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蚕丝-胶原支架用于兔前交叉韧带重建的研究
编辑人员丨6天前
目的:评估蚕丝-胶原支架用于兔前交叉韧带(ACL)重建后,关节腔内韧带再生和骨隧道内腱-骨愈合。方法:Na 2CO 3脱胶法对生蚕丝进行脱胶处理,乙酸抽提法获取Ⅰ型胶原,然后使用热交联和冷冻干燥法制备蚕丝-胶原材料。20只12周龄新西兰大白兔(由河南省实验动物中心提供),对左膝关节使用蚕丝-胶原支架重建ACL。术后4、16周两个时间点随机处死实验动物的一半,每组标本中的5个进行组织学检测,包括关节腔内韧带的组织学检测和骨隧道腱-骨愈合的组织学检测;每组中余下5个标本进行Micro-CT和生物力学检测。组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:术后4周,关节腔内的蚕丝-胶原支架表面可见大量的细胞浸润,细胞排列方向杂乱,细胞周围基质较少,且材料内部细胞浸润较少;骨道内蚕丝-胶原材料内可见细胞浸润,细胞排列较为松散,腱-骨界面可见新生骨组织,骨小梁结构明显;Micro-CT显示骨隧道内新生骨较少,新生骨小梁稀疏,骨体积分数(BV/TV)=(19.36±2.29)%,骨密度(BMD)=(245.04±17.68) mg/cm 3。术后16周,关节腔内支架表面和内部均可见大量细胞浸润,细胞呈纤维细胞形态,排列方向较为一致,与支架长轴方向一致,细胞周围基质较多,免疫组织化学染色显示肌腱蛋白-C(Tenascin-C)表达较4周明显增多;骨道内蚕丝-胶原材料内细胞浸润进一步增多,细胞排列较4周时更为有序,腱-骨界面骨组织趋于成熟,骨组织与支架材料结合更加紧密;Micro-CT显示骨隧道内新生骨较4周明显增多,BV/TV=(39.25±1.51)%( t=16.010, P<0.05),BMD=(400.88±58.32) mg/cm 3,组间比较差异有计学意义( t=5.718, P<0.05);16周5例标本测得最大拉力[(43.67±6.52) N],刚度[(9.18±0.76) N/mm],较4周差异有统计学意义[最大拉力(25.87±4.57) N, t=4.994, P<0.05;刚度(4.85±0.84) N/mm, t=8.556, P<0.05]。 结论:蚕丝-胶原支架用于兔ACL重建,不仅能获得较好的关节腔内韧带再生,同时能够达到良好的腱-骨愈合。
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编辑人员丨6天前
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成骨分化后的去分化BMSCs移植对前十字韧带重建腱骨界面骨形成的作用及机制
编辑人员丨6天前
目的:观察成骨分化后的去分化骨髓间质干细胞(differentiation osteogenic bone marrow mesenchymal stem cells,De-BMSCs)移植对前十字韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建术后腱骨界面骨形成的促进作用,并探索De-BMSCs成骨分化效应增强的分子机制。方法:从家兔胫骨和股骨中提取BMSCs,经成骨诱导分化后用普通培养基进行去分化培养制备De-BMSCs,鉴定De-BMSCs的干细胞特性。建立家兔ACL重建模型,分为3组:腱骨界面注射海藻酸钠凝胶(对照组);腱骨界面注射复合BMSCs海藻酸钠凝胶(BMSCs组);腱骨界面注射复合De-BMSCs海藻酸钠凝胶(De-BMSCs组)。术后4周和12周取膝关节标本,进行组织学、影像学、生物力学检测,评估腱骨界面骨形成情况。De-BMSCs体外成骨诱导分化,给予活化T细胞核转录因子1(nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1)RNA干扰处理,检测成骨分化标志基因及Nanog/NFATc1/Osterix信号通路的表达,明确De-BMSCs成骨分化效应增强的分子机制。结果:De-BMSCs可向成骨、成脂、成软骨分化,具有干细胞特性(均 P<0.05)。