目的:探究胡黄连提取物通过miR-26a-5p/NF-κB通路影响缺氧/复氧诱导心肌细胞凋亡和氧化应激的作用.方法:通过缺氧/复氧(H/R)诱导H9C2细胞建立心肌细胞损伤模型,细胞分为空白对照组、模型组、胡黄连提取物低浓度(250 μg/mL)组、胡黄连提取物中浓度(500 μg/mL)组、胡黄连提取物高浓度(1 000 μg/mL)组、miR-NC组、miR-26a-5p组、anti-miR-NC+胡黄连提取物高浓度组、anti-miR-26a-5p+胡黄连提取物高浓度组.CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡;Western Blot检测cleaved Caspase-3、Bax、p-NF-κB、NF-κB蛋白表达;ELISA检测MDA、SOD、CAT水平;qRT-PCR检测miR-26a-5p表达.结果:与空白对照组比较,模型组细胞凋亡率、MDA、p-NF-κB/NF-κB水平及cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高,细胞增殖能力、SOD、CAT水平及miR-26a-5p表达显著降低(P＜0.05).与模型组比较,胡黄连提取物可显著降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡率及MDA、p-NF-κB/NF-κB水平和cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达,显著升高细胞增殖能力及SOD、CAT水平和miR-26a-5p表达(P＜0.05).抑制anti-miR-26a-5p可逆转胡黄连提取物对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激的影响.结论:胡黄连提取物可能通过调控miR-26a-5p/NF-κB通路抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激.

目的 研究胡黄连PicrorhizaeRhizoma在提取环节提取物指示性成分含量与颜色、苦味等感官属性之间的变化关联规律,及在浓缩、干燥环节温度对上述3类指标的影响.方法 基于HPLC技术建立胡黄连5种指示性成分香草酸及胡黄连苷Ⅳ、Ⅲ Ⅱ、Ⅰ含量测定方法;使用色差仪对液体颜色以L*、a*、b*进行数值量化;采用健康志愿者人工评价法对苦度值进行量化表征.在水提环节对成分含量、颜色及苦度值进行相关性分析,并建立回归方程;在浓缩及干燥环节对上述3类指标受温度影响结果进行差异性分析.结果 在水提环节,L*和b*值与各成分含量呈显著负相关(P＜0.05),a*值与各成分含量呈显著正相关(P＜0.05),苦度值与香草酸及胡黄连苷Ⅲ、Ⅱ含量及成分综合评分呈显著正相关(P＜0.05).在浓缩环节,60 ℃温度条件下与70、80 ℃相比指示性成分含量更高,并且溶液颜色的L*、b*值更小,a*值更高.在干燥环节,在各温度条件下各成分含量均有降低,温度对香草酸、胡黄连苷Ⅲ含量、L*、a*值影响显著(P＜0.05),对其他成分含量及b*值无显著影响.苦度值在浓缩及干燥环节则不存在规律性变化.结论 分析揭示了在制剂前处理环节胡黄连5种指示性成分含量与颜色、苦味感官属性的内在关联规律及温度对3类指标的影响,表明化学指示性成分含量及感官属性受不同环节因素的影响,为胡黄连在制剂前处理环节化学成分与感官属性之间关联性应用的可行性提供指示.

目的 建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定胡黄连Picrorrhiza scrophularaeflora Pennell中胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷的含有量.方法 胡黄连甲醇提取物的分析采用ACTUITY UPLC(R) BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相0.1％甲酸-乙腈;体积流量0.4 mL/min;柱温40℃.采用负离子模式,MRM多反应监测扫描模式.结果 胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷分别在15.28～ 305.60 ng/mL(r=0.999 3)、11.54～230.80 ng/mL (r=0.999 4)、11.20～ 224.00 ng/mL(r=0.999 5)、10.06～201.20 ng/mL (r=0.997 4)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101.62％、101.03％、102.37％、99.41％,RSD分别为1.30％、1.62％、2.45％、0.72％.结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于胡黄连的质量控制.

