目的:观察慢性心力衰竭患者白细胞介素-35（IL-35）水平和CD14 +单核细胞功能变化。 方法:连续入组2018年7月至2019年6月在郑州大学第一附属医院心血管内科住院治疗的慢性心力衰竭患者（74例）和健康对照者（29名），清晨空腹采集抗凝外周血20 ml并分离血浆，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血IL-35水平；纯化外周血CD14 +单核细胞，采用实时定量聚合酶链反应法检测CD14 +单核细胞中IL-35受体亚基IL-12Rβ2和gp130 mRNA相对表达量。以IL-35刺激CD14 +单核细胞，与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）直接或间接接触培养，采用ELISA法检测上清中细胞因子和颗粒酶B水平，通过检测乳酸脱氢酶水平计算HUVEC死亡比例。比较慢性心力衰竭组和健康对照组间上述指标的差异。 结果:慢性心力衰竭组的年龄为（59.4±12.1）岁，男性占58.1%（43例）；健康对照组的年龄为（53.9±9.8）岁，男性占65.5%（19名）；慢性心力衰竭组血浆IL-35水平高于健康对照组［（22.89±7.58）mg/L比（16.42±5.47）mg/L， P<0.001］，gp130 mRNA相对表达量亦然（1.07±0.19比0.98±0.15， P=0.022）。慢性心力衰竭组CD14 +单核细胞诱导HUEVC死亡比例在直接和间接接触培养中均低于健康对照组（均 P<0.001），分泌颗粒酶B水平低于健康对照组（ P<0.001）。抑制颗粒酶B后CD14 +单核细胞诱导HUVEC死亡比例降低（ P=0.011）。IL-35刺激CD14 +单核细胞后，其诱导HUVEC死亡比例和颗粒酶B分泌水平降低（均 P<0.001）。 结论:慢性心力衰竭患者血IL-35表达升高，IL-35可通过抑制颗粒酶B分泌诱导CD14 +单核细胞功能不全，进而促进心力衰竭疾病进程。

目的:探讨血友病B合并凝血因子FⅨ抑制物患儿的临床特征及治疗策略。方法:选择2018年2月8日，苏州大学附属第一医院收治的1例血友病B合并FⅨ抑制物患儿为研究对象。对患儿病史进行收集，并且进行凝血功能常规检查，以及血浆凝血因子、凝血因子抑制物检测等实验室检查，结合基因测序结果进行诊断。患儿接受泼尼松(15 mg/d)联合环孢素(50 mg/次×2次/d)，以及泼尼松(15 mg/d)联合雷帕霉素(1.5 mg/d)方案治疗。并且根据患儿的相关实验室检查结果判断疗效。随访截至2019年9月30日。回顾性分析本例患儿临床特征、诊断、治疗经过及疗效。本研究符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果:①本例患儿为男性，8岁。因"反复出现关节疼痛、肿胀7年"于2018年2月8日至苏州大学附属第一医院就诊。2010年5月，患儿于当地医院诊断为重型血友病B，予凝血酶原复合物，以及重组人FⅨ治疗。2012年3、4月测定FⅨ抑制物滴度分别为3.2、6.2 BU/mL。自2014年6月起，患儿关节频繁出血，疼痛程度显著加重。②患儿入院后凝血功能常规检查结果显示，活化部分凝血活酶时间(APTT)为165.4 s，凝血酶原时间(PT)为13.4 s，凝血酶时间(TT)为16.6 s，纤维蛋白原(FIB)为3.48 g/L，FⅨ∶C为0.5%，FⅧ∶C为20%。APTT纠正试验结果显示，立即及2 h后APTT分别为152.7与129.6 s。抗磷脂抗体检测结果呈阴性，狼疮抗凝物检查结果呈阴性。FⅨ抑制物滴度>10 BU/mL。FⅨ基因测序结果显示，患儿FⅨ基因2号外显子c.7993C>T(p.Arg29X)杂合突变。③该患儿被诊断为重型血友病B合并FⅨ抑制物。选择泼尼松联合环孢素方案对本例患儿进行治疗，治疗3个月后，患儿未获得改善。随后治疗方案改为泼尼松联合雷帕霉素。治疗6个月后，复查患儿FⅨ抑制物滴度下降幅度不明显，但是患儿出血频率较治疗前减少。治疗9个月后，复查患儿FⅨ抑制物滴度降至初诊时的50%，患儿未再发生出血症状。患儿疗效达部分缓解(PR)。截至随访结束，患儿未发生关节肿胀、疼痛，基本恢复正常生活及学习。结论:重症血友病B患儿若多次输注FⅨ后出血频率增加，对常规剂量治疗效果不佳等情况时，需警惕FⅨ抑制物产生可能，应及时测定FⅨ抑制物滴度。血友病B合并FⅨ抑制物少见，疗效差且易出现不良反应，正确诊断与适当治疗对改善患者出血症状具有重要意义。但是，该结论仅限于对单一病例的临床分析，尚需要扩大样本量，进一步研究、验证。

