本研究探究了miR-120在台湾乳白蚁Coptotermes formosanus抵御绿僵菌Metarhizium anisopliae的免疫反应中的作用.研究发现通过对台湾乳白蚁注射miR-120 agomir以增加白蚁体内miR-120的含量后,台湾乳白蚁的存活率降低约35％,绿僵菌对台湾乳白蚁的致死率提升约55％,同时显著抑制了台湾乳白蚁对绿僵菌的趋避反应.双荧光素酶报告系统等试验证实了miR-120靶向结合免疫基因Draper.通过对Draper进行注射法RNAi后,得到了类似于注射miR-120 agomir后的结果.研究结果表明,miR-120通过抑制靶基因Draper的表达,抑制了台湾乳白蚁抵御绿僵菌的免疫反应,最终导致台湾乳白蚁的存活率显著下降.该结果有助于进一步理解白蚁的免疫机制,并为开发抑制白蚁免疫防御反应的技术方法提供理论基础,有助于促进白蚁生物防治的发展.

台湾乳白蚁Coptotermes formosanus又称为地下白蚁,它以木质纤维素为主食,是广泛分布于全球的经济害虫.地下白蚁对病原微生物强大的免疫防御能力一直是其生物防治应用的瓶颈之一.植食性昆虫的解毒酶在其消化和免疫调节中起着至关重要的作用.针对具有木质素代谢活性的解毒酶在白蚁肠道免疫过程中氧化还原稳态的调控研究对揭示其肠道免疫机制有重要意义.本研究以金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae为免疫诱导物,基于肠道氧化还原态的微电极检测系统,首次对台湾乳白蚁感染真菌后前肠/唾液腺、中肠及后肠中氧化还原电位的变化进行了描述;并利用RNA干扰技术,抑制了具有木质素代谢活性的乳白蚁漆酶基因Cflac1在感染前后的表达,并确定了 Cflac1在乳白蚁肠道免疫防御真菌过程中对氧化还原稳态维系的重要作用.本研究丰富了白蚁肠道免疫机制的研究内容,为拓宽白蚁防治新靶点及生物防治技术的研发提供了理论支撑.

目的 研究自制绿僵菌杀蟑饵剂对德国小蠊成虫的继发传递毒性,为绿僵菌在防治卫生害虫上的应用提供参考.方法 首次毒杀实验采用取食饵剂的方式;继发毒性实验使用上次毒杀实验虫尸饲喂的方式进行.结果 特定浓度绿僵菌孢子与低剂量硼酸复配后实现增效作用,使得杀蟑时间由 15d大大缩短至9d,且硼酸的使用量为 3%,远低于市面普通化学杀虫剂.自制杀蟑饵剂对德国小蠊成虫继发毒杀的死亡率可达 100%,毒杀效果显著.结论 自制绿僵菌杀蟑饵剂对德国小蠊具有良好的单次继发传递毒性,具有一定的应用前景.

本研究将球孢白僵菌Beauveria bassiana和摩西球囊霉菌Glomus mosseae作为混合菌剂接种于烟草.设置了未施菌(CK)、单施球孢白僵菌(BB)、单施摩西球囊霉菌(GM)和混合施菌(MIX)4 个不同处理,并对田间烟草整个生长周期的农艺性状、叶绿素 SPAD 值、干物质积累和石油醚提取物(PEE)含量进行了测定.结果表明:混合施菌处理能显著提高苗期根系的农艺性状,表现出对根系的促生作用;幼苗的干物质积累也得到显著提升.移栽后,混合施菌处理的植株的最大叶面积、叶片数、茎围和株高相较于未施菌组均得到显著提升,植株叶绿素含量得到显著增加,干物质积累量提高了 1.24-1.32倍.在移栽 60 d后,MIX植株叶绿素含量显著降低,降幅达 20.1%.混合施菌处理显著提高了上部成熟烟叶的PEE含量,其中在B2F和B3F等级烟叶中分别提高了 5.70%和 6.68%.球孢白僵菌和摩西球囊霉的混合应用在烟草不同生长阶段均具有协同增效作用,显著改善了烟草的根系发育,提高了植株的生长势和上部叶PEE的含量.

