目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)对脑胶质瘤中葡萄糖转运体3(GLUT3)表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法:(1)下载中国脑胶质瘤基因组图谱数据库中mRNAseq_325数据集，应用R语言分析222例原发性脑胶质瘤样本中 PVT1与 GLUT3基因表达的相关性以及二者对患者总生存期的影响。(2)收集海南医学院第一附属医院神经外科自2019年1月至2019年12月手术切除并经病理证实的8例低级别胶质瘤标本(低级别胶质瘤组)及7例胶质母细胞瘤标本（胶质母细胞瘤组），采用荧光原位杂交法检测 PVT1的表达，免疫组化染色检测GLUT3蛋白的表达。(3)体外培养人星形胶质细胞NHA及胶质母细胞瘤细胞U87、LN229和U251(NHA组、U87组、LN229组、U251组），采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR）检测各组细胞中 PVT1、 GLUT3 mRNA的表达，采用Western blotting实验检测GLUT3蛋白的表达。将U87、LN229细胞分别分为 PVT1过表达质粒组与空白质粒组、 PVT1短发夹RNA(shRNA）组与阴性对照shRNA组，分别构建慢病毒稳定转染过表达 PVT1及其空白对照细胞系、敲低 PVT1及其阴性对照细胞系，应用RT-qPCR和Western blotting实验检测各组细胞系中GLUT3 mRNA和蛋白的表达。(4）取 PVT1 shRNA组与阴性对照shRNA组U87、LN229细胞，分别采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验、平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力，采用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力。(5)将10只BALB/C-nu雌性裸鼠按随机数字表法分为实验组与对照组( n=5)，分别移植 PVT1 shRNA组与阴性对照shRNA组U87细胞以构建皮下移植瘤模型。移植4周后处死取瘤，称重及测量体积，并采用免疫组化染色检测肿瘤中Ki-67、GLUT3蛋白的表达。 结果:(1)mRNAseq_325数据集中222例原发性脑胶质瘤样本的 PVT1与 GLUT3基因表达呈正相关关系( r=0.514， P=0.000)；与 PVT1低表达组相比， PVT1高表达组的总生存期明显缩短，差异有统计学意义( P<0.05)；与 GLUT3低表达组相比， GLUT3高表达组的总生存期明显缩短，差异有统计学意义( P<0.05)。(2)与低级别胶质瘤组标本相比，胶质母细胞瘤组标本中 PVT1、GLUT3蛋白的表达明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。(3)与NHA组细胞相比，U87、LN229、U251组细胞中 PVT1、GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。与空白质粒组相比， PVT1过表达质粒组U87、LN229细胞中GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)；与阴性对照shRNA组相比， PVT1 shRNA组U87、LN229细胞中GLUT3 mRNA和蛋白的表达均明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。(4)与阴性对照shRNA组U87、LN229细胞相比， PVT1 shRNA组U87、LN229细胞的吸光度值、集落形成数和侵袭细胞数均明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。(5)与对照组裸鼠相比，实验组裸鼠的皮下移植瘤的体积明显减小、质量明显降低、Ki-67和GLUT3蛋白的表达也明显降低，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:下调PVT1可降低GLUT3的表达，从而抑制脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭能力。

目的:分析长链非编码RNA（LncRNA）浆细胞瘤变异易位基因1（PVT1）通过靶基因调控乳腺癌细胞分化、增殖、侵袭和迁移的机制及临床意义。方法:2018年1月至2019年12月采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测乳腺癌细胞株MCF-7和正常乳腺上皮细胞株MCF-10A LncRNA PVT1、微小RNA（miR）-1207-5p表达水平；转染PVT1过表达质粒、PVT1慢性干扰质粒和阴性对照质粒至人乳腺癌细胞，检测转染后PVT1和miR-1207-5p表达水平；CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各转染乳腺癌细胞的增殖分化、迁移、侵袭能力；qRT-PCR和Western blotting法检测转染miR-1207-5p后信号传导及转录激活蛋白6（STAT6）和P21 mRNA和蛋白表达水平。结果:乳腺癌细胞PVT1和miR-1207-5p表达水平均明显高于正常乳腺上皮细胞（1.271 ± 0.305比0.023 ± 0.006和1.679 ± 0.347比0.031 ± 0.009），差异有统计学意义（ P<0.01）。转染PVT1过表达质粒乳腺癌细胞PVT1和miR-1207-5p表达水平明显高于转染阴性对照质粒和PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞（2.357 ± 0.271比1.000 ± 0.000和0.103 ± 0.021、3.265 ± 0.375比1.000 ± 0.000和0.265 ± 0.024），转染阴性对照质粒乳腺癌细胞明显高于转染PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，差异均有统计学意义（ P<0.05）。转染PVT1过表达质粒后48、72、96和168 h乳腺癌细胞增殖能力明显高于转染阴性对照质粒和PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，转染阴性对照质粒乳腺癌细胞增殖能力明显高于转染PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，差异均有统计学意义（ P<0.05）。转染PVT1过表达质粒后24 h乳腺癌细胞迁移能力和侵袭能力明显高于转染阴性对照质粒和PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，转染阴性对照质粒乳腺癌细胞迁移能力明显高于转染PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，差异均有统计学意义（ P<0.05）。转染miR-1207-5p过表达物后STAT6和P21 mRNA均明显低于转染模拟对照物（0.476 ± 0.102比1.000 ± 0.000和0.429 ± 0.097比1.132 ± 0.236），差异有统计学意义（ P<0.01）；转染miR-1207-5p过表达物后STAT6和P21蛋白明显低于转染模拟对照物（0.396 ± 0.104比1.062 ± 0.002和0.434 ± 0.067比1.141 ± 0.218），差异有统计学意义（ P<0.01）。 结论:LncRNA PVT1可能为miR-1207-5p调控的宿主基因，协同通过调控靶基因STAT6影响乳腺癌细胞增殖、分化、侵袭及转移，抑制该基因转录可能为乳腺癌治疗的研究新方向。