目的:观察IL-36家族成员在冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease，CAHD)患者中的表达谱，探讨外源性IL-36对CAHD患者CD8 +T细胞功能的调控作用。 方法:研究对象为20例对照者和82例CAHD患者。CAHD患者包括稳定性心绞痛(stable angina pectoris, SAP)患者31例、不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris, UAP)患者27例、急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)患者24例。采集抗凝外周血，分离血浆和外周血单个核细胞，ELISA法检测血浆IL-36α、IL-36β、IL-36γ和IL-36受体拮抗剂(IL-36 receptor antagonist, IL-36RA)水平，分选CD8 +T细胞，实时定量PCR法检测CD8 +T细胞中IL-36受体亚基mRNA相对表达量，流式细胞术检测CD8 +T细胞中程序性死亡受体-1(programmed death-1，PD-1)、细胞毒性淋巴细胞相关蛋白-4(cytotoxic T lymphocytes associated protein-4, CTLA-4)、淋巴细胞活化基因-3(lymphocyte-activation gene-3，LAG-3)表达水平，ELISA法检测CD8 +T细胞培养上清中穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素、IFN-γ、TNF-α水平。使用重组人IL-36RA刺激对照者和AMI患者分选CD8 +T细胞，比较刺激前后免疫检查点分子表达、毒性分子和细胞因子分泌差异。组间比较采用单因素方差分析或配对 t检验。 结果:血浆IL-36α、IL-36β和IL-36γ水平在对照组、SAP组、UAP组和AMI组之间的差异无统计学意义( P>0.05)；AMI组血浆IL-36RA水平显著低于对照组、SAP组和UAP组[(1 159.57±297.83) pg/ml与(1 773.47±754.29) pg/ml、(1 600.12±740.48) pg/ml和(1 578.72±720.42) pg/ml， P<0.05]。CD8 +T细胞中IL-1受体6(IL-1 receptor 6, IL-1R6)和IL-1受体辅助蛋白(IL-1 receptor accessory protein, IL-1RAcP)mRNA相对表达量、PD-1和CTLA-4的表达、IFN-γ和TNF-α分泌水平在4组之间的差异无统计学意义( P>0.05)。AMI组CD8 +T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素的水平高于对照组、SAP组和UAP组( P<0.05)。重组人IL-36RA刺激不影响对照者CD8 +T细胞免疫检查点分子表达以及毒性分子、细胞因子分泌( P>0.05)。重组人IL-36RA刺激后，AMI患者PD-1 +CD8 +T细胞比例升高( P＝0.033)，但CTLA-4 +CD8 +T细胞比例差异无统计学意义( P＝0.288)。重组人IL-36RA刺激后，AMI患者CD8 +T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素的水平显著降低( P<0.05)，但IFN-γ和TNF-α分泌水平差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:AMI患者中IL-36RA水平降低可能促进CD8 +T细胞分泌毒性分子，增强CD8 +T细胞活性，参与AMI发病。

