目的:对比猪膀胱脱细胞基质(UBM)和猪脱细胞真皮基质(ADM)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面促愈合效果的差异。方法:将36只10周龄雄性2型糖尿病BKS db/db小鼠按照随机数字表法分为UBM组和ADM组，每组18只，术前非空腹血糖物质的量浓度大于16.6 mmol/L，于每只小鼠背部制作直径6 mm圆形全层皮肤缺损创面，相应植入猪UBM和猪ADM支架。术后即刻及7、14、28 d，行创面大体观察。术后7、14和28 d，每组各取小鼠6只计算创面上皮化率，计算后处死相应小鼠，取创面组织制作切片。收集2组小鼠术后7与14 d各6张切片行苏木精-伊红(HE)染色、术后7与28 d各6张切片行Masson染色，观察组织病理学变化及支架降解情况。收集2组小鼠术后7、14 d各24张切片，采用免疫组织化学法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CD31阳性表达量，以分别反映肌成纤维细胞(Fb)、新生血管生长情况；观察巨噬细胞的分布和活化。取2组小鼠术后7、14 d创面组织，采用实时荧光定量反转录PCR法检测成纤维细胞生长因子2(FGF-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子β 1(TGF-β 1)mRNA含量。上述指标每组各时间点样本数为6。对数据行析因设计方差分析、 t检验及Bonferroni校正。 结果:(1)大体观察显示，UBM组小鼠创面术后大部分时间点与UBM支架融合佳，ADM组小鼠创面术后大部分时间点与ADM支架融合差；术后28 d，ADM组小鼠创面支架表面部分区域仍未形成表皮，UBM组小鼠创面完全上皮化。术后7、14和28 d，UBM组小鼠创面上皮化率分别为(22.4±6.4)%、(68.6±12.4)%、100.0%，均明显高于ADM组[(4.5±2.2)%、(23.6±4.6)%、(64.2±13.2)%， t＝7.427、9.665、7.655， P<0.01]。(2)HE染色和Masson染色显示，术后7 d，UBM组小鼠创面支架出现大量细胞；术后14 d，细胞占据UBM支架的全部区域；术后28 d，创面形成与正常皮肤结构类似的真皮组织，并且UBM支架原有的纤维形态消失。术后7 d，ADM组小鼠创面支架内部仅出现少量细胞；术后14 d，细胞散布于ADM支架之中；术后28 d，ADM支架原有粗大的胶原纤维形态仍清晰可见。(3)术后7 d，UBM组小鼠创面支架底层出现大量聚集的肌Fb，出现新生血管；术后14 d，UBM支架上层出现均匀分布的肌Fb、新生血管，并且大部分血管实现灌注。术后7、14 d，ADM组小鼠创面支架中仅散在分布肌Fb，无或少量未明显灌注的新生管腔结构。术后7、14 d，UBM组小鼠创面支架中α-SMA阳性表达量明显高于ADM组( t＝25.340、6.651, P<0.01)，CD31阳性表达量也明显高于ADM组( t＝34.225、10.581, P<0.01)。(4)术后7 d，UBM组小鼠创面支架底层出现大量巨噬细胞；术后14 d，巨噬细胞迁入UBM支架内部，发生M2型极化、无M1型极化。术后7 d，ADM组小鼠创面支架底部出现少量巨噬细胞；术后14 d，ADM支架内部巨噬细胞稀少，未发生M2型或M1型极化。(5)术后7、14 d，UBM组小鼠创面组织中FGF-2、VEGF、PDGF和TGF-β 1的mRNA表达量均明显高于ADM组( t＝7.007、14.770、10.670、8.939，7.174、7.770、4.374、4.501, P<0.01)。 结论:猪UBM支架通过诱导肌Fb和巨噬细胞迁入、促血管新生与促愈合生长因子的表达，促进糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面的修复和真皮重建，效果优于猪ADM。

