卵巢癌是女性癌症死亡的第五大原因。卵巢癌患者高死亡率是由于缺乏早期症状及晚期诊断所导致，并且存在治疗选择的局限性以及抗肿瘤药物的耐药性。目前，分子靶点已成为肿瘤靶向治疗的重要手段，CD (clusters of differentiations) 24是一种小的唾液酸糖蛋白，通过其糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol，GPI)锚定位于脂筏中。尽管CD24的表达与癌细胞的发展、侵袭和转移密切相关，但CD24在癌细胞中的确切作用尚不清楚。目前的研究表明，CD24在卵巢癌以及许多癌症中存在过表达，CD24也被鉴定为卵巢癌干细胞标记物。最近，CD24已被确定为卵巢癌患者存活的具有独立预后意义的特定分子靶点。接下来，我们将回顾卵巢癌靶向治疗中的分子靶点，并概述新的分子靶点CD24及其与卵巢癌的密切关系。

目的 探究重楼皂苷Ⅰ凝结细胞膜胆固醇影响肿瘤细胞对化疗药物敏感性的作用.方法 采用不同摩尔比的重楼皂苷Ⅰ与胆固醇进行体外结合实验,并培养HepG2 细胞,给予不同浓度重楼皂苷Ⅰ,检测细胞内总胆固醇含量、Filipin Ⅲ标记细胞内胆固醇,透射电镜观察细胞膜形态学变化,免疫荧光染色标记细胞膜脂筏及ABCA1,Western bolt法检测ABCA1 蛋白表达,并通过激光共聚焦与细胞流式仪检测阿霉素的吸收作用.最后,通过CCK-8 实验明确重楼皂苷Ⅰ对阿霉素的增敏作用.结果 重楼皂苷Ⅰ在体外可与胆固醇结合形成凝胶固态物;可降低HepG2 细胞总胆固醇含量,改变细胞膜形态,降低细胞膜脂筏含量并抑制外排蛋白ABCA1 表达,从而增加化疗药物阿霉素吸收提高敏感性.结论 重楼皂苷Ⅰ可凝结细胞膜胆固醇,改变细胞膜通透性使化疗药物吸收和敏感性增加.

概要:本文旨在对flotillins在相关细胞进程中的作用、在多种肿瘤中的作用和机制及其在肿瘤分子诊断和靶向治疗等方面的潜在应用价值进行综述.图1以示意图的形式直观地展示flotillin-1和flotillin-2的蛋白结构;表1对flotillin-1和flotillin-2在各种肿瘤中的表达异常情况、发挥的生物学功能及其机制进行汇总;在图2中,以模式图的形式展示flotillin-1和flotillin-2在肿瘤细胞中参与的信号通路及导致肿瘤细胞出现的不同表型.许多研究表明,flotillins在多种肿瘤中过表达,并且与肿瘤的发生发展、分期和转移密切相关.转移标志着肿瘤由局部病变发展为不可治愈的系统病变,是肿瘤预后的一个重要影响因素,但是其机制尚未完全阐述.因此,对其机制进行进一步探索有助于促进恶性肿瘤分子诊断、预后和精准治疗的发展.

1 细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)概述随着对EVs生物学特性的深入理解,描述EVs的术语已经发生了很大变化,过去常互换使用的“微泡”、“外泌体”和“微粒”等术语已被重新定义[1].现在认为外泌体、微泡和微粒都是属于EVs的亚群,它们共同组成了EVs群体[1].外泌体是起源于多泡体、直径为50～150 nm的匀质小囊泡[2];微泡则是由细胞膜直接产生,直径为100～1 000 nm[3];凋亡小体形态类似细胞碎片,直径为500～2 000 nm[3].在这些亚群的相互鉴别方面,一些蛋白质,如脂筏结构蛋白1、热休克蛋白70或主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类和Ⅱ类蛋白质等,曾被视为区分不同EVs亚群的标记物,然而新近研究表明这些标记物并不具有特异性[4].随着组织化学技术的迅速发展,特定的分子模式未来将有助于对不同类型囊泡的认识和鉴别,但由于提取技术、鉴定方法及命名学的混乱等原因,现在区分这些亚群仍然很困难.因此,在本文中使用统一的术语“EVs”来特指微泡和外泌体[1].

脂筏标记蛋白flotillin-1属于SPFH(stomatin/prohibitin/flotillin/HflK/C)蛋白家族,并广泛参与细胞膜信号传导和细胞膜物质转运等细胞活动,从1997年首次发现到现在已20年.越来越多的研究发现flotillin-1蛋白在许多人类疾病的发生与发展中起着重要的作用.本文主要从flotillin-1蛋白与多种癌症(乳腺癌、肝癌、肺癌、食管鳞状癌,结肠癌等)关系的角度,就近年来的相关文献进行综述,以期推动flotillin-1蛋白在疾病中的研究和潜在应用.