目的:探究施用生防菌剂对浙贝母产量、质量、蛴螬防治效果及根际土壤的影响.方法:以江苏浙贝母鳞茎为实验材料,在大田条件下设置不同浓度的金龟子绿僵菌孢子粉+三菌合剂"宁盾"(S1、S2、S3)、常规化学药剂(40%辛硫磷乳油,CG)四个组,以不施药作为空白对照(CK),进行试验.结果:菌剂处理的三个组(S1、S2、S3)的浙贝母植株各外观性状指标大多比CK、CG组高,且CG组略高于CK组.S1、S2、S3 三个组的鳞茎受蛴螬的危害较CK、CG组明显降低,且产量均有显著提高.同时S1、S2、S3 三个组的生物碱含量及土壤中的速效钾、有效磷和电导率明显高于CK组,但与CG组差异不大.S2 组的土壤脲酶、碱性磷酸酶和蔗糖酶活性均较CK组显著提高,与CG组无显著差异.S1、S2、S3 三组土壤细菌中的厚壁菌门相对丰度较CK、CG组有所提高.S1、S2、S3 三组土壤真菌中的子囊菌门相对丰度较CK组有所提高,较CG组有所降低.结论:施用生防菌剂能够防治蛴螬、促进浙贝母的生长和改善其品质,并能提高土壤营养和改善微生物群落结构.本研究为在浙贝母生产中合理应用生防菌剂提供理论依据.

蚊虫是疟疾、登革热等传染病的重要传播媒介,对人类健康造成严重威胁.基于杀虫剂的化学防治是当前蚊媒疾病媒介控制的主要策略之一,但杀虫剂抗药性的威胁日益严重,迫切需要开发更多的蚊虫控制工具.昆虫病原真菌可作为化学杀虫剂的一种环保替代品,能够通过影响蚊虫的寿命和媒介能力等达到防控蚊虫和蚊媒传染病的目的,也能通过转基因技术对真菌进行改造间接发挥作用.该文对绿僵菌、白僵菌和大链壶菌等主要杀蚊真菌进行介绍,并对其在蚊虫防控中的研究进展进行综述和展望.

为探究盆栽牡丹植株补偿生长和非结构性碳水化合物(NSC)累积特性,并为盆栽牡丹株型管理提供试验依据.以2年生'洛阳红'嫁接苗为试验材料,考察修根强度、生根剂和绿僵菌浓度对'洛阳红'株型发育和NSC积累的影响,并通过正交试验优化管理措施.结果表明,(1)盆栽牡丹根系发生明显的须根化.(2)各因素对植株生长补偿指数的影响大小依次为修根＞生根剂＞绿僵菌,较优组合为修根25％、浇灌生根剂750 mg/L和绿僵菌2 000万单位/mL,此条件下生长补偿指数和NSC积累量分别比对照提高了 65.14％和33.35％.(3)轻度修根促进了盆栽牡丹植株的补偿生长和NSC累积,而过度修根则抑制作用明显;生根剂显著提高盆栽牡丹根系、叶片的生物量和全株NSC的积累量;绿僵菌对植株生长和全株NSC积累量影响最小.(4)通径分析表明盆栽牡丹老根NSC含量、单株叶面积、老根和木质化新根鲜样质量对植株NSC积累量贡献较大.可见,适度修根及浇灌适量生根剂和绿僵菌液可以促进盆栽牡丹植株的补偿生长和NSC累积,达到生产适度矮化的紧凑型盆栽牡丹苗的目标.

