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DDX56对脑心肌炎病毒体外增殖的调控作用研究
编辑人员丨4天前
目的:探讨DDX56解旋酶在脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)感染A549细胞复制增殖过程中的调控作用。方法:通过免疫印迹法、qPCR以及TCID 50检测上调/下调A549细胞中DDX56并接种EMCV病毒,以空载组为对照组,分析其对病毒增殖的影响及对病毒感染引起的RLRs信号通路中关键接头蛋白活化的影响。 结果:A549细胞接种EMCV后,DDX56蛋白水平表达量逐步递增。过表达DDX56可以促进EMCV在宿主细胞中的增殖,干扰DDX56可以抑制EMCV在宿主细胞中的增殖。并且DDX56通过负调控RLRs信号通路中接头分子MAVS、TBK1、IRF3的活化实现对EMCV复制的正调控作用。结论:DDX56促进EMCV增殖是通过抑制RLRs信号通路中接头蛋白的活化来实现的,为EMCV感染的固有免疫应答和调控研究奠定理论基础。
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编辑人员丨4天前
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动态心电图联合血清脑钠肽、肌酸激酶同工酶评估呼吸道感染并发病毒性心肌炎病情的临床价值
编辑人员丨4天前
目的:分析动态心电图联合血清脑钠肽(BNP)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平在评估呼吸道感染并发病毒性心肌炎患者病情严重程度中的临床价值。方法:回顾性选取2018年1月至2022年12月浙江大学医学院附属邵逸夫医院收治的125例呼吸道感染患者,依据是否并发病毒性心肌炎分为并发组(71例)、未并发组(54例),对比动态与常规心电图的特征,分析并发组与未并发组入院时血清BNP、CK-MB水平,对比不同心肌炎病情患者的动态心电图、血清BNP及CK-MB,分析其联合诊断价值。结果:动态心电图中房性早搏及窦性心动过速等检出率高于常规心电图[38.03%(27/71)比22.54%(16/71)、28.17%(20/71)比14.08%(10/71)]( P<0.05);并发组入院时血清BNP、CK-MB水平均高于未并发组[(104.26 ± 10.75) ng/L比(54.11 ± 5.69) ng/L、(17.89 ± 1.86) U/L比(13.46 ± 1.42) U/L],差异有统计学意义( P<0.05);呼吸道感染并发重症病毒性心肌炎患者(37例)动态心电图中房性早搏、窦性心动过速、短阵室性心动过速、一度房室传导阻滞、ST段改变、QRS低电压检出率及入院时血清BNP、CK-MB水平均高于并发轻症病毒性心肌炎患者(34例)[51.35%(19/37)比23.53%(8/34)、43.24%(16/37)比11.76%(4/34)、32.43%(12/37)比11.76%(4/34)、29.73%(11/37)比8.82%(3/34)、43.24%(16/37)比14.71%(5/34)、24.32%(9/37)比5.88%(2/34)、(107.19 ± 10.56) ng/L比(101.08 ± 10.18)ng/L、(18.33 ± 1.85) U/L比(17.41 ± 1.76) U/L],差异有统计学意义( P<0.05);以临床病理诊断为准,动态心电图、入院时BNP、入院时CK-MB、三者联合诊断急性上呼吸道感染并发病毒性心肌炎的 Kappa值分别是0.784、0.765、0.733、0.879,且联合检测灵敏度、准确度更高。 结论:动态心电图联合血清BNP、CK-MB能较好评估呼吸道感染并发心肌炎患者病情严重程度,可加以监测。
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编辑人员丨4天前
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基于IRES转录效率不同构建绿色荧光蛋白差异表达载体
编辑人员丨4天前
目的:根据IRES末端序列的不同,构建4个GFP表达强度不同的逆转录病毒载体,为后续流式检测或成像提供基础。方法:利用脑心肌炎病毒IRES的转录效率依赖于其末端的基因序列,通过重叠PCR方法将IRES与EGFP融合成4个不同连接方式的片段,然后克隆至逆转录病毒载体pMSCV-NGFR中;PCR扩增NGFR片段,克隆至逆转录病毒载体pMSCV-IRES-EGFP前面;逆转录病毒载体pMSCV-NGFR-IRES-EGFP转染293T细胞,分析EGFP的表达比例和平均荧光强度(MFI),同时分析NGFR的表达。结果:成功构建4个逆转录病毒载体pMSCV-NGFR-IRES-EGFP;在293T细胞转染4个逆转录病毒载体,24 h和48 h时EGFP的表达效率没有明显差异,但荧光强度却有明显不同,同时NGFR的表达没有明显不同,说明IRES与EGFP之间加入不同的核苷酸序列,会使EGFP的荧光强度呈现明显差异。结论:EGFP的表达强度受IRES与EGFP之间序列的影响,不同强度EGFP的逆转录病毒载体可以适用于不同的实验要求。
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编辑人员丨4天前
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暴发性心肌炎患者的长期预后及心功能受损的危险因素分析
编辑人员丨4天前