目的:观察原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者外周血和肝脏浸润的自然杀伤样B(natural killer-like B, NKB)细胞变化，分析IL-18在体外对NKB细胞水平的影响和机制。方法:入组43例HCC患者和21例健康对照者(normal control, NC)，采集抗凝外周血，分离血浆和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)，16例接受手术治疗的HCC患者，取肿瘤组织和癌旁组织，分离肝脏内淋巴细胞(intrahepatic lymphocyte, IHL)。酶联免疫吸附试验检测血浆IL-12、IL-18和IL-18结合蛋白(IL-18 binding protein, IL-18BP)水平，流式细胞术检测PBMC和IHL中CD3 -NKp46 +CD19 +NKB细胞比例和NKB细胞中IL-18 +细胞比例。使用重组人IL-18(1 ng/ml和10 ng/ml)对PBMC和IHL进行刺激培养，检测NKB细胞比例和NKB细胞中IL-18 +细胞比例变化，并检测培养上清中IL-18BP水平变化和NKB细胞中磷酸化核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的变化。组间比较采用 t检验、单因素方差分析或LSD- t检验。 结果:血浆IL-12水平在HCC组和NC组之间的差异无统计学意义( P＝0.245)，HCC组血浆IL-18水平低于NC组[(224.30±58.89) pg/ml vs (327.00±52.27) pg/ml， P<0.000 1]，HCC组血浆IL-18BP水平高于NC组[(4.42±0.97) ng/ml vs (0.92±0.18) ng/ml， P<0.000 1]。HCC组外周血NKB细胞比例低于NC组[(2.68±1.23)% vs (8.88±2.95)%， P<0.000 1]，NKB细胞中IL-18 +细胞比例亦低于NC组[(54.42±12.60)% vs (69.74±12.65)%， P<0.000 1]。肿瘤组织IHL中NKB细胞比例低于癌旁组织[(2.89±0.86)% vs (4.66±1.17)%， P<0.000 1]，NKB细胞中IL-18 +细胞比例亦低于癌旁组织[(51.50±13.18)% vs (62.13±9.24)%， P＝0.013]。重组人IL-18刺激后培养上清中IL-18BP分泌水平降低( P<0.05)。1 ng/ml IL-18刺激对PBMC和IHL中NKB细胞比例、NKB细胞中IL-18 +细胞比例、NKB细胞中磷酸化NF-κB水平均无影响( P>0.05)，而10 ng/ml IL-18刺激不但提升NKB细胞比例和NKB细胞中IL-18 +细胞比例，还可诱导NKB细胞中磷酸化NF-κB水平升高( P<0.01)。 结论:高浓度IL-18在体外可能通过抑制HCC患者IL-18BP表达促进NF-κB磷酸化，可能发挥正反馈作用，诱导NKB细胞活化和IL-18分泌。

