目的 建立α1A-肾上腺素能受体(α1A-AR)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的活化T细胞核因子2(NFAT2)稳定共表达细胞.方法 ① 将pcDNA3.1-α1A-AR-3×FLAG重组质粒转染至U2OS-EGFP-NFAT2细胞,经潮霉素B(Hygro-B)200 mg·L-1 压力筛选后加入α1A-AR激动剂去甲肾上腺素(NE,10 μmol·L-1)孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测细胞核内绿色荧光强度,验证EGFP-NFAT2 核转位,筛选得到稳定表达α1A-AR的U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞.②采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测该细胞和对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中α1A-AR mRNA和蛋白的表达水平.③将U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞接种于96孔板,分别加入NE(10-8～10-5 mol·L-1)或α2-AR激动剂右美托咪定(DMED,10-8.8～10-5 mol·L-1)孵育30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2 核转位.④将U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞分为溶剂对照组、α1-AR拮抗剂萘派地尔(1 μmol·L-1)组、NE(1 μmol·L-1)组、萘派地尔+NE(各1 μmol·L-1共孵育)组、α2-AR拮抗剂阿替美唑(0.1 μmol·L-1)组、DMED(0.1 μmol·L-1)组、阿替美唑+DMED(各0.1 μmol·L-1 共孵育)组和萘派地尔+DMED(萘派地尔1 μmol·L-1 与 DMED 0.1 μmol·L-1共孵育)组,药物孵育时间均为30 min,通过高内涵筛选系统检测EGFP-NFAT2核转位,验证该细胞α1A-AR功能的特异性.结果 ①Hygro-B压力筛选得到58株U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞,NE 10 μmol·L-1孵育后,其中50号细胞核内绿色荧光强度最强,故选定其为稳定共表达α1A-AR和EGFP-NFAT2的U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞.②Western印迹法结果显示,U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞可明显表达α1A-AR蛋白,而对照细胞U2OS-EGFP-NFAT2中未见α1A-AR蛋白表达.RT-qPCR结果显示,该细胞在传代5～20代内α1A-AR mRNA均稳定表达,其表达水平为对照细胞的500～800倍.③NE或DMED使U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞中EGFP-NFAT2核转位明显增加,半数有效浓度(EC50)分别为5.94×10-7和6.15×10-8 mol·L-1.④与溶剂对照组和萘派地尔组比较,NE组U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),而萘派地尔+NE组EGFP-NFAT2核转位较NE组明显减弱(P<0.01).与溶剂对照组和阿替美唑组比较,DMED组EGFP-NFAT2核转位明显增强(P<0.01),阿替美唑+DMED组EGFP-NFAT2核转位与DMED组比较无明显差别,而萘派地尔+DMED组EGFP-NFAT2核转位较DMED组明显减弱(P<0.01).结论 成功构建稳定共表达α1A-AR和EGFP-NFAT2的U2OS-EGFP-NFAT2-α1A-AR细胞,可用于靶向α1A-AR化合物筛选和受体分子机制研究.

目的:观察α2肾上腺受体激动剂对大鼠体外循环（CPB）致脑损伤、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白及炎性因子表达的影响。方法:成年清洁级健康雄性SD大鼠32只，按照随机数字表法分为4组：S组进行麻醉诱导及穿刺置管操作，机械通气60 min，不行CPB；C组建立CPB并持续60 min；A组CPB前30 min腹腔注入α2-AR激动剂右美托咪定25 μg/kg，建立CPB并持续60min；B组体外循环前30 min腹腔注入右美托咪定25 μg/kg+乙酰胆碱能受体拮抗剂甲基牛扁碱6 mg/kg，建立CPB持续60 min。CPB后2 h断头取右侧脑海马组织观察病理学结果。取左侧的海马组织免疫印迹法检测NF-κB/p65蛋白的表达。采血液标本ELISA法检测血清S100β、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度。结果:S组海马锥体细胞形态正常完整，C组锥体细胞受损情况较重，核固缩，间隙增宽，A组受损较轻，仅见少量锥体细胞死亡，B组受损较A组重；C组、A组和B组S100β、IL-6和TNF-α水平均升高（ P<0.05）。与C组比较，A组S100β、IL-6和TNF-α水平降低（ P<0.05）。C组、A组和B组NF-κB/p65的表达升高（ P<0.05），与C组比较，A组NF-κB/p65表达降低（ P<0.05），B组NF-κB/p65表达高于C组、A组（ P<0.05）。 结论:α2-AR激动剂能够调低CPB时NF-κB信号表达，减少炎性因子的释放，可能是α2-AR激动剂实现该保护作用的机制之一。