术后4周De-BMSCs组BV/TV值为0.36±0.01,较对照组0.24±0.03和BMSCs组0.30±0.02明显增加( P<0.05),最大负荷(40.34±1.19)N和刚度(20.67±2.14)N/mm较对照组[(14.88±2.74)N,(8.67±2.19)N/mm]和BMSCs组[(26.31±1.76)N,(13.81±2.14)N/mm]明显升高(均 P<0.05);术后12周De-BMSCs组BV/TV值0.47±0.02较对照组0.30 ± 0.02和BMSCs组0.35 ± 0.03明显增加(均 P<0.05),最大负荷(64.46±6.69)N和刚度(25.18±3.11)N/mm较对照组[(41.01±6.12)N,(11.59±2.54)N/mm]和BMSCs组[(48.21±4.12)N,(15.89±2.94)N/mm]明显升高(均 P<0.05);De-BMSCs成骨分化过程中,Nanog的表达增加( P<0.05),NFATc1的表达上升且其与Osterix的相互作用增强( P<0.05),成骨分化标志基因COL1A、OCN、OPN的表达增加(均 P<0.05)。 结论:De-BMSCs移植可促进ACL重建后的腱骨界面骨形成,其作用机制可能是Nanog/NFATc1/Osterix信号通路介导了De-BMSCs成骨分化效应增强。
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编辑人员丨6天前
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腱骨界面损伤的愈合机制与治疗方法研究进展
编辑人员丨6天前
腱骨界面连接肌腱和骨,其作用是实现力学传递和生物学信息交流。但这一结构损伤后术中难以恢复原有层次,形成纤维瘢痕,性能降低。因此,腱骨界面愈合是运动医学领域关注热点。尽管有多项研究显示多种分子和细胞参与腱骨界面重建过程,但具体机制仍然未明确。当前治疗模式研究繁多,临床治疗方案多样且未统一。笔者就腱骨界面愈合的生物学和力学机制及促进愈合主要方法的研究进展进行综述,为进一步对腱骨界面愈合研究与应用提供参考和新思路。
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编辑人员丨6天前
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羟基磷灰石修饰的多孔螺钉对腱骨愈合的研究
编辑人员丨6天前
目的:观察羟基磷灰石(HA)修饰的3D打印左旋聚乳酸(PLLA)多孔螺钉用于兔前交叉韧带(ACL)重建术后肌腱-骨愈合情况。方法:通过3D打印机制备具有良好正交孔隙结构的PLLA多孔螺钉。通过静电层层自组装技术将HA附着在多孔螺钉上。将30只12周龄新西兰雄性大白兔(由郑州大学动物实验中心提供),根据简单随机分组法分为PLLA组和PLLA-HA组,PLLA组仅使用多孔螺钉固定移植肌腱,PLLA-HA组使用HA修饰的多孔螺钉固定移植肌腱。分别于术后6周和12周将每组动物随机各处死5只,进行组织学检测。每组中余下5只进行Micro-CT和生物力学检测。组间比较采用两独立样本 t检验。 结果:组织学显示,术后6周肌腱-骨界面处有胶原蛋白及网状纤维生成,两组间无明显骨整合,但PLLA-HA组有软骨细胞形成。术后12周,两组肌腱-骨界面胶原纤维增多。PLLA组在肌腱-骨界面处可见骨小梁生成,PLLA-HA组可见较成熟的骨小梁,且与移植肌腱出现骨整合。术后12周Micro-CT示,在PLLA-HA组中,反映骨性结构的骨体积分数[BV/TV=(36.46±3.45)%],骨小梁分离率[Tb.Sp=(0.35±0.04) mm]等指标均优于PLLA组[BV/TV=(25.59±3.22)%, t=-5.147, P<0.05);Tb.Sp=(0.64±0.19) mm, t=3.304, P<0.05],组间比较差异均有统计学意义( P<0.05)。术后12周测得PLLA-HA组极限抗拉负荷[(83.74±12.43) N],刚度[(14.16±3.53) N/mm],较PLLA组差异有统计学意义[极限抗拉负荷为(54.70±12.58) N, t=-3.671, P<0.05;刚度为(10.42±0.71) N/mm, t=-2.230, P<0.05]。 结论:HA修饰的3D打印PLLA多孔螺钉可以通过增加骨的诱导性促进骨的生长,加快肌腱在骨隧道内的骨整合。
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编辑人员丨6天前
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组合磁场治疗修复骨腱界面损伤的研究
编辑人员丨6天前
