目的:探究非小细胞肺癌（NSCLC）根治性放化疗后血清外泌体来源的microRNA-4429（miR-4429）水平与预后的关系。方法:收集NSCLC患者血液标本309例［化疗前（T0），化疗1个周期后（T1）和化疗2个周期后（T2），每时间点各103例］，采用实时荧光定量PCR法检测miR-4429表达水平，分析其与NSCLC根治性放化疗预后的关系。结果:103例NSCLC患者1年、2年和3年生存率分别为69.90%、45.63%和34.95%。生存组T1-miR-4429和T2-miR-4429表达水平分别为0.66±0.14和0.77±0.11，高于死亡组T1-miR-4429（0.60±0.06）和T2-miR-4429（0.62±0.11），差异均有统计学意义（ t=2.269、6.997， P<0.05）。限制性立方样条拟合COX回归分析结果显示T2-miR-4429与NSCLC生存预后呈线性关系。COX回归分析结果显示TNM分期是NSCLC生存预后的独立危险因素（ P<0.05），分化程度、靶向治疗和T2-miR-4429均是NSCLC生存预后的独立保护因素（ P<0.05）。由TNM分期、分化程度、靶向治疗和T2-miR-4429构建的列线图回归模型的校正曲线与理想曲线重合度较好，C-index为0.713。 结论:T2-miR-4429表达水平高提示NSCLC生存预后不良风险低。由TNM分期、分化程度、靶向治疗和T2-miR-4429构建的列线图回归模型有一定的区分度和精准度，可辅助评价NSCLC生存预后。

目的:探究微小RNA(miRNA)miR-4429对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭和凋亡的影响;并探究其与内质网应激相关通路基因PIK3R1的靶向关系及对内质网应激相关通路的调控作用.方法:通过脂质体转染法构建miR-4429过表达及敲低的MDA-MB-231细胞模型,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其效率;MTT法、克隆形成实验、Annexin-PI染色实验和Transwell实验分别检测MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡和侵袭;双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-4429和PIK3R1靶向关系,qRT-PCR和Western blot探究miR-4429对内质网应激通路的调控.结果:成功建立miR-4429 过表达及敲低的MDA-MB-231细胞模型;miR-4429 mimic组中MDA-MB-231细胞的增殖、侵袭能力均低于其Ctrl组,凋亡能力高于其Ctrl组(均P＜0.05);miR-4429能够靶向性结合PIK3R1并抑制PIK3R1的蛋白表达,同时下调内质网应激通路相关基因.结论:miR-4429靶向性结合PIK3R1并下调内质网应激通路相关基因,抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭,促进凋亡,提示miR-4429可能是乳腺癌治疗的潜在靶点.

目的 探究盆底功能障碍性疾病(pelvic floor dysfunctional disease,PFD)患者血清微小RNA(microRNA,miR)-4429 和微小RNA(microRNA,miR)-19-3p水平表达及意义.方法 选取 2021 年 6 月～2022 年 6 月衡水市第二人民医院收治的PFD患者 90 例作为PFD组,分为盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)组(n=50)、压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)组(n=25)和POP并发SUI组(n=15);并选取同期在衡水市第二人民医院检查的健康女性 80 例为对照组.比较对照组与PFD组分娩方式、既往流产史、PFD家族史等一般资料.比较各组血清miR-4429 和miR-19-3p水平.受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-4429,miR-19-3p水平对PFD的诊断价值.Logistic回归分析影响PFD的因素.配对样本t检验比较PFD治疗前后血清miR-4429,miR-19-3p水平变化.结果 PFD组在分娩方式、既往流产史、PFD家族史方面与对照组相比差异均有统计学意义(t=4.415,6.444,4.707,均P＜0.05).PFD组血清miR-4429水平较对照组降低(0.71±0.19 vs 1.00±0.25),miR-19-3p水平较对照组升高(1.44±0.35 vs 1.01±0.28),差异具有统计学意义(t=8.927,8.772,均P＜0.05).POP组和SUI组血清miR-4429水平高于POP并发SUI组(0.73±0.22,0.74±0.16 vs 0.59±0.16),POP组和SUI组血清miR-19-3p水平低于POP并发SUI组(1.35±0.39,1.41±0.31 vs 1.77±0.56),差异具有统计学意义(t=3.531,3.411;5.003,3.865,均P＜0.05).ROC曲线分析显示,miR-4429,miR-19-3p可辅助评估是否发生PFD的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为 0.805,0.825,二者联合检测的AUC为 0.865.多因素分析显示,miR-19-3p是影响PFD的危险因素,miR-4429 是保护因素.经过治疗发现,PFD患者血清miR-4429 水平升高(0.93±0.23 vs 0.71±0.19),miR-19-3p水平降低(1.12±0.29 vs 1.44±0.35),差异具有统计学意义(t=6.996,6.679,均P＜0.05).结论 PFD患者血清miR-4429 水平降低,miR-19-3p水平升高,血清miR-4429,miR-19-3p水平与PFD疾病的发生发展密切相关,可作为预测PFD的评估指标.

