目的 研究灯盏细辛Erigeron breviscapus的化学成分及其体外抗胶质母细胞瘤和结肠癌活性.方法 采用大孔树脂柱色谱、中压制备色谱、高压制备色谱等多种方法进行分离和纯化,利用 1D-NMR、2D-NMR、HR-ESI-MS、UV、IR等波谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定,采用CCK-8 法对新化合物的活性进行筛选.结果 从灯盏细辛 80%甲醇提取物中分离得到 4 个化合物,分别鉴定为反式-4-咖啡酰氧基-3-羟基-6-咖啡酰氧甲基-7,8-二氧杂环[3.2.1]辛烷-1-羧酸(1)、异绿原酸A(2)、绿原酸(3)和新绿原酸(4);其中化合物1 对人胶质瘤U87 细胞和人结肠癌HT29 细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)分别为(13.31±0.77)、(14.83±0.92)μmol/L.结论 化合物 1 为新化合物,命名为新飞蓬酯乙;化合物 1 对肿瘤细胞的增殖具有一定的抑制作用.

绿萼梅为蔷薇科植物梅的干燥花蕾,产地广阔,民间应用历史悠久,主要含有黄酮类、苯丙素类、花青素类、挥发性成分、有机酸成分等化学成分,具有疏肝解郁及开胃生津的功效,主治胁肋胀痛,脘闷胀气,纳食不香,咽中似有物作梗等.药理研究表明,绿萼梅提取物有抗抑郁、抗氧化、抑菌、抗血小板聚集等作用,临床上主要用于治疗抑郁症,胃病,癔球症,淋巴结核等症状.就近年来有关绿萼梅的相关化学成分及其药理作用进行综述,并在此基础上结合质量标志物(Q-Marker)的核心概念,从传统药性、拓展功效性、化学成分可测性等方面进行绿萼梅质量标志物的预测分析.结果发现与其传统功效及拓展功效相关药理作用的活性成分主要为苯丙素类及黄酮类成分,并初步预测出绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素、芦丁、异鼠李素、柚皮素、山柰酚和咖啡酸等成分可作为绿萼梅质量标志物的候选化合物,为建立和完善绿萼梅质量标准提供依据,以期为绿萼梅药材质量的深入研究及综合利用提供参考.

综合运用硅胶柱色谱、反相C18 柱色谱、Sephadex LH-20 柱色谱、制备高效液相色谱等多种色谱分离方法对岐山金丝桃地上部分的化学成分进行系统分离和纯化,并采用IR、NMR、MS等波谱解析技术进行结构鉴定.从岐山金丝桃甲醇提取物中共分离 21 个化合物,分别鉴定为(5Z)-8-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5-辛烯酸甲酯(1)、4-甲基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-己酸甲酯(2)、byzantionoside B(3)、9-epi-blumenol C glucoside(4)、corchoionoside C(5)、(6S,9R)-roseoside(6)、顺式-对香豆酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、反式-对香豆酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、对羟基苯丙酸甲酯(9)、绿原酸甲酯(10)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、β-谷甾醇(12)、豆甾醇(13)、豆甾-4-烯-3-酮(14)、β-香树脂醇(15)、胡萝卜苷(16)、sitoindoside Ⅰ(17)、油酸(18)、α-亚麻酸甲酯(19)、甘油三亚油酸酯(20)、cassipourol(21).其中化合物 1 和 2 为未见报道的新化合物,分别命名为岐山金丝桃苷G、岐山金丝桃苷H.化合物 3～5、7～9、17、20～21 为首次从金丝桃属植物中分离得到,其余化合物均为首次从该植物中分离得到.生物活性检测结果表明,化合物 11 具有显著的抗神经炎症活性,化合物 1、3、19 具有一定的神经保护作用.

