目的 探讨黄杞苷对H9c2心肌细胞缺氧再复氧损伤的影响及作用机制.方法 构建H9c2心肌细胞缺氧再复氧模型,将H9c2细胞随机分为常氧+溶剂组、常氧+黄杞苷组、缺氧再复氧+溶剂组和缺氧再复氧+黄杞苷组.实时荧光定量聚合酶链反应检测相关抗氧化酶(过氧化物歧化酶2、谷胱甘肽过氧化物酶1、过氧化氢酶)的mRNA水平;试剂盒检测超氧化物歧化酶、心肌损伤标志物、丙二醛以及胱天蛋白酶-3(caspase-3)水平;免疫组织化学染色检测细胞氧化应激水平;原位末端转移酶标记法染色检测细胞凋亡水平;Western blot检测相关蛋白核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)表达水平.结果 常氧+溶剂组与常氧+黄杞苷组心肌损伤标志物、氧化应激、细胞凋亡等指标及Nrf2、HO-1蛋白表达比较,无统计学差异(P＞0.05);与常氧+溶剂组比较,缺氧再复氧+溶剂组心肌损伤标志物、活性氧、丙二醛、caspase-3以及细胞凋亡率明显升高,相关抗氧化酶的mRNA、超氧化物歧化酶及Nrf2、HO-1蛋白表达明显降低(P＜0.05);与缺氧再复氧+溶剂组比较,缺氧再复氧+黄杞苷组心肌损伤标志物、活性氧、丙二醛、caspase-3以及细胞凋亡率明显下降,相关抗氧化酶的mRNA、超氧化物歧化酶及Nrf2、HO-1蛋白表达明显升高(P＜0.05).结论 黄杞苷可以减轻缺氧再复氧的H9c2心肌细胞的氧化应激损伤及细胞凋亡,可能是通过Nrf2/HO-1通路发挥作用.

目的:对不同批次洗消液进行综合质量评价.方法:采用HPLC-QAMS法建立15批洗消液中落新妇苷、黄杞苷、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、黄柏酮、苦参碱、氧化槐果碱、氧化苦参碱和地肤子皂苷Ic的含量测定方法,采用化学计量学和熵权TOPSIS法对洗消液的整体质量进行综合评价.结果:10种成分的线性范围分别为 1.88～94.00、1.09～54.50、1.47～73.50、0.74～37.00、0.26～13.00、1.30～65.00、0.82～41.00、0.53～26.50、4.15～207.50、3.26～163.00μg/mL(r＞0.999 0),精密度、重复性、稳定性试验的RSD均＜2.0％;平均加样回收率(n=9)在96.74％～100.11％之间(RSD＜2.0％).聚类分析和主成分分析识别方法将15批样品分为3类;正交偏最小二乘法-判别分析发掘出氧化苦参碱、落新妇苷、羟基-α-山椒素、地肤子皂苷I c和黄柏酮在内的5个主要差异成分.熵权TOPSIS分析结果表明,S14质量最佳,S10质量较次.结论:所建立的方法可用于洗消液质量的综合评价.

目的 研究过岗龙(榼藤子Entada phaseoloides干燥藤茎)的化学成分.方法 应用正相硅胶、ODS、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及半制备型HPLC等色谱技术进行系统分离纯化,并通过核磁共振波谱、质谱等技术鉴定单体化合物的结构.结果 从过岗龙75％乙醇提取物中共分离得到17个化合物,分别鉴定为3-氧-泰国树脂酸(1)、6β-羟基-3-氧代齐墩果-12-烯-28酸(2)、泰国树脂酸(3)、苏门答腊树脂酸(4)、3β,6β-二羟基齐墩果-11,13(18)-二烯-28-酸(5)、(Z)-4-[3'-(β-D-glucopyranosyloxy)butylidene]-3,5,5-trimethyl-2-cyclohexen-l-one(6)、异落新妇苷(7)、黄杞苷(8)、槲皮苷(9)、3-O-α-L-鼠李糖-儿茶素(10)、(-)-epicatechin-3-O-p-hydroxybenzoate(11)、lysidicichin(12)、异补骨脂查耳酮(13)、4-羟基-3-甲氧基苯酚-1-O-β-D-(6'-O-没食子酰基)葡萄糖苷(14)、1,6-二-O-没食子酰基-β-D-葡萄吡喃糖(15)、苯甲酸(16)和没食子酸甲酯(17).结论 所有化合物均为首次从过岗龙中分离得到,为中药过岗龙的开发利用提供了一定的物质基础.