目的 探究血清长链非编码RNA INK4位点反义非编码RNA(lncRNA ANRIL)、长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)水平与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿病情及预后的关系.方法 选取124例确诊的ARDS患儿为患病组,另选取124例同期体检健康者为对照组.ARDS患儿根据病情严重程度分为重度组(34例)、中度组(42例)和轻度组(48例);ARDS患儿根据预后情况分为预后不良组(55例)和预后良好组(69例).采用荧光定量聚合酶链反应测定血清中lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平.采用Logistic回归分析法分析ARDS患儿发生预后不良的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平对ARDS患儿发生预后不良的预测价值.结果 患病组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).轻度组、中度组和重度组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平随病情严重程度升高(P＜0.05).预后不良组的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平、氧合指数(OI)、呼吸频率、急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分高于预后良好组,差异有统计学意义(P＜0.05);OI、呼吸频率、lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1为患儿发生预后不良的影响因素(P＜0.05).血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平预测ARDS患儿发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.827、0.737,截断值分别是11.35、4.36,二者联合预测的AUC为0.876.二者联合预测的AUC优于血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT 1水平单独预测(P＜0.05).结论 ARDS患儿的血清lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1水平均上调,且lncRNA ANRIL、lncRNA PVT1为患儿发生预后不良的影响因素,二者联合预测的价值较高.

目的 研究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)对肺癌细胞增殖、凋亡及自噬的影响,并探讨其机制.方法 运用qRT-PCR检测人肺癌细胞A549、人正常肺上皮细胞BEAS-2B中LncRNA PVT1、微RNA(miR)-140-5p的表达;将A549细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-PVT1组(转染si-PVT1)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-140-5p组(转染miR-140-5p mimics)、si-PVT1+anti-miR-NC组(si-PVT1和anti-miR-NC共转染)、si-PVT1+anti-miR-140-5p组(si-PVT1和anti-miR-140-5p共转染),均以脂质体法转染;MTT法检测各组细胞的增殖;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;免疫印迹检测各组细胞中LC3 Ⅱ和Ⅰ的蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性.结果 与BEAS-2B细胞相比,A549细胞中PVT1表达升高(1.73±0.14比0.86±0.08,P＜0.05),miR-140-5p表达降低(0.43±0.04比1.06±0.12,P＜0.05);与si-NC组相比,si-PVT1组A549细胞中PVT1表达降低(P＜0.05),细胞抑制率和凋亡率均升高(均P＜0.05),LC3 Ⅱ蛋白表达降低(P＜0.05),LC3 Ⅰ蛋白表达升高(P＜0.05),LC3 Ⅱ/Ⅰ表达降低(P＜0.05).与miR-NC组相比,miR-140-5p组A549细胞中miR-140-5p表达升高(P＜0.05),细胞抑制率和凋亡率升高(均P＜0.05),LC3Ⅱ蛋白表达降低(P＜0.05),LC3Ⅰ蛋白表达升高(P＜0.05),LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低(P＜0.05).PVT1靶向miR-140-5p.与si-PVT1 +anti-miR-NC组相比,si-PVT1 +anti-miR-140-5p组A549细胞中细胞抑制率和凋亡率降低(均P＜0.05),LC3Ⅱ蛋白表达降低(P＜0.05),LC3 Ⅰ蛋白表达升高(P＜0.05),LC3 Ⅱ/Ⅰ表达降低(P＜0.05),抑制miR-140-5p可逆转敲减PVT1对A549细胞增殖、凋亡及自噬的作用.结论 PVT1可促进肺癌细胞的增殖和自噬,抑制凋亡,其机制可能与靶向miR-140-5p有关,将可为肺癌的靶向治疗提供依据.

