目的:检测自身免疫病患者乳汁中羟氯喹及其活性代谢物去乙基羟氯喹（DHCQ）的浓度，结合观察随访，评价哺乳期服用羟氯喹对婴儿的安全性，并探讨导致患者乳汁中药物浓度个体差异的因素。方法:纳入服用羟氯喹至少6个月且处于哺乳期的自身免疫病患者，通过建立一种新的高效液相色谱法来检测患者服药前（0 h）、服药后2、4、6 h乳汁样本和服药后6 h全血中羟氯喹及DHCQ的浓度。其次通过测定患者与羟氯喹代谢相关的细胞色素酶P450（CYP）的CYP3A4*1G（rs2242480）、CYP3A5*3（rs776746）、CYP2D6*10（rs1065852、rs1135840）的基因型，分析代谢酶基因多态性与患者乳汁中药物浓度个体差异的相关性。随访哺乳患者的婴儿的视力、听力及一般生长状况。统计学方法采用单因素方差分析、独立样本 t检验、 χ2分析及Pearson相关性分析。 结果:共纳入15例患者，服用200 mg/d的患者羟氯喹和DHCQ的平均浓度分别为（520±261）ng/ml、（177±112）ng/ml；服用400 mg/d的患者羟氯喹和DHCQ的平均浓度分别为（1 036±374）ng/ml、（397±271）ng/ml。全血中羟氯喹平均浓度为（661±308）ng/ml，DHCQ平均浓度为（267±73）ng/ml。其中，4例患者服药后2 h乳汁中羟氯喹及DHCQ浓度达到高峰，11例于服药后4 h乳汁中羟氯喹及DHCQ浓度达到高峰。不同CYP基因型与患者乳汁中药物浓度和达峰时间的个体差异未见相关性。随访服用含有羟氯喹的乳汁5~10个月的婴儿的听力、视力、一般生长状况均无异常。结论:乳汁羟氯喹、DHCQ浓度与患者服药剂量呈正相关，乳汁中羟氯喹、DHCQ浓度在服药后4 h达到高峰，服药6 h后乳汁中羟氯喹、DHCQ的浓度和血液浓度相近。建议哺乳期服用羟氯喹的患者可于服药4 h后进行哺乳，减少婴儿通过乳汁摄取的羟氯喹及其活性代谢物。但是，羟氯喹对于婴儿的安全性和CYP基因多态性对于乳汁浓度的影响未来仍需扩大样本和进行长期随访来进一步验证。

目的:建立一种基于高效液相色谱串联质谱技术的测定大鼠血浆中伐地那非浓度的方法，并评估其可行性。方法:采集正常Sprague-Dawley大鼠血浆样本。采用Phenomenex Synergi Polar-RP 80 A色谱柱（2.0 mm×50 mm，4 μm），柱温30 ℃，流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为0.1%甲酸乙腈溶液，流速为0.4 ml/min；质谱采用API 4000Qtrap三重四极杆质谱仪的正离子多反应监测模式监测，伐地那非和内标监测离子质荷比分别为489.3（Q1通道）/151.2（Q3通道）和466.4（Q1通道）/234.2（Q3通道）；西沙必利为内标，检测大鼠血浆中添加的伐地那非浓度。然后评估该方法检测伐地那非浓度的专属性、线性及定量范围、精密度和准确度、基质效应、稳定性。结果:在选定的色谱和质谱条件下，伐地那非和内标的保留时间分别为2.62和2.80 min，峰形良好。该方法在0.2~200 ng/ml浓度范围内线性良好。该方法检测伐地那非的批内精密度（%CV）和准确度（%DEV）分别在1.5%~9.7%和-6.8%~6.6%之间。批间精密度和准确度分别在3.1%~8.4%和-3.7%~4.6%之间。均在要求的范围内。本样品处理方法，伐地那非的提取回收率在88.2%~104.6%之间，符合提取回收率的考察要求。该样品处理方法，伐地那非各质控浓度经内标归一化的基质效应因子（MF）分别为1.04、0.85、1.04，变异系数（%CV）在1.7%~10.7%之间，符合基质效应的考察要求。伐地那非的短期稳定性、长期稳定性、4次冻融循环稳定性的偏差都在±15%以内，变异系数均在5%以内。结论:本研究建立的高效液相色谱串联质谱法特异性好、准确性高，可用于检测大鼠血浆伐地那非浓度。