目的:观察表皮细胞生长因子样结构域3(EGFL3)基因敲减对SNU-449人肝癌细胞生长增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响，探索EGFL3发挥作用的分子机制。方法:利用慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建EGFL3基因敲减的SNU-449细胞系，并利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测EGFL3基因干扰效率，选出敲减效率最高的一组作为基因敲减组(KD组)，同时设阴性对照组(NC组)，随后进行噻唑蓝(MTT)实验、细胞克隆形成实验、细胞凋亡实验、Transwell实验以及Transwell小室侵袭实验，以对比两组SNU-449细胞系的生长、增殖、凋亡、侵袭和转移的能力，最后通过RT-qPCR技术检测两组SNU-449细胞系中转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD基因的相对表达水平。组间样本比较采用独立样本 t检验。 结果:相较于NC组，KD组SNU-449细胞系中EGFL3基因的敲减效率为75.7%( t＝13.730， P<0.01)，KD组SUN-449细胞的生长速度和细胞克隆数量明显低于NC组[5.29±0.23比6.30±0.26， t＝6.606， P<0.01；(1±1)个比(19±2)个， t＝14.690， P<0.01]，KD组细胞凋亡率明显高于NC组[(11.06±0.29)%比(3.20±0.13)%， t＝－43.280， P<0.01]，KD组转移及侵袭的细胞数均明显低于NC组[(104±6)个比(178±3)个， t＝20.090， P<0.01；(209.00±0.00)个比(306.00±3.51)个， t＝48.170， P<0.01]。RT-qPCR检测结果显示，KD组SNU-449细胞系中的TGF-β1、SMAD2、SMAD3和SMAD4基因的相对表达量高于NC组( t＝3.759、5.464、5.979、8.956， P<0.05)，SMAD7基因的相对表达量则低于NC组( t＝0.368， P>0.05)。 结论:EGFL3基因可促进SNU-449肝癌细胞系的生长、增殖、侵袭、转移并抑制凋亡，其机制可能与抑制TGF-β1/SMAD信号通路有关。

目的:基于网络药理学探讨川芎嗪治疗急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠的核心靶点及其潜在的分子机制。方法:通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)及人类疾病信息相关数据库(CTD、DisGeNET、GeneCards、OMIM)筛选出川芎嗪作用靶点与ANP相关靶点，利用Uniprot数据库进行交集，导入STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络，再导入Cytoscape软件进一步分析，利用cytoHubba插件得到关键靶点。对关键靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析，最后通过PyMol和AutoDockTools软件进行分子对接。将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、ANP组和川芎嗪治疗组(川芎嗪组)。采用胰胆管逆行注射4%牛磺胆酸钠建立ANP大鼠模型，川芎嗪组在制模后经腹腔注射10 ml/kg川芎嗪注射液。造模后12 h，取胰腺组织，常规行病理学检查，免疫组织化学染色观察关键靶点在胰腺组织中的蛋白表达；眼眶取血，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:药物平台筛选出137个川芎嗪作用靶点，疾病数据库筛选出513个ANP相关靶点，通过交集得到的25个靶点，最终获得白蛋白(ALB)、表皮生长因子受体(EGFR)、胱天蛋白酶3(CASP3)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)和B细胞淋巴瘤样蛋白1(BCL2L1)共5个关键靶点。GO功能富集分析生物学过程主要涉及生殖结构、系统发育，对抗生素、化学应激和活性氧的反应等，细胞组成主要为囊泡腔、膜筏、膜微区和分泌颗粒腔等靶蛋白，分子功能主要包括SH2域、磷酸酪氨酸残基、蛋白酶结合及蛋白酪氨酸激酶和核受体活性等；KEGG通路富集分析主要为Ras信号通路、PI3K-Akt信号通路、铂类药物耐药、磷脂酶D信号通路和EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药等。5个关键靶点分子对接的平均结合能为-4.20 kcal/mol。胰腺组织病理学检查结果示ANP组大鼠腺体结构较紊乱，小叶间隙明显增大，腺泡、血管周围以及腺体间隙均可见中性粒细胞浸润；川芎嗪组大鼠胰腺小叶间隙略微增大，中性粒细胞轻度浸润。ANP组大鼠胰腺组织EGFR、CASP3和MAPK1蛋白表达量较对照组显著升高，川芎嗪组表达量较ANP组显著降低( P值均<0.01)；ANP组BCL2L1蛋白表达量较对照组显著升高，川芎嗪组又较ANP组显著升高( P值均<0.05)。ANP组大鼠血清IL-6和TNF-α水平较对照组显著增高，川芎嗪组则均较ANP组显著降低( P值均<0.01)。 结论:川芎嗪可以通过激活多种信号通路，减轻ANP后的炎症反应和氧化应激损伤，增强抗凋亡基因的表达，阻断细胞凋亡半胱天冬酶解级联反应，对ANP大鼠胰腺组织起保护性作用。

