目的:分析慢性阻塞性肺疾病患者血清钙结合蛋白S100A8/A9和可溶性糖基化终末产物受体（sRAGE）水平的变化及临床意义。方法:病例对照研究。选取2018年4月至2019年1月湖北中医药大学附属中西医结合医院呼吸科慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者203例，其中男166例，女37例，年龄52~92岁，平均（69.72±9.08）岁。收集体检中心吸烟老年非COPD且相对健康体检者41例为吸烟对照组，其中男35例，女6例，年龄55~89岁，平均（68.66±8.74）岁。收集不吸烟老年健康体检者167名为不吸烟对照组，其中男132名，女35名，年龄57~92岁，平均（69.13±7.21）岁。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）方法检测不同分期COPD患者和两组对照组血清中S100A8/A9和sRAGE的水平，将其与COPD患者的各临床指标：第一秒用力呼气容积FEV l占预计值%、FEV 1/FVC（用力肺活量）、中性粒细胞比率（NEU%）、吸烟量：每日吸烟包数乘吸烟年数（pack-year）做相关性分析。利用受试者工作特征（ROC）曲线分析S100A8/A9，sRAGE以及二者联合检测对于COPD的诊断价值。 结果:COPD患者血清S100A8/A9水平[（2.70±1.11）μg/ml]与吸烟对照组[（1.65±0.63）μg/ml]和不吸烟对照组[（0.99±0.48）μg/ml]相比均明显上升（ t=5.807， P<0.000 1； t=18.45， P<0.000 1）；COPD患者GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清S100A8/A9水平[（2.08±1.08）μg/ml，（2.58±1.06）μg/ml，（2.69±1.12）μg/ml，（2.95±1.10）μg/ml]与不吸烟对照组[（0.99±0.48）μg/ml]相比明显上升，差异均有统计学意义（ t=6.616， P<0.000 1； t=14.56， P<0.000 1； t=17.10， P<0.000 1； t=18.09， P<0.000 1）。COPD患者血清sRAGE水平[（0.29±0.25）ng/ml]与吸烟对照组[（0.60±0.24）ng/ml]和不吸烟对照组[（0.85±0.35）ng/ml]相比均明显下降（ t=7.367， P<0.000 1； t=18.14， P<0.000 1）；COPD患者GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清sRAGE水平[（0.46±0.40）、（0.28±0.25）、（0.29±0.25）和（0.25±0.19）ng/ml]与不吸烟对照组[（0.85±0.35）ng/ml]相比明显下降，差异均有统计学意义（ t=3.459， P=0.000 5； t=10.23， P<0.000 1； t=13.95， P<0.000 1； t=11.70， P<0.000 1）。血清S100A8/A9水平与患者吸烟量、NEU%均呈正相关（ r=0.458 5， P<0.000 1； r=0.228 3， P=0.001 1），与FEV 1/FVC、FEV 1占预计值百分比、sRAGE均呈负相关（ r=-0.190 6， P=0.006 4； r=-0.186 3， P=0.007 8； r=-0.201 7， P=0.003 9）。sRAGE与NEU%呈负相关（ r=-0.155 9， P=0.026 4）。ROC曲线中S100A8/A9，sRAGE以及二者联合检测的曲线下面积分别为0.922[95 %CI（0.897~0.947）]，0.926[95 %CI（0.899~0.952）]，0.966[95 %CI（0.950~0.983）]。 结论:S100A8/A9和sRAGE水平与气流受限严重程度和血清炎症介质水平相关，有望作为COPD的潜在的生物标志物。

目的 探讨毛蕊花糖苷(VB)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终产物受体(RAGE)/核因子κB(NF-κB)信号通路对动脉粥样硬化(AS)大鼠内皮功能障碍的影响机制.方法 采用高脂饲料喂养联合维生素D3溶液腹腔注射的方法建立AS大鼠模型.将大鼠分为对照组(10只),模型组(12只),毛蕊花糖苷低、中、高剂量组(VB-L、M、H,2、5、10 mg/kg,每组10只)和阳性对照组(辛伐他汀,5 mg/kg,10只).全自动生化分析仪检测血清中血脂水平;HE染色观察大鼠主动脉组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中炎性因子及内皮细胞因子水平;微量法试剂盒检测大鼠氧化应激水平;Western blot检测主动脉HMGB1/RAGE信号通路蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠主动脉内膜增厚、血管出现斑块,并伴有脂质沉积和炎性细胞浸润,血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、C反应蛋白(CRP)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、内皮素1(ET-1)、内脂素、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、丙二醛(MDA)及主动脉中HMGB1、RAGE、NF-κB磷酸化水平升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平降低(P＜0.05);与模型组相比,VB各组及辛伐他汀组大鼠病理学变化明显改善,血清中TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β、CRP、MMP-9、ET-1、内脂素、ICAM-1、MDA及主动脉中HMGB1、RAGE、NF-κB磷酸化水平降低,血清HDL-C、NO、SOD、GSH-Px水平升高(P＜0.05).结论 VB可下调HMGB1/RAGE/NF-κB信号通路蛋白表达,抑制AS大鼠炎症和氧化应激,改善脂质代谢和血管内皮功能.