非阿片类镇痛药物是慢性疼痛病重要的临床治疗药物之一，主要包括非甾体抗炎镇痛药、离子通道药物、抗抑郁药、糖皮质激素、神经营养药、肌肉松驰药、α 2肾上腺素能受体激动剂、调节骨代谢药物、N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂和中成药等。基于《国际疾病分类（第11版）》（ICD-11）中慢性疼痛病非阿片类镇痛药物治疗的指南尚未见报道。本指南由中国国家卫生健康委能力建设和继续教育中心疼痛病诊疗专项能力提升项目专家组（以下简称专家组）牵头制订。专家组系统检索和评价了ICD-11七大类慢性疼痛病的非阿片类镇痛药物治疗的适应证、禁忌证、注意事项等问题涉及的有效性证据，并针对特殊的慢性疼痛病患者如老年、妇女和儿童以及肝肾功能受损患者等提出了非阿片类镇痛药物治疗指南的推荐意见，旨在为临床合理应用非阿片类镇痛药治疗慢性疼痛病提供参考。

目的:观察α1肾上腺素受体(α1AR)阻滞剂能否降低和拮抗α1AR激活导致的大鼠门静脉高压，为临床治疗门静脉高压提供新思路。方法:α1AR激动剂选用去氧肾上腺素，α1AR阻滞剂选用阿呋唑嗪，采用门静脉穿刺注射给药并测量门静脉压力。将32只雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为4组。所有大鼠均在给药前测量基础门静脉压力；对照组大鼠按体重经门静脉注射0.9%氯化钠溶液(1 L/g)，门静脉高压模型组大鼠经门静脉注射去氧肾上腺素(1.5 μg/g)，以上两组在给药5和10 min后分别测量门静脉压力；阿呋唑嗪治疗组大鼠经门静脉予去氧肾上腺素(1.5 μg/g)5 min后测压，再予阿呋唑嗪(0.9 μg/g)，在5 min后再次测压；阿呋唑嗪预防组大鼠经门静脉给予阿呋唑嗪(0.9 μg/g)预处理1 min后测压，再予去氧肾上腺素(1.5 μg/g)，在1、5和10 min后测压。采用单因素方差分析、Dunnett- t检验进行统计学分析。 结果:对照组、门静脉高压模型组、阿呋唑嗪治疗组和阿呋唑嗪预防组分别有4、6、8、5只大鼠门静脉穿刺成功。门静脉高压模型组大鼠给药5和10 min后门静脉压力分别为(18.045±7.636)、(15.515±5.440) mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa) ，均高于给药前[(8.452±2.830) mmHg]，差异均有统计学意义( t＝2.89、2.82，均 P<0.05)。阿呋唑嗪治疗组大鼠在注射阿呋唑嗪5 min后，门静脉压力为(10.088±3.743) mmHg，低于本组注射去氧肾上腺素5 min后[(16.146±4.324) mmHg ]和门静脉高压模型组注射去氧肾上腺素10 min后，差异均有统计学意义( t＝3.00、2.22，均 P<0.05)。阿呋唑嗪预防组大鼠给药前，注射阿呋唑嗪后，注射去氧肾上腺素后各时间点的门静脉压力比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:α1AR是参与门静脉压力调节的重要因素，其阻滞剂能降低和拮抗α1AR激活导致的门静脉高压，对防治肝硬化门静脉高压进展具有重要意义。

