目的:检测自身免疫病患者乳汁中羟氯喹及其活性代谢物去乙基羟氯喹（DHCQ）的浓度，结合观察随访，评价哺乳期服用羟氯喹对婴儿的安全性，并探讨导致患者乳汁中药物浓度个体差异的因素。方法:纳入服用羟氯喹至少6个月且处于哺乳期的自身免疫病患者，通过建立一种新的高效液相色谱法来检测患者服药前（0 h）、服药后2、4、6 h乳汁样本和服药后6 h全血中羟氯喹及DHCQ的浓度。其次通过测定患者与羟氯喹代谢相关的细胞色素酶P450（CYP）的CYP3A4*1G（rs2242480）、CYP3A5*3（rs776746）、CYP2D6*10（rs1065852、rs1135840）的基因型，分析代谢酶基因多态性与患者乳汁中药物浓度个体差异的相关性。随访哺乳患者的婴儿的视力、听力及一般生长状况。统计学方法采用单因素方差分析、独立样本 t检验、 χ2分析及Pearson相关性分析。 结果:共纳入15例患者，服用200 mg/d的患者羟氯喹和DHCQ的平均浓度分别为（520±261）ng/ml、（177±112）ng/ml；服用400 mg/d的患者羟氯喹和DHCQ的平均浓度分别为（1 036±374）ng/ml、（397±271）ng/ml。全血中羟氯喹平均浓度为（661±308）ng/ml，DHCQ平均浓度为（267±73）ng/ml。其中，4例患者服药后2 h乳汁中羟氯喹及DHCQ浓度达到高峰，11例于服药后4 h乳汁中羟氯喹及DHCQ浓度达到高峰。不同CYP基因型与患者乳汁中药物浓度和达峰时间的个体差异未见相关性。随访服用含有羟氯喹的乳汁5~10个月的婴儿的听力、视力、一般生长状况均无异常。结论:乳汁羟氯喹、DHCQ浓度与患者服药剂量呈正相关，乳汁中羟氯喹、DHCQ浓度在服药后4 h达到高峰，服药6 h后乳汁中羟氯喹、DHCQ的浓度和血液浓度相近。建议哺乳期服用羟氯喹的患者可于服药4 h后进行哺乳，减少婴儿通过乳汁摄取的羟氯喹及其活性代谢物。但是，羟氯喹对于婴儿的安全性和CYP基因多态性对于乳汁浓度的影响未来仍需扩大样本和进行长期随访来进一步验证。