目的:探讨T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤(T-ALL/LBL)患者接受培门冬酶(PEG-Asp)治疗期间并发颅内静脉窦血栓形成(CVST)的临床特征、诊断及治疗方法，并进行相关文献复习。方法:选择2020年6月2日，于兰州大学第一医院收治的1例PEG-Asp治疗期间发生CVST的23岁男性T-ALL/LBL患者为研究对象。对患者进行病史采集、血常规、骨髓细胞形态学与免疫分型，全身增强CT等检查。根据相关检查结果对患者进行诊断及治疗方案断定。本研究对患者随访截至2021年7月24日。采用回顾性分析方法，对患者的临床表现与诊治过程进行分析。此外，以"门冬酰胺酶""淋巴造血系统恶性肿瘤""颅内静脉窦血栓形成""asparaginase""malignant neoplasm of the lymphohematopoietic system""intracranial venous sinus thrombosis"为中、英文关键词，在中国知网数据库、万方数据服务知识平台、PubMed数据库中检索接受门冬酰胺酶(Asp)治疗后发生CVST的相关文献。文献检索时间为数据库建库至2021年10月20日。总结淋巴造血系统恶性肿瘤患者接受Asp治疗期间发生CVST的临床表现、高危因素及防治等资料。本研究符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果:①病史采集：患者于2020年6月2日因"咳嗽、吞咽困难2个月，加重伴胸痛3 d"入院。根据骨髓细胞形态学与免疫分型，血常规、全身增强CT检查等结果，本例患者被诊断为T-ALL/LBL，于第1、5疗程分别接受PVAP(泼尼松+长春新碱+表柔比星+PEG-Asp)方案诱导缓解治疗和PVA+L(地塞米松+长春新碱+柔红霉素+PEG-Asp)方案巩固治疗。患者化疗后复查骨髓细胞形态学提示骨髓完全缓解(CR)，胸部压迫症状缓解、出院。②出院后第3天，患者因"持续头痛3 d伴抽搐3次"再次入院。其血常规检查结果示，白细胞计数(WBC)、血红蛋白(Hb)值、血小板计数、中性粒细胞比例分别为3.03×10 9/L、102 g/L、44×10 9/L和85%；凝血功能检查结果示，纤维蛋白原(Fib)值、D二聚体(D-D)值、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶(AT)-Ⅲ活动度、血浆蛋白S活性、血浆纤溶酶原活性、蛋白C活性分别为1.4 g/L、0.51 μg/mL、12.9 s、1.17、16.1 s、25%、49.8%、27%和31%；血栓弹力图结果示，凝血反应时间R、凝血形成时间K、凝固角α、血栓最大振幅MA、凝血指数CI分别为3.9 min、11.7 min、34.0°、20.6 mm和-9.636。头颅增强MRI、磁共振血管造影(MRA)、磁共振静脉造影(MRV)检查结果示，双侧额部脑外弧形异常强化，考虑静脉窦血栓合并脑梗死。③根据神经系统症状、影像学、实验室检查，患者被诊断为CVST，遂采取甘露醇降压、左乙拉西坦抗癫痫治疗，阿糖胞苷+地塞米松+甲氨蝶呤方案鞘内注射预防白血病细胞侵犯中枢神经系统(CNS)，治疗期间输注新鲜冰冻血浆(FFP)1 150 mL。治疗后患者头痛缓解，无抽搐后出院。随访7个月，患者病情稳定。④文献复习：符合本研究要求的文献为6篇，共纳入8例接受Asp治疗后均出现CVST的患者。对其进一步治疗中，单独应用左旋门冬酰胺酶(L-Asp)治疗为1例，PEG-Asp为6例，2种制剂均应用为1例；4例发病时AT-Ⅲ活性偏低，8例患者发病后均接受凝血因子抗凝治疗，5例患者一般状况良好，2例血栓仍存在，继续接受抗凝治疗，1例因并发症停用抗凝治疗。 结论:T-ALL/LBL患者接受PEG-Asp治疗存在并发CVST风险，应充分评估高危因素，加强院内、外凝血功能指标监测，积极预防CVST，并尽早予治疗。

