目的:阐明清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的物质基础,建立科学的质量控制方法.方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术对清肝颗粒的活性成分进行表征分析;以清肝颗粒中鉴定出的活性成分为目标对象,进行网络药理学和分子对接研析,并建立多成分含量测定方法.结果:共鉴定出134个成分,其中黄酮类50个、糖苷类8个、苯丙素类17个、三萜类11个、萜类6个、氨基酸类11个、有机酸类9个、脂肪酸类7个、生物碱类8个、挥发油类5个、醌类1个,并解析了黄酮类、萜类、有机酸类、生物碱类以及糖苷类代表性化合物的裂解规律.通过网络药理学分析筛选出8个核心靶点.预测了主要活性成分为异甘草素、腺苷、甘草素、鸟苷、4,5-二咖啡酰奎宁酸等.其次,依据可测性、特征性以及活性相关性的原则,建立了 3,4-二咖啡酰奎宁酸、(R,S)-告依春、甘草素、4,5-二咖啡酰奎宁酸和甘草酸铵等5个潜在活性成分的含量测定方法.结论:筛选出了清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的主要药效活性成分,并展开定量研究,可为清肝颗粒质量控制水平的提高提供了依据.

基于 INSR/AMPK/SREBP-2 信号通路,观察左归降糖清肝方对 db/db 小鼠 2 型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)脂质代谢的影响,探讨其治疗T2DM合并NAFLD的作用机制.随机将 24 只db/db小鼠分为 4 组:模型组,阳性药物组,左归降糖清肝方低、高剂量组.采用 6 只C57 小鼠作为空白组.左归降糖清肝方高、低剂量组分别予左归降糖清肝方 15、7.5 g·kg-1 灌胃,阳性药物组予二甲双胍 0.067 g·kg-1 灌胃,空白组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,连续 6 周.灌胃结束后,检测小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),进行口服葡萄糖耐量实验以及血脂、肝功能水平,肝组织病理学分析脂质蓄积情况.Western blot检测胰岛素受体(insulin receptor,INSR)、AMP依赖的蛋白激酶[adenosine 5′-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]、p-AMPK、甾醇调节元件结合蛋白 2(sterol-regulatory element-binding protein 2,SREBP-2)蛋白表达.结果显示,与模型组相比,经左归降糖清肝方治疗的小鼠体质量、肝重系数、空腹血糖、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)和低密度脂蛋白(low-density lipopro-tein,LDL)以及肝功能水平降低.肝组织病理学显示,与模型组相比,经左归降糖清肝方治疗的小鼠肝组织脂滴空泡明显减少、紫红色糖原颗粒明显增加.Western blot检测结果表明,与空白组比较,模型组INSR、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平均显著下调,SREBP-2蛋白表达水平均显著上调.与模型组比较,左归降糖清肝方高剂量组INSR、p-AMPK/AMPK蛋白表达水平均显著上调,SREBP-2蛋白表达水平显著下调;左归降糖清肝方低剂量组 INSR、p-AMPK/AMPK 蛋白表达水平有上调趋势,SREBP-2蛋白表达水平有下调趋势,但差异无统计学意义.上述研究表明,左归降糖清肝方可能通过激活 INSR/AMPK/SREBP-2信号通路,改善db/db小鼠胰岛素抵抗和脂质代谢.