目的 建立不同来源的菝葜高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,结合多模式化学计量学分析菝葜饮片的质量.方法 建立18批菝葜HPLC指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘-判别分析对不同来源的菝葜进行评价.结果 指纹图谱标定了 13个共有峰,指认出5个成分,分别为绿原酸、落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷及白藜芦醇;相似度评价结果,18批样品除YP3以外,其余相似度均大于0.9;结合多模式化学计量学分析可以将18批样品分为三类,并筛选出6个可能导致菝葜质量差异的标志物.结论 本研究建立的指纹图谱方法简便、重复性好,结合多模式化学计量学分析可用于评价不同来源的菝葜质量.

目的 考察Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂对土茯苓提取液的澄清工艺.方法 采用正交试验设计,以HPLC法测定土茯苓中落新妇苷和黄杞苷保留率及澄清前后固形物清除率为考察指标,优选天然澄清剂的最佳工艺条件.结果 Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂用于土茯苓提取液的最佳澄清工艺为先加入2％A组分,再加1％B组分,料液比1:10,澄清时间1 h,温度60℃.黄杞苷及落新妇苷保留率分别为98.71％ 和98.46％.结论 Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂澄清方法较醇沉方法简单,活性成分损失少,适于土茯苓提取液的澄清工艺.

目的:建立血尿胶囊的融合指纹图谱.方法:采用高效液相色谱(HPLC),使用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乞腈-0.1％磷酸水为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长280 nm,进样量10 μL.采用气相色谱-质谱联用(GC-MS),使用HP-5MS色谱柱(30 m×250 μm ×0.25 μm),载气为氦气,体积流量为1.0 mL· min-1,进样口温度250℃,柱温采用程序升温(初始温度45℃,保持2 min,以5℃·min-1程序升温至180℃,保持10 min,后以10℃·min-1程序升温至250℃,保持10 min),进样量1μL,分流比20:1;电离方式EI,电子能量70eV,离子源温度230℃,四极杆温度150℃,质量范围m/z 50～550.将HPLC与GC-MS的色谱数据进行归一化处理,并将数据导入国家药典委员会制定的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版》进行指纹图谱融合.结果:在血尿胶囊融合指纹谱获得34个共有峰,HPLC指纹图谱得到22个共有峰,并指认了原儿茶酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、虎杖苷、落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇、槲皮素9个成分,GC-MS指纹图谱鉴定了棕榈酸甲酯、棕榈酸乙酯、9,12-十八碳二烯酸甲酯、(E)-9-十八烯酸甲酯、硬脂酸甲酯、亚油酸乙酯、油酸乙酯、7,10-十八碳二烯酸甲酯、硬脂酸乙酯、11-二十烯酸甲酯、二十酸甲酯、二十二酸甲酯12个成分.结论:建立的融合指纹图谱能够全面反映血尿胶囊的整体特征,克服了单一成分含量测定及单一指纹图谱的不全面性,为复方中药制剂质量控制方法研究提供依据.

目的 建立土茯苓Smilax glabra中新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的一测多评测定方法(QAMS)并研究不同生长年限土茯苓中各成分含量的动态变化规律.方法 采用高效液相色谱法,以土茯苓中的落新妇苷为内参物,计算该成分与新落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算各指标成分的含量并与外标法的测定结果进行对比,考察方法的准确性和可行性.采用建立的QAMS法测定不同生长年限土茯苓中各指标成分的含量,研究其动态变化规律.结果 共测定不同生长年限样品5批23份,各指标成分一测多评法与外标法计算结果偏差均小于1.0％.各指标成分含量与生长年限具有一定相关性,落新妇苷的含量与生长年限呈负相关,新落新妇苷、新异落新妇苷和异落新妇苷的含量与生长年限呈正相关,两者的变化趋势相反.结论 建立的QAMS法准确、可靠,可用于土茯苓中5个成分的定量分析.生长年限对土茯苓中4种落新妇苷类成分含量均具一定影响.