目的:探讨孕期全程拟除虫菊酯类农药（pyrethroid pesticides，PYRs）暴露对2岁儿童神经发育的影响及其关键窗口期。方法:2016年1月至2018年12月在云南省宣威市2个乡镇招募孕早期妇女建立出生队列。采用超高效液相色谱-串联质谱法检测482名妇女孕8~12 +6周、20~23 +6周和32~35 +6周尿PYRs代谢产物水平，贝利婴幼儿发育量表-第3版评估2岁儿童神经发育水平。采用多元线性回归分析模型和二元Logistic回归分析模型分析孕期PYRs暴露与儿童神经发育之间的关联。 结果:共完成360个母子对孕期尿液PYRs代谢产物检测和儿童神经发育水平评估。孕早、中、晚期至少检出一种PYRs代谢产物的检出率分别为93.6%（337/360）、90.8%（327/360）和94.2%（339/360）。2岁儿童认知、语言、运动、社会情感和适应性行为得分分别为（102.3±18.9）、（100.2±16.3）、（102.0±20.3）、（107.8±23.3）和（85.8±18.6）分。调整其他混杂因素后，孕早期尿PYRs代谢产物4-氟-3-苯氧基苯甲酸暴露可降低2岁儿童运动（ β=-5.02，95% CI：-9.08~-0.97）和适应性行为（ β=-4.12，95% CI：-7.92~-0.32）得分，可增加2岁儿童适应性行为发育迟缓的风险（ OR=2.07，95% CI：1.13~3.82）。 结论:农村妇女孕早期日常生活PYRs暴露可能会影响2岁儿童神经发育，孕早期可能是其关键窗口期。孕中、晚期同等水平PYRs暴露可能对2岁儿童神经发育影响不明显。

目的:采用高效液相一测多评法同时测定槐芩软膏中芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、槐角苷、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷含量。方法:采用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱；流动相A为甲醇-乙腈(1∶2)，流动相B为0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱；检测波长分别为230 nm(检测芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷)和254 nm(检测槐角苷、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷)；流速1.0 ml/min；柱温30 ℃。以槐角苷为内参物，通过测定该成分与芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷的相对校正因子(RCF)，计算各成分含量，同时与外标法实测值进行比较，以验证高效液相一测多评法的可行性。结果:芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、槐角苷、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷分别在0.034 7~0.867 5、0.063 6~1.590 0、0.006 9~0.172 5、0.198 6~4.965 0、0.092 8~2.320 0、0.026 6~0.665 0、0.042 7~1.067 5、0.020 9~0.522 5 μg( r≥0.999 1)范围内线性关系良好；平均加样回收率( RSD)分别为98.85%(1.02%)、100.04%(0.67%)、96.92%(1.14%)、100.06%(0.85%)、99.31%(1.39%)、99.16%(1.22%)、98.59%(1.33%)和97.58%(1.41%)；槐芩软膏中各成分采用RCF计算的含量值与外标法实测含量值无显著性差异。 结论:高效液相一测多评法可为槐芩软膏多指标成分质量评价提供参考。

目的:探讨光学相干断层扫描（OCT）成像系统评估子宫颈病变的价值。方法:收集2020年1月至2021年12月在郑州大学第三附属医院、河南省信阳市固始县妇幼保健院及河南省商丘市睢县妇幼保健院就诊的1 214例子宫颈病变患者，其年龄为（38.9±10.5）岁（范围：16~77岁）。所有患者均行在体子宫颈OCT检查及子宫颈活检病理检查，总结在体子宫颈病变的OCT图像特征。以病理诊断为“金标准”，评价OCT图像判读结果的准确率、敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值，以及OCT图像诊断与病理诊断的一致性；同时，在体子宫颈OCT图像系统作为一种新兴的筛查工具，与传统的人乳头状瘤病毒（HPV）+液基薄层细胞学检查（TCT）联合筛查进行比较，评价其筛查效果。结果:通过在体子宫颈OCT图像与对应位置HE图像的比对，总结了正常子宫颈及各类子宫颈病变的OCT图像特征。OCT图像诊断高级别鳞状上皮内病变（HSIL）及以上病变（HSIL +）的准确率为93.4%、敏感度为88.5%、特异度为95.0%，阳性预测值及阴性预测值分别为85.0%及96.2%，诊断低级别鳞状上皮内病变（LSIL）的准确率为84.7%、敏感度为61.7%、特异度为96.3%，阳性预测值及阴性预测值分别为89.3%及83.2%。OCT图像诊断与病理诊断的一致性较强（Kappa值为0.701）。OCT筛查与HPV+TCT联合筛查的准确率分别为83.7%和64.9%（ χ2=128.82， P<0.001），敏感度分别为77.8%和64.5%（ χ2=39.01， P<0.001），特异度分别为91.8%和65.4%（ χ2=98.12， P<0.001），分别比较，差异均有统计学意义。 结论:OCT成像系统对子宫颈病变的评估具有较高的敏感度及特异度，且具有无创、实时及高效等特点，OCT检查有望成为子宫颈病变诊断及子宫颈癌筛查的有效方法。

