目的:采用代谢组学技术，筛选可以用于预测曲妥珠单抗辅助治疗人类表皮生长因子受体-2（HER-2）阳性乳腺癌疗效的生物标志物。方法:收集2017年1月至2019年12月金华市人民医院治疗的乳腺癌患者60例的血清样本，分为化疗组（30例）和化疗+曲妥珠单抗治疗组（30例），分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC-Q-Orbitrap HRMS）技术和SIMCA 14.1软件中的多元变量模式对样本及数据进行检测和分析。结果:两组代谢物构建的正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）模型稳健性良好，以 P<0.05且VIP>1.0为筛选条件，筛选并鉴定出8个差异代谢物，可用于预测曲妥珠单抗辅助治疗HER-2阳性乳腺癌的疗效。 结论:代谢组学技术可揭示化疗+曲妥珠单抗组治疗HER-2阳性乳腺癌血清中内源性代谢物的变化特点，筛选出的生物标志物可用于疗效预测，同时为研究曲妥珠单抗的疗效评价提供新思路。

目的:采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术对防风通圣丸的主要化学成分进行定性分析。方法:采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 C18色谱柱(150 mm×3.0 mm，2.7 μm)，以0.1%甲酸-乙腈为流动相，梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源的正、负离子交替扫描模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能(Full MS/dd-MS 2)，进行数据采集。通过精确相对分子质量及二级碎片离子信息，与对照品的保留时间、mzVault 2.0质谱数据库及相关文献报道进行比对，鉴定防风通圣丸的主要化学成分。 结果:共鉴定出82种化学成分，包括黄酮类33个、色原酮类13个、三萜皂苷类8个、香豆素类6个、环稀醚萜类5个、苯肽类4个、萜类4个、酚酸类3个、木脂素类3个、蒽醌类2个、生物碱类1个。结论:UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术可快速、准确地识别防风通圣丸中主要化学成分，为其药效物质基础研究及质量控制提供了理论依据。

目的:鉴定受试者血清中的不同代谢物，以明确代谢综合征（MS）和稳定型冠心病患者的潜在代谢紊乱途径，评估基于血清代谢组学的特异性代谢物群对超重或肥胖人群发生MS和冠心病的预测价值。方法:本研究为回顾性横断面研究。以2017—2019年郑州大学第一附属医院河医院区招募的MS患者（MS组）、稳定型冠心病患者（冠心病组）和超重或肥胖者（对照组）作为训练集，以同时期该医院郑东院区招募的对应3组人群作为验证集。采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨率质谱分析受试者的血清代谢组学特征，收集相关的临床资料，包括年龄、性别、体重、身高、血压、空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、血脂、估算的肾小球滤过率（eGFR）、肌酐清除率（CR）等。在正交偏最小二乘判别分析模型（OPLS-DA）基础上，根据变量权重（ VIP）筛选MS和冠心病患者显著改变的代谢物。绘制受试者工作特征曲线（ROC）并做风险预测。 结果:本研究共纳入488例研究对象，其中训练集MS组40例、冠心病组249例、对照组148例；验证集MS组16例、冠心病组18例、对照组17例。分别比较冠心病组和对照组、MS组和对照组、冠心病组和MS组的血清样本代谢物，共鉴定出22种差异代谢物。改变的代谢途径有磷脂代谢、氨基酸代谢、嘌呤代谢等途径。通过交叉比较，得到2种MS的特异性代谢物［磷脂酰胆碱（18∶1（9Z）e/2∶0）和哌唑酸］、4种冠心病特异性代谢物［溶血磷脂酰胆碱（17∶0）、PC（16∶0/16∶0）、次黄嘌呤和组氨酸］和4种MS和冠心病共有代谢物［异亮氨酸、苯丙氨酸、谷胱甘肽和溶血磷脂酰胆碱（14∶0）］。受试者工作特征曲线结果显示，血清代谢物对超重或肥胖人群发生MS的预测值为100%，发生冠心病的预测值为87.5%，对MS患者发生冠心病的风险预测值为82.1%。结论:血清代谢物的变化提示MS和冠心病可能涉及多种代谢途径紊乱。基于血清代谢组学的特异性代谢物群对超重或肥胖人群发生MS和冠心病具有良好的预测价值。

