酸性鞘磷脂酶缺乏症(ASMD)又称为A型及B型尼曼匹克病，是一组由于鞘磷脂磷酸二酯酶-1(SMPD1)基因突变使酸性鞘磷脂酶活性下降甚至缺失，从而导致鞘磷脂异常沉积的溶酶体内脂质贮积病。本病可通过骨髓穿刺、病理活检、酸性鞘磷脂酶活性测定及SMPD1基因检测等检查手段确诊。近年来随着分子诊断技术的快速进展，对ASMD分子遗传学检测手段、生物标志物及酸性鞘磷脂酶活性测定等实验室诊断方面有了新的认识。本文将对ASMD的诊断进展作一综述，旨在减少该病误诊漏诊，提高临床医生对该病的认识。

目的:通过构建胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型，利用非靶向代谢组学的研究方法，探讨甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:采用ELISA测定血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10的含量，苏木精-伊红（HE）染色及Masson染色观察各组大鼠关节组织学改变，非靶向气相色谱-质谱代谢组学技术筛查血清差异代谢物表达谱并进行聚类分析和KEGG富集分析，筛查出差异性代谢途径，并采用实时定量聚合酶链反应对差异性代谢途径中的关键酶进行检测。将所有符合正态分布的实验数据，采用单因素方差分析比较组间差异，以 P<0.05表示差异具有统计学意义。 结果:甲氨蝶呤（MTX）可明显改善CIA大鼠的关节炎症反应和关节炎评分（ P<0.05），增加CIA大鼠的体质量（ P<0.05）。HE和Masson染色结果显示MTX可改善CIA大鼠滑膜组织对关节软骨的侵蚀。ELISA结果显示MTX可显著降低CIA大鼠血清中TNF-α[（191.2±17.4）pg/ml， F=40.31， P<0.001]、IL-1β[（28.4±1.2）pg/ml， F=10.11， P=0.012]和IL-6[（118.7±1.4）pg/ml， F=829.40， P<0.001]的含量，提高血清中IL-4[（49.3±3.3）pg/ml， F=33.44， P<0.001]和IL-10[（30.2±0.7）pg/ml， F=33.44， P<0.001]的含量。非靶向代谢组学结果显示MTX对CIA大鼠血清中的磷酸胆碱、棕榈酸、油酸、胆碱等代谢产物有影响。KEGG通路富集分析结果显示MTX对CIA大鼠的甘油磷脂代谢（ P<0.01）和鞘脂代谢（ P<0.05）有影响。实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）结果显示MTX可下调CIA大鼠关节滑膜甘油磷脂代谢途径中关键酶磷脂酶B1（Plb1）[（1.00±0.49）， F=8.23， P=0.019]、甘油磷胆碱磷酸二酯酶（Gpcpd1）[（1.10±0.09）， F=8.19， P=0.019]、胆碱激酶α（Chka）[（1.33±0.19）， F=33.00， P<0.001]，胆碱激酶β（Chkb）[（2.07±1.21）， F=8.20， P=0.019]和磷酸乙醇胺/磷酸胆碱磷酸酶1（Phospho1）[（1.07±0.14）， F=13.58， P=0.006）的表达水平，也可下调鞘脂代谢途径中关键酶3-酮二氢鞘氨醇还原酶（Kdsr）[（1.24±0.32）， F=13.85， P=0.006]、磷脂磷酸酶（Plpp1）[（1.61±0.32）， F=11.95， P=0.003]和鞘脂去饱和酶1（Degs1）[（1.21±0.15）， F=46.55， P<0.001]的表达水平。 结论:MTX治疗RA的生物学机制可能与下调机体的甘油磷脂代谢和鞘脂代谢通路的代谢水平有关。