目的:探索早期非小细胞肺癌(NSCLC)体部立体定向放射治疗(SBRT)前后血清中吲哚胺2，3-双加氧酶(IDO)活性的变化以及与患者生存的相关性。方法:本研究为回顾性研究，通过血清犬尿氨酸(Kyn)及Kyn∶色氨酸(Trp)比值评估早期NSCLC患者SBRT治疗前后IDO的活性。纳入2014年12月至2017年7月间在中国科学院大学附属肿瘤医院接受SBRT治疗的30例早期NSCLC患者，利用高效液相色谱法测定其SBRT治疗前后血清Kyn、Trp浓度。根据中位数为截断值，将放疗后与放疗前Kyn浓度比值分为Kyn高水平组和Kyn低水平组。同理，将放疗后Kyn∶Trp比值分为放疗后Kyn∶Trp高水平组和放疗后Kyn∶Trp低水平组。分析患者总生存率(OS)、无进展生存率(PFS)和IDO活性的相关性以及影响患者预后的相关因素。结果:放疗后Kyn与放疗前Kyn比值较低组可获得较长的PFS(中位数：未达到 vs. 26.8个月， HR＝0.31，95% CI＝0.11～0.90， P<0.05)。放疗后Kyn∶Trp比值较低组可获得较长的OS(中位数：未达到 vs. 36.5个月， HR＝0.27，95% CI＝0.08～0.95， P<0.05)。多因素分析中，吸烟<30包/年、高生物等效剂量(BED)、放疗后Kyn与放疗前Kyn比值较低与较长的PFS相关。放疗后Kyn∶Trp较低、高BED与较长的OS相关。 结论:SBRT可以改变IDO介导的抗肿瘤免疫活性。IDO是一种潜在的重要生物标志物，可用于监测早期NSCLC患者SRRT治疗后的免疫状态，对预测患者生存有一定价值。

两栖动物来源的多肽以及微小RNA（miR）在促进慢性创面的愈合方面具有很大的研发潜能，发现新的多肽药物以及其相关miR，并开发相应的miR靶向药物对于促进创面愈合具有重要的价值。昆明医科大学基础医学院杨新旺教授团队近期于《Burns & Trauma》发文《Amphibian-derived peptide homodimer OA-GL17d promotes skin wound regeneration through the miR-663a/TGF-β1/Smad axis》，该研究采用凝胶过滤层析及反相高效液相色谱法从青蛙皮肤分泌物中分离出来一种新的多肽（命名为OA-GL17d），通过Edman降解、质谱法和与互补DNA克隆相结合的方法对其氨基酸序列进行了测定，通过钙黄绿素乙酰氧基甲酯/碘化丙啶对人永生化表皮细胞HaCaT的双重染色实验、小鼠血细胞的溶血活性实验和小鼠对急性毒性反应实验评估了该多肽的毒性，采用淋巴细胞增殖检测实验、细胞划痕试验、与HaCaT细胞进行Transwell共培养实验、小鼠全层皮肤损伤及烫伤模型等实验观察了OA-GL17d的促愈合效果并采用miR转录组测序分析、ELISA、实时荧光定量RT-PCR分析和蛋白质印迹法等方法探讨了其分子机制。研究显示OA-GL17d在肽单体的第16个半胱氨酸残基和序列“GLFKWHPRCGEEQSMWT”之间含有二硫键，OA-GL17d无溶血活性或急性毒性，能有效促进KC增殖和迁移，强烈刺激小鼠背侧全层皮肤损伤创面和烫伤创面的修复，在机制上，OAGL17d降低了miR-663a的水平，增加了TGF-β1的水平，并激活了TGF-β1/Smad信号通路，从而加速了皮肤创面的再上皮化和肉芽组织形成。该研究提示OA-GL17d是一种用于皮肤创面修复的新型多肽候选药物，并表明miR-663a可能是一种促进皮肤修复的有效靶点，为临床促进创面愈合提供了一种潜在的方法。

