巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）是最常见的先天性感染病原体之一，先天性CMV感染最易引起感音神经性听力损失（sensorineural hearing loss，SNHL）。本文重点围绕鼠CMV（murine CMV，MCMV）感染小鼠致聋模型构建、CMV感染致聋机制以及靶点药物的筛选进行综述，认为：（1）小鼠模型可作为研究CMV感染致聋机制较好的工具；（2）CMV感染的致聋机制主要涉及内耳细胞损伤、细胞丢失、细胞凋亡、炎症反应、钙信号系统异常和宿主免疫反应等；（3）更昔洛韦、双黄连和黄连素可改善MCMV诱导的听力损失，以期为临床预防和治疗CMV感染引起的SNHL提供参考。

目的:观察高糖环境下黄连素（BBR）对人视网膜血管内皮细胞（hREC）凋亡的抑制作用。方法:将hREC分为空白对照组（NC组）、高糖组（HG组）、BBR处理组（BN组）、BBR+高糖处理组（BH组）。各组细胞均置于Dulbecco改良Eagle培养基中培养。NC组、HG组培养基中分别加入5.5、30.0 mmol/L葡萄糖。BN组培养基中加入5.0 mmol/L葡萄糖和5.0 mmol/L BBR；BH组培养基中加入30.0 mmol/L葡萄糖和5.0 mmol/L BBR。采用流式细胞仪观察各组细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞中B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞色素C （Cyt-C）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 （Caspase-3）蛋白相对表达量。两组间差异采用 t检验，多组间差异采用单因素方差分析。 结果:流式细胞仪检测结果显示，与NC组比较，HG组细胞凋亡率明显升高，差异有统计学意义（ P<0.01）；与HG组比较，BH组细胞凋亡率明显降低，差异有统计学意义（ P<0.05）。Western blot检测结果显示，与NC组比较，HG组细胞中Bax、Caspase-3蛋白相对表达量升高，Bcl-2蛋白相对表达量降低，差异均有统计学意义（ P<0.01）；与HG组比较，BH组细胞中Bax、Cyt-C、Caspase-3蛋白相对表达量降低，Bcl- 2蛋白相对表达量升高，差异均有统计学意义（ P<0.01）。 结论:高糖环境下BBR可通过影响凋亡蛋白表达抑制hREC凋亡。

抑郁症严重影响全球超过3亿人的生命健康及生活质量，鉴于抑郁症发病机制不明，且抗抑郁药物起效缓慢、疗效不佳，现亟需开辟新思路研究其发病机制及寻找新的治疗靶点。临床及临床前研究表明，大量苦味受体（taste receptor type 2 members，Tas2Rs）激动剂如表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin gallate，EGCG）、白藜芦醇、咖啡因、啤酒花与黄连素等均可显著缓解抑郁患者症状，并干预各类抑郁动物模型抑郁样行为，提示Tas2Rs激动剂参与调节抑郁症的发病过程，然而其抗抑郁作用的具体机制鲜有报道。最近研究显示，Tas2Rs激动剂密切参与了神经递质的调节、炎症信号的传导、脑肠信号交流及血脑脊液屏障物质交换等过程。因此，本文试图从神经递质、炎症、脑肠轴、血脑脊液屏障及其他5个方面出发，综述Tas2Rs激动剂与抑郁症可能相关的致病机制及治疗靶点，为抑郁症病理机制研究及新药研发提供新的思路。