目的:从活性氧簇(ROS)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路探讨乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)抗移植肺缺血再灌注损伤的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠50只，随机分为对照组、移植组和MFG-E8组，袖套改良法建立大鼠左肺移植模型。MFG-E8组受体鼠术前30min经尾静脉注射rhMFG-E8 20 μg/kg，对照组和移植组受体大鼠尾静脉注射同等量生理盐水。肺移植再灌注2 h后阻断右肺门5min，全自动血气分析检测仪检测动脉血中氧分压(PaO 2)和二氧化碳分压(PaCO 2)。苏木精-伊红(HE)染色观察移植肺组织显微病理改变，原位缺口末端标记法(TUNEL)染色检测移植肺组织细胞凋亡指数。组织活性氧检测试剂盒(DHE)检测肺组织中ROS水平，干/湿法测量肺湿质量/干质量(W/D)比。蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肺组织NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(Caspase-1)、和凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)蛋白表达水平。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)表达水平。组间比较使用 t检验，多组比较采取单因素方差分析。 结果:再灌注2 h后，HE染色可见移植组肺组织明显炎性细胞浸润、肺泡结构破坏、肺水肿、肺泡腔内渗出明显伴有一些红细胞；MFG-E8组肺组织炎性细胞浸润明显减少，未见明显肺水肿，肺泡结构基本完整。再灌注2 h后，MFG-E8组动脉PaO 2/FiO 2显著高于移植组[(314.35±58.13) mmHg比(212.76±42.19) mmHg， t＝4.473， P<0.05]；MFG-E8组肺组织ROS水平、细胞凋亡指数和W/D值均明显低于移植组[102.37±20.78比145.72±29.34、(20.36±5.37)%比(28.13±4.64)%、6.15±1.23比8.51±1.83， t＝3.813、3.462、3.385， P<0.05]。移植组大鼠肺组织NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白水平表达明显高于对照组(0.42±0.18比0.20±0.11、0.28±0.12比0.12±0.10、0.65±0.15比0.40±0.13， t＝3.298、3.239、3.983， P<0.05)；MFG-E8组大鼠肺组织NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白水平表达显著低于移植组(0.25±0.12比0.42±0.18、0.15±0.10)比(0.28±0.12、0.44±0.10比0.65±0.15， t＝2.485、2.632、3.684， P<0.05)。移植组大鼠肺泡灌洗液中IL-1β和IL-18蛋白水平表达明显高于对照组[(105.74±34.73) pg/ml比(70.8±7.25) pg/ml、(128.56±23.82) pg/ml比(93.48±14.53) pg/ml， t＝3.114、3.975， P<0.05]；MFG-E8组大鼠肺泡灌洗液中IL-1β和IL-18蛋白水平表达显著低于移植组[(80.16±8.35) pg/ml比(105.74±34.73) pg/ml、(95.50±13.18) pg/ml比(128.56±23.82) pg/ml， t＝2.265、3.840， P<0.05]。 结论:MFG-E8可能通过下调ROS/NLRP3信号通路，抑制NLRP3炎症小体活化，减轻氧化应激和免疫炎性反应，发挥抗移植肺缺血再灌注损伤作用。

目的:通过转录组学联合蛋白质组学的研究方法，分析表皮生长因子样结构域9(EGFL9)影响肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的信号通路。方法:采用RNA干扰技术构建EGFL9基因敲减的Huh-7肝癌细胞系，选取对照组(NC组)和实验组(KD组)，每组3个样本，进行转录组学和蛋白质组学分析，筛选出差异基因和差异蛋白质后，对其进行表达关联分析、聚类分析，利用基因本体论(GO)和京都基因和基因组数据库(KEGG)分别进行基因功能和通路的注释富集分析。结果:基于组学分析发现，KD组与NC组比较，有8 335个差异基因，其中上调4 207个，下调4 128个；有298个差异蛋白质，其中上调188个，下调110个。基于两组学联合分析发现，213个共有差异表达基因，其中在转录水平和翻译水平差异表达程度明显的前3名共有差异表达基因为：转铁蛋白受体2(TFR2)、膜联蛋白A1(ANXA1)、溶质载体家族38成员2(LC38A2)；共有差异表达基因显著富集的信号通路为：细胞周期信号通路、氨基酸的生物合成通路、p53信号通路和糖酵解/糖异生信号通路。结论:EGFL9可能通过调控TFR2、ANXA1、LC38A2等基因的表达参与肝癌细胞的细胞功能调控，并可能通过调控细胞周期等分子信号通路发挥作用。

