目的:了解云南省蝙蝠体表寄生蛛蝇中肯科伊病毒(Kaeng Khoi virus，KKV)的感染情况。方法:2014年在保山市和2017年在瑞丽市采集蝙蝠体表寄生蛛蝇标本并进行鉴定，应用细胞组织培养法进行病毒分离，对阳性分离物进行序列扩增测序，对病毒全基因序列进行同源性和系统进化分析。结果:用蛛蝇标本研磨上清液接种BHK-21细胞，从瑞丽市和保山市蛛蝇标本分离到3株阳性分离物(WDBC1704、WDBC1710和BSBC1406)，均能使BHK-21细胞出现圆缩、脱落的细胞病变。经RT-PCR和高通量测序扩增后，获得3株阳性分离物的全基因组序列。系统进化分析显示3株阳性分离物的S、M、L基因均与泰国分离的KKV原型株PSC-19在同一进化支。本次分离的3株KKV与云南省既往分离株WDBC1403亲缘关系最近，其中BSBC1406株又形成一个独立的小分支。序列对比显示3株分离株之间在M基因上存在较大差异，BSBC1406与其他2株相似度仅为78.0%~78.1%，开放阅读框区中Gc蛋白的氨基酸相似度均为85.3%。结论:从云南蝙蝠寄生蛛蝇中新分离的3株KKV与原型株有较大差异，特别是BSBC1406株与其他分离株存在一定差异，可能已发生了变异，应加强云南省媒介昆虫携带KKV的监测及其与人类疾病关系的研究。

蝙蝠是尼帕病毒和严重急性呼吸综合征冠状病毒等人畜共患病毒的重要宿主。然而，蝙蝠体表的吸血节肢动物是否也携带这些病毒，以及吸血节肢动物携带的病毒与蝙蝠携带的病毒之间的关系尚未报道。本研究于2012—2015年在中国云南省收集了蝙蝠体表686只吸血节肢动物，其中包括蝠蝇、蛛蝇、蜱、螨和跳蚤。采用宏转录组学方法对这些节肢动物携带的病毒进行分析，发现了144种高度多样性的单股正链RNA、单股负链RNA和双链RNA病毒，其中138种是潜在的新病毒。这些病毒分属14个不同的病毒科或目，包括布尼亚病毒目、单分子负链RNA病毒目、呼肠孤病毒科和小核糖核酸病毒目。进一步分析发现，布尼亚病毒目是蜱中最丰富的病毒群(占总病毒RNA的84%)，而裸露核糖核酸病毒在蛛蝇和蝠蝇的文库中最丰富(52%~92%)，其次是solemoviruses(南方菜豆花叶病毒)(1%~29%)和呼肠孤病毒(0%~43%)。这些病毒基于节肢动物类型高度聚类。值得注意的是，在蝙蝠携带的节肢动物的病毒组中没有发现蝙蝠传播的人畜共患病毒，这似乎并不支持蝙蝠体表的节肢动物是蝙蝠携带的人畜共患病毒的传播媒介。

筑巢独栖蜂包括捕食者和传粉者,在生态系统中具有重要的生态功能.巢管法用于研究筑巢蜂的生物学、生活史、多样性和生态学特性,但此前较少用于研究亚热带森林中的独栖蜂.经过在生物多样性-生态系统功能实验(BEF-China)新岗山样地5年的长期定点监测和实验样本积累,我们发现了独栖蜂的主要类群和发生规律.巢管法共获得128个物种,隶属于3目25科.其中传粉者占全部独栖蜂的26.6％,共2科12种,主要为分舌蜂和切叶蜂;捕食者约占全部独栖蜂的73.4％,有4科44种,以蜾赢、蛛蜂、泥蜂和方头泥蜂为主;独栖蜂寄生者有19科72种,主要类群是麻蝇、蜂虻、青蜂、钩腹蜂和姬小蜂.独栖蜂物种组成中传粉者多样性显著低于捕食者.同时独栖蜂中普遍存在着雌雄羽化异律现象,即雄性先羽化,并在越冬个体中更明显.切叶蜂科和方头泥蜂科的发生时间比蜾赢亚科和蛛蜂科的发生时间更集中.此外,通过构建独栖蜂及其寄生者的互作网络,我们发现寄生者多度和多样性受较低营养级寄主的上行控制效应调节.上述结果揭示了对中国亚热带森林地区独栖蜂及其寄生者多样性,有利于更好地保护野生独栖蜂资源,发挥其生态服务功能.