呼吸机相关性肺炎(VAP)发病机制复杂,炎症反应在VAP的病理进程中具有关键作用.高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和晚期糖基化终末产物受体(RAGE)是促发炎症反应的关键介质,且在脓毒症的进程中发挥着重要的作用;而脓毒症是VAP的主要结局及死因.二者可能作为早期发现VAP进展为脓毒症的标志物及治疗靶点.就HMGB1/RAGE在VAP炎症发展中的作用及相关治疗进展进行综述.

目的 观察初诊2型糖尿病病人体内血清25-羟维生素D(25-OH-D)和晚期糖基化终末产物(AGEs)含量变化,分析其变化与胰岛素抵抗和胰岛β细胞早相分泌功能的关系.方法 选取初诊2型糖尿病病人60例为观察组,另选择同期参加门诊体检的40名健康人作为正常对照组.分别测定两组血清25-OH-D、AGEs、白细胞介素-1β(IL-1β)、空腹血糖、血脂和糖化血红蛋白(HbA1c)等指标,并同期进行精氨酸试验.两因素间关系采用Pearson相关分析,多个变量间的分析采用多元逐步回归分析.结果 与对照组比较,观察组25-OH-D含量明显降低,而AGEs、IL-1β明显增高,差异均有统计学意义(t=-9.276～4.430,P＜0.01).相关分析显示,25-OH-D与胰岛素第一时相峰值倍数呈正相关(r=0.453,P＜0.01),而与稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、AGEs和IL-1β呈负相关(r=-0.425～-0.315,P＜0.01).多元逐步回归分析显示,校正性别、年龄、血脂、血压、HbA1c和IL-1β后,胰岛素第一时相峰值倍数与25-OH-D呈显著正相关(t=5.028,P＜0.01),与AGEs呈显著负相关(t=-2.933,P＜0.01);HOMA-IR与25-OH-D呈显著负相关(t=-2.234,P＜0.05),与AGEs呈显著正相关(t=11.513,P＜0.01).结论 初诊2型糖尿病病人体内维生素D水平降低,而AGEs水平升高,可能与胰岛素抵抗和胰岛β细胞早相分泌功能下降相关.

[目的]探讨糖基化终产物(AGEs)及其受体(RAGE)在妊娠期糖尿病(GDM)患者中的表达水平及其临床意义.[方法]选择2014年9月至2016年9月在本院就诊的GDM孕妇371例,按照产前1周检查结果将患者分为血糖控制理想组261例(A组)和不理想组110例(B组),另外抽取同期各指标正常的孕妇作为对照组(C组).比较三组入组前、产前1周空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG),采用高效液相色谱仪测定糖化血红蛋白(HbAlc)、AGEs、RAGE水平,统计各组母婴并发症发生情况.[结果]产前1周B组FPG、 2hPG、HbAlc水平均显著高于A组和C组(P <0.05),但A组与C组比较差异均无统计学意义(P >0.05);产前1周A组和B组AGEs水平高于C组(P <0.05),且A组AGEs水平高于C组(P <0.05) ;B组胎盘 RAGE水平高于A组和C组(P <0.05),A组RAGE水平高于C组(P <0.05).A组和B组酮症酸中毒、妊娠高血压、胎膜早破、羊水过多、产后出血、剖宫产、巨大儿、早产、高胆红素血症、新生儿窒息、新生儿低血糖等发生率均显著高于C组(P <0.05),且B组均高于A组(P <0.05).[结论]GDM患者血清中AGEs和胎盘RAGE表达水平高,增加患者母婴并发症的发生风险,产前检测其表达水平,对GDM具有一定预测价值,可作为GDM治疗和追踪的补充预测指标.