目的:探讨黄连素对高糖培养大鼠离体视网膜Müller细胞的影响及其作用机制。方法:将体外培养的Sprague Dawley(SD)大鼠视网膜Müller细胞分为正常对照组、高糖组、高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组，正常对照组和高糖组细胞分别采用5 mmol/L葡萄糖和25 mmol/L葡萄糖培养，后2个组分别采用25 mmol/L葡萄糖＋相应浓度黄连素处理，培养后72 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法及实时荧光定量PCR法分别检测细胞培养液上清中炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和环氧合酶2(COX-2)，L-谷氨酸-L-天冬氨酸转运体(GLAST)及相关蛋白的表达情况，采用Western blot法检测细胞质中GLAST、镁离子依赖的蛋白磷酸酶1A(PPM1A)、核因子-κB(NF-κB)和cleaved caspase-3及细胞核中NF-κB蛋白的表达情况。结果:正常对照组、高糖组、高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组细胞凋亡率分别为(1.37±0.21)%、(17.67±1.17)%、(10.60±0.17)%和(5.57±0.35)%，总体比较差异有统计学意义( F＝375.97， P<0.01)，其中高糖组细胞凋亡率较正常对照组明显升高，高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组细胞凋亡率较高糖组明显降低，高糖＋25 μmol/L黄连素组较高糖＋10 μmol/L黄连素组细胞凋亡率明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。ELISA检测结果显示，各组细胞中TNF-α、IL-8、COX-2质量浓度总体比较差异均有统计学意义( F＝28.36、35.88、41.59，均 P<0.01)，其中高糖组细胞中TNF-α、IL-8和COX-2质量浓度均明显高于正常对照组，高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组细胞中TNF-α和COX-2质量浓度明显低于高糖组，高糖＋25 μmol/L黄连素组细胞中TNF-α和IL-8浓度明显低于高糖＋10 μmol/L黄连素组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示，各组间Müller细胞中GLAST mRNA的相对表达量总体比较差异有统计学意义( F＝268.60， P<0.01)，其中高糖组GLAST mRNA的相对表达量明显低于正常对照组、高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Western blot分析结果显示，各组Müller细胞质中GLAST、PPM1A、cleaved caspase-3和NF-κB蛋白相对表达量以及细胞核中NF-κB蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义( F＝135.20、156.98、80.96、128.07、47.36，均 P<0.01)，其中高糖组Müller细胞质中GLAST、PPM1A和NF-κB蛋白的相对表达量明显低于正常对照组、高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组，细胞质中cleaved caspase-3和细胞核中NF-κB蛋白的相对表达量明显高于正常对照组、高糖＋10 μmol/L黄连素组和高糖＋25 μmol/L黄连素组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:高糖可诱导SD大鼠视网膜Müller细胞发生凋亡及炎症反应，而黄连素能有效抑制高糖诱发的细胞凋亡及炎症反应，其可能是通过抑制NF-κB的核易位和转录活性，从而抑制炎性因子的表达来发挥保护作用。

目的:观察黄连素应用后铜绿假单胞菌（PA）对环丙沙星的最低抑菌浓度（MIC）的变化和PA菌耐药基因GyrA突变情况。方法:收集2021年1月至10月临床分离耐环丙沙星铜绿假单胞菌25株，测定单用或联用环丙沙星和黄连素的最低抑菌浓度（MIC），计算抑菌浓度指数（FIC），筛选出联用呈协同作用菌株，并和原临床分离耐药菌配对比较。PCR扩增PA主要耐喹诺酮的GyrA基因，并对PCR扩增产物进行测序分析。结果:单用环丙沙星时，25株PA对环丙沙星的MIC均≥8 mg/L，呈耐药。单用黄连素时，MIC值为0.25~4 g/L。环丙沙星联合黄连素浓度0.125~1 g/L后，PA对环丙沙星的MIC值均有不同程度下降，下降率为100%，联用呈协同作用菌株为8株，占比32%,FIC≤0.5。联合黄连素后，黄连素应用后呈协同作用的PA菌与黄连素应用前PA菌均获得367 bp的目的片段，均有GyrA基因的表达，未发现GyrA基因突变。结论:黄连素能增加环丙沙星对PA的抗菌作用，降低临床耐药PA菌的耐药性。其耐药性降低，并未引起耐药基因GyrA基因的突变逆转。

