目的:探究知柏地黄丸(Zhibai Dihuang Granule;ZDG)对阴虚"上火"证血清抗炎凝血蛋白的影响.方法:通过腹腔注射三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronine;T3)处理SD大鼠建立阴虚模型.在该模型基础上往大鼠牙龈出滴加牙龈卟啉单胞菌叠加口腔牙龈炎模型,建立阴虚"上火"证大鼠模型.用滋阴降火药知柏地黄丸对大鼠进行治疗,以iTRAQ-2DLC-MS/MS蛋白组学技术与生物信息学手段分析治疗前后阴虚"上火"大鼠血清差异性蛋白表达谱,探索知柏地黄丸治疗阴虚"上火"的生物学机制.结果:知柏地黄丸观察组大鼠血清凝溶胶蛋白(Gsn)、纤溶酶原(Plg)、纤维蛋白原α链(Fga)、胸腺素β4(Tmsb4x)比值显著上调(Fold Change>1.25);胶原蛋白α2-I型链(Col1a2)比值显著下调(Fold Change<0.8).Gsn是机动蛋白丝的切割蛋白,参与细胞凋亡、清除损伤组织、调节炎性介质等生物学功能;Plg是血液纤维蛋白水解酶无活性的前体,参与机体纤溶、细胞迁移、细胞外基质降解等多种生物过程;Fga是由肝脏合成的纤维蛋白前体,能在内源凝血因子或外源组织因子作用下生成纤维蛋白,参与机体的凝血过程;Colla2是由肝、巨核细胞合成的凝血蛋白酶,是活化Fga的凝血稳定因子,Fga在Colla2的作用下参与完成凝血过程;T-β4是由胸腺产生的淋巴生长因子,具有通过抑制巨噬细胞的迁移、增强抗原提呈细胞功能、抑制炎性因子、促进组织重塑、血管生成和伤口愈合修复等生物学功能.结论:知柏地黄丸通过对Gsn、Plg、Fga、Colla2、T-β4水平的调节,清除损伤组织,释放肌动蛋白、细菌脂多糖,抑制细胞凋亡作用;并且可以调节炎性因子,改变炎性反应部位血液流变动力学障碍,促进炎性反应损伤的愈合的作用.

目的:通过对"上火"人群中细胞因子激活素A(ActivinA)及E选择素(E-selectin)血清含量的测定以及外周血单个核细胞基因表达水平检测,探讨激活素A及E选择素在"上火"人群发病机制的影响和作用.方法:采集临床患者血液样本并提取血清及外周血单个核细胞.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中激活素A及E选择素的含量,应用RT-PCR法检测激活素A及E选择素的基因表达水平.结果:"上火"患者血清中activinA、E-selectin的水平以及外周血单个核细胞activinA、E-selectin基因表达水平高于正常平和质人群;观察组外周血中activinA、E-selectin的基因表达水平高于阴虚"上火"人群.结论:"上火"是一种局部的炎性反应,机体内环境在多种因素的作用下激活素A水平升高,影响炎性反应介质的作用或者本身作为一种炎性反应介质活化血管内皮细胞刺激E选择素的分泌与合成,诱导炎性反应,这是"上火"机制之一.

目的:研究知柏地黄丸治疗阴虚"上火"的生物学机制.方法:应用iTRAQ-2DLC-MS/MS蛋白组学技术检测阴虚"上火"大鼠在知柏地黄丸治疗前后的血清蛋白组学表达谱,筛选并鉴定与知柏地黄丸治疗作用相关的蛋白质群,并应用生物信息学对差异表达的蛋白进行功能富集分析,揭示知柏地黄丸对阴虚"上火"治疗作用的生物学机制.结果:与正常大鼠比较,阴虚"上火"对照组大鼠血清中有47个差异蛋白,其中有20个表达上调,27个表达下调.知柏地黄丸治疗后,有19个差异蛋白恢复至正常或接近正常水平.通过生物信息学分析,发现这些蛋白主要集中在免疫反应与物质代谢过程.其中参与免疫反应的蛋白主要有有补体成分4(C4)、凝血因子X(F10)、激酶相关磷蛋白2(Skap2);参与代谢作用的蛋白有L乳酸脱氢酶A链(Ldha)、果糖二磷酸醛缩酶A(Aldoa)、花生四烯酸脂肪氧合酶(Alox12)、GDP分解酶抑制剂1(Arhgdia)、肌球蛋白轻链(Myl6).结论:阴虚"上火"主要表现为机体免疫反应与物质代谢发生紊乱,知柏地黄丸可以通过调节免疫与物质代谢反应治疗阴虚"上火".

