目的:评价原位肝移植患者输血因素(大量输血、输注储存血及无肝期输血)与术后早期转归的关系。方法:回顾性选取本院2021年1月至2022年3月终末期肝病行原位肝移植术且术中输血的患者，收集患者临床资料。根据患者术中的输血量分为大量输血组(M组，红细胞总输注量≥10 U)和非大量输血组(NM组)，根据输注红细胞的储存时间分为新鲜血组(NS组)和储存血组(S组，红细胞储存时间>2周)，根据无肝期是否输血分为无肝期输血组(T组)和非无肝期输血组(NT组)。采用多因素logistic回归、广义线性模型及广义线性混合模型分别分析输血因素与主要结局指标(术后肺部并发症、循环超负荷、急性肾损伤、腹腔感染、血栓形成)和次要结局指标(ICU滞留时间、术后住院时间、术后任一时点体温≥38.5 ℃、术后肝肾功能指标、凝血功能指标、血小板计数与术前的差值)的关系。结果:本研究纳入患者106例。多因素logistic回归分析结果：大量输血与输注储存血是术后肺部并发症的危险因素，大量输血是腹腔感染的危险因素，肝功能Child-Turcotte-Pugh评分和无肝期时间是术后急性肾损伤的危险因素，Child-Turcotte-Pugh评分是循环超负荷的危险因素，年龄和大量输血是血栓形成的危险因素( P<0.05)。广义线性模型分析结果：术中输注储存血和无肝期输血是ICU滞留时间延长的危险因素，大量输血、术中输注储存血和无肝期输血是住院时间延长的危险因素( P<0.05)，大量输血、术中输注储存血和无肝期输血与术后任一时点体温≥38.5 ℃无相关性( P>0.05)。广义线性混合模型分析结果：是否大量输血、是否输注储存血以及是否无肝期输血患者术后肝肾功能指标、凝血功能指标、血小板计数与术前的差值差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:大量输血及输注储存血是原位肝移植患者术后早期不良转归的危险因素。

目的:探讨单采血小板体外储存过程中其微小RNA(miRNA)的表达水平。方法:选择2022年3月至2023年5月成都市血液中心采集的15份单采血小板为研究对象。15份单采血小板采集自15例健康状况良好，符合《血站技术操作规程》(2019版)采集要求的单采血小板献血者。血小板捐献者的中位年龄为30岁(22，40岁)；男性捐献者为8例，女性为7例。将单采血小板置于恒温震荡保存箱中，温度(22±2)℃，振荡频率60 Hz条件下储存，分别于储存第1天(采集当天)、第5天和第7天的上午10点留取血小板标本3～5 mL。应用血细胞分析仪检测血小板常规指标，实验室pH计测定血小板pH值，流式细胞术(FCM)测定血小板CD62P表达水平，实时荧光定量PCR法测定miRNA-126、-145、-150、-197、-223的相对表达水平。血小板标本存储1、5、7 d时各项指标比较采用重复测量方差分析；采用Spearman相关性分析血小板miRNA表达水平与储存时间的相关性。本研究遵循的程序符合成都市血液中心伦理委员会要求[批准文号：伦审(研)2020年第04号]，并且于血小板捐献前与所有捐献者签署《献血者知情同意书》。结果:①随着储存时间延长，本组15份单采血小板标本的血小板压积(PCT)增大[储存1、5、7 d时分别为(0.68±0.21)%、(0.89±0.13)%、(0.99±0.17)%]，大血小板比例(P-LCR)上升[储存1、5、7 d时分别为(20.5±6.0)%、(26.0±3.4)%、(30.4±2.8)%]；pH值下降[储存1、5、7 d时分别为(7.2±0.1)、(7.1±0.2)、(7.0±0.2)]，并且差异均有统计学意义( F＝5.60， P＝0.007； F＝9.12， P＝0.001； F＝5.44， P＝0.004)；其余指标分别比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。②单采血小板标本储存1、5、7 d时，其CD62P表达水平分别为(6.3±2.9)%、(22.0±7.3)%和(38.4±12.1)%。随着储存时间延长，血小板标本的CD62P表达水平升高，并且差异均有统计学意义( F＝36.16， P<0.001)。③本组血小板标本随着储存时间的延长，其miRNA-126、-150、-197相对表达水平增加，而miRNA-145和-223相对表达水平下降；并且差异均有统计学意义( F＝88.58、32.64、33.59、35.42、22.91，均 P<0.001)。④本组单采血小板标本的储存时间与其miRNA-126、-150和-197的表达水平呈正相关( r＝0.811、0.812、0.856，均 P<0.001)，而与miRNA-145和-223的表达水平呈负相关( r＝－0.720、－0.767，均 P<0.001)。 结论:单采血小板在体外储存过程中，其miRNA-126、-145、-150、-197和-223表达水平发生明显变化，尤其是miRNA197。

