目的 探讨骨碎补(rhizoma drynariae,Rhd)对骨髓腔内脂肪异常积累引起的脂毒性介导成骨细胞焦亡的影响及其机制.方法 体内构建卵巢摘除(ovariectomy,OVX)骨质疏松小鼠模型,用Rhd进行灌胃,给药 8 周后称重,取股骨组织和血清.HE染色观察髓腔内脂肪堆积状态.体外构建成脂-成骨细胞共培养系统,茜素红S(alizarin red S,ARS)染色观察钙化结节的数量,碱性磷酸酶(alkaline phosphatease,ALP)染色检测碱性磷酸酶活性水平,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测和Hoechst33342/PI染色检测共培养下成骨细胞(osteoblasts,OBs)焦亡水平,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的释放量,Western blot检测成骨能力相关蛋白Runt相关转录因子 2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨形态发生蛋白 2(bone morphogenetic protein,BMP2)和 1 型胶原蛋白(collagen-1,COL-1).选择NLRP3 特异性抑制剂MCC950 作为阳性对照检测焦亡相关蛋白NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白 3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、半胱天冬酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,CASP-1)、效应蛋白消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β和IL-18 的表达.结果 OVX小鼠髓腔内发生骨质流失伴大量脂肪堆积,Rhd灌胃可以有效缓解这一趋势.在成脂-成骨共培养系统中,共培养环境抑制了OBs活性和OBs中ALP 活性及矿化结节,抑制了RUNX2、BMP2、COL-1 蛋白表达,并且诱导焦亡发生,提高了LDH释放量和PI染色细胞阳性率,以及上调NLRP3、CASP-1、GSDMD、IL-1β和IL-18 蛋白表达水平.而这一趋势在Rhd干预后得到逆转.结论 大量脂肪堆积引起的脂毒性可以抑制OBs活性并通过激活NLRP3 炎症小体诱导OBs焦亡,而Rhd可能通过抑制NLRP3 炎症小体的激活以抑制OBs焦亡和炎性反应,从而起到抗骨质疏松的作用.

目的:探讨骨碎补总黄酮(TFRD)对幼兔激素性股骨头缺血坏死病程及凋亡相关蛋白表达的影响及其可能机制。方法:动物实验研究。选用2月龄健康新西兰白兔110只，按随机数字表法分为对照组(10只)、模型组(50只)、TFRD组(50只)。模型组及TFRD组行双侧臀肌交替注射醋酸泼尼松龙注射液(7.5 mg/kg)，每周2次，对照组同部位同频次注射等体积生理盐水(0.3 mL/kg)；TFRD组于第1次注射醋酸泼尼松龙开始每天灌服TFRD溶液(35 mg/kg)，对照组及模型组每日灌服等体积生理盐水6 mL，连续8周。根据是否发病将模型组分为模型发病组及模型未发病组；将TFRD组分为TFRD发病组及TFRD未发病组。造模结束后，取双侧股骨头行病理学检查；酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组股骨头组织中磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导与转录激活因子3(P-STAT3)、细胞因子信号传导抑制蛋白3(SOCS3)及凋亡相关因子表达情况；实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、SOCS3相对表达情况。结果:模型组坏死发生率22.86%(8/35)；TFRD组坏死发生率15.79%(6/38)。微型计算机断层扫描技术示：与模型发病组比较，TFRD发病组骨体积分数和骨小梁厚度较高，骨小梁分离度较低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。病理染色示：TFRD未发病组较其他实验组骨小梁形态更完整、骨小梁周围可见成骨细胞、空骨陷窝更少，病理变化得到明显改善。ELISA显示：与模型发病组比较，TFRD发病组P-JAK2、P-STAT3、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)相关X蛋白、半胱氨酸蛋白酶3表达均下降，Bcl-2表达增高，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。qPCR示：与模型发病组比较，TFRD发病组JAK2、STAT3、SOCS3表达下调，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:TFRD可以经JAK2/STAT3/SOCS3通路抑制幼兔激素性股骨头缺血坏死骨组织中促凋亡因子表达，减缓幼兔激素性股骨头缺血坏死病程。