目的:评价右美托咪定减轻七氟烷诱发新生大鼠中枢神经毒性的机制与脑红蛋白(Ngb)的关系。方法:健康雄性SD大鼠84只，7日龄，体重12～16 g，采用随机数字表法分为4组( n＝21)：对照组(C组)、七氟烷组(S组)、七氟烷+右美托咪定组(SD组)和七氟烷+右美托咪定+育亨宾组(SDY组)。七氟烷麻醉方法：吸入8%七氟烷麻醉诱导，3%七氟烷麻醉维持4 h。于麻醉结束时，SD组腹腔注射右美托咪定50 μg/kg，SDY组腹腔注射右美托咪定50 μg/kg后立即腹腔注射α 2肾上腺素能受体拮抗剂育亨宾0.5 mg/kg。每组随机选取6只大鼠，于麻醉结束后24 h时处死，取脑组织，采用HE染色法检测海马CA1区病理学结果，采用免疫荧光染色法检测海马区Ngb的表达，采用Western blot法检测Ngb、细胞色素c(Cyt c)和caspase-3表达水平；剩余大鼠在28日龄时行Morris水迷宫实验。 结果:与C组比较，S组Ngb、Cyt c和caspase-3表达上调，逃避潜伏期延长( P<0.05)，海马CA1区病理学改变加重，Ngb荧光强度增强；与S组比较，SD组Ngb表达上调，Cyt c和caspase-3表达下调，逃避潜伏期缩短( P<0.05)，海马CA1区病理学改变减轻，Ngb荧光强度增强；与SD组比较，SDY组Ngb表达下调，Cyt c和caspase-3表达上调，逃避潜伏期延长( P<0.05)，海马CA1区病理学改变加重，Ngb荧光强度减弱。 结论:右美托咪定减轻七氟烷诱发新生大鼠中枢神经毒性的机制可能与激活α 2肾上腺素能受体，上调Ngb表达有关。

目的:调查北京市东城区基层医疗卫生机构降压药物的使用情况并分析其合理性。方法:该研究为横断面调查。对2019年1月1日至12月31日北京市东城区8家社区卫生服务中心的降压药物处方进行分析。以解剖学、治疗学及化学分类系统（ATC）编码判断药物类别。使用ATC信息对包含降压药物的数据进行筛选，并按ATC类别分组统计数量和占比。由通用名判断药物品种。依据处方中的诊断信息筛选出包含高血压西医诊断的处方。该研究中高血压合并症包括糖尿病、慢性肾脏病、冠心病、心力衰竭、心房颤动、卒中和血脂异常7种。处方合理性分析包括联合用药合理性、药物用量合理性和药物价格合理性。采用约定日剂量（DDD）法来分析药物用量合理性。将药物利用指数（DUI）作为估计用药合理性的定量指标，DUI >1判定为用药过量。药物价格合理性基于药品的价格和是否为“4+7”方案中的药物进行判断。 结果:共筛选出658 140张包含高血压诊断及降压药物的处方，销售总金额为9 658.11万元人民币，涉及7类、60种常用降压药物。钙通道阻滞剂（CCB）在各合并症高血压患者的处方中开具的数量均为最多，α-肾上腺素受体拮抗剂最少。合并心力衰竭的高血压患者处方中利尿剂的占比为21.17%（505/2 385），远高于其他合并症的患者（ P均<0.05）。合并血脂异常的高血压患者处方中利尿剂的占比则低于其他合并症的患者（ P均<0.05），而β-受体阻滞剂（BB）或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）更易被选择［BB为59 348（21.08%），ARB为51 356（18.24%）］。合并慢性肾脏病的高血压患者处方中BB的占比低于其他合并症的患者（ P均<0.05），但ARB和复方制剂的占比均较高（ P均<0.05）。合并冠心病的高血压患者处方中BB的占比高于其他合并症（ P均<0.05）。合并心房颤动或卒中的高血压患者处方中CCB的占比较高（ P均<0.05）。单一降压药物处方数占比最高，为61.19%（402 745/658 140）。联合用药处方中二联用药处方占比最高，为72.19%（184 392/255 395）。在二联用药处方中，以CCB为基础的组合处方数最多，为122 350张（66.36%）。在三联用药处方中，以ARB为基础的组合处方数最多，为48 915张（89.50%），其次为CCB［44 732（81.85%）］。不合理联合用药的处方数为2 174张（0.33%）。60种降压药物中48种DUI>1。处方中共计出现7种“4+7”方案中的降压药物，分别为氨氯地平、厄贝沙坦、氯沙坦、依那普利、福辛普利、赖诺普利和厄贝沙坦氢氯噻嗪，总处方数为109 227张（16.60%），占所有可能“4+7”方案降压药物的40.92%（109 227/266 993）。 结论:北京市东城区基层医疗卫生机构开具的降压药物种类众多、药物选择基本合理，但降压药物联合应用方案欠合理的问题较为突出，且存在用药过量以及“4+7”方案未完全落实的情况。

