探讨黄精不同炮制品(黑豆黄精、炆黄精)干预阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠尿液代谢产物的影响.将 60 只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐组、黑豆黄精组、炆黄精组,每组 12 只,各组进行腹腔注射D-半乳糖(100 mg·kg-1),假手术组腹腔注射等容积生理盐水.1 次/d,持续给药 7 周.D-半乳糖注射 3 周后,进行双侧海马Aβ25-35 注射进行造模.第 2 周开始灌胃给药,模型组与假手术组同体积的双蒸水,其余组给予对应的药物(10 mL·kg-1),1 次/d,连续灌胃 35 d.观察各组大鼠记忆行为学以及海马组织病理学.利用超高效液相色谱-串联三重四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)技术对尿液进行非靶向代谢物检测,并结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)处理数据以筛选差异代谢物、潜在生物标志物,并进行代谢通路富集分析.结果表明,AD大鼠经过黑豆黄精、炆黄精治疗后新物体识别指数升高,Morris水迷宫实验中逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增加.苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色结果,给药组海马组织细胞排列紧密,海马组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量显著降低(P<0.01),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)相对降低,其中黑豆黄精组更为明显,具显著性差异(P<0.05).经过筛选处理,得到潜在生物标志物 15 个,代谢物主要涉及2 条代谢通路:双香豆素作用途径、吡罗昔康作用途径.因此,黑豆黄精、炆黄精对AD具有干预缓解作用,其作用机制可能与双香豆素代谢、吡罗昔康代谢有关.

目的 研究白术Atractylodes macrocephala多糖对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的影响,探讨白术多糖干预UC的代谢途径及可能的作用机制.方法 采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导小鼠UC模型,给予白术多糖或美沙拉嗪干预后,测定小鼠体质量、疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分及结肠长度;采用ELISA检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MOP)活性;采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化;采用超高效液相色谱-串联三重四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)检测小鼠血清内源性代谢物水平,并结合主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析对差异代谢物进行表征,筛选出潜在的差异代谢物;采用MetaboAnalyst5.0网址分析可能的代谢通路.结果 白术多糖显著改善UC小鼠的症状和结肠组织病理损伤,提高血清中IL-10水平和SOD活性(P＜0.05、0.01),降低TNF-α水平和MPO活性(P＜0.05、0.01),并通过α-亚麻酸代谢通路、类固醇激素生物合成通路、初级胆汁酸生物合成通路、甘油磷脂代谢、泛酸和辅酶A生物合成通路、不饱和脂肪酸生物合成通路等代谢途径回调UC小鼠的异常代谢产物.结论 白术多糖具有防治UC的作用,其机制可能与平衡促炎因子与抗炎因子、增强抗氧化和调节脂质代谢等通路相关.

目的:分析高果糖饮食诱导的小鼠血清代谢物变化,探讨青蒿素改善高果糖饮食诱导的小鼠代谢紊乱的机制.方法:检测正常组、高果糖饮食组、青蒿素组及阳性药组小鼠血清葡萄糖、三酰甘油、胆固醇含量;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF MS)对各组小鼠血清进行代谢轮廓分析,进一步根据单变量统计分析筛选差异代谢物,对差异代谢物进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.结果:青蒿素显著降低了高果糖饮食诱导的小鼠血清三酰甘油上升.各组代谢轮廓出现改变.筛选出正离子模式下差异代谢物 42 个,负离子模式下差异代谢物45 个.亚油酸代谢,逆行内源性大麻素信号转导,不饱和脂肪酸的生物合成等重要通路发生了显著改变.结论:青蒿素可以使高果糖饮食导致的代谢紊乱有所恢复,主要涉及脂质代谢.

目的:通过超高效液相色谱-三重四极杆飞行时间串联质谱技术对厚朴花中的化学成分进行分析鉴定.方法:采用反相C18色谱柱(250mm×4.6mn,5μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱.质谱使用ESI离子源,负离子模式下采集数据.依据高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子的精确分子质量信息,结合标准品对照与参考相关文献数据,对厚朴花进行成分鉴定.结果:初步鉴定出酚酸类、黄酮类和苯乙醇苷类共16种化学成分.结论:本研究为进一步探究厚朴花的药效物质基础和质量调控机制提供基础资料.

目的 基于超快速高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱技术(UFLC-Triple Q-TOF-MS/MS),对同批次的枳实传统饮片和破壁饮片的整体化学成分进行鉴定分析,探讨破壁粉碎技术对饮片化学成分的影响.方法 采用PhenomenexC18色谱柱(3.0 mm×150 mm,2.6 μm),以乙腈和0.1％甲酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1;采用ESI电喷雾源的高分辨三重四极杆飞行时间质谱,分别在正、负离子模式下进行检测.结果 根据正负离子模式下获得的一级和二级质谱数据,通过准确分子量、裂解碎片及文献,共确证和指证出54个化合物,其中32个黄酮类成分,14个香豆素类成分,3个生物碱类成分,2个挥发油类成分,2个柠檬苦素类成分和1个有机酸类成分.结论 枳实传统饮片经破壁工艺加工后,化学成分种类无差异.本研究可为枳实传统饮片与破壁饮片的进一步研究及质量控制提供科学依据.