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白编码RNA,参与多种生物学过程,如增殖、凋亡、耐药、迁移和侵袭.最近,越来越多研究表明lncRNA在癌症中发挥着致癌基因的作用.本文聚焦于浆细胞瘤变异易位基因1(PVT1),它在多种肿瘤组织和细胞系中高表达,包括肺癌、胃癌、结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌等.此外,lncRNA PVT1的高表达与临床病理学特征和癌症进展相关.本文对lncRNA PVT1在肿瘤中的表达形式、所发挥的生物学功能及其分子机制作一概述.

目的 探讨增生型糖尿病视网膜病变(PDR)患眼玻璃体、增生膜中长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)、微小RNA-26b(miR-26b)表达水平及意义.方法 选取2016年3月至2019年3月本院收治的单眼发病的糖尿病视网膜病变(DR)患者58例为研究对象(PDR组),另选取同期因特发性黄斑裂孔行玻璃体切除术患者35例作为对照组.采用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测玻璃体和膜组织中lncRNA PVT1、miR-26b、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平,并使用全自动生化分析仪检测血清常规指标.结果 PDR组血清空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平明显高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于对照组(P<0.05).PDR组患眼玻璃体和膜组织中lncRNA PVT1、VEGF mRNA表达水平明显高于对照组,miR-26b表达水平明显低于对照组(P<0.05).PDR组患眼玻璃体和增生膜中lncRNA PVT1表达水平与miR-26b、患者血清HDL-C表达水平呈负相关(P<0.05),与患者血清FBG、HbA1c、VEGF mRNA呈正相关(P<0.05).PDR患眼玻璃体和增生膜中miR-26b表达水平均与患者血清FBG、HbA1c、VEGF mRNA呈负相关,与患者血清HDL-C呈正相关(P<0.05).结论 PDR患眼玻璃体和增生膜中lncRNA PVT1水平显著升高、miR-26b水平显著降低,二者之间可能存在相互作用,共同影响PDR进展.

目的 探究支气管哮喘患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1)表达与气道炎症、重塑的相关性.方法 选取2019年5月至2020年5月安康市人民医院呼吸科收治的80例支气管哮喘患者作为研究对象,将入组患者分为急性发作期组43例和慢性持续期组37例.另选取同期在本院体检显示健康者78例作为对照组.采用实时荧光定量(qRT-PCR)法检测所有入组者血清LncRNA PVT1表达水平,常规检测入组者气道炎症、气道重塑和肺功能指标水平,采用Pearson法进行相关性分析.结果 急性发作期组患者哮喘控制测试(ACT)评分明显低于慢性持续期组患者,差异有统计学意义(P<0.05).血清lncRNA PVT1、气道炎症指标白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子-β(TGF-β)、免疫球蛋白E(IgE)、外周血嗜酸性粒细胞计数(EOS)及气道重塑指标支气管厚度(T/D)、管壁面积占支气道总横截面积百分比(WA％)由高至低依次为急性发作期组、慢性持续期组、对照组;肺功能指标第一秒用力呼气量(FEV1)、一秒率预计值(FEV1％)、最高呼吸气流(PEF)水平由高至低依次为对照组、慢性持续期组、急性发作期组,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).急性发作期组和慢性持续期组患者的血清lncRNA PVT1水平均与IL-6、TGF-β、T/D、WA％水平呈正相关(P<0.05),与FEV1、FEV1％水平呈负相关(P<0.05).结论 支气管哮喘患者血清lncRNA PVT1表达水平显著升高,与气道炎症、气道重塑和肺功能指标变化有关,可作为生物标志物用于临床支气管哮喘患者病情评估和治疗方案确定.