目的:通过蒙特卡洛模拟预测和评价利奈唑胺、替考拉宁和达托霉素对葡萄球菌属血流感染的抗菌效果，优化临床给药方案。方法:借助全国血流感染细菌耐药监测联盟(Blood Bacterial Resistant Investigation Collaborative System，BRICS)平台收集2018年1月至2019年12月从全血标本中分离的1 847株葡萄球菌属菌株。利奈唑胺和达托霉素采用肉汤稀释法进行菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)测定，替考拉宁则采用琼脂稀释法测定MIC。利奈唑胺的给药方案为800 mg(1次/d)、500 mg(每12 h 1次)、600 mg(每12 h 1次)、600 mg(每8 h 1次)。替考拉宁的给药方案为400 mg(每12 h 1次)、600 mg(每12 h 1次)、800 mg(每12 h 1次)、1 000 mg(每12 h 1次)。达托霉素的给药方案为4 mg·kg －1·d －1、6 mg·kg －1·d －1、8 mg·kg －1·d －1、10 mg·kg －1·d －1和12 mg·kg －1·d －1。通过蒙特卡洛模拟计算3种药物不同给药方案的目标获得概率(probability of target attainment，PTA)和累计反应分数(cumulative fraction of response，CFR)。CFR≥90.0%的给药方案是抗菌药物经验治疗的合理选择。 结果:当MIC≤0.500 mg/L时，利奈唑胺剂量为800 mg(1次/d)、500 mg(每12 h 1次)、600 mg(每12 h 1次)、600 mg(每8 h 1次)对葡萄球菌属的PTA均>90.0%；当MIC为1.000 mg/L时，利奈唑胺500 mg(每12 h 1次)、600 mg(每12 h 1次)、600 mg(每8 h 1次)对葡萄球菌属的PTA分别为92.2%、96.6%、97.6%。4种利奈唑胺给药方案对应的CFR分别为73.9%、83.7%、90.8%和95.3%。在MIC≤1.000 mg/L时，替考拉宁400 mg(每12 h 1次)、600 mg(每12 h 1次)、800 mg(每12 h 1次)、1 000 mg(每12 h 1次)对葡萄球菌属的PTA均为100.0%；当MIC为2.000 mg/L时，替考拉宁800 mg(每12 h 1次)、1 000 mg(每12 h 1次)对葡萄球菌属的PTA均为100.0%。4种替考拉宁给药方案对应的CFR分别为90.8%、92.8%、93.5%和94.6%。在MIC≤0.500 mg/L时，达托霉素4 mg·kg －1·d －1、6 mg·kg －1·d －1、8 mg·kg －1·d －1、10 mg·kg －1·d －1、12 mg·kg －1·d －1对葡萄球菌属的PTA均>90.0%；当MIC为1.000 mg/L时，达托霉素8 mg·kg －1·d －1、10 mg·kg －1·d －1、12 mg·kg －1·d －1对葡萄球菌属的PTA分别为96.9%、100.0%和100.0%。5种达托霉素给药方案对葡萄球菌属的CFR分别为97.4%、99.2%、99.9%、100.0%和100.0%。 结论:针对葡萄球菌属引起的血流感染，利奈唑胺600 mg(每12 h 1次)、替考拉宁400 mg(每12 h 1次)、达托霉素4 mg·kg －1·d －1的给药方案可达到有效的抗菌效果。

目的:探讨放射性同位素示踪技术在生物药临床研究中的应用价值。方法:对3名健康志愿者静脉滴注 131I标记的国际一类新药美珀珠单抗，通过测定14 d内不同时间点血样与尿样的放射性浓度，评价美珀珠单抗在健康人体内的药代动力学性质（试验1）。对6名健康志愿者静脉注射 68Ga标记的核酸适配体Sgc8，分别于不同时间点行正电子发射型计算机断层显像（PET/CT），通过测定不同器官对 68Ga Sgc8的标准摄取值，评价 68Ga-Sgc8在健康人体内的生物学分布（试验2）。对9例疑似神经内分泌瘤患者静脉注射 99mTc奥曲肽，4 h后行单光子发射和X线计算机断层扫描（SPECT/CT），测定感兴趣区放射性摄取水平；结合患者活检组织生长抑素受体亚型2（SSTR2）免疫组化染色结果，评价 99mTc-奥曲肽对SSTR2的亲和性和靶向性（试验3）。 结果:纳入试验1的3名健康志愿者均为男性，年龄分别为28、45和25岁； 131I-美珀珠单抗注射剂量分别为21.0、25.9和17.6 mg，放射性活度分别为364、420和304 MBq。纳入试验2的6名健康志愿者中男性和女性各3名，年龄（46±11）岁，范围35~63岁；放射性活度为（80±7）MBq，范围69~87 MBq。纳入试验3的9例疑似神经内分泌瘤患者中男性5例、女性4例，年龄（54±10）岁，范围39~69岁；放射性活度为（777±74）MBq，范围740~ 925 MBq。静脉滴注 131I-美珀珠单抗后，受试者血液放射性浓度在1.5 h达峰值， 131I-美珀珠单抗主要与血细胞结合，其全血清除半衰期为420 h；尿液放射性浓度在16~24 h达峰值，24 h后逐渐降低。静脉注射 68Ga-Sgc8后即刻放射性信号由强至弱的器官依次为膀胱、肾脏、心脏、子宫、肝脏、脾脏、胆囊、大肠和肺；注射药物后3 h内心脏的清除速率最快，子宫、肾脏和肝脏次之，脾脏和胆囊的清除速率较慢，大肠和肺的清除速率最慢。9例患者静脉注射 99mTc-奥曲肽后4 h体内均有放射性异常浓聚，免疫组化染色结果示SSTR2呈强阳性表达，表明 99mTc-奥曲肽对SSTR2有良好的亲和性和靶向性。安全性测试结果显示，试验1中1名受试者静脉滴注 131I-美珀珠单抗后1个月出现碘相关甲状腺功能亢进，无干预持续监测8个月后恢复正常；其余受试者均未发生不良反应。 结论:放射性同位素示踪技术可无创、动态、可视化地评价生物药在人体内的药代动力学性质、生物学分布及靶向性，安全性良好，在生物药的临床评价中具有重要的应用价值。