目的:建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷及落新妇苷的一测多评分析方法,并验证该方法的可靠性和准确性.方法:以落新妇苷为内参物,通过方法学考察,建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷对落新妇苷的相对校正因子,根据建立的相对校正因子计算22批药材中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷的含量,并比较外标工作曲线法、外标一点法与一测多评法的结果,验证一测多评法的准确性和科学性.结果:建立的5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷相对于落新妇苷的相对校正因子重复性和耐用性良好;一测多评法计算的22批贵州产切面红色土茯苓药材样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷含量与外标工作曲线法、外标一点法的含量测定结果无明显差异(RSD＜4.0％);样品含量分析结果表明样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷和落新妇苷的含量差异较大,分别为0.106 3％ ～2.692％,0.031 29％～0.677 1％,0.581 2％ ～4.897％.结论:建立的一测多评法准确可靠,可用于贵州产切面红色土茯苓的多成分质量评价.

目的 研究黄杞苷保护DNA氧化损伤的活性与可能机制.方法 采用DNA保护分析法、超氧自由基(·O2-)清除法、Ferrozine显色法,探讨其保护DNA氧化损伤的活性与可能机制,并通过紫外可见光谱(UV-vis spectra)-察其与Fe2+络合的变化.结果 在DNA保护分析法、·O2-自由基清除法、Ferrozine显色法中,黄杞苷在一定浓度范围内,表现出浓度依赖性.其IC50值分别(60.3±9.9),(44.5±7.6),(159.7±19.9)μg·mL-1.UV-vis光谱分析表明,黄杞苷与Fe2+混合后,在波长475 nm处出现新的峰,摩尔消光系数为102.5 L·mol-1·cm-1、结论 黄杞苷能较好地保护DNA,免受羟基自由基(·OH)诱导的氧化损伤 其保护作用由直接清除ROS和间接清除ROS 2个途径实现.黄杞苷直接清除ROS,可能与氢转移和电子转移有关;间接清除ROS可能通过络合Fe2+的方式,阻断·OH自由基生成.不过,受3-位鼠李糖基的空间位阻影响,其Fe2+络合能力较弱.

目的 建立同时测定乙肝解毒胶囊中没食子酸、香草酸、胡黄连苷Ⅱ、落新妇苷、黄杞苷、胡黄连苷Ⅰ、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、大黄酚、大黄素和汉黄芩素12种成分的含量测定方法.方法 以十八烷基键合硅胶为填充剂(Waters AtlanticT3 C18色谱柱),乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,4％→13％A;10～20 min,13％→15％A;20 ～ 25min,15％→19％ A;25 ～35 min,19％ A;35 ～36 min,19％→23％ A;36～45 min,23％→27％ A;45 ～56 min,27％→43％ A;56～65min,43％→65％A),柱温40℃,流速1 mL·min-1,波长切换,0 ～ 22 min,270 nm;22 ～ 44 min,290 nm;44～65 min,270 nm.结果 12种成分可以实现完全分离,并与其他成分均能达到良好的分离;没食子酸、香草酸、胡黄连苷Ⅱ、落新妇苷、黄杞苷、胡黄连苷Ⅰ、黄芩苷、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、大黄素、大黄酚和汉黄芩素的进样量分别在0.012 19 ～0.243 8μg,0.036 70 ～0.734 0μg,0.033 77 ～0.675 4μg,0.057 38 ～1.147 6 μg,0.006580 ～0.131 6μg,0.015 38 ～0.307 6μg,0.067 11～1.342 2μg,0.028 04 ～0.560 8 μg,0.041 48 ～0.829 6 μg,0.006 310 ～0.126 2 μg,0.01364～0.272 8μμg和0.014 22 ～0.284 4 μg内,与色谱峰峰面积呈良好线性响应;平均回收率(n=6)分别为98.7％,98.9％,99.4％,99.2％,98.9％,99.1％,98.9％,99.6％,99.3％,98.9％,98.6％和99.0％;RSD分别为1.02％,0.46％,0.64％,0.86％,1.1％,1.3％,0.60％,0.92％,0.61％,1.5％,0.93％和0.98％.结论 该方法多种成分同时测定,操作简便,准确、重复性好,可用于乙肝解毒胶囊的质量控制.