浮舰蛋白-1(flotillin-1,FLOT-1)属于脂筏标记蛋白,参与多种细胞生理活动,与许多肿瘤发生发展密切相关.FLOT-1在乳腺癌、食管鳞状癌、肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)、移行细胞癌(transitional cell carcinoma,TCC)、非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)、肝细胞癌等肿瘤中均高表达,并与临床分期、转移、浸润和预后相关.本文综述了FLOT-1的结构和功能,及其在多种人类实体肿瘤中的作用.

目的:检测脂筏标记蛋白-2(Flotillin-2,Flot-2)在胃癌组织中的表达水平,分析Flot-2的表达与胃癌临床病理特征及预后的关系.方法:选取南昌大学第二附属医院胃肠外科于2009年1月至2010年4月行手术切除的胃癌组织112例及与其配对的癌旁组织,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中Flot-2的表达水平,采用Spearman检验Flot-2表达与胃癌临床病理特征及预后的关系,采用Kaplan-Meier法及Log-Rank检验分析其生存数据.结果:Flot-2阳性表达呈黄色颗粒,主要在细胞质中表达,胃癌组织中的表达量明显高于癌旁组织(53.57％ vs 46.43％,P＜0.05).Flot-2表达与患者的性别、年龄、肿瘤位置、分化程度无显著关联(P＞0.05),与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及AJCC分期均显著关联(均P＜0.01).Flot-2低表达组患者的5年总体生存率明显高于高表达组(P＜0.01).Cox回归分析显示,远处转移、AJCC分期和Flot-2蛋白表达水平为胃癌患者预后的独立危险因素.结论:胃癌组织中高表达Flot-2,其与患者不良预后密切相关,是胃癌预后的独立危险因素,有望成为胃癌治疗的潜在新靶点.

目的 研究轻度认知功能障碍(MCI)患者血小板脂质筏内胆固醇水平的变化,为其早期诊断提供科学依据.方法 选择51例MCI患者、40例AD患者和52例认知功能正常的健康对照者,分别进行神经功能评定,采用以Optiprep为介质的密度梯度离心方法分离血小板脂质筏,应用点印迹的方法进行鉴定后,采用荧光法测定其内胆固醇水平.结果 在离心管25％～30％ Optiprep溶液界面处可见一条白色的闪亮环带,经点印迹法证实,其为脂质筏.MCI组和AD组血小板脂质筏内胆固醇水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).MCI组血小板脂质筏内胆固醇水平低于AD组,差异有统计学意义(P＜0.05).MCI组血小板脂质筏内胆固醇水平与Mo-CA总分及MoCA评分中的延迟回忆、注意力和计算力、视空间与执行功能亚项呈显著负相关(P＜0.05).AD组血小板脂质筏内胆固醇水平与MMSE评分中的回忆能力呈显著负相关(P＜0.05).结论 血小板脂质筏内胆固醇水平的改变在MCI的诊断中有一定的潜在价值,有望成为MCI和AD早期诊断和病情评估的重要生物学标记物.

Flotillin-l(浮舰蛋白-1)是脂筏的标记蛋白.它不但参与多种细胞正常的生理活动,也在许多肿瘤发生和发展中起重要作用.近年发现Flotillin-1在肺腺癌、乳腺癌、肝细胞癌等细胞中高表达,并与临床等级、预后差、总体存活率低有关联.简要综述了Flotillin的组成、结构和基本功能,以及在疾病中的作用.

目的 探讨微小RNA-485-5p(miR-485-5p)靶向脂筏标记蛋白(FLOT)2对甲状腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 采用qRT-PCR与Western印迹分别检测不同甲状腺癌细胞及正常甲状腺上皮细胞中miR-485-5p与FLOT2 mRNA及蛋白表达.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测甲状腺癌SW579细胞转染miR-485-5p mimic、miR-NC、si-FLOT2、si-NC后的细胞增殖活性,并采用流式细胞术检测细胞凋亡率.采用双荧光素酶活性检测鉴定miR-485-5p与FLOT2的靶向关系.Western印迹检测SW579细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-caspase)-3蛋白表达.结果 与TEC细胞相比,甲状腺癌细胞SW579、FTC-133、KAT-18中miR-485-5p的相对表达量显著降低(P<0.05),而FLOT2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05);miR-485-5p过表达或抑制FLOT2表达后SW579细胞OD值、CyclinD1及Bcl-2蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、p21、p27及Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05);双荧光素酶活性检测鉴定FLOT2是miR-485-5p的靶基因,miR-485-5p可负向调控FLOT2表达;FLOT2过表达可逆转miR-485-5p过表达对甲状腺癌SW579细胞增殖及凋亡的作用.结论 miR-485-5p通过负向调控靶基因FLOT2抑制甲状腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡.