目的:比较两种不同钙离子载体A23187和离子霉素对卵母细胞的受精率、胚胎发育潜能和临床结局的影响。方法:采用回顾性队列研究方法，收集2010年5月至2019年12月期间在中山大学附属第六医院生殖医学研究中心、因既往卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）受精失败/受精率低或严重少弱畸形精子症而采用A23187或离子霉素行人工卵母细胞激活（artificial oocyte activation，AOA）的65名患者资料。根据激活剂的不同分为A23187-AOA组和离子霉素-AOA组；再根据不同精子来源分为两个亚组：射出精子组和睾丸精子组比较组间的受精率、胚胎发育潜能及临床结局。结果:离子霉素-AOA组的双原核（two pronuclei，2PN）受精率［55.0%（116/211）］、2PN卵裂率［97.4%（113/116）］及囊胚形成率［69.1%（38/55）］均显著高于A23187-AOA组［43.3%（135/312）， P=0.008； 90.4%（122/135）， P=0.023； 45.2%（14/31）， P=0.029］。在射出精子组，离子霉素-AOA组的2PN卵裂率［97.1%（68/70）］、第3日（day 3，D3）可移植胚胎率［92.6%（63/68）］均显著高于A23187-AOA组［85.8%（91/106）， P=0.013； 73.6%（67/91）， P=0.002］；在睾丸精子组，离子霉素-AOA组的2PN受精率［55.4%（46/83）］、囊胚形成率［93.3%（14/15）］、种植率［38.9%（7/18）］和累积临床妊娠率［66.7%（6/9）］均显著高于A23187-AOA组［37.7%（29/77）， P=0.024； 20.0%（1/5）， P=0.005； 5.6%（1/18）， P=0.041； 10.0%（1/10）， P=0.019］。入组的65名患者共活产婴儿20例，均未见出生缺陷与先天畸形。 结论:对于因既往ICSI受精失败/受精率低或严重少弱畸形精子症行AOA的患者，离子霉素可以获得比A23187更好的受精率及胚胎发育潜能；对于睾丸来源的严重少弱畸形精子，与A23187相比，离子霉素可以令患者获得更好的临床结局。

目的:分析Ca 2+载体A23187对卵胞质内单精子注射(ICSI)受精失败或受精低下患者受精及胚胎发育的影响。 方法:回顾性自身对照研究分析2010年1月至2018年1月期间在中山大学附属第六医院生殖医学研究中心，因前次ICSI受精失败或低下[双原核(2PN)受精率≤30%]，再次行ICSI助孕时采用Ca 2+载体A23187激活的43名患者资料。根据前次受精情况将患者分为受精失败和受精低下组、射出精子组和睾丸精子组，激活周期与既往ICSI周期自身对照。 结果:受精失败、受精低下、睾丸精子和射出精子各组激活周期的2PN受精率显著高于既往ICSI周期(分别为41.9%比0， P<0.001;44.3%比16.5%， P<0.001;36.5%比13.5%， P=0.004;43.1%比11.1%， P<0.001)；受精低下组和射出精子组激活周期每周期可移植胚胎数和优质胚胎数较既往周期提高( P均<0.05)；激活周期最终获得9例健康活产婴儿。 结论:Ca 2+载体A23187辅助激活能够提高既往ICSI受精失败或低下患者的受精率，并能改善使用射出精子ICSI患者的胚胎情况及临床结局。

目的 研究钙离子载体A23187对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的肝星状细胞增殖、周期及凋亡蛋白caspase-3表达的影响.方法 将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃ 、50 mL/L CO2孵箱中进行复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白组、TGF-β1(5 ng/mL)组、TGF-β1+低、中、高剂量钙离子载体A23187组,即5 ng/mL TGF-β1刺激24 h,再分别加入1、2、4μmol/L不同剂量钙离子载体A23187作用24 h后,用M T T比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白免疫印记测定凋亡蛋白caspase-3表达.结果 不同浓度钙离子载体A23187均能显著抑制细胞增殖(P<0.05),且随着剂量的增加,细胞的相对增殖率(RGR)降低,低、中、高剂量组分别为85.93%、61.71%、48.43%,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);不同处理组G1期细胞比例、S+G2期细胞比例差异均有统计学意义(P<0.05),钙离子载体A23187剂量越大,G1期细胞比例越高,S+G2期细胞比例越低(P<0.05).随着钙离子A23187浓度的增加,细胞内caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.05).结论 钙离子载体A23187可能通过阻滞大鼠肝星状细胞由G1期进入S期和G2期,抑制细胞增殖,同时上调凋亡蛋白caspase-3的表达.