目的:评价电针对肝部分切除术后小鼠肝再生的影响及Notch信号通路在其中的作用。方法:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只，6周龄，体质量20～22 g。采用随机数字表法分为6组( n＝6)：假手术组(S组)、肝部分切除术组(PH组)、非穴位电针＋肝部分切除术组(NPH组)、肝部分切除术＋Fli-06组(PH＋F组)、穴位电针＋肝部分切除术组(EPH组)和穴位电针＋肝部分切除术＋Fli-06组(EPH＋F组)。除S组以外，其余组小鼠均接受肝部分切除术；PH＋F组和EPH＋F组术前2 d开始腹腔注射Fli-06 4.8 mg/kg，1次/d，直至小鼠处死，其余组注射等体积0.9%氯化钠溶液；EPH组术后即刻开始电针刺激，选择双侧足三里穴，连续波，频率2 Hz，强度1 mA，以后肢出现轻微颤动为度，每次15 min，1次/d，连续3 d。肝部分切除术后第2天时麻醉小鼠，眼球取血样，采用全自动生化分析仪测定血清ALT和AST浓度，ELISA法测定表皮生长因子(EGF)和肝细胞生长因子(HGF)浓度。随后处死小鼠取肝组织，计算肝质量/体质量比，免疫组织化学染色法检测肝脏Ki-67表达；Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、G1/S-物异性同期蛋白-D1(CCND1)、Notch胞内结构域(NICD)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达；RT-PCR法检测Notch1、锯齿状典型Notch配体1(Jagged1)和Hes家族bHLH转录因子1(Hes1) mRNA表达。 结果:与S组比较，PH组血清ALT、AST、EGF和HGF浓度升高，肝脏Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA表达和Ki-67、PCNA、CCND1、NICD表达上调( P<0.05或0.01)；与PH组比较，EPH组肝质量/体质量比、血清EGF和HGF浓度升高，血清ALT和AST浓度降低，肝脏Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA表达和Ki-67、PCNA、CCND1、NICD、HIF-1α表达上调，PH＋F组肝质量/体质量比、血清HGF浓度降低，血清ALT和AST浓度升高，肝脏Jagged1、Hes1 mRNA和Ki-67、PCNA、CCND1、NICD、HIF-1α表达下调( P<0.05或0.01)；与EPH组比较，EPH＋F组肝质量/体质量比、血清EGF和HGF浓度降低，血清ALT和AST浓度升高，肝脏Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA和Ki-67、PCNA、CCND1、NICD和HIF-1α表达下调( P<0.05或0.01)。 结论:电针足三里穴促进肝部分切除术后小鼠肝再生，其机制可能与激活Notch信号通路有关。

目的:探究人表皮生长因子样结构域蛋白6（epidermal growth factor-like domain protein 6，EGFL6）基因在人膀胱癌细胞5637中的低表达对其体外和体内增殖能力的影响。方法:将人膀胱癌细胞5637分为实验组和对照组，实验组细胞利用小干扰RNA（siRNA）靶向人EGFL6基因，对照组细胞转染Mock-siRNA；采用实时定量PCR法检测实验组和对照组细胞中EGFL6 mRNA的含量；利用CCK8检测各组细胞的增殖能力；将裸鼠皮下分别注射实验组和对照组人膀胱癌细胞5637，通过裸鼠皮下移植瘤实验检测细胞在体内的增殖能力；通过蛋白免疫印迹检测EGFL6、p-P13K、p-AKT的表达。结果:实验组和对照组EGFL6表达量分别为（0.19±0.03）和（0.91±0.11），siRNA-EGFL6降低实验组人膀胱癌5637细胞中EGFL6的蛋白表达；CCK8结果发现实验组和对照组的吸光度分别为（1.558±0.152）、（2.287±0.182），实验组细胞增殖能力明显下降；裸鼠皮下移植瘤结果表明，实验组和对照组裸鼠瘤块体积分别为（1192.07±250.9）、（2280.5±600.1）μm 3，质量分别为（0.66±0.31）、（1.52±0.48）g，实验组细胞4周之后形成的瘤块体积和质量均下降；蛋白免疫印迹实验结果发现，对照组和实验组p-P13K表达量分别为（0.79±0.14）和（0.33±0.09），p-AKT表达量分别为（0.93±0.13）和（0.28±0.06），证实实验组细胞较于对照组细胞p-P13K、p-AKT均表达下降。 结论:EGFL6低表达会通过P13K-AKT信号通路抑制人膀胱癌细胞5637的体内与体外增殖能力。