目的 分析临床输血不良反应发生情况及其分布特点,并探讨相关影响因素,为降低输血不良反应发生率和保障临床输血安全提供参考依据.方法 回顾性分析2019-2022年在福建医科大学附属福清市医院接受输血治疗的6 890例患者的临床病历资料.分析产生输血不良反应的原因,并对数据进行分类与统计.比较不同血液成分、性别、年龄、血型、输血史、血液制品是否去除白细胞,以及血小板和红细胞储存时间对输血不良反应的影响,记录输血不良反应发生的主要科室和疾病分布情况.结果 2019-2022年共输血19 180人次,发生输血不良反应71人次.2019-2022年各年度输血不良反应发生率分别为0.16％、0.42％、0.41％、0.47％,各年度不良反应发生率比较,差异无统计学意义(x2=7.03,P＞0.05).不良反应类型以过敏反应和非溶血性发热反应为主,并且过敏反应发生率呈逐年上升趋势.2019-2022年红细胞输血不良反应发生率为0.28％,血浆为0.38％,血小板为1.32％,冷沉淀为0.45％,各种血液成分之间输血不良反应发生率比较,差异有统计学意义(x2=32.80,P＜0.05).红细胞主要以非溶血性发热反应为主,血浆、血小板和冷沉淀均以过敏反应为主.男性与女性受血者输血不良反应发生率比较,差异无统计学意义(x2=0.25,P＞0.05);不同年龄受血者输血不良反应发生率比较,差异无统计学意义(x2=1.36,P＞0.05);不同ABO血型患者输血不良反应发生率比较,差异无统计学意义(x2=1.87,P＞0.05);有输血史的受血者输血不良反应发生率高于无输血史受血者,差异有统计学意义(x2=11.43,P＜0.05);受血者输注去除白细胞的血液制品输血不良反应发生率低于输注未去除白细胞的血液制品,差异有统计学意义(x2=5.38,P＜0.05).发生输血不良反应前5名的科室分别为血液科、消化内科、妇科、重症监护病房和感染科.随着血小板储存时间增加,输血不良反应发生率呈逐渐上升趋势,差异有统计学意义(x2=32.61,P＜0.05).随着红细胞储存时间增加,输血不良反应发生率呈先上升再逐渐下降趋势,但差异无统计学意义(x2=4.04,P＞0.05).结论 福建医科大学附属福清市医院输血不良反应以非溶血性发热反应和过敏反应为主.发生输血不良反应的主要原因与血液成分、输血史、血液制品是否去除白细胞及血小板储存时间有关.临床应多因素管理输血患者,以降低其输血不良反应的发生率.