目的:评价外周血红细胞源微粒对于急性冠状动脉综合征(ACS)诊断的临床意义.方法:2015-01至2016-09在我院心内科住院并符合本研究纳入标准的患者150例,分为非冠心病(Non-CAD)组(n=45)、ACS组(n=105);ACS组患者包括急性ST段抬高型心肌梗死患者(STEMI,n=37)、非ST段抬高型心肌梗死患者(Non-STEMI,n=31)和不稳定性心绞痛患者(UAP,n=37).收集研究对象外周静脉血,离心后加入钙离子载体A23187,得到微粒.用特异性红细胞源微粒抗体(glycophorine A CD235a)标记红细胞微粒,然后经流式细胞仪进行定性定量分析.结果:ACS组外周血中红细胞源微粒水平(％)为26.20[15.90,38.00],Non-CAD组红细胞源微粒水平(％)为14.00[4.35,36.35],ACS组高于Non-CAD组(P<0.05).ACS组STEMI、Non-STEMI和UAP患者的外周血红细胞源微粒水平(％)依次为27.20(17.25,24.25)、21.50(12.76,34.90)、30.20(17.10,39.65),这三类患者之间红细胞源微粒水平的差异并无统计学意义(P>0.05).结论:ACS患者外周血红细胞源微粒水平高于Non-CAD,提示外周血红细胞源微粒水平的升高可能参与ACS发生、发展过程,可能与ACS患者发生急性血栓事件相关.

目的 观察辅助激活技术对辅助生殖技术中受精低下或失败患者成熟卵母细胞的激活效果及其胚胎发育情况.方法 回顾性分析2014年10月至2016年10月在山西省儿童医院妇幼保健院生殖医学中心助孕治疗、至少有1次ICSI受精失败或受精低下(受精率＜30％),再次行ICSI助孕时采用成熟卵母细胞激活处理的12名患者资料.12名患者共收集105枚成熟卵母细胞,全部采用钙离子载体A23187联合6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)进行激活处理,观察卵母细胞激活后的原核形成及胚胎发育情况.结果 激活周期的受精率及卵裂率分别为63.81％(67/105)和88.06％(59/67),较既往周期的受精率[23.96％(23/96)]和卵裂率[69.57％(16/23)]均显著升高(P＜0.05);激活周期中可移植胚胎及优质胚胎数量较既往周期均显著提高,分别为(3.02±2.51)vs.(1.41±0.58)枚和(1.70±1.36)vs.(0.31±0.52)枚(P＜0.05);既往ICSI受精低下或失败的12例患者中,卵母细胞激活处理后5例患者获得临床妊娠.结论 辅助激活技术可以改善ICSI受精失败或受精低下患者的受精率及胚胎发育质量.

目的 比较钙离子载体A23187激活和钙离子载体A23187联合6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)两种辅助激活方案对反复受精患者受精率低下时妊娠结局的影响.方法 回顾性分析有受精率低下史的卵细胞质内单精子注射(ICSI)后反复受精患者21例,分别采用钙离子载体A23187激活(9例)和钙离子载体A23187联合6-DMAP激活(12例),比较两组患者的受精情况、胚胎情况及妊娠结局.结果 两组患者的平均年龄、既往周期的平均获卵数、MⅡ卵数、受精率、卵裂率、可用胚胎率和优质胚胎率比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).两组患者激活周期的获卵数、MⅡ卵数、受精率、受精类型、卵裂率、可用胚胎率、可用胚胎数、优质胚胎率、优质胚胎数比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).9例钙离子载体激活组患者均行冻胚移植,临床妊娠4例;12例联合激活组患者移植11例,临床妊娠3例.结论 两种辅助激活方案均能显著提高反复受精患者的受精率,增加可用胚胎数和优质胚胎数,但钙离子载体激活组的胚胎持续妊娠能力优于联合激活组.