目的:测定自身免疫病患者的全血环孢素A（CsA）药物浓度，并对可能影响环孢素A血药浓度的代谢酶、转运体和作用靶点的基因多态性等因素进行分析。方法:采用酶放大免疫测定法检测193例自身免疫病患者环孢素A稳态血药谷浓度（CsA C 0），并检测入组患者的基因型：CYP3A4 20230C>T、CYP3A5 6986A>G、ABCB1 1236C>T、ABCB1 2677G>T/A、ABCB1 3435C>T、POR 1508C>T及FPR1 C>G。采用单因素方差分析，LSD- t检验及 χ2检验上述位点的基因多态性对环孢素A血药浓度的影响。 结果:193例自身免疫病患者服用环孢素A剂量为75~200 mg/d，患者的血药浓度分布为33.0~313.8 ng/ml。服药日剂量（ χ2=21.908， P=0.001）和年龄（ F=4.262， P=0.006）对患者环孢素A血药浓度的影响差异有统计学意义。ABCB1 2677G>T/A（rs2032582）基因多态性对单位剂量CsA C 0（CsA C 0/d）有影响，野生型（GG）患者的CsA C 0/d[（0.81±0.42）ng·ml -1·mg -1]较杂合突变型[GT/GA，（0.65±0.30）ng·ml -1·mg -1， P=0.023]和纯合突变型[TT/AA/TA（0.66±0.34）ng·ml -1·mg -1， P=0.039]显著升高。 结论:环孢素A血药浓度在个体间差异大，ABCB1 2677G>T/A基因的野生型患者环孢素A血药浓度的C 0/d显著高于突变型患者。

目的:通过对我国人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染者全血样本中的HIV进行分离培养与基因型、表型鉴定，筛选符合中华预防医学会团体标准《病原微生物菌(毒)种标准株艾滋病病毒毒株建立技术规范》(T/CPMA 027—2023)评价要求的HIV标准株。方法:收集48份HIV感染者全血样本；通过分离样本中的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)，并将其与健康人全血样本中分离得到的PBMCs共培养分离感染者体内的HIV，测定培养上清液中的p24抗原浓度和病毒滴度；对于分离成功的毒株，提取病毒RNA，对 gag、 pol基因和 env C2V3片段进行扩增测序，判断基因型、基因重组和耐药位点；通过将病毒培养上清液接种到表达CCR5或CXCR4的Ghost细胞，判断病毒嗜性；通过将病毒培养上清液接种MT-2细胞，观察合胞体的形成。 结果:从48份HIV感染者的新鲜EDTA抗凝全血中分离培养出14株病毒培养上清液的p24抗原浓度>1 ng/ml的HIV毒株；1株病毒滴度≥10 5TCID 50/ml，8株滴度≥10 4TCID 50/ml，5株滴度≥10 3TCID 50/ml；其基因型为9株B亚型、3株CRF01_AE重组型和2株CRF07_BC重组型；14株HIV毒株中11株含有耐药位点；细胞嗜性分析结果显示其中8株为CCR5嗜性，6株为CXCR4/CCR5双嗜性；14株毒株中只有2株可引起MT－2细胞病变，为合胞体诱导型。 结论:本研究共分离出14株具有HIV典型生物学、遗传学特性的HIV毒株，经评价1株为符合《病原微生物菌(毒)种标准株艾滋病病毒毒株建立技术规范》(T/CPMA 027—2023)的HIV标准株。本研究可为HIV-1标准株的筛选提供技术指导。下一步可按照标准株的共享机制完成申请及储备库建设，为HIV疫苗与药物研发等相关研究提供资源。