目的:款冬花具有止咳化痰的作用,以止咳为主.研究显示款冬花的某些成分可能与止咳作用相关,另有某些成分被证实具有止咳活性,但款冬花止咳药效的物质基础尚未阐明.本研究通过对款冬花提取物的高效液相色谱指纹图谱与止咳作用进行谱效相关分析,旨在阐明款冬花的止咳活性成分群.方法:采用高效液相色谱法建立10批款冬花提取物的指纹图谱并获得其化学成分数据;选用豚鼠作为实验动物,采用枸橼酸引咳法获得10批款冬花提取物的止咳药效数据.将SPF级健康雄性Hartley豚鼠随机分为S1～S10组、阳性对照组和空白对照组(共12组),每组10只,S1～S10组分别给予款冬花提取物S1～S10(4 g/kg),阳性对照组给予枸橼酸喷托维林(10 mg/kg),空白对照组给予纯化水,各组连续给药5 d,将豚鼠置于5 L容积的密闭广口瓶内,用超声雾化器以最大喷雾力度喷入17.5%的枸橼酸并持续0.5 min,记录每只豚鼠的咳嗽潜伏期和5 min内咳嗽次数.采用灰色关联度分析和偏最小二乘回归对款冬花提取物的化学成分数据和止咳药效数据进行谱效相关分析,预测款冬花的止咳活性成分群.对预测的款冬花止咳活性成分群进行等效性验证:将SPF级健康雄性Hartley豚鼠随机分为S9组、活性成分群组、阳性对照组和空白对照组(共4组),每组10只,S9组给予款冬花提取物S9(4 g/kg),活性成分群组给予预测的止咳活性成分组合物(剂量相当于4 g/kg的款冬花提取物S9),阳性对照组给予枸橼酸喷托维林(10 mg/kg),空白对照组给予纯化水,各组连续给药5 d,动物造模和药效指标观察同前.结果:共建立10批款冬花提取物的高效液相色谱指纹图谱并获得14个主要共有峰的峰面积数据;获得10批款冬花提取物的止咳药效数据.与空白对照组比较,阳性对照组及S1、S2、S3、S4、S6、S7、S8、S9、S10组的咳嗽潜伏期加长(均P<0.01),阳性对照组及S1、S2、S4、S6、S8、S9、S10组的5 min内咳嗽次数减少(均P<0.05).谱效相关分析显示:异绿原酸C、异绿原酸A、绿原酸、异绿原酸B、异槲皮苷、芦丁6种成分对款冬花止咳作用的贡献度较高,初步判断为款冬花的止咳活性成分群.等效性验证显示:S9组、活性成分群组的2个药效指标的差异均无统计学意义(均P>0.05),证实异绿原酸C、异绿原酸A、绿原酸、异绿原酸B、异槲皮苷、芦丁为款冬花的止咳活性成分群.结论:谱效相关分析结合等效性验证可用于款冬花止咳药效物质基础研究.款冬花发挥止咳作用是多成分共同作用的结果.

目的 探究蒲公英清热解毒的药效物质基础.方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,比较蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物的抗炎作用差异;通过高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),对比蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物中次生物质木犀草苷、绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、秦皮乙素5种成分含量的差异;采用苯酚-硫酸比色法和考马斯亮蓝法分别对比蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物中初生物质多糖和蛋白含量的差异;通过离子交换色谱法分离纯化蒲公英鲜品中的多糖和蛋白类成分,进一步研究其清热解毒的物质基础.结果 蒲公英鲜品匀浆、鲜品水提物和蒲公英干品水提物组小鼠的耳肿胀率分别为0.59、0.85、0.94,其中蒲公英鲜品匀浆提取物中次生物质的含量最低,而初生物质多糖和蛋白类成分含量最高,多糖组和蛋白组小鼠的耳肿胀率分别为0.45、0.74.结论 蒲公英鲜品的抗炎作用优于干品,而且鲜品和干品中次生物质含量差异较小,初生物质中多糖和蛋白的含量差异大,通过进一步研究分离纯化后多糖和蛋白的抗炎作用差异,结果表明蒲公英鲜品中的多糖类成分是发挥清热解毒作用的主要物质基础.

目的:研究半枫荷叶正丁醇部位的化学成分.方法:采用柱色谱和半制备高效液相色谱分离技术对半枫荷叶丙酮提取物的正丁醇部位进行分离纯化,并通过化合物的理化性质和一维核磁共振波谱数据进行化合物结构鉴定.结果:从半枫荷叶丙酮提取物的正丁醇部位中分离得到 13 个化合物,分别鉴定为:新绿原酸(1)、4-羟基-2-甲氧基苯酚-1-O-β-D-(6'-O-没食子酰基)-葡萄糖苷(2)、4-羟基-3-甲氧基苯酚-1-O-β-D-(6'-O-没食子酰基)-葡萄糖苷(3)、芦丁(4)、金丝桃苷(5)、异槲皮苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-芸香糖苷(7)、紫云英苷(8)、杨梅素-3-O-(6"-没食子酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(10)、二氢杨梅素(11)、紫云英苷-6"-O-没食子酸酯(12)、杨梅素-3-O-(6"-没食子酰基)-β-D-半乳糖苷(13).结论:以上 13 个化合物均为首次从该植物中分离得到.