自1978年第一例采用体外受精-胚胎移植助孕技术的婴儿出生以来,在几十年的人类辅助生殖技术助孕治疗中,目前受精方式除了常规体外受精( in vitro fertilization,IVF)外,还有卵胞质内单精子显微注射( intracytoplasmic sperm injection,ICSI) ,并且二者存在不同的适应证. IVF主要用于女方因素引起的不孕症如:卵子运输障碍、排卵障碍以及子宫内膜异位症等.而ICSI主要适用于男方严重少弱精子症、梗阻性无精子症和IVF受精失败等. 通常在采用IVF受精失败的患者再次助孕时,选择ICSI受精方式,能显著提高受精率,并且在临床实际应用中ICSI与IVF相比较,有相对较高的受精率和较低的异常受精率,但是有统计表明仍有1％ ～3％的ICSI周期会发生受精率低下或者完全受精失败,其主要原因是卵母细胞激活失败[1]. 如何避免患者ICSI后卵母细胞激活失败,从而得到更多的受精卵和优质胚胎,最终获得妊娠并出生健康婴儿,同时最大可能减轻其精神心理和经济负担仍是目前ART面临的挑战. 我院生殖科对1 例就诊的首次IVF受精失败后反复ICSI受精失败2 次的患者,采用 ICSI 授精方式并联合使用钙离子载体A23187 进行人工辅助卵母细胞激活( assist oocyte activation,AOA)技术,获得正常受精卵及优质胚胎,移植后获得临床妊娠并分娩一个健康婴儿. 本文对此病例的诊治处理过程进行报道,并结合文献复习,总结ICSI受精卵母细胞激活失败时联合应用A23187进行治疗的经验,以期对AOA的临床应用提供理论支持.

目的 观察辅助卵母细胞激活(assisted oocyte activation,AOA)技术在体外受精周期中的应用,并对受精、胚胎发育情况、临床结局等激活效果进行评价.方法 回顾性分析进行卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)联合AOA处理的23例助孕者的临床资料,观察卵母细胞激活后的原核形成、胚胎发育情况及临床结局等.结果 23例共进行23周期的ICSI+ AOA,全部采用钙离子载体A23187进行激活处理,9例获得临床妊娠,临床妊娠率为39.1％.其中至少有1次ICSI完全受精失败8例(A组),AOA周期的2PN受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率和可利用胚胎率分别为50.0％、93.3％、39.3％和71.4％,临床妊娠率和胚胎种植率分别为12.5％和7.1％;精子严重畸形(如圆头精子症等)15例(B组),AOA周期的2PN受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率和可利用胚胎率分别为53.9％、98.8％、48.8％和65.9％,临床妊娠率和胚胎种植率分别为53.3％和40.7％.结论 AOA可以改善ICSI完全受精失败者的受精率及胚胎发育质量,并可用于严重精子畸形如圆头精子症的ICSI,对临床应用有一定的价值.

用原代培养角朊细胞,经钙离子载体A23187刺激,能合成和释放一种使阿斯匹林处理洗涤兔血小板发生聚巢的物质,经4种方法证明为血小板活化因子(PAF).A23187刺激角朊细胞PAF的生成具有时间和剂量依赖关系.外源性乙既辅醉A、花生四烯酸能增加PAF的生成.本文证明了正常人皮肤角朊细胞能合成和释放PAF.

利用一次腹腔注射的染毒方法观察了苯并（a）芘（BaP）对小鼠脾淋巴细胞钙稳态的影响，并初步探讨了其与免疫抑制的关系。结果表明，LACA雌性小鼠一次腹腔注射BaP 200 mg/kg后第3天和第6天，胸腺和脾脏明显萎缩，与对照组比其相对重量分别下降46.0%～49.2%和28.7%～33.0% ；全脾细胞数明显减少，同时刀豆素A（ConA）刺激的淋巴细胞增殖反应也受到明显抑制，抑制率为21.1%～27.5%；淋巴细胞内游离钙浓度（［Ca 2+］i）在染毒后第3天明显升高，第6天明显下降；不同剂量BaP染毒后第3天淋巴细胞内［Ca 2+］i与染毒剂量呈明显正相关（r=0.985 3,P<0.01）；第6天［Ca 2+]i与染毒剂量呈明显负相关（r=-0.947 3，P<0.0１）。此外，还观察到钙离子载体A 23187使正常小鼠脾淋巴细胞［Ca 2+］i明显升高时，淋巴细胞增殖反应受到明显抑制。结果提示，BaP可明显影响小鼠脾淋巴细胞的钙稳态，而钙稳态的失衡与BaP引起的免疫抑制可能有密切的关系。