目的:研究血管性血友病因子抗原（vWF：Ag）含量和D-二聚体预测接受抗凝治疗的非瓣膜性心房颤动（NVAF）患者血栓风险的性能。方法:收集2017年3月至2019年3月间就诊的NVAF患者256例，其中男152例，女104例，年龄（57.9±20.4）岁；根据随访期内终点事件情况，将患者分为无事件组227例，血栓事件组29例。选择同期健康体检者作为对照组共50名，其中男30名，女20名，年龄（45.0±5.3）岁。用血液凝固仪测定血浆vWF：Ag水平，采用荧光免疫分析仪测定血浆D-二聚体水平。任意两组间数据比对采用Mann-Whitney U检验，多组间数据比对采用Kruskal-Wallis H检验，用Logistic回归对分类资料做多元相关性分析获得优势比（ OR）；用受试者工作特征（ROC）曲线评价vWF：Ag和D-二聚体预测血栓事件的性能；用Kaplan-Meier曲线进行生存分析；用Cox比例风险回归模型获得风险比（ HR）。 结果:对照组的vWF：Ag和D-二聚体为103%（86%~131%）和249（90~522）μg/L，患者组为234%（102%~623%）和744（100~3 352）μg/L；在患者组中，无事件组为225%（102%~623%）和650（100~3 281）μg/L，血栓事件组为333%（210%~494%）和1 325（487~3352）μg/L；患者组的vWF：Ag和D-二聚体高于与健康对照组（ P均<0.001），无事件组高于健康对照组（ P均<0.001），血栓事件组高于无事件组（ P均<0.001）。NVAF患者血浆vWF：Ag和D-二聚体水平均高于与对照组（ P均<0.001）。无事件组患者的血浆vWF：Ag和D-二聚体水平高于健康对照组，差异有统计学意义（ P均<0.001）；血栓事件组患者的血浆vWF：Ag和D-二聚体水平均高于无事件组，差异有统计学意义（ P均<0.001）。ROC显示，vWF：Ag预测NVAF患者3个月内血栓事件的临界值为229%时，曲线下面积为0.839（95% CI：0.784~0.894）；D-二聚体的临界值为588 μg/L时，曲线下面积为0.803（95% CI：0.745~0.861）；vWF：Ag联合D-二聚体，曲线下面积为0.868（95% CI：0.826~0.909）。Logistic回归分析显示，NVAF患者血浆vWF：Ag水平与年龄（ OR=10.240， 95%CI 2.773~37.820）、慢性心力衰竭（ OR=34.779， 95%CI 8.010~151.019）、高血压（ OR=0.068， 95%CI 0.023~0.198）和2型糖尿病（ OR=6.618， 95%CI 2.469~17.734）有显著相关性（ P<0.001），与血管疾病（ OR=4.801， 95%CI 1.204~19.145）有显著相关性（ P=0.026）；血浆D-二聚体水平与慢性心力衰竭（ OR=0.146， 95%CI 0.036~0.588）、服药依从性（ OR=0.114， 95%CI 0.016~0.832）有显著相关性（ P值分别为0.007和0.032）。生存分析显示，血浆vWF：Ag、D-二聚体或vWF：Ag联合D-二聚体评估时，血浆水平高于临界值的患者在3个月内的血栓事件累积概率显著增高（Log-rank χ2分别为11.394、17.895和32.825， P均<0.001）。Cox比例回归模型显示，vWF：Ag和D-二聚体均不能独立预测抗凝治疗期间的血栓事件（ HR分别为0.866和0.834， P值分别为0.253和0.152），但两项指标联合应用可显著改善预测性能（ HR=0.780， P=0.048）。 结论:NVAF患者血浆vWF：Ag和D-二聚体水平变化与多种临床病理因素相关，并与患者3个月内的血栓风险密切相关，联合应用可为临床预测病情提供有效依据。

目的:探讨批量劳力性热射病（EHS）患者集中救治的流程与环节，以期为此类患者的批量救治提供经验与指导。方法:回顾性分析2019年5月18日解放军总医院第八医学中心集中收治的8例EHS患者的救治过程，包括现场急救、转运后送及院内协作救治等情况。结果:根据8例患者高强度运动史和中枢神经系统功能障碍表现，现场迅速诊断为EHS，立即补液物理降温，并紧急启动接诊成批伤应急预案后快速后送转运至解放军总医院第八医学中心。