目的:探讨黄连素对脂多糖（LPS）刺激下大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）表达及分泌促凝和纤溶抑制相关因子的影响。方法:体外培养大鼠AECⅡ细胞株RLE-6TN，取对数生长期细胞，用细胞增殖与毒性检测试剂盒（CCK-8）检测黄连素对细胞的毒性作用，根据半数抑制浓度（IC 50）确定药物浓度范围。将对数生长期细胞分为5组：空白对照组使用DMEM培养基常规培养；LPS组在培养基中加入5 mg/L的LPS刺激细胞；黄连素预处理组先分别加入20、50、80 μmol/L黄连素预处理1 h后，再加入5 mg/L的LPS共培养。LPS刺激24 h后收集细胞，采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）及实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测细胞组织因子（TF）、组织因子途径抑制物（TFPI）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的蛋白和mRNA表达；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中活化蛋白C（APC）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）及抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）的含量。 结果:根据抑制率曲线计算得出黄连素对RLE-6TN细胞的IC 50为81.16 μmol/L，故选择20、50、80 μmol/L作为黄连素的干预浓度。与空白对照组相比，LPS刺激24 h后RLE-6TN细胞表达及分泌促凝和纤溶抑制相关因子异常，表现为TF、PAI-1的蛋白及mRNA表达水平均明显升高，TFPI的蛋白及mRNA表达水平明显降低；同时细胞上清液中APC、ATⅢ含量均明显降低，而PⅢP、TAT含量均明显升高。给予黄连素预处理后，LPS刺激诱导的RLE-6TN细胞表达及分泌促凝和纤溶抑制相关因子异常情况得到纠正，并呈现一定的剂量依赖性，以80 μmol/L时作用更为显著；与LPS组相比，黄连素80 μmol/L预处理组细胞中TF、PAI-1的蛋白及mRNA表达水平均明显降低〔TF蛋白（TF/GAPDH）：0.45±0.02比0.55±0.03，TF mRNA（2 -ΔΔCt）：0.39±0.08比1.48±0.11，PAI-1蛋白（PAI-1/GAPDH）：0.37±0.02比0.64±0.04，PAI-1 mRNA（2 -ΔΔCt）：1.14±0.29比4.18±0.44，均 P<0.01〕，TFPI蛋白及mRNA表达水平明显升高〔TFPI蛋白（TFPI/GAPDH）：0.53±0.02比0.45±0.02，TFPI mRNA（2 -ΔΔCt）：0.94±0.08比0.40±0.05，均 P<0.01〕；同时细胞上清液中APC、ATⅢ含量明显升高〔APC（μg/L）：1 358.5±26.0比994.2±23.1，ATⅢ（μg/L）：118.0±7.4比84.4±2.7，均 P<0.01〕，而PⅢP和TAT含量则均明显降低〔PⅢP（μg/L）：11.2±0.4比18.6±0.9，TAT（ng/L）：222.1±2.8比287.6±7.0，均 P<0.01〕。 结论:黄连素可以剂量依赖性抑制LPS刺激下大鼠AECⅡ细胞促凝及纤溶抑制相关因子表达和分泌，促进抗凝因子表达和分泌，有望成为有效防治急性呼吸窘迫综合征（ARDS）肺泡过度促凝和纤溶抑制的新靶点。

目的:探究小檗碱（又名：黄连素）对多囊卵巢综合征（PCOS）模型小鼠的作用，同时探究黄连素对肠道菌群及肠道菌群对PCOS的影响。方法:以脱氢表雄酮辅以高脂饲料喂养建立PCOS小鼠模型，并给予黄连素进行干预治疗，实验分为C组（即空白对照）、M组（即PCOS模型小鼠）和T组（即PCOS模型小鼠予黄连素治疗），定时对小鼠监测体重、动情周期，行腹腔葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验；实验结束后，对小鼠肝脏、卵巢及脂肪垫称量湿重，并行HE染色观察，验证是否造模成功及黄连素的效果。同时取粪便样本进行16S rRNA肠道菌群分析。结果:PCOS造模成功，黄连素缓解了T组小鼠的动情周期紊乱，且显著缓解了小鼠的脂肪积聚和糖代谢异常，T组小鼠脂肪垫细胞截面积为（2 858±146）μm 2，显著低于M组［（9 518±347）μm 2］，两组比较，差异有统计学意义（ P<0.001），T组小鼠的血糖显著低于M组（ P<0.05）。M组PCOS模型小鼠与C组相比以及黄连素干预后的T组小鼠与M组相比，肠道菌群组成及结构显著改变，而Alpha多样性在3组间并无显著变化（ P>0.05）。 结论:黄连素可能通过干预肠道菌群的变化缓解PCOS症状。