目的:比较生存出院的暴发性心肌炎(FM)和非暴发性心肌炎(NFM)患者的远期预后,并分析FM患者出院后心功能受损的危险因素。方法:该研究为回顾性研究。连续纳入2017年1月至2020年12月于华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科住院的急性心肌炎患者,根据心肌炎的类型分为FM组和NFM组。然后,根据左心室射血分数(LVEF)是否持续<55%,将FM组患者进一步分为心功能正常组和心功能受损组。所有急性心肌炎患者均给予抗病毒、免疫调节、免疫抑制及对症支持治疗,FM患者均采用“综合救治方案”进行救治。通过电子病历系统收集入选患者基线(入院时)临床资料。患者出院后第1、3、6和12个月返院随访,以后每年随访1次。主要观察终点包括主要不良心脑血管事件、LVEF持续<55%和左心室增大。采用Kaplan-Meier生存曲线分析FM组及NFM组患者随访过程中发生LVEF持续<55%及左心室持续增大的情况,并采用Log-rank检验进行组间比较。采用Cox回归模型分析FM患者心功能受损的危险因素。结果:共入选急性心肌炎患者 125例,其中FM组66例、NFM组59例。与NFM 组比较,FM组患者住院期间LVEF最低值<55%者比例较高( P<0.01)、住院期间LVEF恢复时间较长( P<0.01)。两组患者出院时LVEF<55%者比例相当( P=0.071)。随访12(6,24)个月,FM组1例(1.5%)患者出院后发生心原性死亡,16例(24.2%)患者出院后LVEF持续<55%,8例(12.1%)患者左心室增大;NFM组3例(5.1%)患者LVEF持续<55%,1例(1.7%)患者左心室增大。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,FM组患者LVEF持续<55%的发生率高于NFM组( P=0.003),左心室增大的比率亦高于NFM组( P=0.024)。FM组患者的亚组分析结果显示,与心功能正常组比较,心功能受损组起病至入院时间更短( P=0.011)、出院时LVEF<55%占比更高( P=0.039)、接受冠状动脉造影的比例更高( P=0.014)、住院期间LVEF恢复时间更长( P=0.036)。多因素Cox回归分析结果显示,住院期间LVEF恢复时间长是FM患者出院后心功能受损的独立危险因素( HR=1.199,95% CI 1.023~1.406, P=0.025)。 结论:生存出院的FM患者发生LVEF持续降低及左心室增大的比例高于NFM患者。住院期间LVEF恢复时间长是FM患者出院后心功能受损的独立危险因素。
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编辑人员丨4天前
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腺病毒感染与儿童不明原因严重急性肝炎的关系
编辑人员丨4天前
腺病毒感染在全球各地区均可出现,无明显季节性,但大流行多发生在冬季或早春。腺病毒在免疫功能正常的人中常引起轻度、自限性感染,主要累及呼吸道、消化道、眼结膜等,偶尔可导致肝炎、胆囊炎、胰腺炎、出血性膀胱炎、心肌炎、脑膜炎或脑炎。一般预后良好,但在免疫功能缺陷者,可发生严重或致命的感染。腺病毒肝炎主要见于恶性肿瘤及组织器官移植等处于免疫功能抑制状态的人群,但也有在免疫功能正常的小儿或成人引起急性肝炎的个案报道。2022年4月5日,世界卫生组织收到英国通报10例原因不明的儿童严重急性重症肝炎病例,至4月21日增至169例,遍及12个国家(11个世界卫生组织欧洲区国家及美国),其中74例腺病毒阳性、20例新型冠状病毒阳性,19例新型冠状病毒和腺病毒同时阳性。其病因尚未完全阐明,但病因假说主要围绕腺病毒感染,与新型冠状病毒的关系也需进一步排除。
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编辑人员丨4天前
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肠道病毒病的预防与控制
编辑人员丨4天前
肠道病毒(enterovirus,EV)是小核糖核酸病毒科( Picornaviridae)的成员,目前报道有124个型,其中至少66个型的EV与人类疾病有关,由EV感染导致的疾病统称肠道病毒病 [1]。肠道病毒病是人类较为常见的传染病之一,感染易感人群后可以引起多种急性传染性疾病,往往造成突发的公共卫生事件,如急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)、手足口病(hand,foot,and mouth disease,HFMD)、无菌性脑膜炎(aseptic meningitis,AM)、急性出血性结膜炎(acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC)、急性心肌炎和心包炎、疱疹性咽峡炎、类似风疹的出疹性疾病等 [2,3,4,5,6]。EV感染有时也与一些慢性疾病相关,如传染性胸膜痛、糖尿病、胰腺炎等,严重危害人民的身体健康 [7,8]。EV主要在人体肠道内复制,主要通过粪-口途径传播,也可以通过呼吸道途径传播,还可以通过接触进行传播。肠道病毒病的致病特点是,大多数感染以隐性感染更常见,人群普遍易感,但以婴幼儿和免疫功能低下的成人发病最多;病毒在人体肠道内增殖,但很少引起腹泻等肠道症状,是一种以消化道为原发病灶的全身性感染;不同血清型的EV可引起相同或相似的临床症状,同一血清型的EV也可引起不同的临床表现。
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编辑人员丨4天前