目的 对云南大理毛腿鼠耳蝠体表寄生虫的感染状况进行分析,并描述两种蛛蝇的形态特征,探究其系统进化关系.方法 2022年7月,在云南大理州剑川县捕捉毛腿鼠耳蝠,采集其体表寄生虫并进行鉴定.计算各体表寄生虫的构成比、感染率、平均多度和平均感染强度;使用优势度指数(Y)确定各体表寄生虫类群中的优势种;运用扩散指数(C)、I指数、聚块指数(m*/m)和K指数判断优势种的空间分布类型;利用协调系数(V)分析优势种之间的相互关系.描述两种寄生蛛蝇的主要形态学特征.提取蛛蝇基因组DNA,PCR扩增线粒体细胞色素C氧化酶1亚基(cox1)、细胞色素B(cytb)和16S核糖体RNA(16S rRNA)序列,测序并串联后,用MEGA 11以最大似然法构建基于这3个基因的系统进化树.结果 共捕获毛腿鼠耳蝠72只(雄性24只,雌性48只),体表寄生虫感染率为97.3％(70/72).共采集体表寄生虫1 745只,其中革螨1 463只,分属于2科5属7种,分别为织金巨刺螨、鼠耳蝠螨、围睫肪刺螨、柯氏蝠螨、盾板浆刺螨、宽埃螨和朝鲜巨刺螨;蛛蝇282只,分属于2属2种,分别为台湾蛛虱蝇和叉笔虱蝇;未检获其他体表寄生虫.毛腿鼠耳蝠的革螨感染率、平均多度和平均感染强度分别为94.4％(68/72)、20.32、21.53,均高于蛛蝇[91.7％(66/72)、3.92、4.27](Fisher 精确检验,P＜0.05;U=700、424,均P＜0.01).织金巨刺螨、鼠耳蝠螨和围睫肪刺螨为优势种(Y=0.30、0.23、0.22).优势种鼠耳蝠螨(C=1.98、I=0.98、m*/m=1.18、K=5.55)、织金巨刺螨(C=9.43、I=8.43、m*/m=2.15、K=0.87)和围睫肪刺螨(C=6.50、I=5.50、m*/m=2.02、K=0.98)在不同毛腿鼠耳蝠个体间均呈现聚集分布.鼠耳蝠螨与围睫肪刺螨(V=0.33,P＜0.05)、鼠耳蝠螨与织金巨刺螨(V=0.34,P＜0.05)、围睫肪刺螨与织金巨刺螨(V=0.72,P＜0.01)之间均存在正协调关系.台湾蛛虱蝇体长约3 mm,背板Ⅰ呈宽圆形,末端有约25根长刚毛,背板Ⅱ和背板Ⅵ之间有较多长毛,背板Ⅵ上有6根长刚毛和10根长刺.叉笔虱蝇体长为3.5～4.0 mm,背板Ⅰ呈长宽状,边缘有一排短刚毛,背板Ⅱ长约为宽的3倍,背板Ⅱ后方有两个突起,突起表面呈凹状,后缘尖锐带有色素沉着.台湾蛛虱蝇cox1、cytb和16S rRNA序列分别为875、338和455 bp,提交至GenBank获得的登录号分别为OQ127648、OQ134944和OQ127330;叉笔虱蝇cox1、cytb和16S rRNA序列分别为832、332和451 bp,提交至GenBank获得的登录号分别为OQ119629、OQ129602和OQ119632.系统进化树分析结果显示,台湾蛛虱蝇与短铗蛛虱蝇聚在同一个分支上,再与叉笔虱蝇聚在一支.结论 云南大理毛腿鼠耳蝠体表寄生虫感染率高,主要为革螨和蛛蝇,其中台湾蛛虱蝇与同属的短铗蛛虱蝇的亲缘关系最近,叉笔虱蝇与台湾蛛虱蝇和铗蛛虱蝇的亲缘关系较近.