目的 探讨长链非编码RNA-浆细胞瘤变异易位基因1/蛋白质酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子3(lnc-PVT1/JAK/STAT3)信号通路参与肺纤维化的作用机制.方法 采用不同浓度脂多糖(LPS)作用于人正常肺上皮细胞BEAS-2B,用CCK-8法检测细胞活性、蛋白免疫印迹法检测α-SMA的蛋白相对表达量,对LPS药物浓度进行筛选,选取LPS刺激后最适浓度的BEAS-2B建立肺纤维化体外模型;体外合成针对lnc-PVT1的3个小干扰RNA(siRNA)抑制靶点及对照siRNA,瞬时转染到BEAS-2B,用定量逆转录PCR(RT-qPCR)验证lnc-PVT1的表达,选取有效抑制靶点用于后续研究.实验分为空白对照(Con)组、LPS组、LPS+siRNA对照(LPS+siNC)组和LPS+siPVT1组.瞬时转染siPVT1及siRNA对照进入BEAS-2B后,用10μg/mL LPS刺激24 h,用CCK-8法检测细胞活力,划痕检测细胞迁移,RT-qPCR检测lnc-PVT1 mRNA相对表达量,ELISA检测细胞上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α含量,蛋白免疫印迹法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、STAT3和p-STAT3蛋白表达.结果 与Con组相比,10μg/mL LPS处理BEAS-2B细胞后细胞增殖能力增强,α-SMA蛋白相对表达量也上调(P均<0.01);与LPS组相比,敲低lnc-PVT1可抑制LPS诱导的BEAS-2B细胞增殖和细胞迁移(P均<0.01),降低IL-6、IL-1β和TNF-α等炎症因子的含量(P均<0.01),降低α-SMA的mRNA和蛋白表达及磷酸化STAT3蛋白相对表达量(P均<0.01),而STAT3蛋白相对表达量无明显变化(P>0.05).结论 敲低lnc-PVT1可改善LPS诱导的BEAS-2B细胞纤维化过程,可能与lnc-PVT1调控JAK/STAT3信号通路有关.

背景:作者所在课题组前期通过高通量测序结果发现长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1在盆腔器官脱垂患者子宫主韧带中表达明显降低,转化生长因子β1信号通路也是相关通路之一.目的:观察长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1对盆底韧带成纤维细胞的影响,探讨其在盆腔器官脱垂疾病发病机制中的可能作用.方法:提取大鼠盆底韧带组织标本,分离成纤维细胞,进行原代培养.慢病毒构建长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1干扰和过表达载体加入成纤维细胞中.通过免疫荧光、MTT、细胞划痕实验、流式细胞术来检测成纤维细胞的形态、增殖、迁移和凋亡情况;RT-PCR和Western-blot检测转化生长因子β1、smad2/3、c-Myc的mRNA及蛋白表达情况.结果 与结论:①长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1过表达时可显著促进成纤维细胞的增殖,提高细胞的迁移能力,抑制成纤维细胞凋亡;长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1干扰时结果相反;②此外,长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1过表达时细胞中的c-Myc、转化生长因子β1、smad2/3的mRNA和蛋白相对表达量均明显增加,其干扰时则显著抑制c-Myc和转化生长因子β1的表达;③提示长链非编码RNA浆细胞瘤变异性易位基因1能够影响成纤维细胞的形态和生物学功能,可能与转化生长因子β1/smad2/3/c-Myc通路有关;该研究可为盆腔器官脱垂患者的临床诊断和治疗提供新思路.

目的 探讨长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位基因1(lncRNA PVT1),微小RNA-181-5p(miR-181-5p)在支气管哮喘患儿中的表达及与气道炎症及肺功能的相关性.方法 选取2021年1月至2022年6月本院收治的118例支气管哮喘患儿为研究对象,其中急性发作期组71例,缓解期组47例.同期选取年龄、性别相匹配的50例健康体检者为对照组.收集一般资料,使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测患儿血清lncRNA PVT1、miR-181-5p水平.Pearson法分析lncRNA PVT1、miR-181-5p与气道炎症及肺功能指标的相关性,采用ROC曲线分析血清lncRNA PVT1、miR-181-5p对支气管哮喘患儿的诊断价值.结果 急性发作期患儿血清中lncRNAPVT1表达水平高于缓解期患儿及对照组,miR-181-5p表达水平低于缓解期患儿及对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);急性发作期患儿血清中hs-CRP、TNF-β、IFN-γ、IL-6、IL-17、IgE、EOS水平均高于缓解期患儿及对照组,FEV1、FEV1％、PEF水平低于缓解期患儿及对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);Pearson法分析结果显示,支气管哮喘患儿血清中lncRNA PVT1与miR-181-5p表达呈负相关(r=-0.528,P＜0.05);支气管哮喘患儿血清 lncRNA PVT1 水平与 hs-CRP、TNF-β、IFN-γ、IL-6、IL-17、IgE、EOS 表达呈正相关(P＜0.05),与 FEV1、FEV1％、PEF 呈负相关(P＜0.05);血清 miR-181-5p 水平与 hs-CRP、TNF-β、IFN-γ、IL-6、IL-17、IgE、EOS 表达呈负相关(P＜0.05),与 FEV1、FEV1％、PEF正相关(P＜0.05);ROC 曲线结果显示,血清 lncRNA PVT1、miR-181-5p 水平诊断支气管哮喘患儿的AUC分别为0.885、0.896,二者联合诊断的AUC为0.947,高于单一指标检测,差异具有统计学意义(Z=2.264,P=0.024,Z=2.413,P=0.016).结论 lncRNA PVT1在支气管哮喘患儿血清中呈高表达,miR-181-5p呈低表达,二者与患儿气道炎症及肺功能密切相关.