[目的]寻找阴虚上火的新型诊断标志物,深化对阴虚上火的认识.[方法]对34例受试者血清样本的临床资料进行统计分析,运用ELISA法检测血清单核细胞分化抗原(monocyte differentiation antigen)CD14、激肽原-1(Kininogen-1,KNG-1)、载脂蛋白B(apolipoprotein B-100,APOB)和载脂蛋白A2(apolipoprotein A2,APOA2)的浓度,并运用ROC曲线对上述蛋白诊断上火的效果进行评估.[结果]阴虚上火患者CD14与KNG-1显著上调,APOB与APOA2显著下调,与健康对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.001,P<0.05,P<0.05,P<0.01).将CD14、APOA2、KNG-1进行组合构建诊断模型,ROC曲线显示组合物的曲线下面积(area under curve,AUC)值为0.934,敏感度和特异度分别为100％和71.40％,具有较好的准确性.[结论]阴虚上火与能量代谢、炎症反应密切相关.CD14、APOA2、KNG-1的组合可作为临床诊断阴虚上火的潜在的生物学标志物,有助于中医疾病诊断的客观化.

目的:探讨复发性唇疱疹实热“上火”患者Th17、Treg、CD8、CD19细胞含量及Th17、Treg相关细胞因子变化,从免疫学角度探讨复发性唇疱疹实热“上火”发病机制,为该病防治提供理论基础.方法:临床上收集复发性唇疱疹实热“上火”患者28例和非疱疹人46例(正常平和质26例、非复发性疱疹阴虚和非复发性疱疹实热型10例),采用流式细胞检测仪检测外周血Th17、Treg、CD8、CD19细胞含量;采用Elisa法检测血浆中IL-4、TGF-β、IL-2、IL-10、IL-17A和GM-CSF细胞因子含量.结果:与正常平和质人相比,RHL实热患者外周血淋巴细胞中Th17细胞、CD4+ CD25+ Treg细胞、Foxp3+ Treg细胞含量显著升高(P＜0.05);IL-2、IL-10和TGF-β含量显著升高(P＜0.05).与非复发性疱疹阴虚人相比,RHL实热患者Th17细胞和记忆B细胞(CD19+)含量显著升高(P＜0.05),非复发性疱疹实热患者血浆TGF-β显著上升(P＜0.05).与非复发性疱疹实热型相比,检测指标无统计学差异.非复发性疱疹实热外周血B细胞(CD19+)细胞含量显著高于非复发性疱疹阴虚人(P＜0.05).结论:复发性唇疱疹实热“上火”患者可能与免疫功能紊乱密切相关.

目的:筛选阴虚上火人群血清差异表达蛋白,探讨阴虚上火的现代生物学基础,为上火机制的深入研究提供科学依据.方法:应用iTRAQ技术检测血清蛋白质,结合GO、KEGG及STRING等方法筛选血清差异蛋白,采用ELISA进行验证.结果:载脂蛋白C3(APOC3)、锌α2糖蛋白(ZA2G)和C-反应蛋白(CRP)等14个蛋白显著上调(P<0.05),而凝溶胶蛋白(GELS)、凝血酶原(THRB)、抗凝血酶-Ⅲ(ANT3)及血小板糖蛋白V(GPV)等25个蛋白显著下调(P<0.05).APOC3、ZA2G和GELS蛋白变化与iTRAQ鉴定结果相符.结论:血清APOC3、ZA2G和GELS可作为阴虚上火人群潜在的生物标志物.

当归六黄汤出自《兰室秘藏》,书中称其为“盗汗之圣药”,药物组成有当归、黄芪、黄芩、黄连、黄柏、生地黄、熟地黄.《医宗金鉴·删补名医方论》指出该方“用当归以养液,二地以滋阴,令阴液得其养也.用黄芩泻上焦火,黄连泻中焦火,黄柏泻下焦火,令三火得其平也.又于诸寒药中加黄芪,庸者不知,以为赘品,且谓阳盛者不宜,抑知其妙义正在于斯!盖阳争于阴,汗出营虚,则卫亦随之而虚.故倍加黄芪者,一以完已虚之表,一以固未定之阴.”[1]笔者根据该方药物组成及多年应用体会,认为当归六黄汤证的基本病机为阴虚火旺,壮火食气,卫外不固,使用指征为口干苦、喜凉饮、大便干、易上火、舌红、脉滑或滑数,常有阴虚之隐性病机,气虚症状并非必具之征.笔者在临床中除了将该方用于盗汗外,还用于不寐、闭经、鼻鼽等病症的治疗,兹介绍如下.