白消安在造血干细胞移植(HSCT)预处理中发挥重要作用，但是其安全血药浓度范围狭窄，存在药物代谢动力学(PK)参数的高变异性，并且易受药物剂型、患者因素、药物间相互作用等多种因素影响。白消安PK参数变异性较高，可影响HSCT后移植物植入情况及相关并发症发生。由于儿童脏器发育不完善及体重不断变化等因素，白消安用药期间更加需要重视对其进行血药浓度监测。目前，关于儿童HSCT预处理方案中，白消安个体化用药及剂量调整的相关研究仍较少。笔者通过白消安PK参数的影响因素、白消安血药浓度与HSCT后移植物植入情况及相关并发症的关系，以及PK参数指导下的白消安剂量调整等，对白消安在儿童HSCT预处理中的研究进展进行综述，旨在为儿童HSCT预处理中白消安的临床应用提供参考。

目的 建立高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法监测人全血西罗莫司浓度,并将检测结果与均相酶免疫法进行比较.方法 100 μL全血样品加入10μL西罗莫司-D3内标、100μL0.1mol·L-1ZnSO4溶液、300 μL甲醇,涡旋离心后,上清液5μL进样.以0.1％甲酸-甲醇为有机相,0.1％甲酸-水(含10mmol·L-1乙酸铵)为水相,流速0.5mL·min-1,FastCore SuperC18(2.1 mm×100mm,2.6μm)色谱柱进行梯度洗脱分离.在多反应监测(MRM)模式下采用电喷雾离子源(ESI)正离子化方式检测,西罗莫司、内标的定量离子对分别为m/z 931.6＞864.6,m/z934.6＞864.6.进行方法学考察(包括特异性、定量下限、标准曲线、准确度、精密度、残留效应、基质效应、稳定性和回收率).测定94例器官移植患者的西罗莫司浓度,与均相酶免疫法结果进行比较.结果 西罗莫司标准曲线浓度范围为2.5～50ng·mL-1.西罗莫司的日内、日间准确度相对误差(RE)在-5.3％～7.5％,变异系数(CV)小于11.8％.低、中、高不同浓度的质控回收率和基质效应一致,经内标校正后回收率为100.22％～108.56％,经内标归一化后基质效应为95.45％～96.48％,CV小于7.0％.全血样本室温放置3 d,4 ℃放置3d,-20 ℃放置20d,反复冻融3次,处理后样本自动进样器放置20 h,室温放置24 h结果稳定.Passing-Bablok回归分析及Bland-Altman结果表明均相酶免疫法与UPLC-MS/MS两种西罗莫司测量方法存在比例偏差.结论 本研究建立了一种简单、高效的UPLC-MS/MS方法检测人全血西罗莫司浓度,均相酶免疫法与UPLC-MS/MS法检测人全血西罗莫司存在比例偏差.UPLC-MS/MS方法更加准确,是免疫抑制剂治疗药物监测检测金标准.

目的:建立大鼠血浆中测定甲磺酸阿帕替尼的超高效液相色谱串联质谱方法,并考察蒙脱石散对甲磺酸阿帕替尼在大鼠体内吸收的影响.方法:采用含内标的乙腈作为蛋白沉淀剂处理血浆样本,经含0.1％甲酸水溶液和乙腈进行梯度洗脱,在正离子多反应监测模式下对甲磺酸阿帕替尼进行定量分析,并进行方法学验证.将大鼠随机分成3组,先分别灌胃给予等体积的水(对照组)、含蒙脱石散240mg·kg-1的混悬液(常规剂量组)和含蒙脱石散2400 mg·kg-1的混悬液(高剂量组),再全部灌胃给予甲磺酸阿帕替尼40mg·kg-1.各组大鼠于给药后不同时间点经颈静脉处采集全血.血浆样品预处理后测定甲磺酸阿帕替尼的浓度,绘制血药浓度-时间曲线,另采用WinNonlin(v 8.2)软件计算其药代动力学参数.结果:该检测方法在1～2000ng·mL-1范围内线性关系良好.精密度、准确度、提取回收率、基质效应和稳定性均满足相关要求.对照组、常规剂量组和高剂量组,甲磺酸阿帕替尼药峰浓度分别为(571±261)、(650±215)和(961±390)ng·mL-1,曲线下面积分别为(3104±2463)、(3624±1469)和(4578±2738)h·ng·mL-1.结论:蒙脱石散可能影响甲磺酸阿帕替尼在大鼠体内的吸收.建议临床关注基于蒙脱石散与甲磺酸阿帕替尼的相互作用.