目的:对比坦索罗辛及特拉唑嗪用于上尿路结石体外碎石后石街保守排石治疗的有效性及安全性，为临床安全合理用药提供依据。方法:回顾性分析本院2017年1月至2017年12月上尿路结石行体外碎石治疗后发生输尿管下段石街患者共77例，依所服用α 1受体阻滞剂种类分为坦索罗辛组42例及特拉唑嗪组35例，对比分析两组排石疗效以及心血管不良反应发生情况。 结果:坦索罗辛组结石排出率为80.95%(34/42)，显著高于特拉唑嗪组的60.00%(21/35)( P<0.05)；坦索罗辛组平均肾绞痛发作频次为0.50次，显著低于特拉唑嗪组为2.11次( P<0.05)；坦索罗辛组平均肾绞痛最长持续时间为0.71 h，显著低于特拉唑嗪组的1.78 h( P<0.05)；坦索罗辛组体位性低血压发生率为9.52%(4/42)、心悸发生率为11.90%(5/42)、晕厥发生率为0.00%，均显著低于特拉唑嗪组的31.43%(11/35)、34.29%(12/35)、11.43%(4/35)( P<0.05)。 结论:坦索罗辛用于输尿管结石体外冲击波碎石后石街的保守排石疗效显著优于特拉唑嗪，同时具有较低的心血管系统不良反应发生风险，值得临床推广应用。

目的:探讨非那雄胺联合盐酸坦索罗辛对前列腺增生症（BPH）患者围手术期腺体微血管密度（MVD）的影响。方法:选取温州市中西医结合医院2017年8月至2019年8月就诊的BPH患者90例为观察对象，采用随机数字表法分为对照组和观察组，每组45例。两组均行经尿道前列腺电切术，对照组围手术期口服盐酸坦索罗辛，观察组口服非那雄胺联合盐酸坦索罗辛，两组服药6周。对比两组临床疗效、不良反应，治疗前后尿动力学指标、腺体微血管密度、国际前列腺症状量表（IPSS）评分、泌尿症状困扰量表（BS）评分、自制血尿色卡评分变化及不良反应发生情况。结果:服药6周后，两组最大尿流率显著高于治疗前，逼尿肌压力、残余尿量较治疗前下降（均 P<0.05）；观察组服药6周后的最大尿流率［（15.63±2.26）mL/s］显著高于对照组［（13.14±2.23）mL/s］，残余尿量［（29.19±4.81）mL］显著低于对照组［（32.25±5.52）mL］（ t=5.26、2.80，均 P < 0.05）。观察组服药6周后的IPSS评分［（12.09±2.17）分］、术后1周血尿色卡评分［（1.51±0.27）分］显著低于对照组［（14.28±2.22）分、（2.03±0.38）分］（ t=4.73、7.48，均 P < 0.05）。观察组前列腺腺体第Ⅷ因子相关抗原（FⅧ-Rag）、簇分化抗原34（CD34）表达MVD值分别为（14.74±3.05）个/视野、（19.41±3.07）个/视野，显著低于对照组的（18.08±3.16）个/视野、（22.27±3.16）个/视野（ t=5.10、4.35，均 P < 0.05）。观察组术后血尿发生率［15.56%（7/45）］显著低于对照组［35.56%（16/45）］（χ 2=4.73， P < 0.05）。 结论:与单药治疗相比，BPH围术期给予非那雄胺联合盐酸坦索罗辛治疗，患者尿动力学指标显著改善，前列腺腺体MVD、IPSS评分、血尿色卡评分、血尿发生率均显著降低，为预防BPH患者围术期出血提供了一种新思路。