苦马豆素(swainsonine,SW)是由真菌合成的一类吲哚里西啶类生物碱,可以引起哺乳动物疯草病,同时也是一种具有潜力的抗癌药物.SW在不同真菌中的合成途径各不相同,主要通过多基因调控的次生代谢途径产生.早期研究发现酵母氨酸还原酶基因sac可促进真菌合成SW,疯草内生真菌中的吡咯啉-5-羧酸还原酶(pyrroline-5-carboxylate reductase,P5CR)可催化合成哌啶酸,哌啶酸是合成SW的底物,真菌中的SWN基因簇各基因所编码的酶催化从哌啶酸到SW的各步反应.综述豆类丝核菌(Rhizoctonia leguminicola)、罗伯茨绿僵菌(Metarhizium robertsii)及疯草内生真菌中的SW合成途径及相关基因的研究进展,为深入揭示真菌SW的生物合成途径与调控机制提供重要参考,同时对未来疯草SW的控制和利用也具有一定重要意义.

[背景]大麻素是植物的天然活性产物,是一种重要的临床药物.目前药学相关大麻素的生产仍然依赖植物,但植物生产效率低、周期长并且受安全等因素限制.利用生物方法合成大麻素及其类似物具有重要意义.[目的]在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ5464-npgA中重构大麻素前体物 2,4-二羟基-6-正庚基苯甲酸(sphaerophorolcarboxylic acid,SA)的生物合成途径,优化发酵培养基组分,利用生物合成途径高效生产SA.[方法]从罗伯茨绿僵菌(Matarhizium robertsii)ARSEF 23 基因组扩增Mr_OvaA、Mr_OvaB、Mr_OvaC基因,分别构建到不同酵母-大肠杆菌穿梭质粒中,共同转化酿酒酵母 BJ5464-npgA 表达,获得酵母工程菌株 CLB2.通过单因素试验及Plackett-Burman、最陡爬坡试验和响应面法设计优化发酵培养基,使用Design Expert 8.0 对试验数据进行分析.[结果]酵母工程菌株CLB2 可以合成 63.75 mg/L SA.培养基各成分中影响SA产量的 3 个主要因素为:蔗糖、KH2PO4 和维生素溶液,其最佳浓度分别为蔗糖 7.26 g/L、KH2PO4·7H2O 6.08 g/L、维生素溶液 5.67 mL/L,预测产量最大值为 93.15 mg/L,实际产量为 93.75 mg/L,较优化前提高了 47%.[结论]大麻素前体物 SA 可以在酿酒酵母中高效合成.试验获得的高产发酵培养基配方为后续SA及大麻素的研究提供了可靠的支持.

[背景]莱氏绿僵菌(Metarhizium rileyi)对新入侵我国的草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)具有较强的致病力和田间流行性,因此具备深入开发的价值.[目的]优化莱氏绿僵菌SZCY固态发酵培养条件,测定所产分生孢子对草地贪夜蛾幼虫的毒力,为提高该菌株分生孢子规模化生产奠定基础.[方法]采用单因素试验确定了相对适宜的固态培养基,利用Box-Behnken响应面法优化该菌株的固态培养基和发酵参数,同时评价不同条件下该菌所产分生孢子对草地贪夜蛾幼虫的毒力.[结果]去颖稻谷(rice)为莱氏绿僵菌SZCY菌株固相产孢最佳载体.培养温度、光周期及酵母浸粉含量是影响莱氏绿僵菌SZCY固态发酵产孢量的主要因素.莱氏绿僵菌 SZCY固态发酵最佳工艺参数为温度 22.83℃、光周期 18.68 h L:5.32 h D、酵母浸粉 4.98 g/100 g,在此条件下,莱氏绿僵菌在去颖稻谷固态培养基上的产孢量为 5.65×1010 孢子/g,用其制备浓度为 107 孢子/mL 的孢子悬浮液,对草地贪夜蛾 3 龄幼虫的LT50 为 3.88 d.[结论]害虫生防真菌莱氏绿僵菌SZCY菌株以去颖稻谷为固态培养基的发酵培养条件,该条件下产孢量大且对草地贪夜蛾幼虫毒力强,具有广阔的开发应用前景.