目的 观察思肤安营养修护仿生膏对痤疮大鼠皮损的影响,并基于胰岛素样生长因子1(IGF-1)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路探究其作用机制.方法 将18 只SD大鼠随机分为对照组、阿达帕林组及思肤安组,每组6 只.3 组均采用痤疮丙酸杆菌注射诱导建立痤疮模型,造模成功后,阿达帕林组及思肤安组分别给予阿达帕林凝胶和思肤安营养修护仿生膏外涂,对照组给予生理盐水外涂,均1 次/d,连续干预4 周.分别于干预2 周及4 周后观察3 组大鼠造模区域皮损及HE 染色组织病理变化,尼罗河染色观察皮损组织皮脂分泌情况,Western blot及免疫组化法检测皮损组织中IGF-1、PI3K、Akt、甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)蛋白表达情况.结果 干预2 周后,思肤安组、阿达帕林组痤疮鼠背部皮损处结节、红肿较对照组轻,毛漏斗内角质物、毛囊壁及周围组织炎细胞浸润均较对照组减少;干预4 周后,思肤安组及阿达帕林组丘疹、结节基本消退,表皮各层结构组织基本正常,其中思肤安组皮损恢复更好.思肤安组皮损脂质百分比呈现先上升后下降的趋势,干预 4 周后脂质百分比明显高于阿达帕林组(P＜0.05),与阿达帕林组干预2 周后相当(P＞0.05).干预2 周、4 周后阿达帕林组和思肤安组皮损组织中IGF-1、PI3K、Akt、SREBP-1 蛋白相对表达量均明显低于对照组(P均＜0.05),且思肤安组均明显低于阿达帕林组(P均＜0.05),免疫组化染色也显示干预2 周、4 周后阿达帕林组和思肤安组皮损组织中IGF-1、PI3K、Akt、SREBP-1 蛋白表达均较对照组明显减少.结论 思肤安营养修护仿生膏有一定的脂质调节作用,可通过抑制IGF-1/PI3K/Akt通路下调SREBP-1 的表达发挥治疗痤疮作用.

神经调节蛋白 -1(neuregulin-1,NRG-1)是一组含有表皮样生长因子(epidermal growth factor,EGF)结构域的蛋白,其与酪氨酸激酶受体ErbB2(receptor tyrosine-protein kinase erbB-2,ErbB2)结合后,激动下游的Ras蛋白/丝裂原活化蛋白激酶( ras protein-mitogen-activated protein kinase,Ras-MAPK)和磷脂酰肌醇 3激酶/蛋白激酶 B(phosphatidylinositol 3-phosphate kinase-protein kinase B,PI3K-AKT)信号通路,从而促进施万细胞分化、增殖及迁移、髓鞘形成及神经修复.其具有多种亚型,其中Ⅰ型和Ⅲ型主要分布于神经组织中,促进周围神经髓鞘生长.而PI3K/AKT信号通路广泛存在于神经细胞中,在膜受体信号向细胞内转导过程中起到重要作用.本文主要对NRG-1亚型及PI3K/AKT信号通路在周围神经疾病中的相关性作一综述.

目的 探讨表皮生长因子样结构域7(EGFL-7)介导的促血管生成作用在婴幼儿血管瘤中的作用及干预措施.方法 收集该院2013年2月至2016年3月婴幼儿血管瘤的50例石蜡组织标本,按照病理期的不同分为增生期组、消退期组、消退完成期组.采用自身对照设计,选取5例癌旁正常组织作为对照组.对组织标本进行苏木素-伊红(HE)染色,检测以上病理标本中EGFL-7的生成情况.选取同期收治的30例增生期血管瘤患儿为研究对象,采用普萘洛尔干预治疗,检测该组患儿治疗前后血清、尿液中EGFL-7表达的变化.结果 增生期血管瘤组织切片管腔不明显,血管结构紊乱,细胞核大,染色深,内皮细胞排列紊乱.EGFL-7在增生期与消退期组的表达高于消退完成期组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).EGFL-7在消退完成期组与对照组的表达差异无统计学意义(P>0.05).血管瘤的患儿经普萘洛尔干预后血清、尿液中的EGFL-7均低于干预前,差异有统计学意义(P<0.05).结论 经普萘洛尔干预后EGFL-7水平显著下降,这可能成为血管瘤干预的重要机制.