鼠采用脂多糖(LPS)气管滴注法构建ARDS大鼠模型.将造模成功大鼠随机分为模型组、SRI低剂量组、SRI中剂量组、SRI高剂量组、维替泊芬(Verteporfin)+SRI高剂量组,每组10只.造模2 h后SRI低、中、高剂量组分别予低(2 mg/kg)、中(6 mg/kg)、高(12 mg/kg)剂量SRI腹腔注射,Verteporfin+SRI高剂量组在腹腔注射Verteporfin(100 mg/kg)的基础上予SRI腹腔注射(12 mg/kg).空白组和模型组腹腔注射等体积生理盐水.给药10 h后检测大鼠血氧分压(PaO2)、氧指数[PaO2/吸入氧浓度(FiO2)]和肺湿/干(W/D)比,HE染色观察肺组织病理变化并进行病理损伤评分,酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1[3和IL-10的水平,BCA检测BALF中总蛋白水平,姬姆萨染色检测BALF中巨噬细胞和中性粒细胞数量,ELISA法检测肺组织丙二醛(MDA),比色法检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性,荧光法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,Western blotting检测肺组织Hippo-YAP通路蛋白表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠肺组织结构破坏,大量炎症细胞浸润;与模型组比较,SRI低、中、高剂量组肺组织结构有所恢复;与SRI高剂量组比较,Verteporfin+SRI高剂量组肺组织损伤加重,肺泡肿胀、变性,炎症细胞浸润明显.模型组大鼠PaO2、PaO2/FiO2值低于空白组,W/D比、病理损伤评分高于空白组(P<0.05);SRI低、中、高剂量组PaO2、PaO2/FiO2值高于模型组,W/D比、病理损伤评分低于模型组(P<0.05);Verteporfin+SRI高剂量组PaO2、PaO2/FiO2值低于SRI高剂量组,W/D比、病理损伤评分高于SRI高剂量组(P<0.05).模型组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、IL-10、总蛋白水平及巨噬细胞计数、中性粒细胞计数高于空白组(P<0.05);SRI低、中、高剂量组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、总蛋白水平及巨噬细胞计数、中性粒细胞计数低于模型组,BALF中IL-10水平显高于模型组(P<0.05);Verteporfin+SRI高剂量组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β、总蛋白水平和巨噬细胞计数、中性粒细胞计数高于SRI高剂量组,BALF中IL-10水平低于SRI高剂量组(P<0.05).模型组大鼠肺组织MDA、MPO、p-YAP蛋白相对表达量及p-LATS1/LATS1高于空白组,SOD活性及YAP、TEAD1蛋白相对表达量低于空白组(P<0.05);SRI低、中、高剂量组大鼠肺组织MDA、MPO、p-YAP蛋白相对表达量及p-LATS1/LATS1低于模型组,SOD活性及YAP、TEAD 1蛋白相对表达量高于模型组(P<0.05);Verteporfin+SRI高剂量组大鼠肺组织MDA、MPO、p-YAP蛋白相对表达量及p-LATS1/LATS1高于SRI高剂量组,SOD活性及YAP、TEAD1蛋白相对表达量低于SRI高剂量组(P<0.05).结论:SRI能抑制ARDS大鼠炎症反应和氧化应激,其作用机制可能与激活Hippo-YAP信号通路有关.
...不再出现此类内容
编辑人员丨3周前
-
连翘苷通过激活Hippo-YAP信号通路抑制结肠癌LS180细胞的恶性生物学行为
编辑人员丨2024/7/27
目的:探究连翘苷(Phi)通过调控Hippo/YAP信号通路对结肠癌LS180细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:用不同浓度(0、5、10、20、40、80 μmol/L)的Phi处理人结肠癌LS180细胞,MTT法检测24、48 和72 h时的细胞活力.将LS180细胞分为对照组、Phi-L(5 μmol/L Phi)组、Phi-M(10 μmol/L Phi)组、Phi-H(20 μmol/L Phi)组、Phi-H+YAP抑制剂维替泊芬(VP)组(20 μmol/L Phi+5 μmol/L VP),各组均处理24 h.EdU法检测Phi对各组细胞增殖的影响,划痕愈合实验、Transwell小室法分别检测Phi对细胞迁移和侵袭的影响,免疫荧光法和WB法检测Phi对细胞Ki-67表达率和LATS1、YAP和p-YAP、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin表达的影响.构建LS180细胞移植瘤裸鼠模型,观察Phi对移植瘤体积和质量的影响,免疫荧光法和WB法检测移植瘤组织中Ki-67表达率和LATS1、YAP和p-YAP蛋白的表达水平.结果:与对照组比较,Phi-L、Phi-M和Phi-H组LS180细胞EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、Ki-67阳性率、MMP-2、MMP-9、N-cadherin表达均显著降低(均P<0.05),E-cadherin、LATS1和p-YAP/YAP表达均显著升高(均P<0.05);同时使用VP则部分逆转了Phi对LS180细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(均P<0.05).Phi显著抑制裸鼠移植瘤生长,与对照组比较,Phi组裸鼠移植瘤体积、质量和Ki-67 阳性率均显著降低(均P<0.05),LATS1和p-YAP/YAP水平均显著升高(均P<0.05).结论:Phi可能通过激活Hippo/YAP信号通路抑制结肠癌LS180细胞的恶性生物学行为.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/7/27
-
维替泊芬在肿瘤治疗中的作用研究现状
编辑人员丨2024/7/20
在眼科的临床实践中,维替泊芬(verteporfin)作为一种治疗年龄相关性黄斑变性(AMD)的光动剂,已经广泛地被使用了二十余年.近年来,研究人员发现,维替泊芬除了对年龄相关性黄斑变性有治疗效果以外,在肿瘤的治疗中也具有巨大的潜力.维替泊芬对于肿瘤的杀伤作用已经被大量研究和报道,它不仅可以作为光动剂在可见光下杀伤肿瘤细胞,还可在非光活化的条件下直接杀伤肿瘤细胞,本文主要综述了维替泊芬在肿瘤治疗中的作用研究现状.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2024/7/20