目的:分析脑脊液中代谢标志物在晚期肺腺癌软脑膜转移（LM）中的诊断价值。方法:收集2019年12月至2021年12月于南京大学医学院附属鼓楼医院就诊的肺腺癌LM患者脑脊液样本46例（LM组），另外选取同期神经系统良性疾病患者的脑脊液样本48例（对照组），采用高效液相色谱-质谱技术对脑脊液进行代谢组学分析，应用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-DA）进行建模，采用多标准评价体系寻找两组间差异性代谢产物，并利用受试者工作特征（ROC）曲线、通路富集分析等方法，筛选与肺腺癌LM发病相关的代谢物及其通路。结果:LM组与对照组间的年龄（ Z=-0.41， P=0.210）、性别（ χ2=1.19， P=0.275）、吸烟史（ χ2=2.86， P=0.091）、Karnofsky功能状态评分（ χ2=0.65， P=0.419）及颅内压增高比例（ χ2=0.65， P=0.419）差异均无统计学意义。PCA模型（正离子与负离子模式下，R2X分别为0.608和0.583，Q2分别为0.462和0.513）和OPLS-DA模型（正离子与负离子模式下，R2Y分别为0.967和0.889，Q2分别为0.959和0.852）显示整体数据质量良好，具有较好的解释率和预测率，对数据进行200次重采集验证，不存在过度拟合现象。两组人群代谢轮廓有显著差别，应用多标准评价体系共筛选出30个内源性差异性代谢物，通过ROC曲线分析确定了曲线下面积（AUC）较大的6种潜在的生物标志物，包括酪氨酸（AUC=0.967，95% CI为0.906~1.000）、苯丙氨酸（AUC=0.992，95% CI为0.973~1.000）、丙酮酸（AUC=0.976，95% CI为0.935~1.000）、色氨酸（AUC=0.935，95% CI为0.880~0.973）、葡萄糖（AUC=0.932，95% CI为0.880~0.975）、一磷酸腺苷（AUC=0.993，95% CI为0.987~1.000）。将筛选的30种差异性代谢产物进行代谢通路富集分析，匹配到20条相关的代谢通路，其中最可能引起代谢产物变化的4条代谢通路为：糖酵解及糖代谢合成，丙酮酸代谢，苯丙氨酸代谢，苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成。 结论:非靶向代谢组学可有效筛查肺腺癌LM患者特异的脑脊液代谢物，6种潜在的代谢物如酪氨酸、苯丙氨酸、丙酮酸、色氨酸、一磷酸腺苷、葡萄糖及其代谢通路可能参与肺腺癌LM的发病过程。

目的 建立同步检测畲药树参中紫丁香苷、绿原酸、芥子醛葡萄糖苷、松柏醇、芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量的高效液相色谱一测多评(HPLC-QAMS)方法,并采用多元统计分析及加权优劣解距离(technique for order preference by similarity to ideal so-lution method,TOPSIS)法对其品质进行综合评价.方法 以Waters Xbridge C18色谱柱;乙腈-0.05％甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长260 nm.以山柰酚-3-O-芸香糖苷为参照物,建立内参物与其他8个待测成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),进行RCF耐用 性考察及色谱峰定位,同时与外标 法实测结果进行对比,验证HPLC-QAMS法准确性和可靠性.运用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogo-nal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等多元统计分析以及 W-TOPSIS 法对 9 个成分 HPLC-QAMS法含量结果的相关性进行分析,挖掘影响畲药树参产品质量的主要潜在标志物,建立畲药树参综合质量优劣评价方法.结果 9 种成分分别在 3.27～81.75μg/mL、9.85～246.25 μg/mL、0.43～0.75 μg/mL、0.31～7.75 μg/mL、1.58～39.50μg/mL、0.59～14.75 μg/mL、1.26～31.50 μg/mL、4.55～113.75 μg/mL 和 1.98～49.50 μg/mL 范围内线性关系良好,平均加样回收率96.82％～100.07％(RSD＜2.0％);HPLC-QAMS和外标法(ESM)含量测定结果差异无统计学意义(P＞0.05),HPLC-QAMS法可用于畲药树参多组分定量控制;多元统计分析结果显示,前2个主成分累计方差贡献率89.589％,绿原酸、紫丁香苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸是影响畲药树参产品质量的主要潜在标志物;加权TOPSIS法结果显示浙江地区所得畲药树参质量最优,其次为江西、安徽、湖南和湖北产树参,云南和贵州产树参位于排名后4位.结论 所建立的HPLC-QAMS多组分定量控制方法,操作便捷、结果准确;多元统计分析联合加权TOPSIS法全面客观,可用于畲药树参品质的综合评价.

目的 研究九蒸九制槐角炮制过程中主要成分含量、物性参数、颜色的相关性.方法 采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定槐角苷、染料木苷、芦丁和 5-羟甲基糠醛的含量,紫外分光光度法测定多糖的含量;通过测定物性参数和颜色指标(L*、a*、b*),结合系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘法(PLS)研究主要成分、物性参数及颜色的相关性;采用基于指标相关性的指标权重确定(CRITIC)法对槐角九蒸九制过程的影响进行综合评价.结果 含量测定及色度测量方法准确可靠,精密度、稳定性、重复性试验均良好.HCA和PCA结果均表明,槐角饮片炮制过程中一蒸一制至四蒸四制聚为一类,五蒸五制至九蒸九制聚为一类.PLS相关性分析表明,多糖、芦丁的含量与物性参数、颜色均呈显著性相关;吸水膨胀度、相对密度与颜色均呈显著性相关.综合评价显示九蒸九制槐角炮制品最佳.结论 九蒸九制槐角炮制过程中主要成分含量、物性参数、颜色的总体变化具有一定规律性,将其内在成分含量与颜色、物性参数结合为揭示槐角九蒸九制炮制机理提供了依据.