Sheep have been one of the most important groups of animals since ancient times.However,the knowl-edge of their migration routes and genetic relationships is still poorly understood.To investigate sheep matemal migration histories alongside Eurasian communications routes,in this study,we obtain mito-chondrial genomes(mitogenomes)from 17 sheep remains in 6 Chinese sites and 1 Uzbekistan site dated 4429-3100 years before present(BP).By obtaining the mitogenomes from the sheep(4429-3556 BP)found in the Tongtian Cave site in Xinjiang,Altai region of northwest China,our results support the emer-gence of haplogroup C sheep in Xinjiang as early as 4429-3556 BP.The combined phylogenetic analyses with extant ancient and modem sheep mitogenomes suggest that the Uzbekistan-Altai region may have been a migration hub for early sheep in eastern Asia.At least two migration events have taken place for sheep crossing Eurasia to China,one passing by Uzbekistan and Northwest China to the middle and lower reaches of the Yellow River at approximately 4000 BP and another following the Altai region to middle Inner Mongolia from 4429 BP to 2500 BP.Overall,this study provides further evidence for early sheep utilization and migration patterns in Eastern Asia.

目的 探讨微小RNA(miRNA)-4429对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及作用机制.方法收集100例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-NA-4429和磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基1(PIK3R1)mRNA相对表达量.培养乳腺癌MDA-MB-231细胞,将脂质体转染试剂Lipo6000?分别与miRNA-4429模拟物(miRNA-4429 mimic)、miRNA-4429抑制物(miRNA-4429 inhib-itor)、模拟物阴性对照(NC)混合均匀,分别作为miRNA-4429 mimic组、miRNA-4429 inhibitor组、NC组.采用克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qRT-PCR检测PIK3R1 mRNA相对表达量,蛋白质印迹法检测PIK3R1蛋白表达情况.结果 乳腺癌组织中miRNA-4429、PIK3R1 mRNA相对表达量均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01).miRNA-4429 mimic组克隆形成率、迁移细胞数目、侵袭细胞数目均低于NC组,miRNA-4429 inhibitor组克隆形成率、迁移细胞数目、侵袭细胞数目均高于NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).miRNA-4429 mimic组细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均高于NC组,miRNA-4429 inhibitor组细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均低于NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).miRNA-4429 mimic组细胞中PIK3R1 mRNA和蛋白相对表达量均低于NC组,miR-NA-4429 inhibitor组细胞中PIK3R1 mRNA和蛋白相对表达量均高于NC组,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 乳腺癌组织中miRNA-4429表达水平较低,miRNA-4429通过调控PIK3R1的表达抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进乳腺癌细胞凋亡,可能成为治疗乳腺癌的新靶点.