目的 探讨糖化β-淀粉样蛋白(Aβ-AGE)对阿尔茨海默病样大鼠认知功能的影响.方法 将β-淀粉样蛋白(Aβ)与甲基乙二醛于37℃下温育1个月合成Aβ-AGE.将40只Sprague Dawley大鼠随机分为Aβ组、Aβ+小鼠单克隆高级糖化终产物受体抗体(Anti-RAGE)组、Aβ-AGE组、Aβ-AGE+ Anti-RAGE组,每组10只.行立体定向左侧侧脑室注射制备阿尔茨海默病样模型,其中Aβ组大鼠给予Aβ 5μg,Aβ+ Anti-RAGE组大鼠给予Aβ 5μg和RAGE抗体Anti-RAGE 50 μg,Aβ-AGE组大鼠给予Aβ-AGE 5 μg,Aβ-AGE+ Anti-RAGE组大鼠给予Aβ-AGE 5μg和Anti-RAGE 50 μg.注射后第2～7天进行Morris水迷宫实验,记录大鼠寻找隐匿平台的潜伏期;注射后第9天,记录各组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间;Western blot法检测各组大鼠海马组织中高级糖化终产物受体(RAGE)蛋白的表达,免疫组织化学染色法检测各组大鼠大脑皮层中RAGE的表达.结果 在注射后第2天,各组大鼠潜伏期比较差异无统计学意义(F=3.767,P＞0.05).注射后第3～7天,各组大鼠潜伏期比较差异均有统计学意义(F=9.167、25.050、56.980、62.380、122.200,P＜0.05);Aβ-AGE组大鼠潜伏期显著长于Aβ组(P＜0.05),Aβ+ Anti-RAGE组大鼠潜伏期显著短于Aβ组(P＜0.05),Aβ-AGE+ Anti-RAGE组大鼠潜伏期显著短于Aβ-AGE组(P＜0.05).注射后第9天,各组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间比较差异有统计学意义(F=12.930、13.560,P＜0.05);Aβ-AGE组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间显著短于Aβ组(P＜0.05),Aβ+ Anti-RAGE组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间显著长于Aβ组(P＜0.05),Aβ-AGE+ Anti-RAGE组大鼠穿越平台次数和目标象限停留时间显著长于Aβ-AGE组(P＜0.05).注射后第9天,各组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=8.626,P＜0.05);Aβ-AGE组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量显著高于Aβ组(P＜0.05),Aβ+Anti-RAGE组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量与Aβ组比较差异无统计学意义(P＞0.05),Aβ-AGE+ Anti-RAGE组大鼠海马组织中RAGE蛋白相对表达量显著低于Aβ-AGE组(P＜0.05).免疫组织化学染色结果显示,各组大鼠大脑皮层中RAGE阳性细胞数比较差异有统计学意义(F=76.370、P＜0.01);Aβ-AGE组大鼠大脑皮层中RAGE阳性细胞数显著高于Aβ组(P＜0.01),Aβ+Anti-RAGE组大鼠皮层中RAGE阳性细胞数显著低于Aβ组(P＜0.01);Aβ-AGE+ Anti-RAGE组大鼠皮层中RAGE阳性细胞数显著低于Aβ-AGE组(P＜0.01).结论 Aβ-AGE可能通过激活RAGE信号转导通路介导加重AD样大鼠的认知功能障碍,Aβ-AGE和RAGE可能成为治疗AD的新靶点.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/S100P、信号转导和转录激活因子3(STAT3)表达及其意义.方法 收集NSCLC及其癌旁组织标本各40例,应用Western blot方法和RT-PCR方法检测其RAGE、S100P、STAT3和Pim1的表达,并分析不同临床病理特征病人的表达差异.