目的:探讨AMPK-PGC-1α信号通路及氧化应激在“上火”动物模型中的作用.方法:用干姜附子肉桂水煎液灌胃构建阴虚动物模型,用党参黄芪水煎液灌胃构建实热动物模型,21d后氢氧化钠晶体灼烧法叠加口腔溃疡模型.记录大鼠体质量、肛温、溃疡愈合等情况;检测血浆中SOD活力和GSH、MDA含量;分别检测肝脏中AMPK、PGC-1α mRNA和蛋白表达水平;HE染色观察口腔黏膜病理学改变.结果:与正常对照组比较,模型组GSH浓度显著升高(P＜0.01),阴虚溃疡组浓度显著高于模型组和实热溃疡组(P＜0.01);与正常对照组比较,模型组SOD活力显著降低(P＜0.01),阴虚溃疡组显著低于模型组和实热溃疡组(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,阴虚溃疡组与实热溃疡组AMPK及PGC-1α基因表达显著下调(P＜0.01),且实热溃疡组表达较阴虚溃疡组显著下调(P＜0.01),阴虚溃疡组与实热溃疡组AMPK及PGC-1α蛋白表达呈下调趋势,但差异无统计学意义.与阴虚溃疡组比较,实热溃疡组AMPK蛋白表达显著升高(P＜0.01).与正常对照组比较,各组大鼠口腔黏膜组织均发生表皮脱落、萎缩和炎性细胞浸润.结论:“上火”动物模型中存在氧化应激损伤,且实热溃疡模型损伤程度重于阴虚溃疡模型;“上火”动物模型中AMPK-PGC-1α信号通路受到抑制,可能是不同“上火”状态出现抗氧化能力差异的原因之一.

枸杞子是临床上及日常生活中较为常用的药食同源类养阴药,但并非所有人都适宜服用.根据互联网医疗类平台提供的相关数据,在实际生活及临床应用中,人们少量服用枸杞子不会出现问题,但若过量或久服,会有部分人出现上火症状,主要表现为口舌生疮、牙龈肿痛、舌红、苔黄、咽痛、小便黄赤、大便秘结等.从而导致临床医生对枸杞子的药性辨识不清,影响治疗效果.笔者通过溯源研究,针对枸杞的古今用药部位、枸杞子色味及生长环境、古语释义等易于造成药性歧义的诸多方面,进行辨证分析,最终得出枸杞子药性为甘平,最适宜于阴阳两虚型患者服用,对于阴阳平衡、阳气不衰或阴虚有热者均应慎服的结论.

目的:研究广西地区人群的体质特征,并将患者所罹患疾病以五行进行分类,探讨其与体质及出生时五运六气各成分之间的相关性.方法:采用横断面调查方法,利用SPSS 23.0软件对所纳入的646例患者的信息采用频次分析、x2检验及Logistic回归等方法进行统计分析.结果:患者中单纯体质者较少,复合体质者居多,分布频次居前3位的复合体质类型为:气虚质+阳虚质+痰湿质+血瘀质+气郁质、气虚质+阳虚质+血瘀质+气郁质及气虚质+阳虚质+血瘀质.所患疾病涉及各行数患者人数由多到少分别为三行＞四行＞二行＞五行＞一行;五行疾病患者人数由多到少分别为水系疾病＞木系疾病＞土系疾病＞金系疾病＞火系疾病.与"木系疾病"相关的因素有血瘀质、特禀质、出生客气为阳明燥金、性别、年龄、职业、体型、睡眠状况、小便情况等;与"火系疾病"相关的因素有平和质、血瘀质、年龄、婚姻状况,家族史、舌边齿痕等;与"土系疾病"相关的因素有特禀质、出生主气为太阳寒水及少阴君火、性别、年龄、家族史、饮食情况、睡眠状况、居住空间变化等;与"金系疾病"相关的因素有痰湿质、气郁质、特禀质、性别、职业、过敏史、饮酒史、大便情况、口干状况等;与"水系疾病"相关的因素有血瘀质、性别、年龄、睡眠浅、大便情况、上火情况等.阴虚体质与出生时大运为火运太过、木运太过及金运太过有关,血瘀体质与出生时主气相关,复合体质与出生时大运为木运太过相关.结论:广西地区人群的体质以复合体质为主,其中医体质的形成及五行疾病的罹患与多种因素相关,且出生时五运六气格局状态是一个比较重要的时间性因素,值得深入研究.