目的:探讨组合磁场(CMF)治疗对骨腱界面损伤修复的影响。方法:2018年7月至2019年7月,将由中南大学实验动物学部提供的24只成年新西兰雄兔建立髌骨部分切除模型,采用随机数字表法分为2组(每组12只):治疗组术后给予CMF治疗(30 min/d),对照组予以假治疗(设备关机状态)。术后12周收获髌骨-髌腱复合体标本行组织学、影像学和生物力学检测。组间比较采用独立样本 t检验。 结果:组织学染色结果显示,CMF治疗能明显促进愈合界面骨、纤维软骨的形成和成熟。影像学检测发现治疗组面积、长度、骨矿化含量、骨密度和骨显微形态学参数等量化指标明显优于对照组。拉断实验显示,治疗组的横截面积、拉断负荷、极限强度、拉断能量等力学性能指标[(29.58±4.55) mm 2、(229.2±59.4) N、(8.27±1.21) MPa、(0.478±0.149) J]明显高于对照组[(21.25±3.33) mm 2、(154.2±40.9) N、(6.57±1.16) MPa、(0.268±0.140) J, t=3.619、2.547、2.484、2.516, P<0.05]。 结论:CMF治疗能明显促进骨腱界面损伤后修复。
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编辑人员丨6天前
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梯度多相支架材料促进肩袖肌腱-骨界面修复与再生的研究方法与进展
编辑人员丨6天前
肩袖肌腱-骨界面的再生在肩袖损伤修复过程中至关重要。肌腱-骨界面由四个逐渐移行的区域构成,即肌腱区、未矿化纤维软骨区、矿化纤维软骨区和骨区。肌腱-骨界面中各区域的发育和再生受到生长因子、无机离子、机械刺激以及低氧环境的调节。受影响肌腱-骨界面发育和再生因素的启发,学者们转向设计促进肌腱-骨界面区域化再生的梯度支架系统,这些支架的梯度分布包括无机离子梯度和生长因子梯度。根据支架系统的不同梯度来促进肌腱-骨界面的细胞成肌腱、成软骨及成骨分化,同步完成促进肌腱-骨止点的愈合,实现肩袖肌腱-骨界面的修复与再生。目前的研究表明梯度多相支架材料具有很高的学术研究价值,支架材料的相关研究在肌腱-骨界面修复方面起到了一定程度的指导作用,有着较好的临床应用前景。在综述影响肌腱-骨界面发育和再生因素的基础上,总结各影响因素在促进肩袖肌腱-骨界面修复过程中对各区域促进成肌腱、成软骨和成骨的作用;探讨目前已报道的用于肩袖损伤修复的梯度多相支架材料,包括无机离子梯度支架与生长因子梯度支架的特性以及对损伤后肩袖组织的修复效果;分析现阶段梯度多相支架在肩袖损伤修复研究过程中所面临的问题和未来的发展方向。
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编辑人员丨6天前
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低强度脉冲超声促进腱骨界面愈合的机制
编辑人员丨6天前
目的:探索低强度脉冲超声(LIPUS)促进腱骨界面损伤修复的作用及相关机制。方法:建立大鼠(中南大学动物学部提供)肩袖损伤模型并按照随机数字表法分为LIPUS治疗组和对照组,并在术后3周和5周收取冈上肌肌腱-肱骨头复合体标本,进行组织学、免疫组织化学及生物力学检测,相关统计采用双因素方差分析。体外利用LIPUS刺激巨噬细胞并向M2型诱导,检测M2型巨噬细胞占比,收集巨噬细胞上清液干预骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测其成骨和成软骨分化效果,组间比较采用 t检验。 结果:在大鼠肩袖损伤模型中,术后第5周时LIPUS治疗组的腱骨界面成熟度(13.50±2.47比17.33±1.20, t=2.605, P<0.05)和生物学力性能均优于对照组(拉断负荷:49.60±6.12比34.27±5.85, t=4.950;拉断刚度:20.85±2.70比13.82±3.01, t=3.974, P<0.01)。免疫组织化学提示LIPUS治疗组大鼠肩袖损伤局部M2型巨噬细胞比例高于对照组(0.77±0.11比0.59±0.10, t=2.582, P<0.05)。体外实验也证实LIPUS组M2型巨噬细胞占比高于对照组(65.77±4.72%比42.50±3.20% t=7.068, P<0.01),其上清液促进BMSCs成骨(3.92±0.47比1.0±0.12, t=10.43, P<0.01)和成软骨(2.25±0.35比1.0±0.25, t=5.034, P<0.01)分化能力更强。 结论:LIPUS可能通过调节巨噬细胞向M2极化,并影响BMSCs分化,从而有效提高大鼠肩袖损伤模型腱骨界面愈合质量。
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编辑人员丨6天前
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基于脱细胞基质材料的组织工程策略在骨腱界面损伤中的应用现状和展望
编辑人员丨6天前