结果 肺癌组织中RAGE蛋白表达明显低于癌旁正常组织,两组比较差异有统计学意义(t=5.756,P<0.05);S100P、STAT3和Pim1蛋白在肺癌组织中表达明显高于癌旁正常组织,两组比较差异有统计学意义(t=2.414～10.141,P<0.05).RT-PCR结果显示,与癌旁正常组织相比,RAGE mRNA在癌组织中表达明显减少(t=21.530,P<0.05),而S100P、STAT3、Pim1 mRNA在癌组织中表达明显增多(t=10.430～13.640,P<0.05).RAGE mRNA表达量在腺癌组织中高于鳞癌组织,在高中分化组织中表达高于低分化组织,在伴有淋巴结转移的癌组织中表达明显低于不伴有淋巴结转移癌组织,差异有统计学意义(t=2.157～2.908,P<0.05).S100P mRNA在鳞癌组织中的表达高于腺癌组织,在低分化组织中表达高于高中分化组织,在伴有淋巴结转移癌组织中的表达高于不伴有淋巴结转移癌组织,差异有统计学意义(t=2.132～2.590,P<0.05).Pearson相关性分析显示,NSCLC组织RAGE表达与S100P表达、STAT3表达呈负相关(r=-0.430、-0.417,P<0.05),STAT3表达与S100P表达、S100P表达与Pim1表达、Pim1表达与miR-21表达呈正相关(r=0.324～0.337,P<0.05).结论 RAGE、S100P及 STAT3、Pim1 可能参与 NSCLC的发生发展.

目的:研究晚期糖基化终产物特异性受体(advanced glycosylation end-product specific receptor,AGER)对人肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭等肿瘤生物学行为的影响,并初步探讨可能的机制,以及AGER表达与肺腺癌患者预后的相关性.方法:采用脂质体转染法将特异性针对基因的siRNA(siRNA-AGER)转入肺腺癌A549、H1299和H1975细胞,并通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法鉴定沉默效率.通过CCK-8法检测沉默基因表达对人肺腺癌细胞增殖能力的影响,分别通过划痕实验和Transwell小室实验检测沉默基因表达对人肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并进一步采用蛋白质印迹法检测沉默五基因表达对A549细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、波形蛋白(Vemintin)、Snail、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9和β-连环蛋白(p-catenin)蛋白表达水平的影响.通过免疫荧光法和蛋白质印迹法检测沉默基因表达对A549细胞中p-catenin蛋白核定位的影响.通过Survexpress数据库探究AGER在肺腺癌患者中的表达差异及其表达水平与预后之间的相关性.结果:沉默基因表达后,A549、H1299和H1975细胞的增殖能力均明显受到抑制(P值均 < 0.001);划痕实验和Transwell小室实验提示,A549、H1299和H1975细胞的迁移及侵袭能力下降值均< 0.000 1);蛋白质印迹法检测结果提示,A549细胞中PCNA、Vemintin、Snail、MMP-2和MMP-9蛋白的表达量明显下调(P值均<0.001).免疫荧光实验和蛋白质印迹法检测结果均提示,沉默基因表达后细胞核内p-catenin蛋白的表达水平明显减少.Kaplan-Meier法分析结果提示,AGER表达水平越高,患者总体生存率越低= 0.046 3).结论:沉默AGER基因表达可以显著抑制人肺腺癌细胞系的增殖、侵袭及迁移能力,并下调细胞核内p-catenin蛋白的水平;提示AGER可能通过激活Wnt/β-catenin通路起到促癌作用,并且与临床预后紧密相关.