目的 探究清肝散结消瘿方治疗桥本甲状腺炎肝经郁热、脾虚痰凝证的临床疗效及作用机制.方法 根据患者意愿将70例患者分为对照组和药物组各35例.2组均限碘饮食,药物组予清肝散结消瘿颗粒,每次1袋,2次/d,口服.2组均连续治疗4周.同期选择20例健康人作为健康组.观察2组患者临床疗效,比较2组患者治疗前后中医症状积分、甲状腺抗体滴度水平(TPOAb、TGAb)、甲状腺体积及峡部厚度,比较3组受试者血清IκB激酶α(IKKα)、核因子κB抑制蛋白A(IKBα)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,监测2组患者治疗期间不良反应情况.结果 药物组总有效率为85.71%(30/35),对照组为20.00%(7/35),药物组优于对照组(P<0.05).与本组治疗前比较,药物组治疗后中医症状积分、甲状腺抗体滴度水平、甲状腺体积、甲状腺峡部厚度均明显改善(P<0.05);2组治疗后比较,药物组中医症状积分、甲状腺体积均低于对照组(P<0.05),TPOAb滴度下降率高于对照组(P<0.05).2组患者治疗前IKKα、TNF-α水平均高于健康组,IKBα水平均低于健康组(P<0.05);与本组治疗前比较,药物组治疗后IKKα、TNF-α水平下降,IKBα水平升高(P<0.05);2组治疗后比较,药物组IKKα、TNF-α低于对照组,IKBα高于对照组(P<0.05).2组患者治疗期间未见不良事件.结论 清肝散结消瘿方治疗桥本甲状腺炎可降低抗体滴度水平、减轻甲状腺肿大及峡部厚度、降低中医症状积分,临床安全有效,其可能是通过干预NF-κB信号通路发挥治疗作用.

目的:观察双虎清肝颗粒对慢性乙型肝炎患者临床疗效及白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响.方法:符合纳入标准的慢性乙型肝炎患者134例,使用信封法随机分为对照组(阿德福韦酯)和观察组(双虎清肝颗粒联合阿德福韦酯),每组67例.采用ELISA法检测IL-10和TGF-β表达情况.结果:治疗前两组患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)、透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(Ⅲ-PC)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、IL-10和TGF-β无显著性差异(P＞0.05).治疗后观察组对上诉指标的减低幅度显著高于对照组(P＜0.05).治疗结束后观察组转阴率为68.6％(46/67),显著高于对照组的50.7％ (34/67)(P＜0.05).观察组不良反应发生率为10.1％ (7/67),对照组不良反应发生率为9.0％ (6/67),两组不良反应无显著性差异(P＞0.05).结论:双虎清肝颗粒可以减低慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β因子表达,有利于肝功能的恢复并发挥抗肝纤维化的作用,临床使用安全、有效.

目的:建立清肝化瘀颗粒的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法,鉴别黄芩、苦参、半枝莲、莪术等组成药物;采用高效液相色谱法测定方中君药黄芩、苦参的主要成分黄芩苷及苦参碱的含量.结果:确立了颗粒中黄芩、苦参、莪术、半枝莲的薄层色谱鉴别方法.在选定的高效液相色谱条件下,建立了本颗粒中黄芩苷、苦参碱的测定方法,其方法学均符合药典要求.结论:本实验建立的鉴别和含量测定方法简便、准确、重复性好,适用于本颗粒质量的控制.

目的 观察疏肝理气法、养肝柔肝法和清肝利湿法治疗胆囊结石的疗效.方法 将75只豚鼠随机分为正常组和模型组、疏肝组、养肝组和清肝组,采用喂食高脂致石性饲料和少量蔬菜的方法复制胆石症模型,疏肝组灌服十二味疏肝利胆颗粒,养肝组灌服一贯煎颗粒,清肝组灌服龙胆泻肝颗粒,正常组和模型组均灌胃生理盐水.8周后检测各组豚鼠胆囊结石形成率,结石主要成分,血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,以及胆汁总胆红素(total bilirubin,TBIL)和Ca2+浓度,观察胆囊病理变化.结果 疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠胆囊结石形成率较模型组明显降低(P＜0.05),结石主要成分为胆固醇;与模型组比较,疏肝组、养肝组和清肝组豚鼠胆囊病理变化均明显改善,血清ALT、AST、TC水平均明显降低(P＜0.05),胆汁TBIL浓度无明显变化(P＞0.05),仅清肝组Ca2+浓度明显下降(P＜0.05);养肝柔肝法降低AST的作用最优(P＜0.05),疏肝理气法降低TC的作用最优(P＜0.05),清肝利湿法降低胆汁Ca2+的作用最优(P＜0.05).结论 疏肝理气法、养肝柔肝法和清肝利湿法均可防治豚鼠胆囊结石形成,3种中医治法的作用存在差异.