目的 研究添加不同浓度红景天苷(salidroside,Sal)对血小板体外保存期间形态、代谢及活化等影响.方法 将血液成分分离机采集的每份单采血小板均分为5袋,空白对照组(A组)不做任何添加,另外4袋中分别加入不同浓度的Sal溶液,终浓度为 5 μmol/L(B 组)、25 μmol/L(C 组)、40 μmol/L(D 组)和 50 μmol/L(E 组),(22±2)℃ 振荡保存,分别在保存的第1、3、5、7、10、14天抽样,进行血小板参数检测、血气生化检测、血栓弹力图试验、流式细胞术检测和sCD40L浓度检测.结果 各组单采血小板的血小板计数随保存时间延长无明显变化(P＞0.05),平均血小板体积(MPV)在保存前10 d内无显著变化,14 d时均显著增大(P＜0.05),血小板体积分布宽度(PDW)随保存时间延长均有不同程度的变化(P＜0.05);在相同保存时间,各组之间单采血小板计数、MPV、PDW值比较无明显差异.各组单采血小板保存7 d内的pH值明显降低(P＜0.05),LAC值不断升高(P＜0.05),保存14 d的GLU值明显降低(P＜0.05).保存10天内,各组单采血小板的TEG MA值无明显差异,第14天明显低于第1、3、5、7、10天(P＜0.05).保存期间各组单采血小板CD62P表达率不断升高,均在第10天达峰值(P＜0.05),第14天下降(P＞0.05);在保存第5天和第7天,各实验组与A组相比CD62P表达率均有显著差异(P＜0.05).在保存前期,各组血小板sCD40L浓度逐渐升高,第5天达峰值,随后逐渐降低,第14天达最低值,与第3天、第5天相比有显著差异(P＜0.05);在相同保存时间,各组间sCD40L表达率无明显差异(P＞0.05).结论 在单采血小板中添加Sal并不影响血小板正常功能,但可以明显抑制血小板活化,可能有助于减轻血小板储存损伤.

血小板在止血、炎症、肿瘤转移、伤口愈合及防御反应中起到了重要作用,然而其常规保存需要特定温度且保存时间一般为5～7d,同时,血小板储存损伤和细菌滋生会影响其保存时间及保存质量.此外,常规输注后会产生非溶血性发热、过敏、循环超负荷及输血相关急性肺损伤等严重不良反应.这些都限制了血小板制品在临床中的应用.但是,与血小板保存相关的添加剂可以降低它们发生的可能性.因此,我们就近年来血小板保存相关添加剂的研究现状,以及改善血小板储存损伤、提高血小板保存特性等方面进行了综述.

目的 探讨正常机采血小板储存过程中伴随储存时间延长长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因9(SNHG9)的表达变化及意义.方法 收集符合临床血小板输注治疗标准的正常机采血小板32份,保存于专用(22±2)℃恒温振荡保存箱内,在不同储存时间(1、3、5、7、9 d)通过外观、血小板计数、红细胞残留量计数、白细胞残余量计数、pH值及细菌培养检测血小板质量;用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG9在同一机采血小板样本不同储存时间的表达量,分析其对血小板储存损伤(PSL)的影响及意义.结果 在第1、3、5、7、9天SNHG9表达量伴随储存时间延长逐渐增高,数据总体存在统计学差异(H=93.073,P＜0.001),差异有统计学意义(P＜0.05).进一步对不同天数之间SNHG9表达量进行两两多重比较,第1天与第3天校正后的P值是0.144,差异无统计学意义(P＞0.05):第1天和第5天,第1天和第7天,第1天和第9天校正后的P值均小于0.001,差异有统计学意义(P＜0.05);第3天和第5天(P=0.031),第3天和第7天,第3天和第9天(P＜0.001)校正后差异有统计学意义.结论 用于临床治疗的正常机采血小板伴随储存时间延长,第5、7、9天样本中SNHG9表达量比第1天明显增高,SNHG9对血小板储存条件敏感,有可能成为PSL潜在的生物学标记物.