[目的]基于网络药理学技术探讨解毒活血方治疗冠心病的作用机制.[方法]以化合物生物利用度(OB)＞30%且类药性(DL)＞0.18为标准,通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选解毒活血方中的活性成分及其对应靶标,从GeneCards和在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库获取冠心病相关靶标,利用韦恩(Venn)图获得疾病与药物共同作用靶标.借助Cytoscape 3.7.2软件构建活性成分-共同作用靶标网络.结合STRING数据库构建共同靶标蛋白互相作用网络,选取邻接节点数量排名前30位的靶标.利用生物学信息学软件(Bioconductor),通过R语言对共同靶标进行基因本体论(GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,结合文献研究筛选出解毒活血方治疗冠心病的关键信号通路.[结果]从解毒活血方中共筛选出143个活性成分及220个对应靶标,从GeneCards和OMIM数据库中筛选出冠心病相关靶标10 717个,药物与疾病共同靶标204个.靶标蛋白互作网络中邻接节点数量排名前30位的靶标包括STAT3、 JUN 、 AKT1、 MAPK1、 APP等.经GO和KEGG分析,解毒活血方治疗冠心病主要参与细胞因子受体结合、细胞因子活性、四吡咯结合、血红素结合、核受体的活性、G蛋白偶联胺受体活性、氧化还原酶活性、抗氧化活性、类固醇激素受体活性、类固醇结合、肾上腺素能受体活性、儿茶酚胺结合等生理过程及磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)-苏氨酸激酶(Akt)、流体剪切应力与动脉粥样硬化、高级糖化终产物及其受体(AGE-RAGE)、白细胞介素17(IL-17)、低氧诱导因子1(HIF-1)、肿瘤坏死因子(TNF)等生物信号通路.[结论]解毒活血方治疗冠心病的机制主要与调控炎症介质、动脉粥样硬化形成、血栓形成、血管内皮损伤、血管平滑肌收缩、心率等作用有关.PI3K-Akt、AGE-RAGE信号通路在下一步研究中应有所侧重.

目的:观察艾灸"得气"对阿尔茨海默病(Alzhemier's disease,AD)模型大鼠的疗效及脑内β淀粉样蛋白(Aβ)转运和降解相关酶蛋白表达的影响,探讨其改善认知功能的分子机制.方法:将60只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组(8只)、假手术组(8只)和造模组(44只),造模组采用双侧脑室注射Aβ1-42建立AD模型.38只造模成功的大鼠随机取8只作为模型组,剩余大鼠于"大椎"穴行温和灸,每天1次,每次40 min,共28 d.根据"得气"出现与否及出现早晚分为艾灸得气组(12只)、艾灸迟发得气组(10只)和艾灸非得气组(8只).干预后各组大鼠行Morris水迷宫试验检测认知功能;HE染色观察大鼠脑组织形态;Western blot法检测大鼠海马Aβ及其受体介导转运相关蛋白[低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)1、高级糖化终产物受体(RAGE)、载脂蛋白E(ApoE)]和降解相关酶[中性内肽酶(NEP)、胰岛素降解酶(IDE)、内皮素转换酶(ECE)-1和血管紧张素转换酶(ACE)2]的蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组逃避潜伏期延长(P<0.01),平台穿越次数、平台象限与总时间之比减少(P<0.01);脑组织损伤较重;海马Aβ、RAGE蛋白表达升高(P<0.01),海马LRP1、ApoE、NEP、IDE、ECE-1、ACE2蛋白表达降低(P<0.01).与模型组比较,艾灸得气组逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),艾灸迟发得气组和艾灸非得气组第2～5天逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),艾灸得气组和艾灸迟发得气组平台穿越次数、平台象限与总时间之比增加(P<0.01,P<0.05);各艾灸组脑损伤均减轻,其中艾灸得气组损伤程度最轻,艾灸迟发得气组次之,艾灸非得气组稍有改善;各艾灸组Aβ、RAGE蛋白表达均降低(P<0.01,P<0.05),LRP1、IDE蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),艾灸得气组和艾灸迟发得气组ApoE蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),艾灸得气组NEP表达增加(P<0.05),艾灸得气组、艾灸迟发得气组ECE-1和ACE2蛋白表达增加(P<0.05).与艾灸迟发得气组、艾灸非得气组比较,艾灸得气组第3～5天逃避潜伏期缩短(P<0.05),平台穿越次数、平台象限与总时间之比增加(P<0.05,P<0.01);与艾灸非得气组比较,艾灸得气组Aβ降低(P<0.05),LRP1和ApoE蛋白表达升高(P<0.05);艾灸得气组NEP表达高于艾灸迟发得气组、艾灸非得气组(P<0.05).结论:艾灸"得气"较非"得气"能更好地促进Aβ转运和降解,从而降低脑内Aβ水平,改善AD模型大鼠认知功能.