研究鳖甲煎丸对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠肝脂质代谢的影响,探讨鳖甲煎丸调控NASH小鼠脂质代谢和炎症反应的作用机制.通过高脂高胆固醇饲料喂养C57BL/6 小鼠建立NASH模型,给予鳖甲煎丸干预,通过血清和肝脏生化指标及肝脏组织病理学检测评价鳖甲煎丸对NASH小鼠的治疗效果,应用UPLC-Q-TOF-MS技术检测肝脏的脂质代谢物,结合偏最小二乘法判别分析、t检验和受试者工作特征曲线分析筛选差异脂质和主要生物标志物;结合生物标志物结果,利用Western blot和qPCR检测脂质代谢及炎性相关分子.结果表明,鳖甲煎丸能显著降低NASH小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平和肝组织中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量,抑制肝脏脂滴堆积、肝细胞气球样变和纤维化病变;脂质代谢组学结果显示,鳖甲煎丸可调控磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl etha-nolamine,PE)、鞘磷脂(sphingomyelin,SM)、神经酰胺(ceramide,Cer)等NASH相关 11 种脂质标志物;Western blot和qPCR结果显示,鳖甲煎丸可调控固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phospho-AMP-activated pro-tein kinase,p-AMPK)等脂质代谢相关蛋白的表达,及脂肪酸转位酶36(fatty acid translocase 36,Cd36)、Pparγ、心磷脂合酶 1(car-diolipin synthase 1,Crls1)和磷脂酶Cβ2(phospholipase Cβ2,Plcβ2)mRNA水平;抑制磷酸化p38 丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶 1/2(phospho-extracellular signal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)和促炎因子 Il-6、Il-1β、Tnf-α mRNA 表达.综上所述,鳖甲煎丸可调节 PC、PE、SM、Cer 等脂类代谢,调控p-AMPK、SREBP1、PPARγ和Cd36、Crls1、Plcβ2 等脂质调控因子表达,改善脂质代谢紊乱,同时还能抑制MAPK信号通路和促炎因子mRNA水平,缓解炎症反应,发挥治疗NASH的作用.

目的:探讨咪康唑与纤维蛋白能否协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞.方法:培养并鉴定胎鼠神经球;通过MTr法确定不同浓度咪康唑对神经球存活的影响;将神经球按培养条件不同分为四组,对照组、咪康唑组(mico组)、纤维蛋白组(fibrin组)及纤维蛋白-咪康唑联用组(fibrin+ mico组),培养两周后以免疫荧光染色比较髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达;Western Blot法比较MBP、2'3’环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、整合素、细胞外调节蛋白激酶及其磷酸化(ERK、p-ERK)的表达.结果:(1)神经球阳性表达巢蛋白(nestin)和CD133:当咪康唑浓度低于或等于1.5 μmol/L时,神经球存活在各组之间不存在统计学差异(P＞0.05),但2.5 μmol/L组显著低于2 μmol/L组和1.5μmol/L组(P＜0.05).(2)免疫荧光结果显示:神经球分化所成的成髓鞘样细胞表达MBP阳性,呈多突起形态;fibrin组及mico组MBP相对荧光强度均高于对照组(P＜0.05),fibrin+ mico组神经球分化为网络状的成髓鞘样细胞团,其相对荧光强度高于其他组(P＜0.05).(3) Western Blot结果显示:fibrin+ mico组MBP及CNPase表达显著高于mico组和fibrin组(P＜0.05),fibrin+ mico组整合素表达及p-ERK/ERK显著高于mico组和fibrin组(P＜0.05),同时咪康唑及纤维蛋白对MBP、CNPase、整合素的表达及p-ERK/ERK的效应具有交互作用(P＜0.05).结论:咪康唑与纤维蛋白能协同促进神经球分化为成髓鞘样细胞,其机制可能与ERK磷酸化有关.

目的:观察保肾通络方治疗糖尿病肾脏病(Diabetic Kidney Disease,DKD)气阴两虚兼血瘀证患者的临床疗效和足细胞保护机制.方法:采用随机、安慰剂对照的试验设计方法,选取2017年1月～2019牟12月首都医科大学附属北京中医医院肾内科门诊及住院收治的80例DKD气阴两虚兼血瘀证患者.按随机数字表法分为治疗组和对照组,治疗组予基础治疗+保肾通络方颗粒,对照组予基础治疗+安慰剂颗粒.观察两组患者治疗前后尿白蛋白/肌酐(Urinary Albumin/Creatinine Ratio,UACR)、血肌酐(Scr)、白蛋白(ALB)、尿Nephrin和血清转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein-7,BMP-7)和酸性鞘磷脂酶样磷酸二酯酶3b (Acid Sphingomyelinase-like Phosphodiesterase 3b,SMPDL3b)的水平,并采用SPSS20.0进行统计学分析.结果:与本组疗前比较,治疗组疗后UACR明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05);对照组疗后UACR下降,但差异无统计学意义(P＞0.05);两组疗后比较,治疗组UACR低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组治疗前后Scr和ALB差异无统计学意义(P＞0.05).与本组疗前比较,治疗组疗后尿液中Nephrin、血清TGF-β1和SMPDL3b水平下降,血清BMP-7水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);对照组治疗前后对比差异均无统计学意义(P＞0.05);两组疗后比较,治疗组尿液中Nephrin、血清TGF-β1和SMPDL3b水平低于对照组,血清BMP-7水平高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).治疗组中医证候有效率高于对照组,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论:保肾通络方对DKD患者具有较好的改善中医证候、减少蛋白尿的临床效果,其机制可能与下调TGF-β1和SMPDL3b、上调BMP-7水平,减少尿Nephrin排泄,从而发挥对足细胞的多靶点保护作用有关.