目的:探讨活血化瘀中药药对川芎-赤芍拮抗动脉粥样硬化的潜在分子机制及药理过程.方法:使用R语言Limma包分析GEO数据库GSE43292 数据集,对有表达差异的动脉粥样硬化基因进行筛选和提取.川芎-赤芍药对所含的化学活性组分及靶点通过中药系统药理学数据库与分析平台检索.合并差异基因和药物作用靶点以获得共同的靶点.利用在线分析工具STRING和Cytoscape构建药物和靶点的调控网络以及靶点间的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络.然后利用R语言注释靶点基因的基因本体(GO)功能,分析京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路,再进行基因集富集分析(GSEA)以验证KEGG的通路和富集的情况,确定靶点基因的调控功能和参与基因调控功能的信号转导通道.结果:共筛选出动脉粥样硬化差异基因 1244 个,川芎-赤芍药对含 36 个生物活性成分,其中靶点为环加氧酶 1、肾上腺素受体、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ、激酶插入域受体、孕激素受体、基质金属蛋白酶 9、CXC趋化因子配体 8、蛋白激酶Cβ、白细胞介素 6、CD14、二肽基肽酶-4、PIK3CG、肾上腺素受体α1B、微管相关蛋白 2、尿激酶纤溶酶原激活剂和单胺氧化酶 B.靶点在GO中主要富集在合成DNA过程的调控、DNA生物合成的过程、含胶原的细胞外基质、细胞外基质、蛋白酶结合、细胞迁移、血管形成过程、膜筏结构、转录的调节等与动脉粥样硬化炎症、脂肪代谢及血管生成相关的生物学注释.脂质与动脉粥样硬化通路和核因子κB信号通路与动脉粥样硬化关系最为密切,并且在KEGG信号通路和GSEA均显示出富集.结论:川芎-赤芍药对通过潜在的 13 个活性成分作用于可能的 16 个靶点调控相关信号转导通路,通过抗炎、调脂和保护血管等方式产生抗动脉粥样硬化的作用.

目的 采用G蛋白偶联受体及酶活检测实验方法,探究痹祺胶囊对类风湿性关节炎关键靶点的调节作用,明确其作用机制.方法 选取与抑制滑膜炎症相关的靶点[环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)、核因子-κB(nuclear factor-KB,NF-κB)、趋化因子受体 4(C-C chemokine receptor type 4,CCR4)],与抑制血管翳生成相关的靶点[血管内皮生长因子受体(vascularendothelial growth factorreceptor2,VEGFR2/KDR)],与抑制基质降解相关的受体[基质金属蛋白酶-3(matrixmetalloproteinase-3,MMP-3)],以及与活血相关的靶点[凝血酶、磷酸二酯酶(cGMP-inhibited 3',5'-cyclic phosphodiesterase,PDE3A)、肾上腺素受体 α1(alpha-1A adrenergic receptor,ADRA1A)]为研究载体,通过胞内钙离子荧光和酶抑制剂检测技术评价痹祺胶囊中19个主要单体成分对受体的拮抗作用以及对酶的抑制活性.结果 19个化合物中,士的宁、党参炔苷、茯苓酸、丹参素、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、迷迭香酸、人参皂苷Rb1、阿魏酸、藁本内酯、牛膝皂苷D可显著抑制COX-2活性;马钱子碱、士的宁、党参炔苷、白术内酯Ⅲ、茯苓酸、丹参素、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、迷迭香酸、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、藁本内酯、蜕皮甾酮、甘草苷可显著抑制NOS活性;丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B对NF-κB有较好拮抗作用;藁本内酯、牛膝皂苷Ⅳ、甘草次酸可拮抗CCR4;茯苓酸、牛膝皂苷Ⅳ、丹酚酸B、藁本内酯、甘草次酸能抑制VEGFR2/KDR;党参炔苷、丹参素、丹酚酸B、迷迭香酸、藁本内酯可抑制MMP-3活性;丹参素、丹参酮ⅡA、阿魏酸可抑制凝血酶活性,迷迭香酸、丹酚酸B、藁本内酯、甘草苷可抑制PDE3A活性;马钱子碱、士的宁、藁本内酯、牛膝皂苷Ⅳ、甘草次酸可拮抗ADRA1A.结论 痹祺胶囊可能通过干预COX-2、NOS、NF-κB、CCR4、VEGFR2/KDR、MMP-3、凝血酶、PDE3A及ADRA1A等关键靶点,发挥抗炎止痛、抑制血管翳形成及基质降解、活血作用,进而起到治疗类风湿性关节炎的药效作用.其药效物质基础可能为马钱子碱、士的宁、党参炔苷、白术内酯Ⅲ、茯苓酸、丹参素、迷迭香酸、阿魏酸、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、藁本内酯、蜕皮甾酮、牛膝皂苷D、甘草次酸、甘草苷.