目的:阐明清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的物质基础,建立科学的质量控制方法.方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术对清肝颗粒的活性成分进行表征分析;以清肝颗粒中鉴定出的活性成分为目标对象,进行网络药理学和分子对接研析,并建立多成分含量测定方法.结果:共鉴定出134个成分,其中黄酮类50个、糖苷类8个、苯丙素类17个、三萜类11个、萜类6个、氨基酸类11个、有机酸类9个、脂肪酸类7个、生物碱类8个、挥发油类5个、醌类1个,并解析了黄酮类、萜类、有机酸类、生物碱类以及糖苷类代表性化合物的裂解规律.通过网络药理学分析筛选出8个核心靶点.预测了主要活性成分为异甘草素、腺苷、甘草素、鸟苷、4,5-二咖啡酰奎宁酸等.其次,依据可测性、特征性以及活性相关性的原则,建立了 3,4-二咖啡酰奎宁酸、(R,S)-告依春、甘草素、4,5-二咖啡酰奎宁酸和甘草酸铵等5个潜在活性成分的含量测定方法.结论:筛选出了清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的主要药效活性成分,并展开定量研究,可为清肝颗粒质量控制水平的提高提供了依据.

目的 整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan,GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome,KYDS)大鼠的补肾作用机制.方法 分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的非靶向代谢组学和16S rRNA基因测序分析的肠道微生物组学方法,分析正常对照组、肾阳虚证模型组、骨疏丹给药组和阳性对照组大鼠粪便代谢物谱与肠道菌群组成,采用Pearson相关分析探讨内源性差异代谢物与差异菌群之间的相关性.结果 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的代谢组学方法在正负离子模式下共发现骨疏丹参与调控肾阳虚症的 22 种差异代谢物,如色氨酸、鹅去氧胆酸、肌酐和油酸酰胺等,主要涉及氨基酸代谢、胆汁酸代谢、能量代谢和脂质代谢.基于 16S rRNA 测序分析发现骨疏丹在属水平显著上调普雷沃氏菌(Prevotellaceae)的相对丰度(P<0.05),显著下调颤杆菌(Oscillibacter)的相对丰度(P<0.05).相关性分析结果表明甘胆酸和鹅去氧胆酸与在属水平显著改变的普雷沃氏菌(Prevotellaceae)显著正相关(P<0.05),而与考拉杆菌(Phascolarctobacte-rium)显著负相关(P<0.05).二十二碳六烯酸与毛螺菌(Lachnospiraceae)显著负相关(P<0.05).结论 骨疏丹通过良性调节内源性代谢和肠道菌群结构发挥补肾作用,为中药通过肠-肾轴治疗疾病提供新的思路和方法.

目的:研究甘遂炮制前后对生理状态大鼠肝脏代谢组学的影响,探究醋制减毒机制.方法:取24只SPF级SD大鼠,随机分为空白组、生甘遂组、醋甘遂组,每组8只.空白组灌胃0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na),生甘遂组、醋甘遂组给予相应的供试液,连续给药20 d,第20天收集肝脏.运用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-MS)技术分析大鼠肝脏样本,通过Compound Discoverer 3.0软件进行数据前处理,检索HMDB等数据库.并对差异代谢物进行主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)、MetaboAnalyst对所得差异代谢物进行显著富集通路分析.结果:实验最终发现生甘遂组与空白组比对出具有生物学意义的28个差异代谢物,醋甘遂组与空白组比对出具有显著性差异的18个代谢物,其交集有13个代谢物.结论:通过生物学意义分析得到醋炙甘遂能够通过升高肝脏中牛磺脱氧胆酸和硬脂酰肉碱水平,降低早期脑损伤和2型糖尿病诱发的潜在风险;通过升高肝脏甘氨胆酸水平,促进调节机体免疫功能;通过升高肝脏20-羟基二十碳四烯酸水平,促进缺血性卒中后的神经血管重塑和功能恢复;通过升高肝脏3-羟基丁酸、油酰乙醇胺水平,发挥抗肿瘤、抗氧化和神经保护作用.其发挥减毒机制的相关代谢通路为花生四烯酸代谢、初级胆汁酸生物合成、酮体的合成与降解、牛磺酸和次牛磺酸代谢.