酸性鞘磷脂酶(ASMase)不仅介导溶酶体代谢,参与膜结构的调节和信号转导,而且对鞘磷脂转化为神经酰胺起关键作用.ASMase由鞘磷脂磷酸二酯酶1(SMPD1)基因编码.最近有研究显示SMPD1及ASMase与神经退行性疾病如帕金森病的发病和进展相关.该文就SMPD1及ASMase与帕金森病的相关研究进行介绍,以供同行们参考.

目的 探讨过表达骨形态发生蛋白(BMP)-2对骨折大鼠的骨愈合和成骨能力的影响及其可能机制.方法 将60只SD大鼠随机分为模型组、BMP-2过表达的阴性质粒组(pcDNA/NC组)和BMP-2过表达质粒组(pcDNA/BMP-2组),各20只.每组均通过横行切断大鼠股骨中段建立大鼠骨折模型.造模24 h后,给予模型组、pcDNA/NC组、cDNA/BMP-2组大鼠经尾静脉分别注射磷酸缓冲盐溶液、BMP-2过表达的阴性质粒溶液、BMP-2过表达质粒溶液.49 d后,处死所有大鼠,X线片观察各组大鼠骨折线的变化及达到骨性愈合的时间;micro-CT检测各组大鼠的骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁密度(Tb.Th)和骨小梁数量(Tb.N);蕃红O染色后观察各组大鼠股骨组织病理变化;检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10和ALP水平,以及骨组织BMP-2、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、鞘磷脂磷酸二酯酶(Smpd)3、Smad1和Runx2蛋白的表达情况.结果 pcDNA/BMP-2组大鼠在第7周时骨折完全愈合.与其他两组比较,pcDNA/BMP-2组骨密度、BV/TV、Tb.Th和Tb.N均升高,血清IL-6、TNF-α水平均下降,血清IL-10水平及ALP活性升高,骨组织BMP2、Smad1、Runx2、p38 MAPK和Smpd3的蛋白表达水平均升高(均P<0.05).结论 过表达BMP-2可加快大鼠骨折愈合,这可能与BMP-2降低炎症因子的表达,上调Smad1和Runx2的表达以促进骨细胞中胶原蛋白的形成,以及通过p38 MAPK调节Smpd3的表达有关.

目的 基于血清脂质组学研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的脂质代谢特征.方法 将2020年1月至2021年1月上海市普陀区中心医院30例NAFLD患者和30名正常人群纳入研究.采用UPLC-Q-Orbitrap/MS对两组人群血清进行脂质组学分析,使用主成分分析法和正交偏最小二乘法判别分析对数据进行多维统计分析,以VIP值>1、P<0.05的代谢物为差异性脂质生物标志物.结果 两组体重指数,碱性磷酸酶、总蛋白、胆碱酯酶、尿素、甘油三酯比较,差异有统计学意义(P<0.05).两组年龄、性别、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、γ-谷酰胺转肽酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆汁酸、肌酐、尿酸、肾小球滤过率、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇比较,差异无统计学意义P>0.05).共筛选出181个差异性脂质生物标志物,包括甘油三酯、甘油二酯、鞘磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺、O-酰基-ω-羟基脂肪酸、单硬脂酸甘油酯、溶血磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰甘油、溶血磷脂乙醇胺、溶血磷脂酰胆碱及神经酰胺等.结论 NAFLD患者的脂质代谢与正常人群有显著差异,本研究筛选出的181个脂质生物标志物可作为潜在的NAFLD的新靶标.

1914年Niemann首次报道了一组累及多器官系统的溶酶体内脂质贮积病(lysosoml storage disease,LSD),后于1927年Pick详细描述该病组织病理学形态.1961年,Crocker根据发病年龄、临床表现及组织器官中鞘磷脂(sph-ingomyelin,SM)含量,将尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease,NPD)分为A、B、C、D 4型[1].近年来随着分子诊断技术的快速发展,根据分子生物学的不同将NPD分为A、B、C3型.其中A型与B型都为不同类型酸性SM磷酸二酯酶1(sph-ingomyelin phosphodiesterase 1,SMPD1)基因突变导致的 SM异常沉积于网状内皮系统和中枢神经系统中的进行性多系统疾病,故合称为酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)缺乏症(ASM deficiency,ASMD).C 型 NPD(Niemann-Pick disease type C,NPC)是因2种不同的胆固醇结合蛋白(NPC1 和NPC2)基因突变,使大量游离胆固醇异常沉积于组织细胞内[2].D型已明确为NPCJ基因突变,不再作为独立类型.NPD累及器官广泛,临床表现多样,误诊、漏诊率高.为提高临床医师对NPD诊疗的认识,减少误诊,本文对A型及B型NPD病理机制、临床表现、治疗进展作一综述.