为调查云南省蝙蝠体表寄生虫蛛蝇中病原体的携带情况.采集蝙蝠体表蛛蝇标本,用细胞培养法分离病毒,对阳性分离物进行分子生物学鉴定,用RT-PCR(Reverse transcription PCR)、TCID50 (Tissue culture infective dose)、免疫荧光等实验对病毒的特性进行研究.2012年从勐腊县的棕果蝠(Rousettus leschenaulti)体表采集蛛蝇183只,利用节肢动物线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)的通用引物用PCR方法鉴定为蛛蝇科的Eucam psi poda sundaica.从这些蛛蝇中分离到1株阳性分离物MLBC1215,能引起金黄地鼠肾细胞(Golden hamster kidney cell,BHK 21)和非洲绿猴肾细胞(African green monkey kidney cell,VeroE6)出现圆缩、脱落的细胞病变(Cytopathic effect,CPE).用RT-PCR方法扩增序列,测序结果显示MLBC1215病毒株为三节段RNA病毒,各基因组编码区序列长度分别为S基因为975核苷酸,M基因为4 568核苷酸,L基因为6 866核苷酸,3个基因节段核苷酸序列所形成的进化树拓扑构图相似,MLBC1215病毒株的S、M和L基因均与1970年泰国分离的肯科伊病毒(Kaeng Khoi orthobunyavirus,KKV)(PSC-19)处于同一进化分支.MLBC1215株的S、M、L片段与泰国PSC 19株的核苷酸的同源性分别为97.9％、94.4％和95.3％;氨基酸的同源性分别为98.7％、96.5％和98.4％.MLBC1215株在BHK-21细胞生长到60h达到最高滴度,TCID50为104.8/0.1ml,随后病毒滴度逐渐下降,至144h TCID50为10 3.6/0.1ml.MLBC1215株对小白鼠的主要器官均能引起病理改变,从而导致小白鼠发病死亡.采集的33份人血清中有9份IgG抗体与MLBC1215株有反应,检测结果为阳性,抗体滴度为4份1∶20,4份1∶40,1份1∶80.本次研究证实云南省腊勐县蝙蝠体表吸血昆虫蛛蝇携带布尼亚病毒目KKV.

目的 了解云南省蛛蝇和蝠蝇中沃尔巴克氏体(Wolbachia)的感染状况及其基因型别.方法 2012-2017年,在云南省芒市、腾冲、畹町、孟连、勐腊、祥云、墨江、永德县和保山市隆阳区共9个采样点采集蝙蝠体表蛛蝇和蝠蝇,PCR扩增沃尔巴克氏体的核糖体小亚基16S(16S rRNA)和细菌表皮蛋白(wsp)基因并测序,对所有16S rRNA和wsp基因进行系统进化分析.结果 2012-2017年,在云南省9个采集点采集蝙蝠体表蛛蝇747只(48批)和蝠蝇19只(6批),检测54批标本获得沃尔巴克氏体16S rRNA和wsp基因序列各24条.云南省蝙蝠体表蛛蝇和蝠蝇中,蛛虱蝇属(Phthiridium)6批和Eucampsipoda属37批中检出沃尔巴克氏体阳性分别为2批(2/6)和19批(19/37),蛛虱蝇属(Nycteribia)(0/4)和笔虱蝇属(Penicillidia)(0/1)未检出;蝠蝇均属于蝠虱蝇属(Brachytarsina),6批中检出沃尔巴克氏体阳性的有3批(3/6).16S rRNA基因系统进化结果提示,24株沃尔巴克氏体均位于一个大的分支中,与1株来源于白蚁(DQ837204)的同源性最高达98.80％～100％.wsp基因的系统进化分析提示,24株沃尔巴克氏体位于B组和F组基因型.结论 沃尔巴克氏体在云南省蛛蝇和蝠蝇中广泛而长期存在,wsp基因系统进化分析属于B组和F组基因型.

记述了采自中国云南和湖南的拟蝇虎属(Plexippoides)3新种:长突拟蝇虎P.longapophysis sp.nov.、类黑拟蝇虎P.subtristis sp.nov.及唐氏拟蝇虎P.tangi sp.nov.,提供了它们的地理分布信息、详细的形态特征以及外形和外生殖器显微照片.

有瓣蝇类(Calyptratae)隶属于昆虫纲(Insecta)四大超适应辐射类群之一的双翅目(Diptera),占双翅目已知物种多样性的近20％.有瓣蝇类分布广泛,生物学习性极为多样,在维系生态系统稳定中发挥着重要作用,是媒介、法医、传粉和天敌昆虫学研究领域的热点类群,也是探究双翅目系统演化及其成功适应辐射的关键类群.为了还原有瓣蝇类的演化历史,许多著名昆虫学者先后对该类昆虫开展过不同层面的研究.有瓣蝇类的单系性得到了普遍支持,并被分为3个总科——虱蝇总科(Hippoboscoidea)、蝇总科(Muscoidea)和狂蝇总科(Oestroidea),其中单系的狂蝇总科与多系的蝇总科聚为一支,再与虱蝇总科成为姐妹群.在科级阶元水平,蝠蝇科(Streblidae)(虱蝇总科)、花蝇科(Anthomyiidae)(蝇总科)、丽蝇科(Calliphoridae)(狂蝇总科)、邻寄蝇科(Rhinophoridae)(狂蝇总科)等类群的单系性仍有待验证,且新的科仍在不断被建立[如粉蝇科(Polleniidae)、乌鲁鲁蝇科(Ulurumyiidae)],因此,有瓣蝇类科级系统发育关系仍不十分明晰.已有研究对虱蝇总科虱蝇科(Hippoboscidae)、蝠蝇科、蛛蝇科(Nycteribiidae),蝇总科蝇科(Muscidae)、粪蝇科(Scathophagidae),狂蝇总科麻蝇科(Sarcophagidae)、狂蝇科(Oestridae)胃蝇亚科(Gasterophilinae)的演化历史进行研究,明确了起源与扩散、寄主转移、取食策略等关键生物学习性的演化历史.但由于部分关键类群生活史信息的缺失,以及尚未有效解决的系统发育关系,有瓣蝇类演化历史仍有许多待解之谜.本文综述了有瓣蝇类分类、系统发育及演化研究进展,是在系统学研究进入系统发育基因组学时代后对该类群相关研究进展的首次全面总结.