目的:研究骨碎补总黄酮对亚硝酸钠诱导的学习记忆障碍模型小鼠学习记忆的影响。方法:将75只小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、抗脑衰胶囊组、骨碎补总黄酮组和骨碎补总黄酮+抑制剂组，每组15只。抗脑衰胶囊组灌胃抗脑衰胶囊混悬液585 mg/kg；骨碎补总黄酮组灌胃骨碎补总黄酮溶液97.5 mg/kg；骨碎补总黄酮+抑制剂组腹腔注射0.072 mg/kg ICI182780溶液，并灌胃骨碎补总黄酮溶液97.5 mg/kg，连续给药21 d，1次/d。第22天进行造模，除空白组外，其余各组小鼠腹腔注射亚硝酸钠复制学习记忆障碍模型。采用水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力，免疫组织化学染色检测小鼠海马雌激素受体β（ERβ）表达，Western blot法检测海马中ERβ、磷酸化p38（P-P38）、Bcl-2、Bcl-2关联死亡启动子（Bcl2 antagonist of cell death，Bad）、Caspase-3蛋白表达，比色法检测海马MDA、SOD、NO水平。结果:与模型组比较，骨碎补总黄酮组小鼠潜伏期缩短（ P<0.01），穿越平台次数及靶象限停留时间增加（ P<0.01）；小鼠海马区ERβ［（0.371±0.010）比（0.124±0.009）］、Bcl-2［（1.146±0.028）比（0.726±0.016）］蛋白表达及SOD［（153.657±6.385）U/mg比（67.719±5.845）U/mg］活性增加（ P<0.01）；P-P38/P38［（0.412±0.043）比（0.806±0.069）］、Bad［（0.421±0.010）比（0.633±0.010）］、Caspase-3［（0.923±0.042）比（1.437±0.033）］蛋白表达及MDA［（8.669±0.662）nmol/mg比（11.772±1.054）nmol/mg］、NO［（4.259±0.225）nmol/mg比（10.805±0.415）nmol/mg］水平降低（ P<0.01）。ER阻断剂可拮抗骨碎补总黄酮的恢复和改善作用。 结论:骨碎补总黄酮可通过雌激素受体-P38丝裂原激活的蛋白激酶（ER-P38/MAPK）信号通路调节亚硝酸钠模型小鼠的学习记忆功能，抑制神经细胞凋亡，减少氧化应激损伤，从而发挥神经保护作用。

研究发现Runx2在骨质疏松症(osteoporosis,OP)的发生发展过程中起到重要作用.Runx2通过结合特定的DNA序列来调节许多基因的转录,与骨代谢的关系密切,可通过多个信号通路、细胞因子、激素等对成骨细胞、软骨细胞、破骨细胞等具有调控作用.近年来,中医药在防治骨质疏松方面的研究越来越多,许多学者发现在骨质疏松症的治疗中补肾类中药与Runx2因子存在明显的相关性,如单药中的淫羊藿、骨碎补、杜仲、鹿茸、补骨脂,复方中的六味地黄丸、左归丸、补肾活血汤、二仙汤、仙灵骨葆胶囊,可通过作用于不同的信号通路,如Wnt/β-catenin、BMPs、MAPK、PI3K/AKT、Hedgehog等信号通路调控Runx2的表达以防治骨质疏松.故该文通过补肾类中药对Runx2因子调控相关信号通路防治骨质疏松症进行综述,以期为中药防治骨质疏松症的相关研究提供参考.

目的 通过体内与体外实验相结合探讨槐黄烷酮G抑制破骨细胞形成和分化,从而缓解骨丢失现象的作用机制研究.方法 通过CCK-8和TRAcP染色实验验证槐黄烷酮G是否具有抑制破骨细胞形成的作用;通过分子对接验证槐黄烷酮G与破骨细胞分化相关的特异性蛋白结合的亲和力大小,借助RT-PCR和Western blot实验探讨槐黄烷酮G抑制破骨细胞形成的作用机制;最后通过体内实验进一步探讨,以验证体外实验的准确性和可靠性.结果 槐黄烷酮G能够在安全浓度下抑制破骨细胞形成和分化,同时也与破骨细胞相关的特异性蛋白如NFATc1、CTSK、c-Fos、MMP9 具有较高的亲和力,并能够降低上述基因和蛋白的相对表达水平,槐黄烷酮G也能够在 15 和 30 min处有效降低MAPK信号通路中的ERK和JNK的磷酸化表达水平,体内实验证明槐黄烷酮G能够起到缓解骨丢失,改善骨小梁相关参数的作用.结论 槐黄烷酮G具有抑制破骨细胞形成和分化,缓解骨量减少的作用,从而起到抗骨质疏松症的作用.

目的 通过正交设计观察续苓健骨方中的药物对卵巢切除术(ovariectomy,OVX)模型大鼠骨密度、骨微结构和骨代谢影响的主次作用,并探讨疗效较佳优化组别的潜在作用机制.方法 大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓健骨方组、优化 1组、优化 2 组、优化 3 组、优化 4 组、优化 5 组、优化 6 组、优化 7 组和优化 8 组,每组 10 只,采用OVX制备大鼠快速骨丢失模型,连续灌胃 12 周后取材备检.双能X线骨密度仪检测胫骨近端骨密度,micro-CT检测胫骨微观结构,ELISA检测血清骨吸收金指标CTX和骨形成金指标PINP的含量,Real-time PCR和Western blot检测股骨OPG、RANKL mRNA和蛋白的表达水平.结果 续苓健骨方组、优化 4 组、6 组和 7 组骨密度均显著升高(P<0.05),优化 4 和 7 组 Tb.N 和 BV/TV 显著升高(P<0.001),续苓健骨方组和优化1～8 组血清CTX、PINP均不同程度降低,续苓健骨方组和优化7 组OPG mRNA和蛋白表达水平显著升高、RANKL mRNA和蛋白表达水平显著降低.结论 优化 4 组、6 组和 7 组是治疗效果较好的组别,可通过调控OPG/RANKL发挥抗骨质疏松作用,续断、骨碎补、女贞子、红花和川芎是续苓健骨方取效的主要有效药物.