目的:探讨黄连素体外诱导人脐带间充质干细胞(hUMSCs)向神经细胞分化的作用。方法:体外对hUMSCs进行培养，以不同浓度黄连素(分4组：对照组即0 mg/L组、50 mg/L组、100 mg/L组和200 mg/L组)诱导其向神经样细胞分化，显微镜下观察细胞形态改变并记录，并通过细胞免疫化学及免疫荧光技术检测细胞表面神经标志物巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。组间比较采用重复测量数据的方差分析。结果:经黄连素诱导72 h，细胞呈典型神经细胞样形态，且80%以上细胞表达神经细胞特异性标志物Nestin、NSE、GFAP。不同药物浓度作用下，神经样细胞分化率随时间变化情况为，200 mg/L组阳性细胞率在诱导48 h即可达峰值，高于100 mg/L组和50 mg/L组[(81.4±5.8)%比(50.4±4.7)%比(3.6±2.3)%， F＝25.806， P<0.05]，差异有统计学意义，但诱导72 h后明显下降，阳性表达细胞出现漂浮凋亡；100 mg/L组阳性细胞率在诱导72 h达到峰值，高于200 mg/L组和50 mg/L组[(87.7±4.6)%比(57.7±7.7)%比(14.3±5.3)%， F＝24.815， P<0.05]，差异有统计学意义，且高表达可持续维持3 d，诱导120 h后仍高达(85.2±5.0)%；50 mg/L组阳性细胞率一直相对较低，在诱导6 d达到峰值，低于100 mg/L组、高于200 mg/L组[(15.8±6.5)%比(64.5±6.6)%比(8.3±4.0)%， F＝22.516， P<0.05]，差异有统计学意义。 结论:黄连素体外可诱导hUMSCs向神经样细胞分化，浓度为100 μg/ml时诱导最为明显，且存活时间最长。

黄连素又名小檗碱，是一种苯基四异喹啉生物碱，可从黄连等多种植物中提取，也是黄连解毒汤、左金丸等多种中药方剂的主要成分。黄连素已被证实对微生物感染、炎症、心血管疾病、胃肠疾病、神经退行性疾病、抑郁症、代谢功能障碍等疾病具有多种有益的生物活性。黄连素可通过不同机制抑制食管癌、结肠腺癌、肝癌、骨肉瘤、乳腺癌等多种肿瘤细胞的增殖，促进凋亡；并被发现可以作用于多种儿童胚胎源性肿瘤细胞，如神经母细胞瘤、肝母细胞瘤、横纹肌肉瘤等。本文通过文献复习，阐述黄连素在儿童胚胎源性肿瘤中的药物作用，以期对后续黄连素用于胚胎源性肿瘤的研究有所帮助。

目的:观察黄连素合用环孢素A抗同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的影响，探讨其作用机制。方法:以BALB/c小鼠为供体，以C57BL/6小鼠为受体，采用背-背皮肤移植手术法制备模型。将受体小鼠按随机数字表法分为模型组、黄连素组、环孢素A组、联合组，每组20只；另取20只健康C57BL/6小鼠作为假手术组。造模后黄连素组小鼠腹腔注射黄连素100 mg/kg，环孢素A组小鼠腹腔注射环孢素A注射液10 mg/kg，联合组腹腔注射黄连素100 mg/kg及环孢素A注射液5 mg/kg，假手术组和模型组小鼠腹腔注射等体积0.5%羧甲基纤维素钠。1次/d，连续10 d。记录受体小鼠移植皮片的存活时间；采用ELISA法检测血浆Th1类细胞因子[IL-2、γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)]和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)水平；采用流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞亚群CD4 ＋CD25 ＋比例。 结果:与模型组比较，各给药组受体小鼠移植皮片的存活时间延长( P<0.01)；联合组移植皮片存活时间较黄连素组或环孢素A组延长( P<0.01)。与模型组比较，联合组血浆IL-2[(11.55±3.14)pg/ml比(19.85±2.42)pg/ml]、IFN-γ[(26.41± 6.20)pg/ml比(57.23±10.15)pg/ml]水平降低，IL-4[(192.45±70.12)pg/ml比(61.09±21.61)pg/ml]、IL-10[(106.79±27.83)pg/ml比(40.08± 11.23)pg/ml]水平升高( P<0.05)，脾脏CD4 ＋CD25 ＋调节性T细胞比例[(7.65±2.42)%比(3.69±0.83)%]升高( P<0.01)。 结论:黄连素合用环孢素A通过促使Thl向Th2细胞的偏移、诱导免疫耐受、刺激CD4 ＋CD25 ＋调节性T细胞的表达等途径，抑制同种异体小鼠的皮肤移植排斥反应。