随着我国全民健身运动的迅速发展,运动损伤人次也随之升高。骨腱界面具有复杂的结构、组成和力学特征,因而损伤后常常成为临床上的巨大挑战。组织工程技术的出现和发展为骨腱界面损伤修复提供了一种新的辅助治疗方式。先进的仿生支架、生物活性因子和种子细胞均可加速骨腱界面的修复与再生。在组织工程三要素中,脱细胞基质材料是骨腱界面损伤组织工程策略中一类重要的先进仿生支架材料。研究证实在骨腱界面损伤领域,通过脱细胞基质材料的形状设计、脱细胞方法的改进、支架材料的生物活性强化和种子细胞的优化筛选能够获得更满意的临床疗效和应用前景。本文简要论述脱细胞基质材料组织工程策略在骨腱界面损伤领域的最新应用,以期为读者提供一些思考。
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编辑人员丨6天前
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同种异体移植物处置方式对韧带重建术后腱骨愈合的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨同种异体移植物处置方式对前交叉韧带(ACL)重建术后腱骨愈合的影响。方法:32只比格犬(64膝)按照ACL重建移植物类型随机抽样平均分为4组,A组为新鲜自体移植物,B组为新鲜同种异体移植物,C组为经γ射线辐照后低温冷藏同种异体移植物,D组为冻干后经γ射线辐照同种异体移植物,每组8只。术后6个月取材行组织学和生物力学检查。组间比较采用单因素方差分析。结果:A组腱骨界面连接紧密,软骨细胞带排列有序。B组腱骨界面清晰,有少量软骨细胞。C组腱骨界面模糊,可见软骨细胞移行带。D组腱骨界面连接疏松,可见腔隙形成,软骨细胞着色淡提示未成熟软骨样组织。D组组织学评分低于A组[(2.580±0.670)分比(5.320±0.720)分, t=8.660, P<0.05]和C组[(2.580±0.670)分比(5.010±0.220)分, t=11.000, P<0.05],差异有统计学意义。A组最大失败载荷最大(271.210±27.470) N,D组最小(58.590±16.970) N;B组最大失败载荷低于A组[(149.430±45.520) N比(271.210±27.470) N, t=-16.870, P<0.05]和C组[(149.430±45.520) N比(234.110±38.960) N, t=-31.472, P<0.05];D组最大失败载荷低于A组[(58.590±16.970) N比(271.210±27.470) N, t=-22.810, P<0.05]和C组[(58.590±16.970) N比(234.110±38.960) N, t=-25.220, P<0.05]。D组刚度低于A组[(28.540±10.120) N/mm比(73.540±17.910) N/mm, t=4.724, P<0.05]和C组[(28.540±10.120) N/mm比(73.490±9.460) N/mm, t=6.236, P<0.05]。最大位移比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:处置方式影响同种异体移植物ACL重建术后腱骨愈合,冻干后γ射线辐照处理不建议常规使用。
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编辑人员丨6天前
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界面螺钉与可调节襻钛板重建前十字韧带的研究进展
编辑人员丨6天前
对于前十字韧带(anterior cruciate ligament,ACL)损伤患者,关节镜下ACL重建是恢复其运动功能的主要方式。骨隧道的定位与制作、移植物的选择及固定方式是影响ACL重建手术效果的三个关键因素。移植物固定不当会引起骨隧道扩大、移植物松弛,从而导致ACL重建手术失败以及导致的翻修手术。因此,对ACL重建术中移植物的固定方式更为重要。过去40年采用ACL重建不断取得进展,手术理念趋于一致,手术技术逐渐规范,移植物固定方式为最常用的界面螺钉和可调节襻钛板。界面螺钉属于骨隧道内挤压固定,可调节襻钛板是最常用的骨皮质外悬吊固定。相较于界面螺钉,可调节襻钛板具有固定牢靠、强度高、不损伤移植物、有利于腱-骨愈合、降低炎症反应、减少骨隧道扩大、减少皮质骨膜破坏、减轻术后疼痛等优势,受到越来越多的临床医生关注和采用。目前,股骨侧固定方式已基本统一,而胫骨侧的最佳固定方式仍有争议。国内的指南认为界面螺钉和可调节襻钛板固定均可接受,但手术医生应对固定方式充分了解。
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编辑人员丨6天前