[背景]职业病防治事关劳动者健康权益,事关社会和谐稳定,《中华人民共和国职业病防治法》(简称《职业病防治法》)的颁布实施为促进我国职业卫生管理的法制化与规范化,保障劳动者健康权益提供了强有力的法律武器.[目的]了解东莞市虎门镇某工业园区产业工人对《职业病防治法》的认知、态度和行为得分情况及其影响因素.[方法]采取整群抽样的方法,选取东莞市虎门镇某工业园区 1278名产业工人作为调查对象进行认知、态度、行为(KAP)问卷调查.采用SPSS 25.0软件进行数据处理,分析研究对象关于《职业病防治法》的KAP水平及其影响因素.[结果]发放问卷1278份,回收有效问卷1270份,有效问卷回收率99.37%.该园区1270名产业工人《职业病防治法》KAP总达标率为87.77%,其中,总认知知晓率为85.20%(8656/10160),总防治态度正确率为 91.05%(8094/8890),总防控行为符合率为 87.19%(4429/5080).KAP平均得分为(35.72±10.46)分,其中,认知得分为(23.36±9.19)分,态度得分为(6.37±0.92)分,行为得分为(5.98±1.54)分.Pearson相关性分析显示,产业工人对《职业病防治法》的认知分别与态度(r=0.440,P<0.01)、行为(r=0.463,P<0.01)正相关,态度与行为正相关(r=0.403,P<0.01).二元逻辑回归分析结果显示男性相对于女性的KAP及格率更高(OR=1.736,95%CI:1.252～2.407);不同教育程度研究对象的KAP及格率差异均存在统计学意义(P<0.05);从事电子生产和电缆制造行业的工人比食品行业工人的KAP及格率更高(OR=1.914、2.669,95%CI:1.213～3.019、1.242～5.732)、工厂管理员比普通操作工人的KAP及格率更高(OR=2.694,95%CI:1.481～4.901);相比 50～60岁的员工,年龄在 20岁以下的员工其KAP及格率较低(OR=0.361,95%CI:0.161～0.808);与食品行业员工相比,从事物流行业的调查对象《职业病防治法》KAP及格率较低(OR=0.424,95%CI:0.207～0.868).[结论]东莞市虎门镇该工业园区产业工人对《职业病防治法》的了解程度总体较高.其中物流行业的得分情况和及格率均较低.需继续提高从业人员的自我防护意识,并加强职业病防治教育的宣传力度,推动产业工人把防护意识转化为行动自觉.

目的 探索住院期间颅内动脉瘤病人发生动脉瘤破裂危险因素与住院期间动脉瘤破裂出血相关性,提出临床诊疗的指导方案,改善临床预后.方法 病例为2014年1月至2017年12月间在北京天坛医院住院治疗的颅内动脉瘤病人.采用观察性研究的方法,从前瞻性颅内动脉瘤队列中筛选符合入排标准的在院破裂出血病人(破裂组),按破裂组:对照组=1:2比例随机抽样配对(对照组)进行比较研究.结果 队列共有住院动脉瘤病人4429例,其中符合入排标准的破裂组12例,匹配对照组24例,男:女=5:7.院前动脉瘤破裂是动脉瘤在院破裂的危险因素(Fisher精确检验,OR=8.333,95％可信区间1.480～46.936,P=0.011);动脉瘤形状不规则(Fisher精确检验,OR=10.133,95％可信区间1.941～52.902,P=0.005)与流入角<60°(Fisher精确检验,OR=41.800,95％可信区间4.311～405.335,P=0.000)与动脉瘤在院破裂相关.结论 院前动脉瘤破裂病史、形态不规则和流入角<60°是动脉瘤在院破裂的危险因素.发生动脉瘤在院破裂与临床预后不良相关.诊疗一体的复合手术技术能够缩短动脉瘤病人术前等待手术时间,降低动脉瘤在院破裂风险.

目的 基于TCGA数据集分析mRNA在子宫内膜癌中的差异表达,建立mRNA差异表达与子宫内膜癌预后的关联.方法 提取TCGA数据库中子宫内膜癌样本的mRNA表达量及临床数据资料,采用edgeR算法比较正常组织与子宫内膜癌组织的mRNA表达量,通过mRNA差异表达和临床存活时间作生存分析,寻找对子宫内膜癌预后产生影响的mRNA.结果 正常组织与子宫内膜癌组织之间共发现4429个差异表达mRNA,从中选取前1000个差异表达mRNA进行GO富集分析、KEGG富集分析及蛋白互作网络分析,筛选出20例hub基因.通过生存分析发现,7个差异表达mRNA(ASPM、AURKA、BUB1、CDCA8、KIF2C、TOP2A、UBE2C)与子宫内膜癌患者存活时间相关(P＜0.05).结论 正常组织和子宫内膜癌组织之间的ASPM、AURKA、BUB1、CDCA8、KIF2C、TOP2A、UBE2C 7个差异表达mRNA与子宫内膜癌患者预后相关,对mRNA在子宫内膜癌领域的研究具有参考价值.