目的 探讨机采血小板储存过程中差异性lncRNA表达谱变化及其差异表达的lncRNA在血小板储存损伤中潜在的生物学功能.方法 收集13(人)份O型健康男性机采血小板各50 mL,于(22±2)℃下震荡储存,应用lncRNA芯片技术检测储存2、5、8d机采血小板中lncRNA和mRNA表达谱变化;运用GO分析及KEGG分析预测差异表达的lncRNA功能分布,通过顺式调控分析预测lncRNA调控邻近蛋白编码基因表达的分子机制;采用实时PCR(RT-PCR)技术,验证8条lncRNA(MARCH2-2∶1、SLC2A2-1∶1、WBSCR16-3∶6、WEE 1-2∶1、ENTPD6-2∶1、NKD2-1∶1、FOXS1-2∶1、MAPK13-3∶1)和4条mRNA(BCL2L1、CAPN2、MAPK14、VAMP8)的表达.结果 芯片检测:血小板储存5与2d相比,有162种lncRNA的表达量发生明显变化,表达升高的4种、降低的158种;8与2d相比,有691种lncRNA表达量发生明显变化,表达升高的20种、降低的671种;8与5d相比,246种lncRNA表达量发生明显变化,升高的2种,降低的244种.GO和KEGG分析:差异表达的lncRNA可能参与的生理过程有血小板激活、血小板聚集、内吞、凋亡、肌动蛋白纤维聚集、肌动蛋白骨架的调节;顺式调控分析:lncRNA具有调控血小板相关mRNA表达的功能,USP39-1调控VAMP8的表达、TMEM86B-2调控GP6的表达、FOXS1-2调控BCL2L1的表达等.RT-PCR验证:与芯片检测结果一致,其中lncRNA MARCH2-2∶1、WEE 1-2∶1和NKD2-1∶1表达量升高,WBSCR16-3∶6、SLC2A2-1∶1、ENTPD6-2∶1、FOXS 1-2∶1和MAPK13-3∶1表达量下降,BCL2L1,CAPN2,MAPK14和VAMP8的表达量也下降.结论 血小板中含有大量的lncRNA,其表达量随着血小板储存时间延长而呈不同的变化趋势,总体来讲下调的lncRNA数量较多,且下调的幅度较大.部分变化的lncRNA可能与血小板生理功能密切相关,并且在血小板储存损伤中发挥作用.

血小板储存损伤是从献血者抽出血液到给输血者输注血小板过程中血小板形态结构和功能发生损伤的总和.它会造成血小板形态变化功能下降以及治疗功效的下降.伴随着临床对血小板的需求日益增多,研究血小板储存损伤的重要意义逐渐凸显.因此,本文将对血小板储存损伤作用机制、评估与监测以及新技术开发等方面研究进行综述,试图解释血小板储存损伤的作用机制.

目的 优化冻干血小板保护液,减少冻干过程对血小板的损害,有效保护其功能.方法 采用3因素3水平的正交设计法,对血小板膜保护剂、血小板激活抑制剂、蛋白质类保护剂的3类成分组成的保护液进行优选.检测血小板最大聚集率、血小板活化标志PAC-1、CD62P的阳性表达率和血小板回收率,通过比较其差异,筛选出本实验的最优冻干血小板保护液.以优化保护液对血小板处理后进行冻干,并以此为实验组,与新鲜血小板和原保护液处理后冻干血小板进行比较验证,验证指标与优选指标相同,比较3者4项指标之间的差异.结果 正交设计试验结果显示:血小板最大聚集率组间最高(74.33±24.01)％,血小板活化标志PAC-1和CD62P低于9组平均水平,血小板回收率高于9组平均水平.以主要体现血小板功能的血小板最大聚集率为优先指标,结合其余3项检测指标进行综合分析,在原保护液的基础上,筛选出添加了2％ DMSO、第2信使调节剂、2 mmol/L维生素B6,75％的PPP保护液组为最优组合.验证实验结果显示,优化保护液组血小板最大聚集率(76.12±6.02)％,与原保护液组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),与新鲜血小板组相比,差异没有统计学意义(P＞0.05).最优保护液组血小板激活标志PAC-1和CD62P阳性表达率分别为(3.23±0.49)％和(36.83±8.21)％,2者与原保护液组、新鲜血小板组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);最优保护液组冻干血小板复水化后血小板回收率为(85.90±2.24)％,与原保护液组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本实验优化的血小板保护液优于原保护液,明显提高了冻干血小板复水化后最大聚集率,能更好地保护血小板的功能,但对血小板冻干过程的保存损害问题没有得到更好的改善,有待下一步深入研究.

随着输血技术逐渐成熟,输血有关的血液紧缺和风险问题也逐渐凸显.临床输血包括自体输血和异体输血.一般来说,我们提到的临床输血指的是异体输血.异体输血不可避免的存在输血性疾病的传播风险:一方面目前已知通过血液传播的疾病＞20种但由于我国仅检测发病率在全国范围内普遍较高、危害较大的4种传染病的病原体标志物;另一方面窗口期感染问题已经成为世界性难题.而且异体输血类似于异基因器官移植可能带来的微血栓、凝血、溶血、输血后免疫抑制、非溶血性发热反应、同种异体血液免疫致敏、血小板输注无效、习惯性流产、输血后急性肺损伤、输血后移植物抗宿主病等尚无法避免的不良反应.