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新生儿暴发性肠道病毒感染的现状和防控策略
编辑人员丨4天前
肠道病毒是引起新生儿病毒感染的常见病原,主要通过粪-口或呼吸道途径感染,可引起婴儿室或新生儿病房内的暴发流行。大部分患儿无症状或症状轻微,少数患儿病情严重,可并发脑炎、心肌炎、出血-坏死性肝炎等,重症患儿病死率明显增加。尽早识别、尽早隔离是防止肠道病毒院内暴发感染的重要措施。
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编辑人员丨4天前
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新生儿肠道病毒感染临床诊断治疗
编辑人员丨4天前
肠道病毒感染是新生儿期常见的病毒感染。与年长儿不同,新生儿肠道病毒感染往往病情较重,临床表现与细菌性败血症难以区分,重症感染者可并发坏死性肝炎、脑膜炎和心肌炎,病情发展迅猛,死亡率高。病初予静脉输注免疫球蛋白治疗可能降低新生儿重症肠道病毒感染死亡率和并发症发生率。尚需进一步研究新型抗肠道病毒药物在新生儿期应用的安全性和有效性。
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编辑人员丨4天前
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病毒性心肌炎患者血清Gal-3、PTX-3表达及其预后意义
编辑人员丨4天前
目的:探讨病毒性心肌炎患者血清半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal-3)、正五聚体蛋白-3(pentraxin-3,PTX-3)表达水平及其诊断及预后评估价值。方法:选取2018年1月—2019年7月本院收治的122例病毒性心肌炎患者为研究对象(心肌炎组),同期选取118例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清Gal-3、PTX-3及心肌指标脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB,CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)水平;采用Pearson法分析病毒性心肌炎患者血清Gal-3、PTX-3与心肌指标的相关性;采用受试者工作特征曲线(receiver operator charateristic curve,ROC曲线)分析血清Gal-3、PTX-3水平对病毒性心肌炎的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析影响病毒性心肌炎患者预后的因素。结果:心肌炎组血清Gal-3、PTX-3、BNP、CK-MB、cTnI水平高于对照组,差异有统计学意义( P>0.05)。病毒性心肌炎患者血清Gal-3与PTX-3呈正相关( r=0.594、 P<0.05),且二者与BNP、CK-MB、cTnI均呈正相关( P<0.05)。血清Gal-3、PTX-3水平诊断病毒性心肌炎的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.873、0.916,截断值分别为5.431 ng/mL、4.159 ng/mL,特异性分别为74.5%、84.7%,敏感度分别为84.4%、82.0%;二者联合诊断的AUC为0.969,特异性为95.9%,敏感度为88.5%。预后不良组病毒性心肌炎患者血清Gal-3、PTX-3水平高于预后良好组,差异有统计学意义( P<0.05)。Gal-3、PTX-3、cTnI是影响病毒性心肌炎患者预后不良的独立危险因素( P<0.05)。 结论:病毒性心肌炎患者血清Gal-3、PTX-3表达水平升高,二者对病毒性心肌炎诊断及预后评价均可能有重要价值。
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编辑人员丨4天前
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脑炎心肌炎病毒3C蛋白酶抗体的制备和检测
编辑人员丨4天前
目的:制备脑炎心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus, EMCV)的3C蛋白酶抗体并检测抗体特异性反应位点。方法:构建原核表达载体pQE30-3C,将蛋白进行体外原核表达,免疫纯种BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,通过Western blot检测制备的抗体与3C蛋白结合的特异性,通过免疫荧光和Western blot检测抗体与EMCV病毒中表达的3C蛋白酶结合的特异性。原核表达具有不同抗原性的EMCV 3C的3个不同片段,并通过Western blot检测单克隆抗体与EMCV 3C蛋白酶不同片段的反应特异性。结果:单克隆抗体与原核表达的3C蛋白酶反应良好,通过Western blot可以检测到病毒中表达的3C蛋白,通过免疫荧光也可以检测到EMCV病毒中的3C蛋白。通过与3C片段的反应发现,单克隆抗体与C端反应,即抗体针对的是C端处的抗原决定簇。结论:成功制备EMCV 3C蛋白酶的抗体,能与原核表达的3C蛋白和病毒3C蛋白反应,且针对的是C端的抗原决定簇。
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编辑人员丨4天前