目的:研究白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促反应动力学特征.方法:建立大鼠和人肝微粒体体外孵育体系,对Militarine进行体外孵育反应;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,结合UNIFI数据库并参考文献对其代谢产物进行结构鉴定.同时,以葛根素为内标,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用技术对Militarine在大鼠肝微粒体中的代谢转化量进行定量分析,通过GraphPad Prism 5.0软件拟合代谢转化曲线,并计算在有/无还原性辅酶Ⅱ(NADPH)参与的反应条件下的Militarine酶促动力学参数[最大清除速率(vmax)、米氏常数(km)、固有清除率(CLint)].结果:Milita-rine在大鼠和人肝微粒体中孵育后,生成了1个化学式为C21H29O11的化合物,推测其为Militarine的酯键水解代谢产物.酶促动力学研究显示,有/无NADPH参与的Militarine酶促反应的vmax分别为1.955、2.129 nmol/(h·mg),km分别为8.601、9.854 nmol/mL,CLint分别为0.2273、0.2161 mL/(h·mg),两者无明显差异.结论:Militarine在肝微粒体中的主要代谢途径为C1或C4位酯键的水解;其代谢不依赖于由NADPH启动反应的细胞色素P450酶代谢途径.

目的:从代谢组学角度探讨大黄牡丹汤治疗炎症性肠病(IBD)的作用机制.方法:采用灌肠给予2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇(90 mg· kg-1)诱导IBD模型;SD大鼠随机分正常组、模型组、美沙拉嗪组(430mg· kg-1)和大黄牡丹汤组(7.5 g·kg-1),每组8只,连续灌胃给药7d,每天1次.观察大鼠一般情况,测定体质量及疾病活动指数(DAI);全自动血液分析仪检测大鼠红细胞、白细胞、粒细胞和淋巴细胞数量;采用ELISA法检测血清中IL-6、TNF-α的含量;HE染色观察结肠组织病理变化.采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)技术建立大鼠血清代谢轮廓图,分析各组大鼠血清内源性代谢物的变化,鉴定潜在的生物标志物并进行生物学意义分析.结果:与正常组比较,模型组大鼠的DAI评分明显升高(P＜0.001),体质量明显降低(P＜0.001),白细胞、红细胞、淋巴细胞及粒细胞数目均显著上升(P＜0.05,P＜0.01),血清中IL-6、TNF-α含量显著升高(P＜0.01,P＜0.001),结肠组织出现不同程度的水肿、糜烂,腺体破坏严重且紊乱,有隐窝炎及脓肿形成.与模型组比较,给药组大鼠的DAI评分明显降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001),体质量明显升高(P＜0.05,P＜0.01),白细胞、红细胞、淋巴细胞和粒细胞数目均显著下降(P＜0.05,P＜0.01),血清中IL-6、TNF-α的含量显著降低(P＜0.01),结肠黏膜上皮逐渐恢复,肠绒毛形态结构趋于完整,肠腺结构明显.结果鉴定出IBD大鼠血清中的8个生物标志物,大黄牡丹汤可以上调苯乙酰甘氨酸、鞘氨醇、植物鞘氨醇、黄嘌呤、色氨酸、吲哚的含量(P＜0.05,P＜0.01),下调甘氨酸、苯丙氨酸的含量(P＜0.05,P＜0.01).结论:大黄牡丹汤对TNBS-乙醇诱导的IBD大鼠具明显的治疗作用,可能与其改善血清中内源性代谢物水平,恢复体内正常代谢活动有关.

目的:应用代谢组学的方法观察乳腺癌患者的血清代谢产物变化规律,并将其用于发现诊断乳腺癌病情进展及治疗的生物标志物.方法:收集正常人和乳腺癌病人的血清标本,分为正常人组49例,乳腺癌组31例.经超高效液相色谱-三重四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC/Q-TOF-MS)检测,将所得数据输入SIMCA-14.0软件,对其进行多变量统计分析.如主成分分析法(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模式识别分析各代谢物的变化.结果:乳腺癌和正常组血清产物水平呈现不同的分布.结论:代谢组学方法可展示乳腺癌血清中代谢产物的变化特点,为进一步发现乳腺癌发病的生物机制奠定基础.

本研究基于代谢组学方法研究了黄花菜提取物(HCE)在模拟微重力(SMG)诱导的抑郁症大鼠模型中的抗抑郁作用.通过14天模拟微重力方法建立SMG抑郁大鼠模型,以蔗糖偏爱指数的降低值和强迫游泳试验中不动时间的增加值验证建模成功.研究结果发现HCE和阳性药物帕罗西汀可逆转某些代谢物谱.HCE的抗抑郁作用可能涉及多种代谢途径的调节,例如苯丙氨酸、谷氨酸和色氨酸代谢以及能量代谢的变化.5-羟基色氨酸、柠檬酸、苯乙酰甘氨酸、马尿酸、环腺苷酸和左旋多巴在HCE和帕罗西汀给药后被回调.此外,谷氨酸仅在HCE组中被调节,而黄嘌呤酸和脱氧尿苷水平的波动在阳性组中被回调,这表明阳性药物和HCE在改善谷氨酸代谢中的作用机制可能不同.本研究为HCE在抑郁症治疗中的应用奠定一定的理论基础.

应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)和超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLCQQQ-MS/MS)对东革阿里提取物中的苦木素二萜成分进行定性和定量分析.UPLC-Q-TOF-MS采用Agilent Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.8 μm),以乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱.UPLC-QQQ-MS/MS采用Agilent Eclipse Plus C18 RRHD柱(2.1 mm×S0 mm,1.8 μm),以乙腈-0.1％甲酸水为流动相进行梯度洗脱.质谱分析均采用电喷雾正离子模式采集.UPLC-Q-TOF-MS通过对照品比对及高分辨质谱数据解析,推测了东革阿里中32种苦木素二萜成分并解析了其裂解规律.UPLC-QQQ-MS/MS定量分析东革阿里中4种苦木素二萜成分,在考察的浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 6),回收率为90.35％～106.4％,RSD为1.8％～3.6％.该方法快速、可靠、高效,能较全面地反映东革阿里中的苦木素二萜类成分及含量,可为深入阐明东革阿里的药效物质基础及其质量标准研究提供参考.