目的 研究化肝健脾汤治疗溃疡性结肠炎的临床疗效并探讨其机制.方法 将68例患者随机分为2组,观察组34例采用化肝健脾汤联合美沙拉嗪缓释颗粒剂治疗,对照组34例采用选用关沙拉嗪缓释颗粒剂治疗,2组均治疗8周,观察2组症状积分、证候疗效、结肠镜检查积分、血清TNF-α、IL-1β3和IL-6水平.结果 与治疗前相比,两组患者的症状积分都明显降低(P＜0.05),与对照组相比,治疗后观察组的症状积分下降明显(P＜0.05).在两组证候疗效比较中,观察组为94.1％,对照组为76.5％,两组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).两组结肠镜检查积分均较治疗前降低(P＜0.05),但观察组比对照组下降明显(P＜0.05).在两组治疗前后血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平比较中,两组炎症因子水平明显下降(P＜0.05),与对照组治疗后相比,观察组下降明显(P＜0.05).结论 化肝健脾汤联合美沙拉嗪可以有效地改善患者临床症状及内镜下表现,降低血清炎症因子水平,化肝健脾汤的清肝疏肝柔肝,理气祛湿健脾之功与传统气机升降理论和圆运动理论不谋而合,该疗法值得临床推广应用.

目的 优选清肝降浊颗粒的提取工艺.方法 采用正交试验法,以五味子醇甲含量为水提工艺考察指标,优化清肝降浊颗粒的提取工艺.结果 最佳煎煮工艺为加8倍量水,煎煮提取3次,每次1.5 h;制粒辅料为糊精,稠膏与糊精1:2配比,80%的乙醇为湿润剂,制成颗粒成型性和溶化性均较好.结论 优选得到的清肝降浊颗粒工艺稳定可行,可应用于工业化生产.

目的:为探讨证候类中药新药的临床评价方法,采用证病结合的临床研究模式,针对肝郁化热证,选择具有该证候的偏头痛、非器质性失眠和广泛性焦虑障碍患者,评价清肝解郁方对患者证候及生命质量的改善情况.方法:选取2013年07月至2014年12月北京中医药大学东直门医院收治的符合入组标准的患者180例,采用分层随机、阳性药对照的临床试验设计,将患者随机分为观察组和对照组,观察组采用清肝解郁方免煎颗粒进行治疗,偏头痛对照组患者使用天舒胶囊,失眠或焦虑对照组患者使用乌灵胶囊进行治疗.应用《肝郁化热证证候评价量表》对2组患者的证候改善情况进行评价,并采用SF-36生命质量量表评价2组患者生命质量.结果:1)经治疗后,2组患者肝郁化热证证候评分均呈下降趋势,治疗前后证候评分差值的组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05),观察组下降较对照组更明显;2)治疗前后,2组患者生命质量各维度得分均较治疗前提高,其中社会功能(SF)维度组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05),观察组改善更明显;3)肝郁化热证证候评分变化与生命质量各维度得分变化的相关性分析提示:生理功能(PF)、生理职能(RP)、精力(VT)、社会功能(SF)、情感职能(RE)与肝郁化热证证候评分变化呈显著正相关.结论:清肝解郁方可改善偏头痛、非器质性失眠及广泛性焦虑障碍患者的肝郁化热证证候,并可提高患者的生命质量.

《中华人民共和国药典》记载含虎杖的中成药11种,其中除跌打镇痛膏为中药复方制剂,其余10种均为中成药.这11种药物包含口服制剂7种,外用制剂3种,内外兼用1种.目前,含虎杖的中成药中有双虎清肝颗粒、胆宁片、养阴降糖片、烧伤灵酊、维血宁合剂及疏风活络丸6个品种作为处方药管理,其余的均为非处方药.《中药部颁标准》记载的配伍虎杖的复方共有28首,复方用药的作用主要是活血化瘀、清热解毒、清利湿热、祛风通络、凉血止血、消痰化浊、利尿通淋、祛痰止咳,其中以活血化瘀为主要功效的复方和以清热解毒为功效的复方各10首,以祛风通络为主要功效的复方9首.含虎杖外用或内服的中成药,不良反应报道较少,提取物白藜芦醇不良反应也较少,因此,这些药物相对于其他同适应证药物来说,安全系数相对较高.