目的 探讨miR-4429与依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1(NADH quinone dehy-drogenase 1,NQO1)对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、炎症因子分泌的影响及其作用机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用30 mmol/L葡萄糖处理24 h,制备糖尿病肾病肾小管上皮细胞损伤模型,记作高糖组;用含有5.5 mmol/L葡萄糖的培养基培养24 h,记作正常对照组;用含有50 mmol/L甘露醇的培养基培养24 h,记作高渗对照组;分别将miR-4429抑制剂(anti-miR-4429)、anti-miR-4429阴性对照序列(anti-miR-NC)、anti-miR-4429与NQO1小干扰RNA(si-NQO1)、anti-miR-4429与si-NQO1阴性对照序列(si-NC)转染至HK-2细胞,使用含有30 mmol/L葡萄糖的培养基培养24 h,分别记作HG+anti-miR-4429组、HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-4429+si-NQO1组、HG+anti-miR-4429+si-NC组.检测各组细胞miR-4429、NQO1 mRNA的表达水平,并检测各组细胞存活率、细胞凋亡率、Caspase-3蛋白水平、NQO1蛋白水平、丙二醛(malondialedhyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量.采用双荧光素酶报告实验验证miR-4429过表达对野生型和突变型NQO1荧光素酶活性的影响.结果 高糖处理后,miR-4429、Caspase-3的表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),MDA含量与IL-1β、TNF-α水平显著升高(P<0.05),但NQO1 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05),细胞存活率与SOD活性显著降低(P<0.05);抑制miR-4429表达后细胞凋亡率与Caspase-3表达量显著降低(P<0.05),MDA含量与IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05),细胞存活率显著升高(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-4429能够抑制NQO1的3′-UTR区荧光素酶活性(P<0.05);抑制NQO1的表达可明显减弱miR-4429的表达对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用.结论 miR-4429可靶向调控NQO1的表达从而促进高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,降低细胞存活率,加重细胞氧化损伤与炎性损伤.

目的 调查2014-2018年济宁市济宁医学院附属医院儿童下呼吸道肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)感染情况,为MP的临床诊断、治疗和预防等提供新的参考依据.方法 以2014-01/2018-12间在济宁市济宁医学院附属医院就诊的急性下呼吸道感染儿童(门诊及住院部)为调查对象,入院后采集患儿静脉血1～2 ml,采用IFA法进行检测MP IgM水平,采用卡方检验和趋势卡方检验进行统计分析.结果 经过数据筛选后共纳入19352例调查对象,MP IgM阳性病例共4429例,总阳性率为22.89％(4429/19352).2014-2018年儿童下呼吸道感染中MP IgM阳性率分别为18.78％(742/3952)、19.61％(731/3728)、22.12％(816/3689)、24.56％(963/3921)和29.98％(1177/4062).趋势卡方显示2014-2018年期间,MP IgM阳性率有随年度的增加而升高的趋势(P<0.05).春季、夏季、秋季和冬季MP IgM阳性率分别为11.47％(488/4256)、30.77％(1771/5755)、26.45％(1337/5054)和19.43％(833/4287),不同季节对比显示,MP IgM阳性率在不同季节之间的分布均差异有统计学意义(P<0.05).男童和女童MP IgM阳性率分别为21.24％(2304/10847)和24.99％(2125/8505),且女童MP IgM阳性率高于男童(P<0.05).<1岁组、1～3岁组、4～6岁组和7～14岁组MP IgM阳性率分别为10.98％(231/2104)、24.83％(1456/5863)、27.68％(1668/6025)和20.04％(1074/5360),不同年龄组MP IgM阳性率对比差异均有统计学意义(P<0.05).结论 济宁市济宁医学院附属医院收治的急性下呼吸道感染患儿中MP阳性率高,夏秋季为高发季节,4～6岁组儿童及女童更为常见.加强儿童呼吸道感染高峰时段的病原学、流行病学监测及防控很有必要.