目的 了解云南省中华菊头蝠体表寄生虫的感染情况,为开展中华菊头蝠体表寄生虫研究和媒介传播性人兽共患病的防治提供科学依据.方法 2019年8月、2020年8月和11月于云南省6个调查点抓获中华菊头蝠样本,采集并鉴定其体表寄生虫.并分析中华菊头蝠体表寄生虫感染情况.结果 在捕获109只中华菊头蝠中,88只感染体表寄生虫,感染率为80.73％.采集革螨、蝙蝠蝇、恙螨和蜱4大类体表寄生虫共578只,其中革螨482只,蝙蝠蝇94只,恙螨和蜱各1只,革螨和蝙蝠蝇共占中华菊头蝠总体表寄生虫总数的99.65％.革螨被鉴定为2科3属4种,其中蝠螨科埃螨属的宽埃螨为优势革螨种,其次为拟弱螨属的斯氏拟弱螨和巨刺螨科巨刺螨属的峨眉巨刺螨.蝙蝠蝇被鉴定为2科2属2种,其中蛛蝇科的Stylidia szechuana为优势虫种.宽埃螨、斯氏拟弱螨、峨眉巨刺螨和S.szechuana在不同个体的中华菊头蝠体表均呈聚集分布.不同性别的中华菊头蝠个体间总体表寄生虫、革螨和蝙蝠蝇的感染率、平均多度和平均感染强度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 云南省中华菊头蝠的主要体表寄生虫类群是革螨和蝙蝠蝇.体表寄生虫的感染情况与宿主性别之间的关系可能受到宿主生理状态影响.对我国蝙蝠体表寄生虫的研究仍待完善和深入,将为媒介传播性人兽共患病的监测和防控提供科学指导.

目的 了解云南省境内部分地区亚洲长翼蝠体表寄生虫的感染状况和相关生态规律.方法 2020-2022年期间,在云南省昆明市富民县、昆明市晋宁区、楚雄彝族自治州牟定县、曲靖市沾益区、大理白族自治州宾川县和普洱市思茅区6个采集点,使用雾网捕捉亚洲长翼蝠,之后采集其体表寄生虫并进行整理鉴定.计算亚洲长翼蝠体表寄生虫的构成比(Cr)、感染率(PM)、平均多度(MA)和平均感染强度(MI),分析感染情况;使用优势度指数(Y)判断亚洲长翼蝠体表寄生虫的优势物种;运用聚块指数(m*/m)判断优势种的空间分布类型;利用协调系数(Ⅴ)分析优势种之间的相互关系.运用Fisher's精确检验和非参数秩和检验等统计学方法分析体表寄生虫感染情况的性别差异.结果 共捕捉到亚洲长翼蝠77只,在其体表收集到寄生虫498只,主要类群为革螨(Cr=33.53％,PM=55.84％,MA=2.17,MI=3.88)和蝙蝠蝇(Cr=64.66％,PM=93.51％,MA=4.18,MI=4.47).优势物种为长铗蛛虱蝇(Y=0.293)和短铗蛛虱蝇(Y=0.203).聚块指数分析表明,长铗蛛虱蝇(m*/m=1.366)和短铗蛛虱蝇(m*/m=2.460)在不同宿主个体间均呈聚集分布.协调系数分析发现,长铗蛛虱蝇与短铗蛛虱蝇之间(V=0.248,P=0.026)存在正协调关系.此外,亚洲长翼蝠性别对其总体表寄生虫、蝙蝠蝇和革螨感染率的影响差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 云南省亚洲长翼蝠体表寄生虫感染普遍,体表寄生虫物种多样性相对较低,群落结构较简单,主要为革螨和蝙蝠蝇.