目的 基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UPLC-QE-MS)技术的尿液代谢组学方法,寻找与小儿积滞体质相关的潜在生物标志物,探究积滞体质形成的代谢特征.方法 依照侯江红教授制定的中医儿童体质分型与判定标准,纳入积滞体质与健康体质志愿者各30例.采集两组志愿者的尿液样品,利用UPLC-QE-MS技术进行尿液样品检测和数据采集,结合无监督的主成分分析法(PCA)和正交信号校正的偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)统计处理数据,以变量投影重要度(VIP)＞1,P＜0.05为卡值标准筛选积滞体潜在生物标志物,将筛选得到的差异代谢物导入到KEGG数据库,通过富集和拓扑分析,寻找相关性最强的关键途径.结果 积滞体质与健康体质OPLS-DA得分图表明两种体质之间存在明显差异.在正、负离子模式下共鉴定出43个与积滞体质相关的潜在生物标志物,其中3个标志物涉及色氨酸代谢、脂肪酸代谢等5条通路.结论 积滞体质潜在生物标志物主要参与苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢,脂肪酸代谢,β-丙氨酸代谢,烟酸和烟酰氨代谢,嘧啶代谢等途径,对机体的影响与积滞体质免疫力低下、易感冒、大便干结、易口疮和苔腻等状态相符,为儿童体质分型和判定标准提供客观化依据.

目的 探究黄芪的3个重要产地(山西浑源与朔州、甘肃渭源与岷县、陕西子洲)所产黄芪饮片的成分差异,为其基原鉴定与质量研究提供参考依据.方法 用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术(UHPLC-Q-Orbitrap-MS)测定3个不同产地黄芪饮片的化学成分.以变量投影重要性(VIP)＞1、P＜0.05为标准,筛选获得其显著差异成分,用SIMCA软件对所得化合物及差异化合物进行聚类分析、偏最小二乘法判别分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA).结果 4-羟基肉桂酸、胱氨酸、刺芒柄花素等21个化合物在甘肃、陕西、山西3个产地黄芪之间存在显著差异,其中甘肃与山西产地的黄芪差异性成分有1个,山西与陕西产地的黄芪差异成分有11个,甘肃与陕西产地的黄芪差异成分有18个.结论 基于UHPLC-Q-Orbitrap-MS液质联用技术及聚类分析、PLS-DA等成分分析方法所得21个差异性成分,可为不同产地及品种黄芪饮片的来源鉴定及质量控制提供理论依据.

目的:研究制川乌-白芍配伍前后的成分差异.方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,对制川乌-白芍药对及其单味药定性分析.使用Thermo Scientific Accu-core?C18色谱柱(100 mm×3 mm,2.6 μm)分离样品,以0.1％甲酸乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,通过Mass Range的正、负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能,对制川乌-白芍药对及其各饮片的水煎液快速分析;利用目标化合物的二级碎片离子信息对比mzVault、mzCloud数据库和对照品及相关文献报道的化合物质谱信息.结果:制川乌-白芍药对供试品共检测到184个化合物,其中56个可能为配伍后新生成的化合物,包含生物碱类化合物8个、黄酮类化合物9个、酚酸类化合物15个、苯丙素类化合物8个、其他类化合物16个.结论:该研究发现川乌配伍白芍后可产生新的化合物,为进一步研究制川乌-白芍药对的药效物质提供参考.

梅花为蔷薇科植物梅Prunus mume(Sieb.)Sieb.et Zucc.的干燥花蕾,绿萼梅为临床入药的主要品种.该研究为明确不同发育时期绿萼梅的化学组成及差异,采用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱(UPLC-QE-MS)检测其化学组成,共检测得到328个化合物,包含67个黄酮、50个苯丙素、104个萜类、26个酚类、24个生物碱、11个有机酸及其衍生物、8个氨基酸衍生物及其他38个化合物.半定量结果显示绿萼梅中主要化学成分的含量随发育时期呈逐渐下降趋势.采用紫外-可见分光光度法对不同发育时期绿萼梅样品中总黄酮和总苯丙素含量进行测定,采用UPLC法测定不同发育时期8个指标性成分(新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、异绿原酸B、槲皮苷)含量,分析结果表明花蕾期与全开期之间成分含量差异显著,绿原酸可作为不同发育时期之间的差异质量标志物.DPPH自由基清除法检测不同发育时期绿萼梅的抗氧化活性,结果表明抗氧化能力与其成分含量密切相关,且随着花的发育逐渐减弱.该文结果可为梅花的化学成分动态变化规律和最佳采收期的确定提供分析方法和数据支撑.