采取边持续降温边转运的原则，同时医院开放绿色通道，重症监护病房（ICU）对极危重伤员采用伤员∶护士∶医师1∶3∶1抢救模式，并保证配有呼吸机、血滤机、冰毯机；各科室间以ICU为中心紧密合作，密切监测患者生命体征，根据血常规、生化指标、出凝血时间、血气分析等动态变化，给予滴定式、精准治疗。8例患者中4例行连续性肾脏替代治疗（CRRT），2例冰毯机降温，1例呼吸衰竭患者行气管插管后呼吸机治疗，1例弥散性血管内凝血（DIC）患者在补充血浆、纤维蛋白原的基础上给予低分子肝素钠抗凝治疗。8例患者经补液降温、CRRT、机械通气、防治DIC等集束化治疗后，5～11 d各器官功能明显改善转出ICU，11～20 d均康复出院。结论:规范的救治流程（现场快速识别、迅速降温、安全转运后送、院内协作救治）结合降温补液、CRRT、边补充凝血因子边抗凝等集束化治疗方案，可为批量救治EHS患者提供有力保障，取得良好的救治效果。

患者女，26岁。因突发右眼视物不清1 d，于2023年4月13日到遵义医科大学第二附属医院眼科就诊。患者半个月前因右侧腘静脉血栓栓塞行下腔静脉滤器置入手术及尿激酶溶栓、那屈肝素钠抗凝治疗。否认其他全身病史。眼科检查：右眼、左眼最佳矫正视力分别为数指/10 cm、1.0。右眼、左眼眼压分别为14、11 mm Hg （1 mm Hg=0.133 kPa）。右眼直接对光反射消失。眼底检查，右眼视盘水肿，盘缘小片状出血，视网膜静脉纡曲扩张，"串珠样"改变，静脉旁多发散在视网膜前出血，对应静脉处可见白色栓子样梗塞，动脉变细，反光增强（图1A）。红外眼底扫描激光检查，右眼仅见上方及颞侧涡静脉轮廓（图1B）。光相干断层扫描（OCT）检查，右眼黄斑区鼻侧视网膜水肿增厚，视网膜层间结构模糊，脉络膜厚度不均（图1C）。左眼眼前节及眼底检查均未见明显异常。右下肢静脉CT血管成像检查，右侧股静脉下段-腘静脉栓塞，周围软组织肿胀（图2A）。右下肢静脉3D-CT血管造影检查，右侧胫前、胫后及腓静脉显影变淡，右侧腘动脉局限性轻度狭窄（图2B）。实验室检查，活化部分凝血活酶时间109.4 s（正常值范围31 ～43 s）。给予患者静脉注射800 ml冰冻血浆补充凝血因子、维生素K40 mg/d促进凝血因子合成。治疗2 d后患者自觉右眼视力降至无光感。眼底检查，右眼视网膜大量散在Roth斑样出血，视网膜静脉系统"串珠样"改变伴多发散在节段性栓子栓塞，黄斑区内界膜隆起伴内界膜下出血（图3A）。OCT检查，右眼后极部视网膜重度水肿，层间结构紊乱、内界膜脱离（图3B）。荧光素眼底血管造影（FFA）检查，右眼全周视网膜大范围遮蔽荧光，隐约可见动脉前峰充盈，遮蔽区域见脉络膜背景荧光弥漫增强；造影晚期仍未见视网膜静脉荧光充盈（图3C）。实验室检查：抗核抗体（＋）、抗双链DNA抗体（＋）、抗史密斯抗体（抗SM抗体）（＋），抗磷脂抗体、狼疮抗凝物（＋）；其余血常规、生物化学检测结果无明显异常。血栓弹力检查，凝血因子及纤维蛋白原活性减弱。诊断：（1）右眼视网膜中央动脉阻塞（CRAO）并视网膜中央静脉阻塞；（2）系统性红斑狼疮（SLE）合并抗磷脂综合征（APS）；（3）狼疮抗凝物-低凝血酶原综合征。给予患者眼球按摩、高通量氧气间断吸氧、静脉注射甲泼尼龙琥珀酸钠免疫抑制、维生素促进凝血因子合成、达肝素钠抗凝、球后注射硫酸阿托品扩血管、噻吗洛尔滴眼液点眼降眼压、血栓通活血化瘀治疗。但患者视力无明显改善。

血浆置换治疗通过清除致病因子和调节免疫系统功能等作用治疗多器官系统重症免疫病和重症肝病。局部枸橼酸抗凝不影响体内凝血功能，不增加出血风险，是血浆置换治疗的可选抗凝方式之一。本文对国内外的单重血浆置换治疗实施局部枸橼酸抗凝的研究进行综述，为临床医师开展该类治疗提供参考。

儿童急性肝衰竭(PALF)是指由多种因素作用下引发的严重肝损害，导致肝脏合成、排泄、解毒及生物转化等功能出现严重障碍。既往认为PALF患儿凝血功能障碍，容易导致出血，而目前注意到由于抗凝因子和促凝因子同时减少，机体处于一种"再平衡止血"状态，相比出血风险也容易产生血栓。恰当的实验室检查可以更好地评估PALF患儿机体的凝血状态，指导适当的血液制品输注以改善凝血功能，减少输血相关的液体过负荷等不良预后的发生。