目的:利用高速逆流色谱(HSCCC)技术从传统藏药纤毛婆婆纳中分离酚酸及环烯醚萜苷类物质及其对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响.方法:选择乙酸乙酯-正丁醇-水=1:1:2的溶剂体系,上相为流动相,下相为固定相,主机正接反转,转速REV 800 r/min、进样量240 mg,流动相以5 mL/min流速洗脱纤毛婆婆纳乙醇提取物,根据HSCCC色谱峰收集片段一、二;利用超高效液相色谱(UPLC)分析两个片段的物质组成;以CCK-8法检测酚酸及环烯醚萜苷对HeLa细胞增殖的抑制作用.结果:HSCCC分离总时间为46 min;UPLC分析片段一主要为酚酸类物质,包括4-羟基苯甲酸、原儿茶酸、木犀草素,片段二主要为环烯醚萜苷物质,包括毛蕊花糖苷、梓苷、胡黄连苷Ⅱ、6-O-藜芦酰梓苷;酚酸及环烯醚萜苷能显著地抑制HeLa细胞增殖(P<0.01).结论:HSCCC一步洗脱分离纤毛婆婆纳乙醇提取物酚酸及环烯醚萜苷两类物质高效可行,两类物质均表现出较强的抗HeLa细胞增殖活性.

目的:建立HPLC一测多评法同时测定胡黄连提取物中的10个成分,验证该方法在胡黄连质量分析中应用的科学性及可行性.方法:采用Sepax HP-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.5％乙酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长294 nm,柱温30℃.以胡黄连苷Ⅱ为内参物,建立该成分与云杉苷、草夹竹桃苷、胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅲ、胡黄连苷Ⅳ、黄金树苷、米内苷、6-阿魏酸梓醇、藏黄连苷B的相对校正因子,采用相对校正因子计算各成分的质量分数,同时用外标法进行测定.比较2种测定结果,评价一测多评法在胡黄连中应用的准确性及科学性.结果:10个成分在测定范围内线性良好,平均回收率在98.0％～102.0％,相对校正因子耐用性良好;采用外标法和一测多评法测定3批胡黄连提取物中10个成分含量,2种测定方法结果无明显差别.结论:以胡黄连苷Ⅱ为内标同时测定其多种成分的一测多评法可用于定量分析.

对中药胡黄连的化学成分和生物活性的研究进展进行了综述。主要化学成分为糖甙和有机酸等。总糖甙，胡黄连素结晶体，胡黄连苦甙Ⅰ和Ⅱ，香草酸和香荚兰乙酮等成分具有保肝，利胆，平喘和免疫等多种生物活性。其中糖甙提取物picroliv的保肝活性可与水飞蓟素相比。

为明确婆婆纳(Veronica didyma)抗黑色素瘤活性部位及物质基础,该研究采用CCK8法评价了婆婆纳乙醇提取物4个萃取部位(石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层)乙醇提取物及单体化合物对黑色素瘤细胞株(B16和A375)细胞的增殖抑制作用,并使用植物化学方法和技术对活性部位的化学成分进行系统分离纯化.结果表明:(1)乙酸乙酯萃取部位(ethyl acetate extract,PPNE)较其他样品有更好抑制B16细胞和A375细胞增殖的作用,其半抑制浓度(IC50)值分别为0.177 mg·mL-1(B16)、2.826 mg·mL-1(A375).(2)从活性部位PPNE中得到7个单体化合物,即对羟基苯甲醛(1)、胡黄连苷Ⅱ(2)、isoscutellarein 7-O-(6?-oacetyl)-β-allopyranosyl(1?→2″)-β-glucopyranoside(3)、3′-hydroxyl-4′-O-methylisoscutellarein 7-O-[6?-O-acetyl-β-D-allopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside(4)、6-O-veratroylcatalposide(5)、veronicoside(6)、isoscutellarein 4′-methyl ether 7-O-(6?-O-acetyl)-ballopyranosyl(1?→2″)-β-glucopyranoside(7).(3)7个化合物均为首次从该植物中分离得到,HPLC分析结果显示这7个化合物是PPNE的较大量成分.(4)除化合物1外,其余6个单体化合物均有较好抑制黑色素瘤细胞增殖的作用,该文首次报道了化合物3、4、7的抗黑色素瘤活性.综上认为,婆婆纳的乙酸乙酯萃取部位(PPNE)为其抗黑色素瘤活性部位,环烯醚萜类化合物2、5、6和黄酮类化合物3、4、7可能为PPNE抗黑色素瘤的活性基础.该研究结果为合理利用其资源奠定了科学基础.