山楂具有化浊降脂的功效,在临床上用于治疗高脂血症,但其功效成分尚不清楚.该文采用"谱效"关系结合体内药效评价的方式筛选、验证山楂化浊降脂功效成分,并采用液相色谱质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术建立山楂质量控制方法.首先,复制高脂血症大鼠模型,灌胃给予山楂提取物不同极性部位及其组合,比较其对模型大鼠血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholester-ol,LDL-C)的影响;采用正交偏最小二乘(orthogonal partial least squares,OPLS)算法建立山楂提取物不同极性部位及组合中24 个化学成分与药效指标间的"谱效"关系模型,筛选山楂化浊降脂功效成分,并通过体内实验对功效成分进行验证;最后,以枸橼酸、奎尼酸等 10 个化学成分为指标,采用LC-MS建立山楂的质量控制方法.结果表明,山楂提取物不同极性部位及其组合对高脂血症模型大鼠血清中TG、TC和LDL-C均有不同程度的调节作用,其中乙酸乙酯部位的效果最优;通过OPLS模型筛选山楂化浊降脂功效成分为牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、芦丁、枸橼酸、苹果酸和奎尼酸;灌胃给予高脂血症模型大鼠功效成分混悬液能显著降低模型大鼠血清中TC和TG水平;50 批山楂中枸橼酸、奎尼酸、芦丁、没食子酸、牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素-2-O″-鼠李糖苷、苹果酸、香草酸、新绿原酸和延胡索酸的平均质量分数分别为 38、11、0.018、0.009 5、0.037、0.017、8.1、0.009 5、0.073、0.98 mg·g-1.该文初步阐明了山楂化浊降脂的功效成分,并建立了山楂的含量测定方法,为科学评价山楂的质量提供了数据和方法支撑.

目的 对山银花茎叶化学成分进行分离和结构鉴定,并进行体外抗炎活性评价.方法 山银花茎叶 80%甲醇提取物采用Diaion HP20SS、Sephadex LH-20、高速逆流色谱、反相半制备液相色谱等进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.通过测定单体化合物抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7 释放NO水平评价其抗炎活性.结果 从山银花茎叶中分离得到 13 个化合物,分别鉴定为苄醇-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、獐牙菜苷(2)、表断马钱子苷半缩醛内酯(3)、马钱子苷半缩醛内酯(4)、裂环马钱苷(5)、断氧化马钱苷(6)、裂马钱素二甲基乙缩醛(7)、绿原酸甲酯(8)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(9)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(10)、野漆树苷(11)、木犀草素-7-O-α-L-吡喃阿拉伯糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(12)、忍冬苷(13);化合物 2～8、11～13 可抑制LPS诱导RAW264.7 细胞释放NO.结论 化合物 1 首次从忍冬属植物中分离得到,化合物 3、5、7、9、11～12 首次从山银花茎叶中发现.化合物 2～8、11～13 具有一定的抗炎活性.

目的:基于分子对接,确定中药红藤75%乙醇提取物的水溶性部位(HTW)中的抗炎物质基础及相关的炎症因子.方法:采用液质联用(LC-MS)技术确定HTW中的主要化学成分.采用软件Autodock Vina对化合物与肿瘤坏死因子-α、白介素-1β转化酶、IL-6、IκB激酶β、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)及Toll样受体2(TLR2)等6种靶点蛋白的结合能进行打分,虚拟筛选出抗炎活性成分以及关键靶点.结果:通过LC-MS分析,共确定14个含量较为丰富的小分子化合物,主要为苯丙酸、苯乙醇和木脂素类化合物,其中绿原酸类化合物含量最高.分子对接结果显示,TLR2与HTW中化合物的结合能平均值最高,其中与化合物2、3、7、11-13的结合能均超过-9.0 kcal/mol,远超过阈值-7.2 kcal/mol.TLR2与木通苯乙醇苷B(12)的结合能为-9.7 kcal/mol,与绿原酸(3)及其异构体(2)亦有较好的结合力.iNOS对HTW中化合物也较敏感,与苯乙醇苷类化合物10的结合能为-9.8 kcal/mol.结论:绿原酸、苯乙醇苷等化合物可能是红藤水溶性部位(HTW)最重要的抗炎活性物质;其抗炎关键靶点可能是TLR2和iNOS.

目的 明确黑骨藤抗类风湿性关节炎药效物质基础、质量标志物,建立该药材质量评价体系.方法 采用CIA模型药理学实验验证黑骨藤对照提取物的抗类风湿关节炎作用,UPLC法测定黑骨藤有效对照提取物含量,构建其抗类风湿性关节炎功效的质量评价体系,并应用于药材质量控制.结果 黑骨藤对照提取物、对照品可有效缓解足趾肿胀,减小关节炎评分、CIA大鼠血清促炎细胞因子水平,改善组织病理学变化.对照提取物法、单体对照品法含量测定结果基本一致.新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、绿原酸甲酯、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C为质量标志物.结论 该方法具有检测指标多、效率高、成本低等优点,可为构建黑骨藤及其他中药质量评价新模式提供借鉴.