目的 探讨急性等容血液稀释(ANH)性血液回输对体外循环下行心脏瓣膜手术患者术后谵妄(POD)的影响.方法 选择 2021 年 9 月至 2022 年 12 月期间,体外循环下行瓣膜手术患者 60 名,按照随机数字法分为ANH组和对照组.ANH组患者在全麻下通过右侧颈内静脉三腔中心静脉导管连接含有枸橼酸钠抗凝剂的储血袋,依靠重力作用采集患者全血,并于手术结束前回输,对照组按常规手术处理.在术前(T1)、体外循环结束时(T2)、术毕(T3)取患者全血5 ml,检测并记录血清中白介素(IL)-1β、IL-6、IL-10、游离血红蛋白(FHb)浓度和脑电双频指数(BIS)值.记录两组患者术中低脑氧饱和度、POD、术后ICU停留时间、气管插管带管时间、24 h心包纵膈引流量、围术期血制品输注量及术后血管活性药物使用量等情况.结果 ANH组POD发生率、IL-1β、IL-6、T2 和T3 时FHb的浓度、T3 时的BIS值、术后 24 h白细胞、C反应蛋白、乳酸值、引流量、血制品输注量以及带管时间和ICU停留时间等均低于对照组(P<0.05),血管活性药使用量亦显著减少(P<0.05);两组术中发生低脑氧饱和度及其他临床结果无明显差异(P>0.05).结论 ANH性血液回输可以降低体外循环下患者POD的发生率,其原因可能与降低患者术中炎性因子及FHb的浓度、减少血制品的输入量和术后血管活性药物的使用有关.

目的 研究含羞草根乙酸乙酯部位(简称为乙酸乙酯部位)对急性髓系白血病小鼠的影响.方法 以不同质量浓度(0.062 5、0.125、0.25、0.5 mg/mL)乙酸乙酯部位作用于急性粒-单核细胞白血病细胞WEHI-3,考察其对该细胞活力的影响.将50只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(5-氟尿嘧啶,13 mg/kg)和乙酸乙酯部位低、高剂量组(50、200 mg/kg),每组10只.除空白对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射WEHI-3细胞悬液进行造模,并在造模第2天起灌胃相应药物/水,每天1次,连续14 d.末次给药后,检测小鼠肝、脾指数,并进行肝组织病理学形态观察和血液学分析以及白细胞分化检测;检测小鼠血清中细胞因子[白细胞介素2(IL-2)、IL-3、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;检测小鼠全血中白细胞表面标志物[分化簇3(CD3)、CD19、CD11b、分化簇107b(即Mac-3)]抗体水平.结果 经0.062 5～0.5 mg/mL的乙酸乙酯部位作用后,WEHI-3细胞增殖抑制率均显著升高(P＜0.05).经高剂量的乙酸乙酯部位干预后,小鼠的肝、脾指数,血清中TNF-α水平,全血中白细胞表面CD11b、Mac-3抗体水平均显著降低(P＜0.05),血清中IL-2、IL-3、IFN-γ水平和全血中白细胞表面CD3、CD19抗体水平均显著升高(P＜0.05);肝实质偶有淋巴细胞浸润,几乎无炎症细胞浸润;血液学指标改善且白细胞分化减弱.结论 含羞草根乙酸乙酯部位可抑制WEHI-3细胞增殖,改善急性髓系白血病小鼠症状,其作用机制与增强机体免疫功能有关.