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定麝香接骨胶囊中芍药苷、盐酸麻黄碱、柚皮苷、β-蜕皮甾酮、川续断皂昔Ⅵ、儿茶素、蛇床子素的含量.方法 分析采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mmx2.1 mm,1.7 μm);流动相0.1％甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温30 ℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式.结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.990 0),平均加样回收率85.6％～110.1％,RSD 2.9％～6.4％.20批样品中有5批检出蛇床子素;儿茶素、柚皮苷、β-蜕皮甾酮、盐酸麻黄碱含量在各批次样品中差异较大,而且有2批未检出儿茶素.结论 麝香接骨胶囊有独活混入情况,儿茶、骨碎补、牛膝、麻黄质量参差不齐,建议该制剂现行标准补充儿茶等药味的质量控制方法.

目的 基于中药七情配伍理论归纳补骨脂药对配伍规律,为补骨脂临床合理应用提供依据.方法 通过古籍与现代文献检索与分析,从相须相使、协同增效、相畏相杀、减毒降副,配伍禁忌三方面总结补骨脂配伍规律.结果 基于七情配伍理论探析补骨脂药对的配伍规律,补骨脂常用相须相使药对为肉豆蔻、蛇床子、小茴香、益智仁、肉桂、吴茱萸、巴戟天、杜仲、骨碎补、仙茅,常用相畏相杀药对为胡桃仁、生地黄、五味子、赤芍,相恶、相反禁忌药对有甘草、淫羊藿.结论 总结了常与补骨脂配伍的药对,为临床遣方用药提供思路.

目的 中药骨碎补是中医骨伤科的常用药,现代研究表明,骨碎补总黄酮及其成分柚皮苷均能促进牵张成骨过程.通过动物体内实验,观察比较骨碎补总黄酮和柚皮苷对牵张成骨骨愈合的影响.方法 取雄性新西兰兔15只,按前期研究造模步骤完成牵张成骨模型兔造模;将模型兔分为3组(n=5),在术后第2天开始分别予生理盐水、骨碎补总黄酮[200 mg/(kg·d)]和柚皮苷[100 mg/(kg·d)]灌胃给药.术后第56天处死动物,观察各组骨标本牵张区骨缺损修复情况,并行显微CT(Micro computed tomography,Micro-CT)检查、生物力学检测.结果 与柚皮苷组相比,骨碎补总黄酮组骨骼矿物质密度(Bone mineral density,BMD)、骨表面积组织体积比值(Bone volume to tissue volume,BV/TV)、骨小梁厚度(Trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(Trabecular number,Tb.N)更高,差异有统计学意义(P＜0.05),而骨碎补总黄酮组骨小梁分离度(Trabecular separation,Tb.Sp)更小,差异有统计学意义(P＜0.05).与柚皮苷组相比,骨碎补总黄酮组骨标本能承受的最大应力(Maximum stress,N/mm2)和最大载荷(Maximum loading,N)均更大(P＜0.05).结论 本研究表明,骨碎补总黄酮和柚皮苷对牵张成骨骨愈合均有促进作用,而总黄酮比其成分柚皮苷更显著.

目的:分析《永类钤方》中骨伤内服药方的用药规律.方法:收集《永类钤方》中的骨伤内服药方,建立标准化方药数据库.采用Microsoft Office Excel 2019软件统计纳入方剂中组方药物的出现频次、药性、药味、归经和功效,采用SPSS Modeler 18.0软件分析纳入方剂中组方药物的关联规则,采用SPSS Statistics 26.0软件对高频药物进行系统聚类分析.结果:共收集到47首内服药方,涉及162味中药.出现频次≥5的中药共34味,出现频次排前6位的中药依次为当归、川芎、白芷、生川乌、乳香、肉桂.药性出现频次最高的为温,药味出现频次较高的依次为辛、苦、甘,归经主要归肝经、脾经、心经,药物功效出现频次较高的依次为活血化瘀、补虚和解表.对47首骨伤内服药方中的组方药物进行关联规则分析,共得到17条关联规则,增益均＞1,支持度最高的关联规则为当归→川芎,置信度为100％的关联规则为当归→肉桂+川芎、当归→肉桂+白芷、当归→没药+川芎;关联度较强的药对为川芎-当归、当归-肉桂、当归-乳香、白芷-当归、没药-乳香.聚类分析得到新处方3首,分别为川椒-泽兰-甘草-当归-川芎-肉桂、白芷-桔梗-陈皮-赤芍-茴香-生姜-生地黄、独活-生草乌-干姜-羌活-苍术-牛膝-细辛-续断-何首乌-生川乌-白芍-骨碎补-木鳖子仁-乳香-没药-自然铜.结论:《永类钤方》中骨伤内服药方多采用辛温、苦温和甘温之药,常从肝经、脾经、心经论治,以活血化瘀、补虚并兼顾解表为主要治法,以"发散寒邪,通气通血"为主要用药思想.